CC BY
0
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
ABL-EAC и предложенными нами (ABL-N). Было протестировано 40 проб кДНК, полученных при разном выделении РНК, в том числе 8 архивных со сроком хранения более б мес. Показано, что пороговые циклы амплификации в пробах со свежевыде-ленной РНК по методу Хомчинского с праймерами ABL-EAC и ABL-N совпадают. Однако в архивной кДНК и РНК из замороженных лейкоцитов пороговый цикл амплификации с праймерами ABL-N значительно падает. Снижается и уровень химерных транскриптов. При этом амплификация с праймерами ABL ЕАС гена ABL1 сохраняется. Это свидетельствует о деградации в архивных образцах РНК и кДНК, в то время как уровень геномной ДНК снижается незначительно. Таким образом, есть принципиальные различия при подсчете уровня химерного транскрипта относительно экспрессии гена ABL1, измеренной с использованием праймеров ЕАС и описанных нами.
Заключение. Предложенные праймеры для амплификации контрольного гена ABL1 позволяют, в отличие от рекомендуемых
ЕАС, получать адекватное соотношение пороговых циклов амплификации химерного транскрипта и контрольного гена независимо от наличия примесей геномной ДНК в препаратах РНК, выделенных из клеток.
Таблица. Последовательности праймеров для выявления РНК гена АВ1.1 и длины фланкируемых ими фрагментов в геноме человека и кДНК
Название Последовательность праймеров (5'-3') ДлинаДНК, нукл Длина кДНК, нукл
ABL1 ЕАС прямой* TGGAGATAACACTCTAAGCATAACTAAAGGT 687 124
ABL1 ЕАС обратный* GATGTAGTTGCTTGGGACCCA
Зонд ABL1 ЕАС* R6G-CCATTTTTGGTTTGGGCTTCACACCATT-RTQ1
ABL1 N прямой ** GTCCACACTGCAATGTTTTTGTG 139708 100
ABL1 N обратный ** GAGTTCCAACGAGCGGCTTCACTC
Зонд ABL1 N ** FAM-CCAGTAGCATCTGACTTTGAGCCTCAG-RTQ1
* ABL ЕАС- праймеры, предложенные ассоциацией ЕАС
** ABL N- праймеры, предложенные авторами, амплифицирующие только кДНК, ноне геномную ДНК
Фёдорова А. В., Клясова Г. А., Хрульнова С. А.
ДЕТЕКЦИЯ ENTEROCOCCUS SPP., ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ГЕМОКУЛЬТУРЫ, ПРИ РАЗНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ СИСТЕМЫ КРОВИ
и» Минздрава России
ФГБУ «НМИЦ гематологи
Введение. Частота детекции Enterococcuj spp.y больных опухолями системы крови может варьировать в зависимости от варианта гематологического заболевания.
Цель работы. Изучить частоту Enterococcuj spp., выделенных из гемокультуры, при разных опухолях системы крови.
Материалы и методы. Частота детекции Enterococcuj spp. из гемокультуры была изучена в ходе проспектового многоцентрового исследования (2016—2020 гг.) у больных при разных гемобласто-зах. Резистентность к ванкомицину у Enterococcuj spp. определяли методом серийных микроразведений в бульоне (CLSI, 2020 г.). Гены резистентности к ванкомицину (vanA и vanB) определяли методом ПЦР.
Результаты и обсуждение. Всего было исследовано 145 эпизодов инфекций кровотока, вызванных Enterococcuj spp. Среди заболеваний системы крови преобладали острые миелоидные лейкозы (ОМЛ) и составили 42,7% (п=62), далее следовали неходжкинские лимфомы (НХЛ) — 22,1% (п=32), острые лимфобластные лейкозы (ОЛЛ) — 14,5% (п=21). Другие заболевания крови составили 20,7% (п=30). Среди 145 Enterococciu spp. были 118 (81,4%) E.faecium и 27 (18,6%) Е. fa.eca.LL). Изоляты Е. faecium преобладали при всех вариантах гемотологических заболеваний, составляли от 73,3% до 87,1% при ОМЛ (табл.). Резистентыми к ванкомицину были 31,4% (n=37) Е. faecium, из которых 81,1% (п=30) имели генотип устойчивости vanA и 18,9% (п=7) — генотип vanB. Инфекции кровотока, вызванные ванкомицин-резистентными Е. faecium, были детектированы достоверно чаще при ОМЛ (32,3%) в сравнении с ОЛЛ (9,5%, р=0,05). Частота детекции из гемокультуры
генотипа резистентности vanA среди ванкомицин-резистентных Е./аесшт была значимо выше при ОМЛ (27,4%) в сравнении с ОЛЛ (4,8%, р=0,03).
Заключение. При всех заболеваниях системы крови, вызванных Е^егососсил врр., преобладали Е. /аесшт, частота детекции которых была несколько чаще у больных ОМЛ (87,1%). Ванкомицин-резистентные Е. /аесшт достоверно чаще регистрировали у больных ОМЛ (32,3%) в сравнении с больными ОЛЛ (9,5%).
Таблица. Частота детекции ЕЫвгососсив эрр. из гемокультуры у боль-ныхс разными гематологическими заболеваниями
Показатель ОМЛ, п=62 НХЛ, п=32 ОЛЛ, п=21 Другие, п=30
E.faecium (п=118) 54(87,1%) 26 (81,3%) 16 (76,2%) 22 (73,3%)
Ванкомицин-резистентные Е. faecium, (п=37) /1=0.05 7 (23,3%)
20 (32,3%) 8 (25%) 2 (9,5%)
Генотип резистентности к ванкомицину vanA (п=30) 17(27,4%) /|=0.03 7(21,9%) I 1 (4,8%) 5(16,7%)
Федуленко Д. А.1, Жибурт Е. Б.2, Евсеенко О. В.1
РЕЗУЛЬТАТЫ СКРИНИНГА НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ ГЕМОТРАНСМИССИВНЫХ ВИРУСОВ У ДОНОРОВ КРОВИ
1ГКУЗ «Центр крови Ленинградской области», 2НМХЦ имени Н.И. Пирогова
Введение. Одной из главных задач трансфузиологии является инфекционная безопасность. Серологические методы исследования позволили значительно сократить риск передачи гемотрансмиссив-ных вирусов реципиенту, однако не решили окончательно проблему «серологического окна». Внедрение МАТ-тестирования в рутинную практику обследования доноров снизило остаточный риск передачи возбудителей. Но не ясен вопрос частоты выявления нуклеиновых кислот вирусов гемотрансмиссивных инфекций у доноров, а также частоты выявления образцов крови в «серологическом окне».
Цель работы. Исследовать частоту выявления нуклеиновых кислот вирусов гемотрансмиссивных инфекций в период «серологического окна» в образцах крови доноров.
Материалы и методы. Для исследования были взяты данные обследования доноров Центра крови Ленинградской области
с 2011 по 2021 год. Было обследовано 122 576 доноров. Доноры обследованы в установленном законодательством порядке на выявление ДНК гепатита В, РНК гепатита С и РНК ВИЧ, методом полимеразной цепной реакции в минипулах из б образцов. При получении положительного результата образцы были обследованы повторно дважды в единичных постановках. Обследованные были разделены на первичных и повторных доноров. У всех доноров учитывали возраст. У повторных — количество дней после предыдущей донации и количество донаций в анамнезе.
Результаты и обсуждение. Положительные результаты NAT-тecтиpoвaния при отрицательных серологических тестах (т.е. в «период окна») были получены у 44 доноров. Частота выявления маркеров гемотрансмиссивных инфекций
