CC BY
16
high-producing dairy cows / L.M. Chagas [el 4022-4032. al.]. // J. Dairy Sci. - 2007. - Vol. 90. - P.
АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ У КОРОВ РАЗЛИЧНЫХ ГЕНОТИПОВ
Крупин Е.О., Тагиров М.Ш.
Резюме
Исследованиями установлено, что в исследуемой популяции животных максимально высокая активность ферментов ACT и AJ1T установлена у особей с гомозиготными генотипами TG5n по гену TG5, альфа-амилазы у животных с гетерозиготным генотипом PRL48 но гену PRL, а самая низкая активность фермента ЩФ выявлена у животных с гомозиготным генотипом BLGAA по гену BLG. По изучаемым генам максимально высокая активность фермента ACT установлена у животных с комплексным генотипом CSN3abGHvvTG5tcBLGaaPRLaa (п=1) - 100,00 Е/л, АЛТ - у животных с комплексным генотипом CSN3/LiGHLVTG5TCBLGABPRI.AA (п=1) - 55.60 Е/л, ачьфа-амилызы - у животных с комплексным генотипом CSN3/UiGHl'yTG5Г( BLGAAPR LAB (n=l) - 105.0 Е/л. наиболее низкая активность фермента ЩФ - у животных: с комплексным генотипом CSN3AAGHyvTG5BLGAAPRLAA (п=1) - 62,33 Е/л.
ACTIVITY OF BLOOD SERUM ENZYMES IN COWS OF VARIOUS GENOTYPES
Krupin E.O., Tagirov M.Sh.
Summary
Studies have shown that in the studied animal population the highest activity of AST and ALT enzymes was established in individuals with homozygous genotypes TG5 genotypes for the TG5 gene, alpha-amylase in animals with the PRLAh heterozygous genotype for the PRL gene, and the lowest activity of the enzyme ALP was detected in animals with a homozygous BLGAA genotype gene BLG. According to the studied genes, the highest activity of the AST enzyme was established in animals with the complex, genotype CSN3ABGHn'TG5rcBLGA''PRLAA (n = 1) - 100.00 E / L. ALT in animals with the complex genotype CSX3AA Gil' lTG5n ' BLG™ 1> RIAA (n = Г) - 55.60 E/L. alpha-amylases - in animals with the complex genotype CSN3ABGH'' TG5n BLGAAPRIA" (n = 1) -105.0 U / 1, the lowest activity of th.c enzyme ALP - in animals with the complex genotype CSN3AAGHvvTG5ccBLGAAPRLAA (n - 1) - 62.33 U /1.
УДК 636.22/.28.033; 636.22/.28.034
БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ БЕЛКОВОГО И УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА У КОРОВ РАЗЛИЧНЫХ ГЕНОТИПОВ
Кручин Е.О. - к.в.н., Тагиров М.Ш. - д.с/х.н., академик АН РТ
ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр «Казанский научный центр
Российской академии наук»
Ключевые слова: животные, корм, гены, кровь, метаболизм
Keywords: animal feed, genes, blood, metabolism
Постоянное стремление сельхоз- повышению нродукпвности животных и
товаропроизводителей к максимальному получению, в конечном счете, наибольшей
прибыли приводит к метаболической переориентации организма животного, что может сопровождаться клинически выраженными нарушениями обмена веществ [1,5]. При этом одной из характерных особенностей молочных стад, в которых генетические аспекты селекционируемых признаков ориентированы на повышение продуктивности животных, является высокий уровень обмена веществ и низкая резистентность организма к стрессовым факторам разного генеза [4, 8, 9, 111. Для нормальной жизнедеятельности тканей и органов крайне необходимо постоянство состава внутренней среды организма, которую образуют кровь совместно с лимфой и тканевой жидкостью. Кровь в организме животных выполняет ряд исключительно важных функций. Изменения в организме, как физиологического состояния, так и при заболеваниях сказываются на изменении показателей крови. Анализ данных показателей позволяет оценить характер протекания того или иного вида обмена веществ, особенно если оказывает влияние какой-либо фактор кормления, которое в современных условиях обязано быть сбалансированным, а корма в составе рациона - высококачественными [2, 3, 6].
Целью проведенных исследований являлась оценка биохимических показателей сыворотки крови (показатели интенсивности белкового и углеводного обменов веществ дойных коров в зависимости от генетического
полиморфизма генов каппа-казеин (СБЮ),
бета-лактоглобулин (BLG), пролактин (PRL). соматотропин (GH). тиреоглобулин (TG5).
Материал и методы исследований.
Исследования выполнили на дойных коровах холмогорской породы татарстанс кого типа в ТатНИИС-Х обособленном структурном подразделении ФИЦ КазНЦ РАН и СХПК «Агрофирма Рассвет» Кукморского района Республики Татарстан. В хозяйстве были изучены условия содержания и кормления животных; с использованием компьютерной программы «Корм Оптима Эксперт» проанализированы текущие рационы их кормления и приведены в соответствие с детализированным и нормами [7]. В состав рациона кормления животных входило сено люцернорвое (1,5 кг), сенаж шоцерновый (8,0 кг) и сенаж из кормосмеси (9,0 кг), силос кукурузный (12,0 кг), комбикорм для дойных коров (6,0 кг), зерно кукурузы (2,0 кг), дробина пивная сухая (1,0 кг), маслосемяна рапса ярового (1,0 кг), зерно овса пропаренное (0,5 кг). Кроме представленных выше компонентов в состав рациона кормления всех дойных коров была введена комплексная кормовая добавка в количестве 0,7 кг на одно животное в сутки. полученная из продуктов биоферментации зерна, торфа верхового, отходов технических производств и биологически активных веществ. Схема проведенного опыта представлена в таблице 1.
Таблица 1 - Схема научно-хозяйственного опыта
Количество голов Подгруппы по генотипам
CSN3 В1 LG PI RL GH TG5
< < И < CQ Р2 < < а < сс сс < < CQ < се PQ > > > J О и Е—1 О Н н
81 Основной рацион + комплексная кормовая добавка (0,7 кг/гол./сут.)
Содержание общего белка Содержание альбуминов Содержание мочевины Содержание глюкозы
Материалом для лабораторных ис-исследований служили пробы цельной крови животных, а также сыворотка крови животных. Из цельной крови животных выделяли ДНК с помощью набора «ДНК-Сорб-В» по прилагаемой изготовителем методике. Полиморфизм генов CSN3, BIG, PRL, GIL TG5 выявляли методом ПЦР-ПДРФ в ходе которого фрагменты ДНК амшшфицировали на программируемом термоциклере My Cycler. Рестрикцию осуществляли на
программируемом термоциклере согласно рекомендациям производителя. Анализ полученных результатов исследования проводили методом гель-электрофореза в агарозном геле и документировали с помощью видеосистемы Gel Г)ос. В сыворотке крови животных определяли содержание общего белка
колориметрическим фотометрическим (биуретовым) методом, альбуминов BCG-методом по реакции с
Наибольшим содержанием
альбуминов в сыворотке кроки по гену
бромкрезоловым зеленым, мочевины - УФ кинетическим, глюкозы - ферментативным методом. Результаты исследований обрабатывали с применением
математической статистики [10].
Результаты исследований. Оценка биохимических показателей сыворотки крови показала некоторую взаимосвязь между характером протекания белкового и углеводного обменов веществ и полиморфизмом генов качественных и количественных признаков (таблица 2).
Из данных, представленных в таблице, видно, что наибольшим содержанием общего белка в сыворотке крови по гену CSN3 характеризовались животные с генотипом CSN3Bli - 99.40 г/л. по гену BLG - животные с генотипом BLG** - 96,43 г/л, по гену PRJ. - животные с генотипом PRLÁB - 99,31 г/л, по гену GH животные с генотипом Gfí' - 95,03 г/л, по гену TG5 - животные с генотипом TG5CC- 95,84 г/л.
CSN3 характеризовались животные с генотипом CSN3BB - 47,60 г/л, по гену BLG
Таблица 2 - Биохимические показатели сыворотки крови коров различных генотипов по изучаемым генам___
Тен Генотип Показатель
общий белок, г/л альбумины, г/л мочевина, мм оль/л глюкоза, ммоль/л
CSN3 (п=81) АЛ (11-64) 94,30±1,75 42,06±1,03 5,44±0,14 3,76±0,19
AB (п=12) 92,95 • 3.66 42,92±1,90 5,36±0,30 3,32±0,31
ВВ (п-5) 99,40±3,37 47,60±4,14 6,66=0,44 3,40+0,54
BLG (п-81) АА(п=15) 96,43±3,20 42,00=1,79 5,52±0,34 3,23=0,30
AB (п=44) 93,78*2,09 43,41 ±1,34 5,40±0,15 3,77±0,24
ВВ (п=22) 94,36±2,97 41Д4±1,57 5,71=0,26 3,78+0,24
PRL (п-81) АЛ (п=59) 93,32±1,72 41,37±0,91 5,64±0,15 3,78+0,20
AB (п=16) 99,31 ±3,27 43,8812,57 5,12+0,28 3,50±0,28
ВВ (п=6) 92,33±6,93 50,33±3,7 6 5,25±0,3 8 3,08±0,43
GH (п=81) LL (п=38) 93,89±2,35 42,63±1,49 5,55±0,17 3,48+0,24
LV (п-27) 95,03±2,60 42,51±1,42 5,35=0,21 3,91 ±0,2 8
VV (п-16) 94,69+2,87 42,31±1,77 5,66=0,34 3,72±0,27
TG5 (п=81) СС (п—50) 95,84+2,01 42,89±1,30 5,37±0,16 3,90±0,19
ТС (п~30) 93,24±2,17 41,89±1,23 5,69±0,20 3,65±0,29
TT (n i) 70,00 42,00 6,27 1,79
- животные с генотипом BLG- 43,41 г/л, по гену PRL - животные с генотипом PRLBB - 50,33 г/л, но гену GH - животные с генотипом Gil"' - 42,63 г/л, по гену TG5
/■у •
- животные с генотипом TG5 - 42,89 г/л.
Наименьшим содержанием мочевины в сыворотке крови по гену CSN3 характеризовались животные с генотипом CSN3 - 5,36 ммоль/л, по гену BLG -животные с генотипом BLGÁÜ - 5,40 ммоль/л, по гену PRJ. - животные с генотипом PRLa - 5,12 ммоль/л. по гену GH - животные с генотипом GHU - 5,35 ммоль/л, по гену TG5 - животные с генотипом TG5C - 5,37 ммоль/л. Наибольшим содержанием глюкозы в сыворотке крови по гену CSN3 характеризовались животные с генотипом CSN3M - 3,76 ммоль/л, по гену BLG -животные с генотипом BLGbb - 3,78 ммоль/л, по гену PRL - животные с генотипом PRLaa - 3,78 ммоль/л, по гену Gil - животные с генотипом GH1' - 3,91 ммоль/л, по гену TG5 - животные с
СС
генотипом TG5^ - 3,90 ммоль/л.
Таким образом, максимально высокое содержание общего белка, и альбуминов установлено у особей с гомозиготными генотипами CSN3 в и PRLBB по генам CSN3 и PRL. глюкозы - у особей с гомозиготным генотипом TG5'с
по гену TG5; минимальное содержание мочевины - у особей с гетерозиготным генотипом PRIab по гену PRL. Оценка биохимических показателей сыворотки крови показала некоторую взаимосвязь между характером протекания белкового и углеводного обменов веществ и полиморфизмом комплекса генов качественных и количественных признаков (таблица 3).
Из данных, представленных в таблице, видно, что по изучаемым генам максимально высокое содержание общего белка установлено у животных с комплексным генотипом
CSN3aaGHvvTG5icBBBLGPRLbb (п=1) -122,00 г/л, альбуминов - у животных с комплексным генотипом
CSN3a bGHll TG5tcBLGa bPRLaa (n=l) -57,00 г/л, глюкозы - у животных с комплексным генотипом
CSN3ajGHlvTG5ccBBBLGPRLaa (n—1) -5,75 ммоль/л; минимальное содержание мочевины - у животных с комплексным генотипом CSN3aaGHij-TG5tcBLG4BPRLab (п=1) - 4,01 ммоль/л. Дополнительными исследованиями необходимо уточнить установленные результаты в виду низкой частоты встречаемости различных комплексных генотипов.
Таблица 3 - Биохимические показатели сыворотки крови коров различных комплексных генотипов по изучаемым генам
Показатель
Генотип (CSN3, GH, TG5, BLG, PRL) общий белок, г/л альбумины, г/л мочевина, ммоль/л глюкоза, ммоль/л
AALLCCABAA 89,86+7,39 40.29±4,22 5,00+0,33 4,14=0,47
AALLCCAAAA 104,6±7,51 40,20+3,89 5,55+0,64 3,21=0.67
AALLTCABAA 93,40±5,84 37,60+1,44 6,13+0,33 4,52+1,23
AALVCCABAB 108,00+5,34 45,60+6,58 5,24+0,64 3,76=0,74
AALVTCABAA 91,20+4,85 41,40±1,17 4,86+0,39 4,22+0,67
AALLCCABAB 95,00*3,03 41,25=6,52 5,64=0,64 4,05=0,56
AALLTCBBAA 87,25+5,06 44,25+4,82 6.63+0,48 2,40+0,27
AALVCCABAA 93,50±4,99 40,00±6,58 5,24+0,64 3,76+0,74
AALLCCBBAA 106.00±8,62 39,00+3,21 5,32+0,07 4,20+0,24
AALVTCBBAA 87,00±7,00 43.00.-l 1,00 5.03+0.48 3,28+0,39
AAVVCCAAAA 86,00=4.04 47,33±4,26 5.13+1,02 2,64=0,03
AALLCCABBB 80,00=5,00 53,50±7,50 5,23±0,16 2,05±0,49
ABLLCCABAA 86,00=16,00 45.00±3.00 5,23+1,02 2,01 ±0,42
ABVVCCABAA 84,00±10,00 42,50=3,50 6,63±0,45 4.11 ±0.06
BBVVTCABAA 101,50±6,50 52,50±5,50 6,26+1,13 2.20±0.39
AALLCCBBBB 81,00 56,00 4,28 3,88
AALLTCAAAA 96,00 37,00 6,44 1.82
AALLTCABAB 109,00 43,00 4,01 2,96
AALVCCAAAA 94,40 42,00 5.51 3.67
AALVCCAABB 101,00 49,00 4.18 2,56
AALVCCBBAA 79,00 42,00 7,00 5,75
AALVCCBBAB 107,00 36.00 4,08 4.67
AALVCCBBAB 90,00 55,00 6,38 2,74
AALVTCABAB 76,00 34.00 6,18 3.93
AALVTTBBAA 92,00 42,00 6,27 2.79
AAVVCCBBAA 104,00 41,00 7,14 5,33
ААVVССВВAB 96.00 36,00 4,06 3,88
AAVVTCBBAA 96.00 41,00 4,26 4,92
AAVVTCBBBB 122,00 35,00 6,37 4,42
ABLLTCABAA 98,00 57,00 5,41 2,66
ABLLTCABAB 96,00 45,00 5,38 3,15
ABLVCCABAB 117,00 47,00 4,08 1,93
ABLVTCABAA 94,40 42,00 5,51 3,67
ABVVCCAAAA 98,00 33,00 6,10 5,25
ABVVCCBBAA 94,00 33,00 4.03 4.10
ABVVTCAAAA 97.00 40,00 4,13 4,00
ABVVTCAAAB 81,00 43,00 5,94 2,79
BBLLCCABBB 90,00 55,00 6.19 3,55
BBLVTCBBAA 106,00 35.00 7,23 4.64
BBVVCCAAAA 98,00 43,00 7,38 4,41
Заключение. Величина того и ли иного биохимического показателя сыворотки крови коров имеет некоторые различия у животных различных генотипов по изучаемым генам. В изучаемой нами популяции животных установлены особи с наибольшим содержанием в сыворотке крови обшсго белка, альбуминов, глюкозы и наименьшим содержанием мочевины Полученные результаты следует уточнить дальнейшими исследованиями в связи с различающейся частотой встречаемости генотипов животных, как по исследуемым генам, гак и по их комплексам. ЛИТЕРАТУРА:
1. Алехин, Ю.Н. Значение энергетического питания в обеспечении репродуктивной функции коров / Ю.Н.
Алехин // Современные проблемы ветеринарного обеспечения
репродуктивного здоровья животных / Вссрос. Науч.- исследов. институт патологии, фармакологии и терапии. -Воронеж, 2009. - С. 28-32.
2. Бикчантаев, И.Т. Воздействие различных доз и соединений селена на продуктивность и концентрацию его в крови и органах бычков на откорме / И.Т. Бикчантаев, Г.С. Шарафутдинов // Вестник КГАУ. - 2014. - Т 9. - №2(32). - С. 85-88.
3. Быкова, O.A. Биохимические показатели крови сухостойных коров при включении в рацион сапропеля и его производных / O.A. Быкова // Агропродовольственная политика России. - 2015. - № 4 (16). - С. 47-50.
4. Ковзов, В.В. Особенности обмена веществ у высокопро дуктивных коров V В.В. Ковзов. - Витебск. 2007 - С. 160 с.
5. Крупин Е.О. Определение эффективной дозы нового кормового концентрата для дойных коров / Е.О. Крурин, Ш.К. Шакиров, М.Ш. Тагиров // Достижения науки и техники АПК. - 2017. -Т. 31.- №8. -С. 49-53.
6. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных: Справочное пособие / А.П. Калашников [и др.]. -М.: Агропромиздат, 2003. - 456с.
7. Разумовский, Н.П. Высокопродуктивные коровы: обмен веществ и полноценное кормление / Н.П. Разумовский. В.В. Ковзов, И.Л. Пахомов. -Витебск. 2007. - 290 с.
8. Сафонов, В.А. Изменение биохимических показателей крови высокопродуктивных коров во время беременности и в послеродовый период /
В.А. Сафонов и др. // Вестник РАСХН . -2008. -№3._ С. 74-76.
9. Смирнова. Л.В. Роль процессов перекисного окисления липидов и антиоксиданг - ной защиты в воспалении молочной железы у коров / Л. В. Смирнова // Важнейшие итоги исследований по йзучепию заболеваний с.-х. животных незаразной этиологии, их профилактика и лечение. - Воронеж, 1993. - С. 93-99.
10. Усович, А.Т. Применение математической статистики при обработке экспериментальных данных в ветеринарии: научное издание / А.Т. Усович, П.Т. Лебедев Омск: Западно-Сибирское книжное издательство. 1970. 43 с.
11. Шкуратова. И. Эффективность кормового препарата при заболеваниях печени у крупного рогатого скота / И. Шкуратова, Н. Фердман, Т. Бузанова // Комбикорма. — 2007. - № 6. - С . 96-97.
БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ БЕЛКОВОГ О И УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА У КОРОВ РАЗЛИЧНЫХ ГЕНОТИПОВ
Крупин Е.О., Тагиров М.Ш.
Резюме
Исследованиями установлено, что в изученной нами популяции животных максимально высокое содержание общего белка, и альбуминов характерно для особей с гомозиготными генотипами CSN388 и PRLliB по генам CSN3 и PRL, глюкозы - у особей с гомозиготным генотипом TG5CC по гену TG5; минимальное содержание мочевины - у особей с гетерозиготным генотипом PRLAB по гену PRE. По изучаемым генам максимально высокое содержание общего белка установлено у животных с комплексным генотипом CSN3AAGHlTTG5rcBBBLGPRL8!i (п=1) - 122.00 г/л, альбуминов - у животных с комплексным генотипом CSN3abGHilTG5tcBLGabPRLaa (п=1) - 57,00 г/л, глюкозы - у животных с комплексным генотипом CSN3aaGHlvTG5ccBBBLGPRLaa (п=1) - 5,75 ммоль/л; минимальное содержание мочевины - у животных с комплексным генотипом CSN3AAGHLLTG5TCBLGABPRLAB (п=1) - 4,01 ммоль/л. Различная частота встречаемости генотипов, как по отдельным генам, так и по их комплексам обуславливает необходимость проведения дальнейших исследований для уточнения полученных результатов.
BIOCHEMICAL INDICES OF THE PROTEIN' AND HYGIODE EXCHANGE OF SUBSTANCES IN COWS OF VARIOUS GENOTYPES
Krupin EO, Tagirov M.Sh.
Summary
Studies have shown that in the animal population we studied, the highest total protein content and albumin content are characteristic of individuals with homozygous genotvpes CSN3BB and PRLBB for CSN3 and PRE genes, for glucose in individuals with homozygous genotype TG5
for the TG5 gene; the minimum urea content in individuals with a heterozygous PRLAB genotype for the PRL gene. According to the studied genes, the highest total protein content was found in animals with the complex genotype CSN3AAGHl 1 TG5tcBBBLGPRL')b (n= 1) - 122.00 g/1. albumins
- in animals with the complex genotype CSN3ABGHLLTG5K BLGWPRLU (n=l) - 57,00 g/1, glucose
- in animals with the complex genotype CSN3aaGHuTG5ccBBBLGPRL,a (n=l) - 5.75 mmol/1: the minimum urea content in animals with the complex genotype CSN3A/4GHLLTG5lcBLGABPRLAti (n=l) - 4.01 mmol/1. The different frequency of occurrcnce of genotypes, both for individual genes and for their complexes, necessitates further research to refine the results obtained.
УДК 619:616.98:579.8
РАЗРАБОТКА МЕТОДА ИММУНОФЕРМEHTHOI O АНАЛИЗА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ АНТИГЕНА ¡V1.AGALACTIAE ОВЕЦ И КОЗ В БИОСУБСТРАТАХ
*Кулибеков Ф.М. - д.б.н., Дильбази Г.Г. - к.в.н. * Институт Микробиологии Национальной Академии Наук Азербайджана Ветеринарный Научно-Исследовательский Институт
Ключевые слова: микоплазма агатактии, иммуноферментный анализ, биосубстраты, антиген, бактерия
Key words: mycoplasma agalactia, enzyme immunoassay, biosubstrates, antigen, bacterium
Развитие овцеводства является одной из важнейших задач сельского хозяйства, направленных на увеличение производства продуктов животноводства. Успешному решению этой проблемы в Российской Федерации и Азербайджанской Республике препятствуют инфекционные болезни и в частности, инфекционная агалактия и листериоз овец. Из известных в настоящее время 102 видов бактерий рода Mycoplasma ля овец и коз наиболее патогенным является Mycoplasma agalactiae (Х.З. Гаффаров и др., 1994; Ф.М. Кулибеков, 2012; Ф.М. Кулибеков, Г.Г. Дильбази, 2015;Talavera S., Goncer А., 1985; Kennedy S., Ball U.S., 1987; Gaillard-Periin G., 1985; Sarris K. et al., 1987; Montagna C.O., 1988; Sanchis R. et al., 2000). Как сообщают' ряд исследователей (Кулибеков Ф.М., Дильбази Е.Г.), под руководством профессора Фарзалиева М.М. в условиях неблагополучных по агалактии овец и коз хозяйствах Азербайджанской Республики были выделены микоплазмы. Изучение роли микоплазм в этиологии инфекционной агатактии овец, выделение и изучение иммунобиологических свойств
эпизоотических штаммов М. agalactiae и на их основе создание средств специфической
профилактики и лабораторной диагностики указанной болезни, является весьма актуальной проблемой.
Несмотря на значительный период изучения этой болезни. результаты исследований по разработке средств специфической профилактики и лабораторной диагностики,
свидетельствуют о том, что эта проблема требует дальнейшей разработки.
Целью настоящей работы явилась разработка метода иммуно- ферментного анализа для выявления антигена возбудителя М^а1аспае в биосубстратах и получение мембранного антигена пригодного при гипериммунизации овец для получения специфических диагностических сывороток. Учитывая при этом что, основной задачей при получении иммуноферментных конъюгатов является сохранение высокой каталитической и иммунологической активности
образовавшейся гибридной молекулы белка и фермента. Качество их определяется активностью фермента, высокой специфической активностью иммуноглобулина, используемого для конъюгации, оптимальным соотношением фермента и иммуноглобулина в конъюгате.
