CC BY
13
УДК 638.19:638.1:633.31
1Ковальський Ю.В., 1Кирил1в Я.1., 2Голубець О.В. ©
1 Лъв\всъкий нацюналънийутеерситет еетеринарногмедицини та бютехнологт ¡мет С.З. Гжицъкого 2 Науково-дослгднии центр випробуванъ продукцггДП "Укрметртестстандарт "
ДИНАМ1КА КЛАС1В ФОСФОЛ1П1Д1В ПРИ Г1СТОЛ131 ТА Г1СТОГЕНЕ31ЛЯЛЕЧОК МЕДОНОСНИХ БДЖ1Л
Устатт1 наводятъся дат щодо вмжту фосфолгпгдгв та ствв1дношення гх клаыв в оргатзм1 лялечок медоносных бджгл. Зниження температуры гнкубацгг розплоду на 2° Су дослгдних ам'ях призводитъ до високовироггдного зниження вм1сту фосфолгпгдгв на 1,6-8,1 % (Р<0,001). Ствв1дношення клаав фосфолгпгдгв пов 'язане з режимом гнкубацгг розплоду. У тканинах лялечок фосфолШди представлет такими класами: лгзофосфатидилхолгн (л1золецитин), сфтгом1елт, фосфатидилетаноламт (кефалт), фосфатидилхолгн (лецитин). 1хнги вм1ст залежитъ в/д перюду розвитку лялечки та температури дозргвання.
Фосфолшщи це складш еф1ри жирних кислот \ спирт1в, в молекулах яких присутнш залишок фосфатно! кислоти. Вони е основними складовими бюлопчних мембран. При цьому фосфолшщи вщ1грають суттеву роль у функцюнуванш кл1тинних мембран \ внутр1кл1тинному обмм та виконують структурну, регуляцшну \ транспортну функцш [1]. 3 цього огляду е актуальним питания динамжи клаав фосфолшщ1в у тканинах медоносних бджш пщ виливом температурного фактора [2, 3].
Тому метою роботи було дослщження впливу низькотемпературно! шкубацп розплоду на сшввщношення клаав лшщ1в у тканинах медоносних бджш у перюд лялечки.
Матер1ал 1 методи дослщжень. Дослщження проводились в умовах лабораторп та паЫки кафедри технолог!! виробництва продукцп др1бних тварин. У першш декад! травня на стшьник помщалась плщна матка. Для наявносп одновжового розплоду вона помщалась в ¿золятор. Пкля вщкладання перших яець, матка перебувала пщ ¿золятором 10 годин. 3 метою контролю за вщкладанням яець маткою (щоб на дослщному стшьнику виключити наявшсть розплоду), И вщокремлювали роздшьною реш1ткою. На 6-ий день личинково! стади, теля запечатування останньо! чарунки розплоду, дшили стшьник навпш у вертикальному напрямку. Контролем служив розплщ, який завжди знаходився у вулику. Дослщною групою вважався розплщ, який помщали в термостат. У термостат! (ТС-80) температура пщтримувалась на р1вш 32° С (норма 34 °С) та вщноенш вологост1 пов1тря 75-85%. Р1вень вологост1 пщтримували за допомогою чашок Петр1, у яких постшно
© Ковальський Ю.В., Кирил1в Я.1., Голубець О.В., 2013
350
знаходилась вода. Вщб1р проб проводили через кожш 2-3 дш [4]. При цьому визначали сшввщношення фосфолшвдв та !х клас1в [5].
Результата власних дослщжень. У норм1, при дотриманш ус1х параметр1в ппени, кшькють фосфолшдав у тканинах лялечок медоносних бджш протягом усього перюду розвитку е практично стабшьною. 1х вмкт коливаеться в межах 28,0-31,1 % вщ уЫе! кшькост1 лшвдв (рис.1.).
доба доба доба доба доба □ Контроль н\_□ Дослщнн
Рис. 1. Динамжа фосфолтЫв у тканинах лялечок у залежное™ ввд режиму ¡нкубащ1 розплоду, %
Зниження температури шкубаци розплоду, призводить до значного зменшення вмюту фосфолшвдв. У тканинах лялечок дослщно! групи 1х кшьюсть не перевищуе 26,4 %. Найнижчий 1х вмкт у дослщнш груш зафжсовано в перюд 4 доби розвитку лялечки. У перюд штенсивних процеЫв пстол1зу р1зниця м1ж дослщною та контрольною трупами становить 8,6 % (Р<0,001). Таке зниження кшькост1 протоплазматичних лшвдв негативно вщображаеться на процесах пстогенезу. Це пов'язано з тим, що фосфолшщи складають переважну частину лшвдв ядра, м1тохондрш, рибосом I палоплазми кл1тини. У перед1магшальний перюд в оргашзм1 лялечок вщбуваються найбшьш виражеш змши пов'язаш ¿з формуванням тканин.
Тому, у цей час, вмкт фосфолшвдв е особливо необхщний. Невщповщшсть параметр1в шкубаци розплоду призводить до пролонгованост1 перюду розвитку. При цьому, в останню добу, у контрольнш груш спостер1гаеться найвищий вмкт фосфолшдав. Його вмют складае 31,1 % ус1х лшвдв. На 9 добу, при дослщженш проб дослщно! групи виявлено, що вмют фосфолшвдв становив лише 23,0 %. Однак, в перед1магшальний перюд !хнш вмкт зростае до 27,4 %. Очевидно, через значну потребу у фосфолшщах, у лялечок дослщно! групи I вщбуваеться перерозподш клас1в лшвдв.
Фосфолшщи тканин лялечок представлен! наступними класами: л1зофосфатидилхолшом (л1золецитин), сфшгом1елшом,
фосфатидилетаноламшом (кефалш), фосфатидилхолшом (лецитин) (табл.1).
351
Таблиця 1
Стввщношення клаыв фосфолтЫв у тканинах медоносних бджш у иершд до^мвання лялечки другоУ доби в залежное™ вщ температури _¡нкубацп розплоду, % (М±ш, п=20)__
Класи фосфолшщв Щадосладт ам'1 Р1зниця, %
контрольш дослщт
-л1зофосфатидилхолш 44,12±0,26 42,45±0,96 1,6
-фосфатидилхолш 55,86±0,27 57,54±1,01 1,6
Примгтка. Вгроггдт ргзницг у показчиках бджш досл1дно'1 групи поргвняно до контрольноI (*-Р<0,05; **-Р<0,01; ***-Р<0,001)
У таблиц! 1 подано стввщношення клас1в фосфолшвдв у тканинах медоносних бджш у перюд лялечки друго! доби дозр1вання залежно вщ температури шкубаци розплоду. 3 даних таблиц! випливае, що у бджш контрольно! групи найбшьшу масову частку фосфолшдав займае фосфатидилхолш Лецитин, як \ прост! жири, мктять структурш залишки глщерину 1 жирних кислот, але до 1х складу ще входять фосфорна кислота 1 холш Лецитини широко представлен! в кл1тинах р1зних тканин, вони виконують як метабол1чш, так I структурш функци в мембранах. Його вмкт у цей перюд становить 55,8 %. У дослщнш груш цей показник дещо вищий I становить 57,4 %.
Вмют л1зофосфатидилхолшу навпаки е вищим у контрольнш груш. Пор1вняно до кшькост1 фосфатидилхолшу, його вмют нижчий у контрольнш груш на 11,7 %, а у дослщнш на 15,0 %. Попри те, що у класах фосфолшщ1в виявлено лише дв1 фракци л1зофосфатидилхолш 1 фосфатидилхолш, процеси пстогенезу вщбуваються нашнтенсившше. Таке припущення можна пщтвердити найвищим вмктом л1зофосфатидилхолшу. Адже вщомо, що л1золецитин змшюе проникшсть бюлопчних мембран, викликае руйнування кл1тин, регулюе проникшсть стшок судин, знижуе чутливкть серця до ацетилхолшу.
Таблиця 2
Стввщношення клас1в фосфолтЫв у тканинах медоносних бджш у иершд дозр1вання лялечки четвертоУ доби в залежное™ вщ температури _¡нкубацп розплоду, % (М±ш, п=20)__
Класи фосфолшщв Щадосладт ам'1 Р1зниця, %
контрольш дослщт
-л1зофосфатидилхолш 27,56±0,41 28,09±1,12 0,5
-фосфатидилетаноламш 29,30±0,47 30,74±0,50 1,4
-фосфатидилхолш 43,12±0,40 41,16±1,07 1,9
У таблиц! 2 подано стввщношення клас1в фосфолшвдв у тканинах медоносних бджш у перюд лялечки четверто! доби дозр1вання в залежност1 вщ температури шкубаци розплоду.
Як видно з даних таблиц!, кшьккть фосфолшвдв у дослщнш груш висовирогщно знижуеться. Поряд з цим, класи фосфолшвдв у тканинах лялечок
352
медоносних бджш представлен! трьома класами: л1зофосфатидилхолшом, фосфатидилетаноламшом, фосфатидилхолшом. Серед них найбшьшу кшьккть у контрольнш груш займае фосфатидилхолш 43,1 %. Взагал1, у структур! фосфолшвдв сшввщношення вс1х клас1в у цей перюд практично не вщр1зняеться. Однак з'являеться ще один клас - фосфатидилетаноламши. Його кшьккть у пщдослщних групах знаходиться у межах 29,3-30,7 %.
У таблиц! 3 наведено сшввщношення клас1в фосфолшвдв у тканинах медоносних бджш у перюд лялечки шосто! доби дозр1вання залежно вщ температури шкубацп розплоду.
Таблиця 3
Сшввщношення клаав фоефолшЫв у тканинах медоносних бджш у першд дозр1вання лялечки шостоТдоби в залежное™ ввд температури _¡нкубацп розплоду, % (М±ш, п=20)__
Класи фосфолшщв Щадосладт ам'1 Р1зниця, %
контрольт доелвдт
-л1зофосфатидилхолш 40,84±2,05 36,48±1,47 4,3
-фосфатидилхолш 59,15±2,05 63,50±1,47 4,3
Зростання кшькост1 фосфолшщ1в у дослщнш груш, пор1вняно до 4-х денних лялечок, евщчить про 1х потребу як структурних елемент1в кл1тин.
У контрольнш груш кшькють л1зофосфатидилхолшу складае 40,8 % вщ усього вмкту фосфолшвдв. При цьому в дослщнш груш вмкт л1зофосфатидилхолшу нижчий. Вмкт фосфатидилхолшу завжди вищий у пщдослщних трупах, пор1вняно з вмктом л1зофосфатидилхолшу. У контрольнш груш його бшьше, шж на 19 %, ау дослщнш груш на 27 %.
Невщповщшсть параметр1в комфорту для розплоду медоносних бджш призводить до подальших, бшьш глибших I незворотних процеав перерозподшу клаЫв лшдав.
Таблиця 5
Сшввщношення клаыв фоефолшЫв у тканинах медоносних бджш у першд до^мвання лялечки дев'ятоУдоби в залежное™ вщ температури _¡нкубацп розплоду, % (М±ш, п=20)__
Класи фосфолшщв Щадосладт ам'1 Р1зниця, %
контрольт доелвдт
-л1зофосфатидилхолш 21,93±0,54 36,12±1,99 14,2
-сф1нгом1елш 18,01±0,53 63,87±1,99 45,8
-фосфатидилетаноламш 27,71±0,25 - -
-фосфатидилхолш 32,32±0,19 - -
Зокрема, це ч1тко видно з даних таблиц! 5, у якш наведено сшввщношення клас1в фосфолшщ1в у тканинах медоносних бджш у перюд дозр1вання лялечки на дев'яту доби. Згщно результат дослщжень щодо вмюту фосфолшвдв видно, що саме у перюд штенсивного пстогенезу вщбуваеться високовирогщне (Р<0,001) зменшення 1х вмюту у дослщнш груш в 1,3 раза. У
353
контрольнш груш фосфолшщи представлен! 4 класами: л1зофосфатидилхолшом, сфштом1елшом, фосфатидилетоноламшом,
фосф атидилхолшом.
3 ус1х клас1в у найбшьшш кшькост1 залишаеться фосфатидилхолш. У структур! фосфолшдав вш займае бшьше, шж третину ус1х клаЫв. Пщготовка до ¿магшально! форми проявляеться з появою в структур! фосфолшвдв ще двох клас1в. Зокрема 27,7 % займае фосфатидилетаноламш, який взагал1 вщсутнш у дослщнш груш. Методом тонкошарово! хроматограф!! не виявлено у дослщнш груш1 свштом1елшу.
Даш таблиц! 6 подано сшввщношення клаЫв лшвдв у тканинах медоносних бджш у перюд дозр1вання лялечки 11 доби лише дослщно! групи.
Таблиця 6
Сшввщношення клаыв фосфолшЫв у тканинах медоносних бджш у першд до^мвання лялечки одинадцято*! доби в залежност1 вщ температури
шкубацй' розплоду, % (M±m, n=20)
Класи фосфолшщв Щадосладт cím'i
контрольт доелвдт
-л1зофосфатидилхолш — 35,11±1,76
-фосфатидилхолш - 64,87±1,76
Бджоли контрольно! групи у цей перюд вже вийшли з чарунок i були ввдбраш для визначення ф1зюлопчно! придатностг
У тканинах медоносних бджш на початок ¿магшально! фази виявлено лише два класи: л1зофосфатидилхолш i фосфатидилхолш. 1нш1 фракци фосфолшдов вщсутш. Тому, у цьому вщношенш бджоли дослщно! групи можна вважати неповноцшними.
Отже, зниження температури шкубацй розплоду на 2° С призводить до зменшення вмкту фосфолшщ1в на 1,6-8,1 % (Р<0,001). Нашнтенсившше процеси пстол1зу у лялечок вщбуваються на 2 добу розвитку.
Л1тература
1. Галяс В. EioxÍMÍ4HÍñ i бютехнолопчний словник / В. Галяс, А. Колотницький. Льв1в, 2005. - 496 с.
2. Зимина Т.А. Физиологические особенности терморегуляции медоносных пчел (Apis mellifera) в экстремальных условиях : дис. кан. биол. наук : 03.00.13, 03.00.16 / Зимина Татьяна Алексеевна. - Нижний Новгород, 2006. - 154 с.
3. Еськов Е.К. Этология медоносной пчелы / Е.К. Еськов. — М.: Колос, 1992.- 190с.
4. Ковальська Л.М. Лшщний та жирнокислотний склад тканин медоносних бджш : дис.. кан. с.-г. наук : 03.00.04 / Ковальська Лщ1я Микола1вна. - Льв1в, 2009. - 130 с.
5. Ткачук В.М. Дослщження воску жиропоту i лшдав вовни овець (Методичш рекомендаци) / В.М. Ткачук, П.В. Стапай. - 1нститут бюлоги тварин НААН, 2011. - 24 с.
354
Summary Y. Kowalski1, Y. Kiriliv1 О. Holubets2
1 S. Gzhytsky Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies 2 Research Center testing products SE "Ukrmetrteststandard DYNAMICS OF CLASSES PHOSPHOLIPIDS HISTOLIZI AND
HISTOGENESIS PUPAE OF HONEY BEES The article presents data on the content of phospholipids and the ratio of their classes in the body pupae of honey bees. Lowering the temperature of incubation brood of 2 ° C in the experimental families vysokovyrohidnoho leads to decrease of phospholipids on 1,6-8,1% (P < 0,001). Value classes of phospholipids associated with the regime incubation brood. In the tissues of pupae phospholipids are the following classes: lizofosfatydylholin (lizoletsytyn), sphingomyelin, phosphatidylethanolamine (kefalin), phosphatidylcholine (lecithin). Their content depends on the period of pupal development and ripening temperature.
Рецензент - д.вет.н., професор Зав1рюхаВ.1.
355
