CC BY
20
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
позитивной в отношении анти-VZV IgG. При этом, ни в одном из образцов надосадочной жидкости из культуры МПК здоровых доноров анти-VZV IgG обнаружено не было.
Таким образом, мы показали, что только МПК крови больных ОГ, являются продуцентами анти-VZV IgG. МПК здоровых доноров, перенесших согласно анамнестическим данным ОГ или ветряную оспу ранее, анти-VZV IgG не продуцируют. По-видимому, продукция анти-VZV IgG МПК может рассматриваться как надежный диагностический маркер, позволяющий дифференцировать острую VZV-инфекцию и инфекцию, перенесенную ранее. Данный подход представляется перспективным в диагностике субклинических форм инфекции при реактивации VZV. В дальнейшем планируется изучить диагностическую значимость продукции специфических антител при реактивации других вирусов данного семейства.
СОСТОЯНИЕ ФАГОЦИТАРНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА У ДЕТЕЙ, ПРОЖИВАЮЩИХ НА ТЕРРИТОРИИ ВОЗДЕЙСТВИЯ АНОМАЛЬНОГО ГЕОМАГНИТНОГО ПОЛЯ ПРИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗЕ
П.В. Калуцкий, Л.Ю. Зайцева, О.А. Медведева
ГБОУ ВПО Курский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, г. Курск
Иммунная система одной из первых реагирует на внедрение патологического агента в организм. Ее способность к адекватному иммунному ответу и сохранению антигенного гомеостаза организма определяет течение и прогноз инфекционного процесса, риск развития осложнений. На особенности иммунореактивности детского организма могут влиять различные внешние факторы, в том числе региональные. В нашем регионе таким фактором является Курская магнитная аномалия. Известно, что постоянное и длительное воздействие геомагнитного поля повышенной напряженности на живые организмы приводит к возникновению различных адаптационных реакций со стороны иммунной системы. На этом фоне течение различных патологических процессов может существенно изменяться.
Нами было изучено течение сальмонеллезной инфекции у детей раннего возраста, подвергающихся постоянному воздействию геомагнитного поля повышенной напряженности (г. Железногорск).
Факторы врожденного иммунитета играют важную роль на всех стадиях иммунного ответа. От их состояния напрямую зависит исход начальной стадии инфекционно-воспалительного процесса. Средние значения фагоцитарного индекса при сальмонеллезе у детей в г. Железногорске было достоверно ниже контрольных значений, фагоцитарное число при саль-монеллезной инфекции мало отличалось от группы контроля (здоровые дети). Известно, что повышение спонтанного теста с НСТ характерно для бактериального воспаления, как следствие антигенного раздражения неактивированных гранулоцитов крови. Таким образом, повышение спонтанного НСТ-теста сопровождает развитие кишечной инфекции бактериальной этиологии. При развитии сальмонеллеза количество НСТ положительных нейтрофилов при стимуляции достоверно превышало контрольные значения, что говорит о сохранности внутриклеточной антибактериальной активности в фагоцитах.
Таким образом, течение сальмонеллезной инфекции у детей в г. Железногорске сопровождается снижением активности фагоцитирующих клеток и их поглотительной способности, при сохранном резерве внутриклеточных бактерицидных механизмов.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К ПРИОНАМ ДЛЯ ИХ РЕТРОСПЕКТИВНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ НА ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ
В.Я. Кармышева, В.В. Погодина
«Федеральное государственное бюджетное учреждение Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов имени М.П. Чумакова» РАМН, Москва
Авторские моноклональные антитела, конъюги-рованные с пероксидазой хрена (Григорьев В.Б. 2009, 2010; Покидышев А.Н., 2009), были переданы нам для изучения возможности ретроспективного выявления патологических прионов на гистологических препаратах мозга человека и животных, погибших или больных прионными болезнями. Были использованы гистологические препараты справочной коллекции по трансмиссивным губкообразным энцефалопатиям (Кармышева и др., 2003), созданной в лаборатории клещевого энцефалита и других вирусных энцефалитов Института. Были изучены препараты мозга пациента, страдавшего спорадической формой болезни Крейтцфельдта—Якоба, мозга овцы с натуральной болезнью скрепи и мозга белой мыши при экспериментальной инфекции агентом скрепи. Применен ретроспективный метод выявления антигенов, используемый в вирусологии (Кармышева В.Я., 1979). Выявление прионов проводили по обычной схеме. После постановки реакции с моноклональными антителами были выявлены места их связи с прионами по светло-коричневому или темно-коричневому окрашиванию части нейронов, глиоцитов, эндотелиоцитов, нервных волокон. В грушевидных нейронах (клетках Пуркинье) мозжечка погибшего пациента с болезнью Крейтцфельдта-Якоба прионы были видны в нейроплазме (особенно четко в области отхождения аксона), на нейролемме и в виде светло-коричневых ободков цитоплазмы вокруг ядер клеток-зерен. Эти участки находились в местах образования синапсов. В контрольных препаратах, обработанных по тому же плану, но без мо-ноклоналных антител, окрашивание отсутствовало. Результаты работы свидетельствуют о возможности использования МКА для выявления патологических прионов даже при ретроспективном изучении, что расширяет возможности диагностики прионов.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К АНТИМИКОТИКАМ ГРИБОВ РОДА КАНДИДА У АМБУЛАТОРНЫХ ПАЦИЕНТОВ г. ИРКУТСКА
О.Г. Карноухова, Г.Ю. Коган, А.Д. Ботвинкин
ГБОУ ВПО «Иркутский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития РФ, г. Иркутск
В последние годы проблема кандидозной инфекции приобретает все больший интерес, в связи с неуклонным ростом заболеваемости и трудностью терапии. Диагноз кандидомикоза основывается на выделении возбудителя микробиологическими методами, а эффективность специфического лечения во многом зависит от чувствительности к про-
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
тивогрибковым препаратам. Цель работы: идентификация и количественное определение грибов рода Candida, определение их чувствительности к анти-микотикам при обследовании амбулаторных пациентов. За 2010—2011 гг. исследовано 2073 пробы биологического материала от поликлинических больных г. Иркутска. Выделение грибов проводилось на среде Сабуро с последующей идентификацией на бактериологическом анализаторе «AutoScan4 System» (Siemens, USA). Определение чувствительности выделенных штаммов грибков к нистатину, амфотери-цину В, клотримазолу, кетоконазолу, интраконазо-лу, флюконазолу проводилось диско-диффузионным методом. В результате было выделено 172 (8,3% всех исследованных проб) культуры грибов рода Candida. Из общего числа культур 59,9% выделены из органов мочеполовой системы, 27,2% — из верхних дыхательных путей, 11,7% — из органов желудочно-кишечного тракта; культуры прочей локализации составили 1,2%. Среди выделенных культур, удельный вес C. albicans составил 86,1%, на долю C. non-albicans приходилось 13,9%, которые были представлены видами C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis. Учитывали культуры грибов с концентрацией 104 колониеобра-зующих единиц (КОЕ) и выше в 1 мл исследуемого материала. Микст-инфицирование (грибы и бактериальная микрофлора) наблюдалось в 51,2% случаев. Выделенные штаммы C. albicans показали наибольшую чувствительность к нистатину (от 87,5 до 100%) вне зависимости от места выделения, наименьшую — интраконазолу (от 32,1 до 64,4%). Чувствительность к остальным антимикотическим препаратам колебалась от 38,4% (кетоконазол) до 84,6% (клотримозол). Таким образом, у амбулаторных пациентов наиболее часто обнаруживали C. albicans. Культуры этого микроорганизма, выделенные в г. Иркутске, характеризовались наибольшей чувствительности к анти-микотику полиенового ряда — нистатину, на фоне более низкой чувствительности к антимикотикам системного действия.
ПЕРСПЕКТИВЫ МОНИТОРИНГА БАКТЕРОИДОВ В ПЦР АНАЛИЗЕ ДЛЯ ОЦЕНКИ ФЕКАЛЬНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ
А.Н. Карташева, Л.В. Черкасова, Г.А. Петрушанская, Р.А. Бурханов
Филиал ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве» в САО города Москвы, Москва
Актуальность мониторинга фекального загрязнения воды обусловлена тем, что результаты бактериологического исследования санитарно-показательной и патогенной флоры в ряде случаев не совпадают (Ahmed W. с соавт., 2008). Описаны случаи вспышек кишечных инфекций на фоне отрицательных результатов санитарно-показательной флоры. По мнению экспертов ВОЗ, назрела необходимость в пересмотре критериев микробиологической безопасности воды и поиске более надежных лабораторных показателей (Nusca A соавт., 2008). С помощью ПЦР анализа в воде открытых водоемов и в водопроводной воде определяются токсоплазмы, хели-кобактер пилори, вирус гепатита А, энтеробактерии и энтеровирусы, риккетсии и легионеллы,многие из которых,по-видимому, нежизнеспособны и не представляют опасности. Вместе с тем, присутствие санитарно-показательных бактерий в воде в любой
форме свидетельствует о фекальном загрязнении воды и о потенциальной опасности контаминации воды патогенными микробами.Одним из перспективных тестов рассматривается индикация бактероидов, которые детектируются в воде открытых водоемов и в питьевой воде чаще других микроорганизмов (Ahmed W. с соавт. ,2008, Bower P. с соавт., 2005). Цель настоящего исследования заключалась в индикации ДНК бактероидов в водопроводной воде, в том числе горячей, бакпосевы которой, как правило, отрицательны.
В исследовании использованы ПЦР тест-системы производства НПФ «Литех» для определения ДНК бактероидов в режиме реального времени на амплификаторе Rotor 0епе-6000.Для пробообра-ботки использован ДНК-экспресс той же фирмы. Пробы водопроводной воды объемом 0,5Л предварительно концентрировали пропуская на вакуумной установке через фильтры с диаметром пор 0,45 мкм, после чего материал экстрагировали с поверхности фильтров и растворяли лизирующим буфером и далее следовали инструкции фирмы производителя для получения пробы ДНК. Все пробы воды параллельно исследовались на санитарно-показательную флору. В результате проведенных исследований из 36 проб воды в 4 обнаружена ДНК бактероидов (11%), при этом в 3 (из 30) в горячей и в 1 (из 6) в холодной воде. В бактериологическом исследовании все пробы были отрицательными. Дальнейшие исследования в этом направлении с применением количественного варианта ПЦР анализа позволят детально изучить информативность индикации бактероидов в воде для оценки ее безопасности.
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ БРЮШНОГО ТИФА
Л.А. Кафтырева, С.А. Егорова, А.В. Семенов, Ю.В. Останкова, Ю.А. Артамонова
ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
В настоящее время одним из методов генотипи-рования возбудителей инфекционных заболеваний, основанном на секвенировании, является MLVA (multiple-locus variable-number tandem-repeats analysis), который субтипирует штаммы, используя различия в числе тандемных нуклеотидных повторов в определенных локусах хромосомной ДНК. Метод обладает высокой дифференцирующей способностью и эпидемиологической конкордантностью.
С 2010 г. в референс-центре по мониторингу за возбудителем брюшного тифа проведено генотипирова-ние методом MLVA 65 штаммов S. Typhi, выделенных в 2005—2010 гг. на различных административных территориях РФ. Завозные случаи заболевания отмечались из Азербайджана (2006 г.), Таджикистана (2006, 2008, 2010 гг.), Абхазии (2008 г.), Кыргызстана (2010 г.), Узбекистана (2010 г.), Индии (2008, 2010 гг.), Бангладеш (2008 г.), Камбоджи (2008 г.), Египта (2008, 2010 гг.), ОАЭ (2008 г.), Пакистана (2008 г.), Непала (2010 г.) и др.
Популяция российских штаммов S. Typhi характеризовалась различными фенотипами резистентности к антимикробным препаратам и генетической неоднородностью. По результатам MLVA-генотипирования выявлено 8 кластеров (генотипов), характеризующихся репрезентативны-
