Determination of acute toxicity of “Bendamin” drug in laboratory animals Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

HayKOBMM BiCHMK ^tBiBCtKoro Ha^OHa^tHoro yHiBepcMTeTy

BeTepMHapHoi Megw^HM Ta öioTexHO^oriw iMem C.3. I^M^Koro

Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies

ISSN 2518-7554 print doi: 10.32718/nvlvet9243

ISSN 2518-1327 online http://nvlvet.com.ua

UDC 619.615

Determination of acute toxicity of "Bendamin" drug in laboratory animals

I.S. Varkholiak, B.V. Gutyj

Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Ukraine

Varkholiak, I.S., & Gutyj, B.V. (2018). Determination of acute toxicity of "Bendamin" drug in laboratory animals. Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies, 20(92), 209-212. doi: 10.32718/nvlvet9243

The study of acute toxicity is a mandatory stage in the investigation of new drugs, which allows assessing the health of substances for health in the short-term and determining the class of toxicity and breadth of therapeutic action. Therefore, at the first stage of the study, the acute toxicity of Bendamin Cardiomatography was studied, in particular the determination of maximum tolerant, toxic and intermittent lethal doses for laboratory animals. The acute toxicity of Bendamin was determined in two stages: indicative and expanded experiments. In the indicative trial, the drug was administered intragastrically at doses of 50, 500 and 5000 mg/kg body weight. Three white mice and rats were used for each dose. In an expanded experiment, Bendamin was administered intragastrically at doses of 5000 and 10000 mg/kg body weight. In determining the acute toxicity of Bendamin, the DL50 value could not be determined, indicating a low toxicity of the test substance. Thus, the DL50 drug for intragastric administration to white mice is greater than 5000 mg/kg m. The general condition of animals in the studied groups did not differ from the state of intact animals: coordination of movements and skeletal muscle tone, pain response, tactile and acoustic stimuli were adequate, the frequency of breathing and the rhythm of heart rate were within the normal range. At administration of the preparation in a dose of5000 mg/kg m. T, an insignificant inhibition was established, which is related to the introduction of a large amount of the drug. In determining the coefficients of the mass of the internal organs of laboratory animals, a slight decrease in the weight coefficient of the liver was found in both mice and in rats. The "Bendamin" drug when administered to white mice and rats in the stomach in the maximum amount does not cause symptoms of poisoning and behavioral abnormalities. According to GOST 12.1.007-76, Bendamin, for intragastric administration, according to the degree of hazard belongs to grade 4 toxicity - low toxicity substances (DL50 more than 10000 mg/kg body weight). In the future, it is planned to investigate the chronic toxicity and cumulative properties of the drug in laboratory animals.

Key words: pharmacology, toxicology, Bendamin preparation, mice, rats, acute toxicity.

Визначення гостроУ токсичносл препарату "Бендамш" на лабораторних тваринах

1.С. Вархоляк, Б.В. Гутий

Львiвський нацюналъний унгверситет ветеринарног медицини та бютехнологт iMem С.З. Гжицького, м. Львiв, Украша

Вивчення гострог токсичности е обов 'язковим етапом дослгдження нових лжарсъких засобгв. Це дозволяе оцтити небезпеч-тстъ речовин для здоров 'я за умов короткотривалог дгг та визначити клас токсичностг й широту терапевтичног дгг. Саме тому на першому етат дослгдження було вивчено гостру токсичнгстъ кардюпрепарату "Бендамт ", зокрема визначення максимально толерантних, токсичних i середнъо-смертелъних доз для лабораторних тварин. Гостру токсичнгстъ препарату "Бендамт " ви-значали у два етапи: оргентовному та розгорнутому дослгдах. В оргентовному дослгдг вищезгаданий препарат вводили внутрш-нъошлунково в дозах 50, 500 i 5000 мг/кг маси тгла. На кожну дозу використовували по три бглих мишг та щури. У розгорнутому дослгдг Бендамт вводили внутршнъошлунково у дозах 5000 та 10000 мг/кг маси тта. При визначенш гострог токсичностг препарату "Бендамт " встановити величину DL50 не вдалося, що вказуе про низъку токсичнгстъ дослгджуваного засобу. Отже, DL50

Scientific Messenger LNUVMB, 2018, vol. 20, no 92

209

Article info

Received 06.11.2018 Received in revisedform

05.12.2018 Accepted 06.12.2018

Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Pekarska Str., 50, Lviv, 79010, Ukraine. Tel.: +38-096-486-26-85 E-mail: irynkavet@ukr.net

препарату за внутршньошлункового введения бтим мишам е бтьшою за 5000 мг/кг м. т. Загальний стан тварин до^джуваних груп не вiдрiзнявся вiд стану ттактних тварин: зберкалася координащя рухiв та тонус скелетних м 'язiв, реакци на больовi, так-тильт та звуковi подразники були адекватними, частота дихання та ритм серцевих скорочень знаходилися в межах фiзiологiчних величин. Шсля введення препарату у дозi 5000 мг/кг м. т. встановлено незначне пригшчення, що, правдоподiбно, пов 'язано з вве-денням великог кiлькостi препарату. За визначення коефiцiентiв маси внутрШшх оргатв лабораторних тварин, встановлено незначне зменшення вагового коефщента печтки як у мишей, так i у щурiв. Препарат "Бендамш " при введены в шлунок бтим мишам та щурам у максимально допустимт кiлькостi не викликае клiнiчних ознак отруення та вiдхилень у поведтщ. Згiдно з ГОСТ 12.1.007-76, Бендамт, за внутршньошлункового введення, за ступенем небезпечностi вiдноситься до 4 класу токсичностi-малотоксичш речовини (ОЬ5в бшьше 10000 мг/кг маси тта). У подальшому плануеться до^дити хротчну токсичтсть та куму-лятивш властивостi препарату на лабораторних тваринах.

Ключовi слова: фармаколог1я, токсикологiя, препарат «Бендамт», мишi, щури, гостра токсичтсть.

Вступ

Патологи серця 1 судин у собак та кшок надзви-чайно р1зноманггш та достатньо поширен у щоденнш практиц лшаря ветеринарно! медицини в Укра!т та за И межами. Зпдно класифкацп професора Г.В. До-мрачева, у домашшх тварин серцево-судинна патоло-пя подшяеться на хвороби мюкарда, перикарда, ендо-карда та хвороби кровоносних судин. 1снуе тюна за-лежшсть м1ж вище вказаними патолопями, вжом та породами тварин ^екоГтк^, 2009; Undhad et а1., 2012; г^Ш^а, 2016).

За остант роки було проведено шлька значних до-слщжень в обласп лшувания тварин з серцевою недо-статшстю. Кр1м того були введет нов1 методи д1агно-стики, виявлено генетичн1 особливост1 окремих пато-лог1й. До того ж з'явилися нов1 л1карськ1 засоби, на-приклад: п1мобендан, пол1ненасичен1 жирн1 кислоти, силденафш, левосимендан, торасем1д, неб1волол, 1зи-ноприл, клоп1догрель та деяк1 1нш1 для л1кування тварин з патолог1ею серцево-судинно! системи (Vaтkho1ia^, 2016). Дос1, даних про застосування но-вих терапевтичних засоб1в за л1кування тварин з па-толог1ею серцево-судинно! системи недостатньо.

Отже, обгрунтовано виникае нагальна потреба з л1кування тварин з патолопею серцево-судинно! системи. Кр1м того проведения всеб1чних досл1джень механ1зм1в дп згаданого вище л1карського засобу, його взаемоди 1з 1ншими аналог1чними препаратами, клшчно! ефективност1 лiкуваиия тварин та безпеки !х застосування.

Зважаючи на аналiз даних вичизняних i зарубiж-них дослщнишв розробка зручного у застосуваннi i безпечного комплексного кардiологiчного препарату, використання якого дозволить пiдвищити ефектив-шсть лiкуваиия тварин i широкого спектру серцево-судинних патологiй е на чаа i становить актуальнiсть проведения дослщжень для ветеринарно! медицини.

Метою роботи було вивчити гостру токсичтсть препарату "Бендамш" на лабораторних тваринах.

Матерiал i методи досл1джень

Експериментальш дослiджения проведенi у вiдпо-ввдносп до вимог лiкарсько-бiологiчного експеримен-ту з тдбору аиалогiв, постановцi контролю, дотри-маиню однакових умов годiвлi та утримания пiд час проведения дослвду та облiку результатiв.

Гостру токсичтсть препарату "Бендамш" визна-чали у два етапи: орiентовному та розгорнутому до-слiдах. В орiентовному дослiдi препарат вводили внутрiшньошлунково в дозах 50, 500 i 5000 мг/кг маси тша. На кожну дозу використовували по три бiлих мишi та щури. У розгорнутому дослщ Бендамiн вводили внутршньошлунково у дозах 5000 та 10000 мг/кг маси тша. Тваринам контрольних груп вводили iзотонiчний розчин натрш хлориду. Пiсля введения дослiдного препарату спостереження за лабораторними тваринами здшснювали протягом 14 дiб. У першу добу дослвду тварини знаходились тд постiйним наглядом. За цих умов враховували так1 показники: загальний стаи, зовшшнш вигляд, особли-востi поведшки тварин, iнтенсивнiсть та характер рухливо! активностi, наявнiсть судом, координацiю рухiв, реакц1ю на зовнiшнi подразники (тактильш, звуковi, свiтловi), стан волосяного покриву, видимих слизових оболонок, в1дношення до корму, ритм, частоту дихання, час виникнення та характер штоксика-цп, !! важкiсть, перебiг, час загибелi тварин або !х одужання (Kotsiumbas et а1., 2006; Gutyj et а1., 2017; Todoriuk et а1., 2018; Gutyj et а1., 2018).

Результати та 1х обговорення

Гостру токсичтсть препарату "Бендамш" вивчали на щурах та мишах за одного шляху введення - внут-ршньошлунковому, що передбачаеться для застосування у практиш ветеринарно! медицини. При виборi дози п1д час вивчення гостро! токсичностi за умов внутршньошлункового введения лiмiтуючим стало введения максимально! дози IV класу токсичносп -5000 мг/кг.

За умов внутршньошлункового введения кардю-препарату "Бендамiн" загибелi бших щурiв не вияв-лено (табл. 1).

Пiсля внутршньошлункового введения препарату у вище вказаних дозах клшчних ознак iнтоксикацi! у щурiв не спостерiгали тварини були охайними, актив-ними, мали задовшьний апетит, процеси сечовидiлен-ия i дефекаци були в нормi, реагували на звуковi та свiтловi подразники, порушення дихания та судом не вщзначали. Рефлекторна збудливiсть у вах тварин була збережена. Лише встановлено короткочасне пригшчення лабораторних тварин, яким задавали препарат у дозi 5000 мг/кг, що пов'язано з введениям в оргашзм тварин велико! кшькосп препарату.

Scientific Messenger LNUVMB, 2018, vo1. 20, по 92 210

Таблиця 1

Показники токсичносп препарату "Бендамш" на бших щурах

тг. _ , Число загиблих тварин

Кшьшсть тварин у груп1 Доза препарату, мг/кг ---

_всього_у %_середнш час загибел

3 50 0 0 0

3 500 0 0 0

3 5000 0 0 0

12 (дв1ч1 по 6 тварин)_5000_0_0_0_

На наступну добу змш у клшчному сташ тварин дослвдних груп не спостер1гали. Так1 ж результати було отримано i за повторного введення лаборатор-ним тваринам препарату у дозi 5000 мг/кг.

Отже, DL50 препарату за внутрiшньошлункового введення бшим щурам е бiльшою за 5000 мг/кг м. т.

Таблиця 2

Показники токсичносп препарату "Бендамш" на бших

Результати з визначення гостро'' токсичносл препарату "Бендамiн" за внутршньошлункового введення бшим мишам наведет у таблиц 2. Загибелi бiлих мишей за внутрiшлункового введення препарату "Бендамш" у ввдповвдних дозах не спостертали. Явищ виражено'' iнтоксикацiï у тварин у ходi експерименту не було встановлено.

мишах

Число загиблих тварин

Кiлькlсть тварин у груш Доза препарату, мг/кг -—---—т

_^_всього_у %_середнш час загибел!

3 50 0 0 0

3 500 0 0 0

3 5000 0 0 0

12 (дв1ч1 по 6 тварин)_5000_0_0_0_

Загальний стан тварин дослщжуваних груп не в1д-р1знявся в1д стану штактних тварин: зберiгалася координация рух1в та тонус скелетних м'яз1в, реакцiï на 6ольов1, тактильнi та звуков! подразники були адеква-тними, частота дихання та ритм серцевих скорочень знаходилися в межах норми. Шсля введення препарату у доз1 5000 мг/кг м. т. встановлено незначне пригшчення, що пов'язано з введенням велико'' к!лькост1 препарату.

За визначення гостро'' токсичност1 препарату "Бендамш" визначити величину DL50 не вдалося, що вказуе про низьку токсичтсть дослвджуваного лiкар-ського препарату.

Отже, DL50 препарату за внутршньошлункового введення 61лим мишам е бшьшою за 5000 мг/кг м. т.

Саме тому, у розгорнутому дослщ "Бендамш" вводили у доз1 5000 мг/кг маси тша, використовуючи по 6 бших мишей та щур1в. Як показали проведен дослщження (табл. 3), шсля одноразового внутршньошлункового введення препарату "Бендамш" в доз1 5000 мг/кг маси тша загибелi мишей та щур1в не ви-явили. Встановлено, що препарат "Бендамш" у вказа-нш доз1 не впливав на масу тша тварин та ваговi кое-фiцiенти маси внутр1шн1х органiв (табл. 3, 4).

Таблиця 3

Вплив препарату "Бендамш" на масу тша дослвдних тварин (М ± m, n = 6)

Групи тварин

Вид тварин

3 доба

Маса тша, г

7 доба

14 доба

I (контрольна)

II (дослщна)

миш щури миш щури

19,1 ±0,50 168,1 ±2,62 19,0 ±0,41 171,5 ±2,50

20.2 ± 0,35 175,3 ± 1,41

20.3 ± 0,24 176,3 ±2,11

20,6 ± 0,41 185,6 ± 0,96 20,5 ± 0,44 186,6 ± 1,72

Встановлено, що маса тша мишей та щур1в контрольно'' групи на 14 добу дослшу зростала пор1вняно з попередшми добами дослщжень i вшповшно стано-вила 20,6 ± 0,41 i 185,6 ± 0,96 г, тод1 як маса мишей i щур1в дослвдно'' групи - 20,5 ± 0,44 i 186,6 ± 1,72 г.

При визначенш коефiцiентiв маси внутр1шн1х ор-гашв лабораторних тварин, встановлено незначне зменшення вагового коефiцiента печiнки як у мишей, так i у щур1в.

Scientific Messenger LNUVMB, 2018, vol. 20, no 92 211

Таблиця 4

Коефщенти маси внутршшх оргашв лабораторних тварин (М ± m, n = 6)

Масов! коефщ1енти внутршшх оргашв

Групи тварин Вид тварин

Нирки

печ1нка

селезшка серце тимус права л1ва

9,8 ± 0,2 5,4 ±0,1 5,1 ± 0,1 9,0 ± 0,2 9,9 ± 0,2

4,1 ±0,1 3,5 ± 0,1 2,5 ± 0,2 3,1 ± 0,1 3,3 ± 0,2

9,6 ±0,1 5,6 ± 0,2 5,0 ± 0,2 8,7 ± 0,3 9,6 ± 0,3

4,0 ±0,1 3,4 ±0,1 2,4 ± 0,2 3,3 ± 0,1 3,4 ±0,1

I(контрольна) II (досл1дна)

миш1 щури миш1 щури

51,4 ± 0,3 35,6 ± 1,1 49,8 ± 0,5 34,2 ± 0,6

Отже, новостворений препарат "Бендамш" нале-жить до малотоксичних речовин 4 класу токсичностi за ГОСТ 12.1.007-76.

Висновки

Препарат "Бендамiн" пiсля введення в шлунок 6i-лим мишам та щурам у максимально допустимш кшь-костi не викликае клiнiчних ознак отруення та ввдхи-лень у поведшщ.

Згiдно з ГОСТ 12.1.007-76, Бендамш, за внутрш-ньошлункового введення, за ступенем небезпечностi ввдноситься до 4 класу токсичносп - малотоксичш речовини (DL50 бiльше 10000 мг/кг маси тша).

У подальшому плануеться дослiдити хронiчну ток-сичнiсть, кумулятивш властивостi препарату на лабо-раторних тваринах.

References

Stekol'nikov, A.A. (2009). Bolezni sobak i koshek.

Kompleksnaja diagnostika i terapija. SPb (in Russian). Undhad, V.V., Fefar, D.T., Jivan, B.M. Gupta, H., Ghodasara, D.J., Joshi, B.P., & Prajapati, K.S. (2012). Cardiac troponin: an emerging cardiac biomarker in animal health. Vet. World, 5(8), 508-511. doi: 10.5455/vetworld.2012.508-511. Zhulikova, O.A. (2016). Monitoring rasprostranenija serdechno-sosudistyh zabolevanij sredi koshek i sobak v g. Blagoveshhensk amurskoj oblasti. Dal'-

nevostochnyj agrarnyj vestnik, 2(38), 49-56. https://cyberleninka.ru/article/n/monitoring-rasprostraneniya-serdechno-sosudistyh-zabolevaniy-sredi-koshek-i-sobak-v-g-blagoveschensk-amurskoy-oblasti (in Russian).

Varkholiak, I.S. (2016). The usage of medicines at the cardiovascular pathologies in dogs and cats. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj, 18, 3(71), 261-265. https://nvlvet.com.ua/index.php/ j ournal/article/view/974.

Kotsiumbas, I.Ia., Malyk, O.H., & Patereha, I.P. (2006). Doklinichni doslidzhennia veterynarnykh likarskykh zasobiv. L.: Triada plius (in Ukrainian).

Gutyj, B., Khariv, I., Binkevych, V., Binkevych, O., Levkivska, N., Levkivskyj, D., & Vavrysevich, Y.

(2017). Research on acute and chronic toxity of the experimental drug Amprolinsyl. Regul. Mech. Biosyst., 8(1), 41-45. doi: 10.15421/021708.

Gutyj, B., Grymak, Y., Hunchak, V., Mysak, A., Nazaruk, N., Brezvyn, O., Hariv, I., Shcherbatyy, A., Semeniv, B., Bushueva, I., Parchenko, V., & Kaplaushenko, A.

(2018). Preclinical searches of the preparation Thireomagnile. Ukrainian Journal of Ecology, 8(1), 688-695. doi: 10.15421/2018_267.

Todoriuk, V.B., Hunchak, V.M., Gutyj, B.V., Gufriy, D.F., Hariv, I.I., Khomyk, R.I. , & Vasiv, R.O. (2018). Pre-clinical research of the experimental preparation "Ferosel T". Ukrainian Journal of Veterinary and Agricultural Sciences, 1(1), 3-9. doi: 10.32718/ujvas1-1.01.

Scientific Messenger LNUVMB, 2018, vol. 20, no 92 212