CC BY
122
БОЛЕЗНИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ
биологические риска развития алкого
и алкогольного Цирр
1висимости ja печени
П.П. Огурцои|Ж.С. Поликарпова
Кафедра госпитщьной терапии Российский^н1В|РСитеТ дружбы народов ул. Миклухо-Маклаям, Москва, Россия, 117198
И.В. Гар -аш, О.С. Аришева
Кафедра факультетской терапии Российский университет дружбы народов ул^М^клухо-Маклая, 8, Москва, Россия, 11Ъ
А.Е. Гущин
олекулярной диагностики и эп одукции ФБУН ЦНИИ Эпидемио| 'л. Новогиреевская, д. 3а, Москва, Р\
Сшт
из'
Е.В. Тарасенко, Г.
Кафедра биологи Российский унив ул. Миклухо-Ма
на
ы народов 'оссия, 117198
гических факторов, влияющих на развитие сновными генами-кандидатами повышенного риска алко-алкогольметаболизирующих ферментов, кодирующие обладающих различной скоростью окисления эта-ие полиморфизма генов ангиотензиногена на развитие
^ ^Работа предпринята с целью выя когольного цирроза печени (АЦГ ольной болезни печени считают изоформы алкоголь- и альдеги нола и ацетальдегида. ОбсуЖдает алкогольной зависимости (
Целью нашей работы бЫ1Ъ изучение влияния полиморфизма гена АДГ2 и t174т гена ангио-тензина AGT на развитие алкогольной зависимости и алкогольного поражения печени. Установлено, что аллель АДГ2-2 встречается чаще среди больных алкогольным циррозом печени, чем в популяции (16% У8. 7%; р < 0,05). Среди лиц, злоупотребляющих алкоголем (декомпенсированный цирроз печени и алкогольная зависимость без цирроза, п = 98), аллель т гена agt (? 174т), встречается достоверно чаще (15,8%), чем в популяции (6,7%, п = 52; р = 0,04). Наибольшее увеличение частоты аллеля т по сравнению с популяцией наблюдалось в подгруппе с АЦП (17,3%, п = 49; р = 0,035). При сравнении клинико-лабораторных показателей больных АЦГ установлено, что аллельный полиморфизм Л74т гена agt не влияет на течение и клиническую картину АЦП, за исключением уровня гамма-глутамилтранспептидаза (ГГТ), активность которой повышена у гомозигот и.
Ключевые слова: алкогольный цирроз печени, алкогольная зависимость, алкогольдегид-рогеназа, ренин-ангиотензиновая система, полиморфизм гена ангиотензиногена.
Основными генами-кандидатами повышенного риска алкогольной болезни печени считаются гены алкогольметаболизирующих ферментов, кодирующие изо-формы алкогольдегидрогеназ (ADH) и альдегиддегидрогеназ (ALDH), отвечающие за 80% окисления алкоголя в организме человека [7, 10, 11]. Аллельные изяформы этих ферментов ADH 2 и ALDH 2 обладают различной скоростью окиолбнив- этанола и ацетальдегида, который играет важную роль в специфическам^ораЖении печени [8]. Однако имеющиеся в литературных источниках дашыеовлиянии изо-форм алкогольметаболизирующих ферментов на течение и прогноз алкогольной болезни печени достаточно противоречивы, поэтому данная проблема требует дальнейшего изучения.
Наибольшее влияние на метаболизм этанола и, «оо1в|Г1твенно, риск развития алкогольной патологии, способны оказывать алквгольдегидрогеназы. Существует 4 класса алкогольдегидрогеназ, однако их рол^в метаболизме этанола в организме человека не одинакова. Их аллельные шоф^рмУ-О^^^ и aldh 2-2 обладают аномальной активностью, которая приводит к накоплению в организме высокотоксичного ацетальдегида при поступлении экзогенного алкоголя [3]. Изоформа ADH 2-2 обладает ферментативной активностью, вМ0 раз превышающей in vitro активность ADH 2-1. Аллельная форма adh 2-2(кодирующая субъединицу Р2)-отл1кается от остальных заменой одного нуклеотида в третьем экзоне, что приводит к появлению остатка His47 вместоЛге47.
Распространение-вариантов adh неоднородно в разных-популяциях: аллель в странах Северо-восточной АзииЛнастоГа — до 60— о-европейской популяции (до 4%) и практически отсутст-]. В России генотипы adh изучались в популяции корен-и других коренных жит|л|й Сибири. Отмечалась низкая dh 2-2^реди приполярных монголоидов^—Я% (чукчи, сибирские эскимосы). Среди российских континентальных монголоидов частота adh 2-2 составила 25—26%»оуряты, алтайцы), что соответдтвует^го^астоте среди населения Вос-Ажи [2]. В Московской популяции частота adh 2-2 составляет 7%, что бли-ча!тоте этого аллеля в ЕвропейскияШопуляциях [15].
Плохая переносимость алкоголя возникает независимо от того, какой имен-фермент аномален — ADH или ALDH, либо оба фермента одновременно. Особенно высокая скорость у^ко дЛ|уИHmжсичного ацетальдегида при приеме экзогенного этанола наблюдается у носителей adh 2-2, обладающих одновременно геном неактивной алкогольдегидрогеназы — ALDH 2-2. При этом в отношении роли аллеля adh 2-2 в развитии алкогольного цирроза печени данные противоречивы. По данным большинства исследований, частота adh 2-2 в группе пациентов с алкогольным циррозом увеличивается, по некоторым данным — уменьшается [3, 6, 13, 14].
В последнее время внимание исследователей также сосредоточено на изучении роли ренин-ангиотензиновой системы (РАС) в развитии алкоголизма и его органных осложнений. Ангиотензин П — это цитокин, имеющий не только вазокон-стрикторные свойства. Он является стимулятором синтеза коллагена звездчатыми
adh 2-2 часто встреча 80%), редко — в за вует среди африканце ных жителей ко' частот
измов АДГ2, t174m ольной зависимости и ал-
оценки ГГТ, транс-линиче-
клетками печени, влияет на питьевое поведение млекопитающих [4, 5]. В эксперименте на животных были получены данные о прямой зависимости потребления алкоголя от уровня ангиотензиногена [1]. Различные генетические варианты ангио-тензиногена (ЛОТ) определяют разную физиологическую активность ангиипевзи-на-П. Полиморфизмы Й74т т2351 гена АОТ являются маркерами^ип|ртонии и инфарктов миокарда. В литературе представлены данные о влиянии полиморфизмов гена ЛОТ на скорость прогрессии фиброза печени у больных с хронической HCV-инфекцией [12]. Однако данные о роли полиморфизЗбврена ангиотен-зиногена в становлении алкогольной зависимости и развитии алкогольной болезни печени у человека в литературных источниках отсутс
Цель исследования — изучить влияни#"п!! и Ш254Т гена ангиотензина ЛОТ на риск развития а™1 когольного поражения печени.
Материалы и методы. 0бследов^о^50 человек московской популяции: 98 злоупотребляющих алкоголем (^гяациентЯх алкогольной зависимостью без цирроза и 44 больных алкогольнымширроом печени) и группа контроля — 52 человека без алкогольной зависимости и цирроза печени.
Всем больным проводилась клинико-лабораторное обследов поражения печени. Исследовалисьуровень билирубина, активно аминаз, общий анали^крови. У больных циррозом печени оц ское течение, тяжелые^Ьрожнения (кровотечение из варикозчИРрасЩиренных вен пищевода, гепаторенальный синдром, энцефалопатия и др.) и выживаемость больных по методу Каплан!—Майера. ДНК выделяли изиреток^ериферической крови. Аллелигено^АДГ и АТГ идентифицировали ^помощью ПДРФ-анализа продуктов ^Цр. Соответствие частот аллелей и генотиЛвв равновесию Харди—Вайн-берга проверили по критерию %2. Для оценю м полиморфизмом исполь Статистическая обработка ^ 13.0 у!
'езультаты исследованилпоказци, что аллель айк 2-2 встречался в группе жогольного цирроза печенМ^аще (16%), чем в популяции (16% У8 7%; р < 0,05). ГВ группе злоупотребляющихалкоголЬм лиц без цирроза эта частота составила 4%. Несмотря на более тяжелое течение алкогольного цирроза у больных с гетерозиготным генотипом АЬН^ТЩк 2-1/2) аллельный полиморфизм айк 2 на стадии цирроза печени (ЦП) не имел решающего прогностического значения для выживаемости.
Среди лиц, злоупотребляющих алкоголем (декомпенсированный цирроз печени и алкогольная зависимость без цирроза, п = 98), аллель т гена agt (Й74т) встречается достоверно чаще (15,8%), чем в популяции (6,7%, п = 52; р = 0,04). Наибольшее увеличение частоты аллеля т по сравнению с популяцией наблюдалось в подгруппе с АЦП (17,3%, п = 49; р = 0,035). При сравнении клинико-лабора-торных показателей больных АЦП установлено, что аллельный полиморфизм Й74т гена agt не влияет на течение и клиническую картину АЦП, за исключением
связи количественных признаков од однофакторного дисперсного одилась с помощью пакета про-
уровня ГГТ, активность которой повышена у гомозигот При исследовании частоты аллеля t гена agt (ш2350 среди всех вошедших в исследование 150 больных наблюдалось равномерное его распределение как среди здоровых лиц московской популяции, так и в группах алкогольной зависимости и алкогольного цирроз! чени. В то же время течение и клиническая картина АЦП имела ряд особенностей в зависимости от полиморфизма agt m235t. Так, у пациентов, гомозигоГны^ю ал-лелю т (п = 10), по сравнению с гомозиготным генотипом и ^=12)мрстоверно чаще развивался острый алкогольный гепатит. Кроме того, на ммнт"госпитали-зации в стационар наблюдалась более выраженная желтуха с последующим нарастанием уровня билирубина.
В нашем исследовании среди больных с АЦП наиболее многочисленной была группа с генотипом adh 2-1/1, в которой в л и яниеполй морфиз м а Й74ш гена agt оказалось существенным. Так, при наличии гомозиготного генотипа и (п = 23) течение ЦП более часто осложнялось развитием желудочно-кишечного кровотечения (56,5% и 16,7%; р = 0,03) по сравнению а^йосительством adh 2-1/1 и гетерозиготного генотипа Ш гена agt (п = 12). Кроме тоТо^у данной группы пациентов были более выражены признаки воспалительного синдрома в виде повышения активности аспарагиновой аминотрансфервзы (АСТ) и ускоренного СОЭ, а^акЖкболее высокая активность ГГТ. При этом уровень ГГТ в большей степ^и^пределялся гомозиготным генотипом adh 2-1/1.
Выводы. АллельУош8-2 является биологическим факторо"Шрйска"алкоголь-
ованной популяции среди больных алкогольным [ота выше (16%), чем в популяции "^1%). В группе зло-лиц без цирроза эта частота составила 4%. В москов-полиморфизм гена agt (Й74т) влияет^в^тановление алкогольной мирование алкогольной болезни печени. Течение алкогольного
ного цирроза печени. циррозом печени его употребляющих алког ской попу зависимости и
имеет ряд особенностей пршравличных генотипах agt и их сочета-льными вариантами adh 2. Однвко^Ьийанные для московской популя-ны впервые на небольшом количестве больных и требуют дальнейшего
АТУРА
а~Е.И., Обухова М.Ф. Алкогольная мотивации у крыс: ие ангиотензинов // Экспериментальная наркология. —
[1] Котов А.В., Толпыго С. дифференцированное у 2004. — № 6. — С. 37—44.
[2] Курилович С.А., Авксентюк А.В., Сегал и др. Молекулярно- генетические исследования в популяции коренных жителей Чукотки // Вести РАМН. — 1994. — № 2. — С. 28—30.
[3] Alcohol in health and disease / Ed. Agarwal D.P., Seitz Н.К. — New York; Basel: Dekker, 2001. — 632 р.
[4] Bataller R. et al. Activated human hepatic stellate cell express the rennin-angiotensin system and synthesize angiotensin II // Gastroenterology. — 2003. — Vol. 125. — Р. 117—125.
[5] Bataller R. et al. Prolonger infusion of angiotensin II into normal rat induces stellate cell activation and proinflammatory events in liver // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. — 2003. — W. 285. — Р. G642—G651.
deal-
[6] Chao Y.C., Young T.H., Tang H.S., Hsu C.T. Alcoholism and alcoholic organ damage and genetic polymorphisms of alcohol metabolizing enzymes in Chinese patients // Hepatology. — 1997. — Vol. 25. — P. 112—117.
[7] Cichoz-Lach H., Partycka J., Nesina 1., Celinski K., Slomka M., Wojcierowski hydrogenase and aldehyde dehydrogenase gene polymorphism in alcohol liv cohol chronic pancreatitis among Polish individuals // Scand J Gastroente Vol. 42(4). — P. 493—498.
[8] Ethanol and the Liver Mechanisns and Management // Ed. by DJ.N. R.R. Watson. — N.Y.: Taylor &, Francis, 2002. — 689 p.
[9] Goedde H.W., Agarwal D.P., Fritze G. et al. Distribution in different population // Hum. Genet. — 1992. — Vol.
[10] Higuchi S., Muramatsu T., Matsushita S. et al. Polymorph in alcoholics with inactive ALDH 2 // Hum. Genet.
[11] Lieber C.S. Medical disorders of alcoholism // N. Engl.
[12] Smirne C., Fabris C., Toniutto P., Caldera F.
[13]
[14]
DH 2 genotypes
-oxidizing enzymes l. 97.— Р. 431—434. . — Vol. 333. — Р. 1058. Onverting enzyme gene И) poly-
urnal of Hepatology, Supplement. —
morphism and liver fibrosis in chronic hepatil 2006. — Vol. 44, N 2. — Р. S205—S20' Garcia-Martin Е., Martinez С., Serrad Jimenez-Jimenez F.J. Alcohol dehy 2010. — 50(1). — P. 85—91.
Kang T.S., Woo S. W., Park H.J.%Roh Х. Comparison of genetic polymorp ADH2, and ALDH2 genes involVedjfl^lcohol metabolism in Koreans and four groups // J Clin Pharm Ther. — 2009. — Apr; 34(2). — P. 225—30 [15] Русакова О.С., Гармаш И.В., Гущин А.Е., Тарасенко Е.В., Мазур к Н.В. Урцое П.П.
avarro Н., Navacerrada F., Agundez J.A., ;enotype and risk for migraine // Headache. —
f СУР2Е1, ег ethnic
Моисеев В. С. гидрогеназы (А| гия и терапия
ныи цирроз печени и генетически^ гиотензиногена (Т174М, М235Т . —Т. 15. — № 5. — С. 31— 33.
орфизм алкогольде-кая фармаколо-
P.P. Ogurts G I. Myan
Departmi
the biological factors influence alcoholic liverpislease progression
I.V. Garmash, Е.V. Tarasenko, Arisheva, T.S. Polikarpova
edicine and Department of Biology Genetics Medical faculty riendship University of Russia Miklukho-Maklaya str., 8, Moscow, Russia, 117198
А.E. Guschin
Laboratory of Molecular diagnosis and epidemiology of infections reproductive organs FBUN Epidemiology Research Institute Novogireevskaya str., 3a, Moscow, Russia, 111123
The aim of om study was to detect the genetic factors which cause the predisposition for alcoholic liver damage. The main candidate genes of high risk are isoforms of adh and aldh genes which are responsible for different rate of alcohol metabolism and oxidation of ethanol and acetaldehyde. Our results demonstrated that allelic variant adh2-2 is in a higher frequency in patients with alcoholic liver damage than in a population (16% vs. 7%;p < 0,05).
BecTHHK Py^H, cepua Medu^Ha, 2013, № 3
The polymorphism t174m of angiotensinogen gene AGT was studied as risk factor of alcoholic liver damage. The allelic variant m of angiotensinogen gene AGT is more frequent (15,8%) in patients with alcoholic liver cirrhosis and alcohol abuse without cirrhosis (n = 98) than in a population (6,7%, n = 52; p = 0,04). the greater frequency of allele m was in a group with alcoholic liver cirrhosis (17,3%; P=^,058). Our. data provides the evidence that polymorphism 1174m of AGT gene does not influence the pr (clinical picture) of alcoholic liver cirrhosis, except the level of GGT, which is increased in homozygous genotype tt.
Key words: alcoholic liver cirrhosis, alcoholdehydrogenase, polymorphism adh t174m, angiotensinogen gene AGT, the renin-angiotensin system.
olymorphism
REFERENCES
[1]
[2]
[3]
[4]
[5]
[6]
[7]
tion in rats: differential use. — 2004. — № 6. —
jular geq^tic studies in aborigine populations -30.
al, Seitz N. — New York; Basel: Dekker,
kllate cell express the rennin-angiotensin system Ogy. — 2003. — Vol. 125. — P.J0—1£5.
ll acti-siol. —
Kotov A.V., Tolpygo S.M., Pevtsova E.I., Obukhov M.F. participation of angiotensin // Experimental drug a P. 37—44.
Kurylovich S.A., AvksentyukA.V., Segal et al. of Chukotka // News of RAMS. — 1994. Alcohol in health and disease / Ed. D.R^A: 2001. — 632 p.
Bataller R. et al. Activated human Wpatic and synthesize angiotensin II // GasMenteri
Bataller R. et al. Prolonger infusion or^ngfotensin II into normal rat induc vation and proinflammatory events in liver // Am. J. Physiol. Gastroint 2003. — Vol. 285. —Bjte642—G651
Chao Y.S., Young T.N^TanÊIM.S., Hsu S.T. Alcoholism and alcohoh polymorphisms of aldhoïmetlbolizmg enzymes in Chinese patients itoi Vol. 25. — P|J12—¿¿7.r
Cichoz-LaakH^PartyCka J., Nesina 1, Celinski K., SlomkW M., Wojcierowski J. Alcohol de^ hydrogenEc and^yehyde dehydrogenase gene polymorphism^ alalhol liver cirrhosis and alcohol chromOkpancreatitis among Polish individualsP/^Sgan"J^astroenterol. — 2007. — VolM2I4). —¥. 493—498.
he Liver Mechanisms and Management // Ed by D.I.N. Sherman, Charles Preedy, atson. — N.Y. : Taylor &, Francis.
N. W., Agarwal D.R., Fritze G^Tal. Distribution of ADH2 and ALDH 2 genotypes fferentpopulation // Hum. Genet^%£2. —Vol. 88. — P. 344—346 Higuchi S., Muramatsu T., Matsushita S. etol^Polymorphysms of ethanol-oxidizing enzymes
and genetic gy. — 1997. —
1] [12]
[13]
[14]
[15]
in alcoholics with inactive ALI Lieber C.S. Medical disorder Smirne S., Fabris C., TonU phism and liver fibrosis in Vol. 44. — N 2. — P. S205—
Genet. — 1996. — Vol. 97. — P. 431—434. N. Engl. J. Med. — 1995. — Vol. 333. — P. 1058. ra F. Angiotensin converting enzyme gene and polymor-patitis C // Journal of Hepatology, Supplement. — 2006. —
06.
Garcia-Martin E., Martinez C., Serrador M., Alonso Navarro H., Navacerrada F., Agundez J.A., Jimenez-Jimenez F.J. Alcohol dehydrogenase 2 genotype and risk for migraine // Headache. — 2010. — 50 (1). — P. 85—91.
Kang T.S., Woo S. W., Park H.J., Lee Y., Roh X. Comparison of genetic polymorphisms of SUR2E1, ADH2, and ALDH2 genes involved in alcohol metabolism in Koreans and four ethnic groups // J Clin Pharm Ther. — 2009. — Apr; 34 (2). — P. 225—230. Rusakova O.S., Garmash I.V., Gushin A.E., Tarasenko E.V., MazurchikN.V., Ogurtsov P.P., Moiseev V.S. Alcoholic cirrhosis of the liver and the genetic polymorphisms of alcohol dehydrogenase (AD1A) and angiotensinogen (T174M, M235T) // Clinical Pharmacology and Therapeutics. — 2006. — Vol. 15. — N 5. — P. 31.
