CC BY
50
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РИСКА РАЗВИТИЯ АЛКОГОЛЬНОЙ ЗАВИСИМОСТИ И АЛКОГОЛЬНОГО ЦИРРОЗА ПЕЧЕНИ
П.П. Огурцов, Т.С. Поликарпова
Кафедра госпитальной терапии Российский университет дружбы народов ул. Миклухо-Маклая, 8, Москва, Россия, 117198
И.В. Гармаш, О.С. Аришев
Кафедра факультетской тера
Зг
апии
Российский университет дружбы народов ул. Миклухо-Маклая, 8, Москва^о£сия,1^Ц
А.Е. Гу
Лаборатория молекуЛЬрной^иаТНостики и эпидемиологии инфеКциивпганов репродукции ФБУН ЦНИИ эпидеИиологии^оспотребнадзора ул. Новогиреевсшя, За^Мрсква, Россия, 111123
Е.В. Тарасе 'ко, г.И. Мяндина,
Кафедра биологии и общей генетики сийский университет дружбы народов Шухо-Маклая, 8, Москва, Россия, 1171
Работа предпринята с целЬю выявления биологических факторов, влияющих на развитие алкогольного цирроз^пеЧечжЯЦт Основными генами-кандидатами^овышенного риска алкогольной болезни печени^читаЮГся еДы алкогольметаболизирующих ферментов, кодирующие изоформы алкоголь- и альдегиддегидрогеназ, обладающих различной сверостью^кисления этанола и ацеталь-дегида. Обсуждаетш^значение полиморфизма генов ангиоГензиногенана в развитии алкогольной зависимяЕ1и(ал?оголизма).
^ЦелЪю^ашйй работы было изучение влияниа^олД^орфизма гена АДГ2 и ?174т гена ангио-тан1ена ЛОТ на развитие алкогольной зависимоитию^1лкогВл>^1ого поражения печени. Установлено, что аллель АДГ2-2 встречается чаще среди больных алкогольным циррозом печени, чем в популяции (16%vs. 7%; р < 0,05). Среди лиц, злоуяотрЯЬяющЯх алкоголем (декомпенсированный цирроз печ|ри и алкогольная зависимость без цирроза, п =^98), аллель т гена а$ (?174т) встречается достоверно чаще (15,8%), чем в популяциив6,7%,^ = 52; р = 0,04). Наибольшее увеличение частоты алия т по сравнению с популяцией^аблюдалось в подгруппе с АЦП (17,3%, п = 49; р = 0,035). При сравнении клинико-лабораа^рныЖ пок^аПлей больных АЦП установлено, что аллельный полиморфизм ?174т гена афЬ не влияет^а^Иение и клиническую картину АЦП, за исключением уровня гамма-глутамилтранспептидаза (ГвТ), активность которой повышена у гомозигот И.
Ключевые слова: алкогольный цирроз печени, алкогольная зависимость, алкогольдегидро-геназа, ренин-ангиотензиновая система, полиморфизм гена ангиотензиногена.
Основными генами-кандидатами повышенного риска алкогольной болезни печени считаются гены алкогольметаболизирующих ферментов, кодирующие изоформы алкогольдегидрогеназ (АБН) и альдlгиддlгидрогlназ (АЬБН), отвечающие за 80% окисления алкоголя в организме человека [7; 10; 11]. Аллельные изоформы этих ферментов АБН 2 и АЬБН 2 обладают различной скоростью окисления этанола и ацетальдегида, который играет важную роль в специфическом поражении
евышающеи in vitro |ующая субъединицу ^2) третьем экзоне, что при-
печени [8]. Однако имеющиеся в литературных источниках данные о влиянии изо-форм алкогольметаболизирующих ферментов на течение и прогноз алкогольной болезни печени достаточно противоречивы, поэтому данная проблема требует дальнейшего изучения.
Наибольшее влияние на метаболизм этанола и, соответственно,\ари|к развития алкогольной патологии способны оказывать алкогольдегидрюгенйзы^%ущест-вует 4 класса алкогольдегидрогеназ, однако их роль в метаболизмештанола в организме человека не одинакова. Их аллельные изоформы adh ¿-к'и^!^^^.-2 обладают аномальной активностью, которая приводит к накоплению в организме высокотоксичного ацетальдегида при поступлении жзогенщсР^лкоголя [3]. Изоформа АБН 2-2 обладает ферментативной активностью активность АБН 2-1. Аллельная форма adh ^2-2 (к отличается от остальных заменой одного нукле водит к появлению остатка Ш847 вместо ае§47. 1
Распространение вариантов adhшщоднщalДHо в разных популяциях: аллель adh 2-2 часто встречается в странах Северо-Восточной Азии (частота — до 60— 80%), редко — в западноевропейРкой^опуляции (до 4%) и практически отсутствует среди африканцев [9]. В РосЛи генотипы adh изучались в популяЦЯи^оренных жителей Чукотки и других коренЯыя^ителей Сибири. Отмечалас^шизка« частота adh 2-2 среди приполярных монголоидов: 2—3% (чукчи, сибирскщьЦкимосы). Среди российских кяйГннентальных монголоидов частота^дкЗ-^составила 25— 26% (буряты, алтайцы), что соответствует его частоте среди населения Восточной Азии [2]. В Московской популяции частота adh 2-2 составляет 7%, что ближе к частоте этого¿алле^я^Е вропейских популяциях [15]
Пложя переносимость алкоголя возникает независимо от того, какой именно фермент аномале^— АБН или АЬБН, либо оба*фер™вйта одновременно. Особенно высокая скорость накопления токсичного ацетальдегида при приеме экзоген-иЬго^танолБ наблюдается у носителей^dh^-2, Обладающих одновременно геном Цеактивной алкогольдегидрогеназы^—2. При этом в отношении роли алЯ|ля adh 2-2 в развитии алкогол8Цсго цирроза печени данные противоречивы. о данным большинства исслайованийкчастота adh 2-2 в группе пациентов с ал-огольным циррозом увеличивается, по некоторым данным — уменьшается [3; 6; 13; 14].
В последнее время внимание исследователей также сосредоточено на изучении роли ренин-ангиотензиновой системы (РАС) в развитии алкоголизма и его органных осложнений. Антаотензин II — это цитокин, имеющий не только вазо-констрикторные свойства. Он является стимулятором синтеза коллагена звездчатыми клетками печени, влияет на питьевое поведение млекопитающих [4; 5]. В эксперименте на животных были получены данные о прямой зависимости потребления алкоголя от уровня ангиотензиногена [1]. Различные генетические варианты ангиотензиногена (AGT) определяют разную физиологическую активность ангиотензина-11. Полиморфизмы t174m m235t гена AGT являются маркерами гипертонии и инфарктов миокарда. В литературе представлены данные о влиянии полиморфизмов гена AGT на скорость прогрессии фиброза печени у больных
вание для оценки ктивность ГГТ, транс-оценивалось клиниче-
с хронической HCV-инфекцией [12]. Однако данные о роли полиморфизмов гена ангиотензиногена в становлении алкогольной зависимости и развитии алкогольной болезни печени у человека в литературных источниках отсутствуют.
Цель исследования — изучить влияние полиморфизмов АДГ2\ и m254T гена ангиотензина AGT на риск развития алкогольной зависищостщи алкогольного поражения печени.
Материалы и методы. Обследовано 150 человек москавекойшопуляции: 98 злоупотребляющих алкоголем (54 пациента с iiiii hi iiii i mi Ушисим' ню без цирроза и 44 больных алкогольным циррозом печени) и группа контроля — 52 человека без алкогольной зависимости и цирроза печени.
Всем больным проводилась клинико-лабораторйЯе о поражения печени. Исследовались уровень билирубина аминаз, общий анализ крови. У больных цирррзом%е'
ское течение, тяжелые осложнения (кровотечение из варикозно-расширенных вен пищевода, гепаторенальный синдром, энцефалопатия и др.) и выживаемость больных по методу Каплана—Майера. ДНКвыделяли из клеток периферической крови. Аллели генов АДГ и АТГ идентифицировали с помощью ПДРФ-анализа продуктов ПЦР. Соответствие частот аЛлелейи генотипов равновесию Харди—Вайн-берга проверяли по критерию %2. ДЛй^ценки связи количественны^призжаков с генетическим полиморфизмом использовали метод однофактОрнсгО^исперс-ного анализа. Статистическая обработка данных проводилась с помощью пакета программ SPSS 13.0
Результаты исследования показали, что аллель ad£2-2 встречался в группе алкогольного дирло^1^еч1ни чаще (16%), чем в попуЛяции £16%v^ 7%; p < 0,05). В группе злоупотребляющих алкоголем лиц без цирроза эта частота составила 4%. Несмотря на более тяжелое течение алкогольного цирроза у больных с гетеро-зиготным^енотииом ADH 2 (adh 2-Уг) аллельныжЛолЯморфизм adh 2 на стадии цирроза печени (ЦП) не имел решающего прогностического значения для выживаемости.
Среди лиц, злоупотребляющих алкоголем (декомпенсированный цирроз пе-и алкогольная зависимость^ез цирроза, n = 98), аллель m гена agt (t174m) речается достоверно чаще (С,8%), чем в популяции (6,7%, n = 52; р = 0,04). аибольшее увеличение частоты аллеля m по сравнению с популяцией наблюдалось в подгруппе с 49; р = 0,035). При сравнении клинико-ла-бораторных показателей больных АЦП установлено, что аллельный полиморфизм t174m гена agt не влияет натечение и клиническую картину АЦП, за исключением уровня ГГТ, активность которой повышена у гомозигот tt.
При исследовании частоты аллеля t гена agt (m235t) среди всех вошедших в исследование 150 больных наблюдалось равномерное его распределение как среди здоровых лиц московской популяции, так и в группах алкогольной зависимости и алкогольного цирроза печени. В то же время течение и клиническая картина АЦП имела ряд особенностей в зависимости от полиморфизма agt m235t. Так, у пациентов, гомозиготных по аллелю m (n = 10), по сравнению с гомозиготным генотипом tt (n = 12) достоверно чаще развивался острый алкогольный гепатит.
Кроме того, на момент госпитализации в стационар наблюдалась более выраженная желтуха с последующим нарастанием уровня билирубина.
В нашем исследовании, среди больных с АЦП, наиболее мног была группа с генотипом айк 2-1/1, в которой влияние полиморфизма оказалось существенным. Так, при наличии гомозиготного генотипа
течение ЦП более часто осложнялось развитием желудочно-к ния (56,5% и 16,7%; р = 0,03) по сравнению с носительст: зиготного генотипа Ш гена аф1 (п = 12). Кроме того, у дан
сленнои на
(n = 23) Вотече--1/1 и гетеро-ы пациентов в виде повышения ного СОЭ, а также льшей степени опре-
были более выраженные признаки воспалительного активности аспарагиновой аминотрансферазы (АСТ более высокая активность ГГТ. При этом уровень делялся гомозиготным генотипом айк 2-1/1.
Выводы. Аллель айк 2-2 является 6иопогич|сй1м фактором риска алкогольного цирроза печени. В исследованной популяции среди больных алкогольным циррозом печени его частота выш|^И%), чШ^ популяции (7%). В группе злоупотребляющих алкоголем лиц бр-цирроза эта частота составила 4%. В московской популяции полиморфизм шна а,§Ж ¿174т) влияет на становление-алкогольной зависимости и формирование алкогольной болезни печени. Течение алкогольного цирроза печени имеет ряд особенностей при различных генотипах-а^ ишх сочетаниях с аллельными-вариантами айк 2. Однако эти данныеиля^осковской популяции получены впервые на небольшом количестве больных и требуют дальнейшего изучения.
огольная мотивации у крыс: риментальная наркология. —
ЛИТЕРАТУРА
Толпыго С.М., Певцова Е.И., Обухо )еренцйрованное участие ангиотензинов ' ►№ 6. — С. 37—44.
тлович С.А., Авксентюк А.В., Сеаалшдя^явлекулярно- генетические исследования ^пуляции коренных жителей ЧукоткиАШести РАМН. — 1994. — № 2. — С. 28—30. dcohol in health and disease /EHTAgarwal D.P., Seitz H.K. — New York; Basel: Dekker, 2001. — 632 p. J^
Bataller R. et al. Activated hemanhepatic stellate cell express the rennin-angiotensin system and synthesize angiotenafffc //gastroenterology. — 2003. — Vol. 125. — P. 117—125.
[5] Bataller R. et al. FVoiongerjftusioiTbf angiotensin II into normal rat induces stellate cell activation and proinflammatoTfevents in liver // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. — 2003. — Vol. 285. — P.G42—G651.
[6] Chao Y.C., Young T.H., Tang H.S., Hsu C.T. Alcoholism and alcoholic organ damage and genetic polymorphisms of alcohol metabolizing enzymes in Chinese patients // Hepatology. — 1997. — Vol. 25. — P. 112—117.
[7] Cichoz-Lach H., Partycka J., Nesina I., Celinski K., Slomka M., Wojcierowski J. Alcohol de-hydrogenase and aldehyde dehydrogenase gene polymorphism in alcohol liver cirrhosis and alcohol chronic pancreatitis among Polish individuals // Scand J Gastroenterol. — 2007. — Vol. 42(4). — P. 493—498.
[8] Ethanol and the Liver Mechanisns and Management // Ed. By D.I.N. Sherman, V. Preedy, R.R. Watson. — N.Y.: Taylor & Francis, 2002. — 689 p.
[9] Goedde H.W., Agarwal D.P., Fritze G. et al. Distribution of ADH2 and ALDH 2 genotypes in different population // Hum. Genet. — 1992. — Vol. 88. — P. 344—346.
[10] Higuchi S., Muramatsu T., Matsushita S. et al. Polymorphysms of ethanol-oxidizing enzymes in alcoholics with inactive ALDH 2 // Hum. Genet. — 1996. — Vol. 97. — P. 431-
[11] Lieber C.S. Medical disorders of alcoholism // N. Engl. J. Med. — 1995. — Vol. 33
[12] Smirne C., Fabris C., Toniutto P., Caldera F. Angiotensin converting enzyme morphism and liver fibrosis in chronic hepatitis C // Journal of Hepatolog 2006. — Vol. 44. — N 2. — P. S205-S206.
García-Martín E., Martínez C., Serrador M., Alonso-Navarro H., Navac¿
[13]
.ine // Headache. —
Jiménez-Jiménez F.J. Alcohol dehydrogenase 2 genotype and ] 2010. — Jan; 50(1). — P. 85—91.
[14] Kang T.S., Woo S.W., Park H.J., Lee Y., Roh J. Comparison f^en^tic polymorphisms of CYP2E1, ADH2, and ALDH2 genes involved in alcohol metaPoil|m'in Koreans and four other ethnic groups // J Clin Pharm Ther. — 2009. — Ащ|Й14(2). — ВГ225—230.
[15] Русакова О.С., Гармаш И.В., Гущин А.Е., Таршенко ЕВ., Мазурчик Н.В., Огурцов П.П., Моисеев В.С. Алкогольный цирроз печени и^наТическии полиморфизм алкогольдегидро-геназы (АДГ2) и ангиотензиногена (Т124М(^235Т)т/ Клиническая фармакология и терапия. — 2006. — Т. 15. — № 5. —
gúndez J.A.,
о
risk a
OF ALCOHOLIC
xS^
^V E.WTai
LOGICAL FACTORS LIVER DISEASE PRO
gurtsov, I.V. Garmash, A.E arasenko, G.I. Myandinai^.S? T.S. Polikarpov
Department of HoapjEalWed' Department of Biology^nd^eniral^enetics Peoples Friendship University of Russia Miklukho-Maklaya4ir.,8^MoscWw, Russia, 117198
Aim: to detect the genetic factors isk are isoforms of adh and aldh oxidation of ethanol and acetaldel frequently in patients with alcohi
The polymorphism t174m of a
alcoholic liver lesion. The main candidate genes of high ¡sponsible for different level of alcohol metabolism and demonstrated that allelic variant adh2-2 is observed more iage than in population (16% vs. 7%; p < 0,05). uotensinogen gene AGT was investigated as one of the risk factor
of alcoholic liver lesion. The allelic variant m of angiotensinogen gene AGT is more frequent (15.8%) in patients with alcoholic liver cirrhosis and alcohol abuse without cirrhosis (n = 98) than in population (6.7%, n = 52; p = 0.04). The highest frequency of allele m was in a group with alcoholic liver cirrhosis (17.3%; p = 0.058). Our data provides the evidence that polymorphism t174m of AGT gene does not influence the progression (clinical picture) of alcoholic liver cirrhosis, except the level of GGT, which is increased in patients with homozygous genotype tt.
Key words: alcoholic liver cirrhosis, alcoholdehydrogenase, polymorphism adh2, polymorphism t174m, angiotensinogen gene AGT, the renin-angiotensin system.
