CC BY
17
эффект холодной гелиевой плазмы в отношении кристаллогенных свойств сыворотки крови. При этом установлено, что имеет место дозозависимость реакции изучаемой характеристики биосреды на данное воздействие, причем более оптимальным представляется ответ последней на менее продолжительную обработку (1 мин).
MODIFICATION OF CRYSTALLOGENIC ACTIVITY OF BLOOD SERUM BY COLD
HELIUM PLASMA
Krasnova S.Yu., Martusevich A.K., Kozlova L.A.
Summary
The aim of this study was estimation of modulating effect of cold plasma on crystal!ogenic properties of blood plasma. Our experiment was carried on 10 blood specimens from healthy volonteers. Each specimen was divided into 3 portions. First portion was control (without any manipulatons), and second and third portions were processed with flow of cold helium plasma (processing time -1 and 3 min., respectively). This study demonstrated clear modulating effect of cold helium plasma on crvstallogenic properties of blood serum. In addition, we fixed dose-dependent action of this agent on response of biological fluid. It was stated that more optimal response to processing was characterized for faster manipulation (1 min.)
УДК 636.22/.28.033; 636.22/.28.034
АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ У КОРОВ РАЗЛИЧНЫХ
ГЕНОТИПОВ
Крупин Е.О. - к.в.н.. Тагиров М.Ш. - д.с/х.н., академик АН РТ
ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр «Казанский научный центр
Российской академии наук»
Ключевые слова: животные, корм, гены, кровь, метаболизм
Keywords: animal feed, genes, blood, metabolism
Интерьерная оценка животных но показателям крови необходима для определения племенных качеств животных и прогнозирования их продуктивности. Основные направления обмена веществ в организме животных регулируются ферментами, ключевыми из которых являются авпартат- и алинин-аминотрансферазы (ACT и АЛТ). альфа-амилаза. щелочная фосфатаза (ЩФ) и др. Исследователями установлено, что интерьерно-комплементарный метод
отбора или селекция с учетом сопряженных параметров важнейших ферментов крови у животных основывается на суммирующем продуктивном эффекте [3].
Интенсификация отрасли животноводства
в последнее время сопровождается сокращением продолжительности
хозяйственного использования
высокопродуктивных молочных коров вследствие снижения репродуктивных показателей и роста числа различных заболеваний [5, 7]. Нередко причиной выбраковки животных являются модифицированные метаболические
процессы. которые обусловливают перераспределение поступающих в организм питательных веществ в пользу производства молока в ущерб энергетическим резервам тела и воспроизводительной способности. Очень часто указанные расстройства являются следствием не сбалансированного кормлс-
ния, или кормления кормами плохого качества [2,10]. На современном этапе развития науки диагностику заболеваний на ранних стадиях и/или оценку характера изменений обменных процессов целесообразно проводить только на основании лабораторных исследований, главным образом, основываясь на данных клинической биохимии, поскольку относительное постоянство количественного и качественного состава крови обеспечивает сохранение видовых, породных и индивидуальных особенностей конституции животных, а присущая ему лабильность обеспечивает адаптацию как экзо- так и к эндогенным факторам [1,4, 8]. Целью проведенных исследований являлась оценка активности ферментов в сыворотке крови дойных коров в зависимости от генетического полиморфизма генов каппа-казеин (CSN3), бета-лактоглобулин (BLG), пролактин (PRL), соматотропин (GH). тиреоглобулин (TG5).
Материал и методы исследований.
Исследования выполнили на дойных коровах холмогорской породы татарстанского типа в ТатНИИСХ -обособленном структурном подразделении
ФИЦ КазНЦ РАН и СХПК «Агрофирма Рассвет» Кукморского района Республики Татарстан. В хозяйстве были изучены условия содержания и кормления животных; с использованием
компьютерной программы «Корм Оптима Эксперт» проанализированы текущие рационы их кормления и приведены в соответствие с детализированными нормами [6]. В состав рациона кормления животных входило сено люцернорвое (1,5 кг), сенаж люцерновый (8,0 кг) и сепаж из кормосмеси (9,0 кг), силос кукурузный (12,0 кг), комбикорм для дойных коров (6,0 кг), зерно кукурузы (2,0 кг), дробина пивная сухая (1,0 кг), маслосемяна рапса ярового (1,0 кг), зерно овса пропаренное (0,5 кг). Кроме представленных выше компонентов в состав рациона кормления всех дойных коров была введена комплексная кормовая добавка в количестве 0,7 кг на одно животное в сутки. полученная из продуктов биоферментации зерна, торфа верхового, отходов технических производств и биологически активных веществ. Схема проведенного опыта представлена в таблице 1.
Таблица 1 - Схема научно-хозяйственного опыта
Количество голов Подгруппы но генотипам
CSN3 BLG PRL GH TG5
1 га < OD СО < < К CQ CQ 5 сс < с сс > > > О и н и н н
81 Основной рацион + комплексная кормовая добавка (0,7 кг/гол./сут.)
Активность фермента ACT Активность фермента AJ1T Активность фермента альфа-амилазы Активность фермента ЩФ
Материалом для лабораторных исследований служили пробы цельной крови, а также сыворотка крови животных.
Из цельной крови животных выделяли ДНК с помощью набора «ДНК-Сорб-В» по прилагаемой изготовителем методике. Полиморфизм генов СБЫЗ, ВЬО. РИТ, 011, Т'С5 выявляли методом
ПЦР-ПДРФ в ходе которого фрагменты ДНК амплифицировали на
программируемом термоциклере
МуСус1ег. Рестрикцию осуществляли на программируемом термоциклере согласно рекомендациям производителя. Анализ полученных результатов исследования проводили методом гель-электрофореза в
агарозном геле и документировали с помощью видеосистемы GelDoc. В сыворотке крови животных определяли активность ферментов аспаргат-аминотрансферазы и аланин-
аминотрансферазы (УФ кинетическим методом), альфа-амилазы и щелочной фосфатазы (кинетическим колориметрическим методом). Результаты исследований обрабатывали с применением математической статистики [9|.
Результаты исследований. Оценка активности ферментов сыворотки крови показала некоторую взаимосвязь между характером протекания различных процессов обмена веществ и полиморфизмом генов качественных и количественных признаков (таблица 2). Из данных, представленных в таблице, видно, что наивысшей активность фермента ACT по гену CSN3 характеризовались животные с генотипом CSN3Afl - 78,58 Е/л, по гену BLG - животные с генотипом ВШЛА - 78,96 Е/л, по гену PRL -животные с генотипом PRLM - 75,41 Е/л. по гену GH - животные с генотипом GH1' - 78,13 Е/л, по гену TG5 - животные с
,-7Г
Максимально высокой активность фермента АЛТ по гену СЯМЗ была у животных с генотипом СБКЗ^4 - 29,82 Е/л, по гену ВЕС - у животных с генотипом ВЬСлв - 29,09 Е/л, но гену РШ. - у животных с генотипом РЯЬАА - 28,36 Е/л, по гену ОН - у животных с генотипом ОН1'1 - 34,96 Е/л, по гену Т05 - животные с генотипом Т05тт - 82,00 Е/л. Наивысшей активность фермента альфа-амилазы по гену СБЫЗ характеризовались животные с генотипом СЖЗАА - 64,55 Е/л, по гену В 1.0 - животные с генотипом ВЬОАА -69,13 Е/л, по гену РИТ - животные с генотипом РЮАВ - 70.13 Е/л, по гену СН -животные с генотипом ОН1'1 - 66,59 Е/л. по гену Т05 - животные с генотипом ТС51с - 67,63 Е/л. Наиболее низкой активностью фермента щелочной фосфатазы по гену С8№ характеризовались животные с генотипом СЗМЗАА - 102,22 Е/л, по гену ВШ -животные с генотипом В1/}АА - 82,33 Е/л, по гену РК.1. - животные с генотипом
г АН
PRL™ - 92.69 Е/л. по гену GH - животные
с генотипом GII1'1 - 96.31 Е/л. по гену TG5 - животные с генотипом TG5CC - 94.45 Е/л.
генотипом TG5 - 79,00 Е/л.
Таблица 2 - Биохимические показатели сыворотки крови коров различных генотипов
Ген Генотип Показатель
ACT, Е/л АЛТ, Е/л Альфа -амилаза, Е/л ЩФ, Е/л
CSN3 (п=81) АА (п=64) 75,49±1,38 29,82±2,76 64,55±3,89 Ю2,22±5,29
АВ (п=12) 78.58±3,87 23,33±4,48 59,92±8,28 104,30±7,77
ВВ (п=5) 66,20± 16,40 14,80=^3,12 60,604-9,1 104,60± 11,26
BLG (п-81) АА (п=15) 78,96±3,28 25,53-t2,80 69,13±7,43 82,33±6,45
АВ (п=44) 77,45±1,66 29,09±3,75 66,80±5,17 102,60-5,17
ВВ (п=22) 68,77±3,82 27,27±3,74 53,50±3,84 116,73±10,75
PRL (п-81) АА (п=59) 75,41±1,93 28,36±3,07 63,73±3,96 104.31 ±5,60
АВ (п=16) 75,25±2,70 26,50±3,02 70,13±7,96 92,69±6,24
ВВ (п=6 ) 75,33±6,00 27,67+3,41 45,17±5,61 113,33±11,51
GH (п-81) LL (п=38) 76,60±1,92 25,32±1,75 61.18-5.28 103,71±7,23
LV (п=27) 72,01±3,20 34,96±6,07 66,59±5,84 105,00±7,06
VV (п—16) 78,13±3,32 22.31±3,25 64,36±5,90 96,31 ±7,56
TG5 (п=81) СС (п-50) 75,20±1,64 25,55±1,62 62,32±3,92 94,45±4,37
ТС (п=30) 73,52±3,28 31,52±5,61 67,63±6,36 105.15±6,24
ТТ (п=Г) 79,00 82,00 46,00 229,00
Таким образом, максимально высокая активность ферментов ACT и АЛТ установлена у особей с
77*
гомозиготными генотипами TG5 по гену TG5, альфа-амилазы - у животных с гетерозиготным генотипом PRLAB по гену PRL, а самая низкая активность фермента ЩФ выявлена у животных с гомозиготным генотипом BLGaa по гену BLG. Оценка активности ферментов сыворотки крови показала некоторую взаимосвязь характера протекания различных обменных процессов у животных и полиморфизма комплекса генов качественных и количественных признаков (таблица 3 ).
Из данных, представленных в таблице, видно, что по изучаемым генам максимально высокая активность
фермента ACT установлена у животных с комплексным генотипом
CSN3abGHvvTG5tcBLGaaPRLaa (п=1) -100,00 Е/л, АЛТ - у животных с комплексным генотипом
CSN3AAGH,vTG5tcBLGadPRLaa - 55.60 E/'л, альфа-амилазы - у животных с комплексным генотипом
CSN3abGHvvTG5tcBLGaaPRL4B - 105,0 Е/л, наиболее низкая активность фермента ЩФ - у животных с комплексным генотипом CSN3AAGHyvTG5ccBLGiAPRLAA (п=1) -62,33 Е/л. В виду низкой частоты встречаемости описанных выше комплексных генотипов данные исследования необходимо продолжить на большей популяции животных.
Таблица 3 - Биохимические показатели сыворотки крови коров различных комплексных генотипов по изучаемым генам _ ___
Показатель
Генотип (CSN3, GH, TG5, BLG, PRL) ACT, Е/л иЗ Н Альфа-амилаза, Е/л w £ я
AALLCCABAA 72,57±4.81 24,14±1,93 52,71 ±8,63 88,43± 17,10
AALLCCAAAA 80,80+5,94 20,00±3.69 73.40±12,64 78,60±9,9
AALLTCABAA 74,60=4,79 21,20+6.98 102.60± 17,12 119,40±20,79
AALVCCABAB 76,40+2,91 20,60±3,46 70,00± 14,58 84,40± 10,56
AALVTCABAA 79,00±4,32 55,60+29,21 57,20+18,75 113,60±18,18
AALLCCABAB 77,00+4,65 37,50±4,29 58,25±25,47 93,00±18,20
AALLTCBBAA 80,00±6,15 20,75±3,12 35,00±3,49 124,25±49,51
AALVCCABAA 76,40±2,91 20,60±3,46 70,00± 14,58 84,40±10,56
AALLCCBBAA 77,67±5,24 32,67+12,35 56,00-0,03 100,00±4,00
AALVTCBBAA 67,33±7,67 35,00±7,00 76,00+12,00 111,33±9,33
AAWCCAAAA 73,33±6,33 28.00+2,52 75,00=17,79 62,33±21,36
AALLCCABBB 89,50+10,50 36,00±1,00 48,50=17,50 138,00±3,00
ABLLCCABAA 79,50±4,50 21,00±9,00 32,50+1,50 109,00±7,00
ABVVCCABAA 81,00±6,00 27,50±17,50 45,00± 13,00 87,00±18,00
BBVVTCABAA 85,50±11,5 14,00±2,00 69,00+1,00 107,50±19.50
AALLCCBBBB 70,00 21,00 54,00 74,00
AALLTCAAAA 84,00 23,00 28,00 80.00
AALLTCABAB 86,00 30.00 56.00 119,00
AALVCCAAAA 75,40 28,00 64,00 102,00
AALVCCAABB 65.00 33,00 30,00 108,00
AALVCCBBAA 59,00 23,00 90.00 168,00
AALVCCBBAB 51,00 35,00 71,00 74.00
AALVCCBBAB 65,00 31,00 50,00 116.00
AALVTCABAB 80,00 49,00 97.00 83,00
AALVTTBBAA 79.00 32,00 46,00 129.00
AAWCCBBAA 52,00 12Ю0 62,00 130.00
AAVVCCBBAB 68.00 16,00 62,00 124.00
AAVVTCBBAA 75,00 14.00 48,00 127.00
AAVVTCBBBB 80.00 23.00 44,00 87.00
ABLLTCABAA 49,00 30.00 99,00 165.00
ABLLTCABAB 80,00 21.00 90.00 96,00
ABLVCCABAB 91,00 3,00 50.00 96,00
ABLVTCABAA 75,00 28.00 49,00 102.00
ABVVCCAAAA 82,00 9,00 94,00 70,00
ABVVCCBBAA 84.00 10.00 38,00 132.00
ABVVTCAAAA 100,00 54,00 39,00 119.00
ABVVTCAAAB 61,00 28,00 105,00 80.00
BBLLCCABBB 58,00 17.00 46,00 135.00
BBLVTCBBAA 7,00 5.00 34,00 77.00
BBVVCCAAAA 93,00 24,00 85,00 96.00
Заключение. Величина активности того или иного фермента в сыворотки крови коров имеет некоторые различия у животных различных генотипов по изучаемым генам качественных и количественных признаков. В исследуемой популяции животных выявлены особи с наиболее предпочтительными максимальной и минимальной активностью изучаемых ферментов. Полученные результаты требуют уточнения дальнейшими исследованиями в связи различной частотой встречаемости генотипов как по исследуемым генам, так и по их комплексам.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Исмагилова. Э.Р. Влияние экологических факторов на организм крупного рогатого скота / Э.Р. Исмагилова // Ветеринария. - 2006. - №2. - С. 44-47.
2. Крупин. Е.О. Определение эффективной дозы нового кормового концентрата для дойных коров / Е.О. Крупмн. Ш.К. Шакиров, МЛН. Тагиров // Достижения науки и техники АПК. - 2017. -Т. 31.- №8,-С. 49-53.
3. Кудрин, А.Г. Интерьериая классификация типов конституции у коров черно-пестрой и голштинской пород / А.Г. Кудрин // Молочнохозяйственный вестник. - 2013. -№3(11). -С.И-14.
4. Кузьмина, Л.II. Состояние метаболизма у коров и его коррекция в зоне экологического неблагополучия /
Л.Н. Кузьмина // Особенности физиологических функций животных в связи с возрастом, составом рациона, продуктивностью, экологией и этологией: Ученые записки К1АВМ. - 2006. - Т. 185. -С. 165-170.
5. Лягин, Ф.Ф. Особенности воспроизводительных качеств высокопродуктивных коров / Ф.Ф. Лягин // Зоотехния. - 2003. - № 5,- С. 25-27.
6. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных: Справочное пособие / А.П. Калашников |и др.]. -М.: Агропромиздат, 2003. -456с.
7. Племятпов, К.В. Проблема продуктивных возможностей и производственного долголетия коров в Ленинградской области / К.В. Племяшов и др. // Международный вестник ветеринарии. - 2008. - № 3. - С. 6-8.
8. Титов, В.Н. Патофизиологические основы лабораторной диагностики заболеваний печени / В.Н. Титов // Клиническая лабораторная диагностика. - 1996. - №1. -С.3-9.
9. Усович, А.Т. Применение математической статистики при обработке экспериментальных, данных в ветеринарии: научное издание / А.Т. Усович, П.Т. Лебедев Омск: Западно-Сибирское книжное издательство. 1970. 43 с.
10. Invited review: New perspectives on the roles of nutrition and metabolic priorities in the subfertility of
high-producing dairy cows / L.M. Chagas [el 4022-4032. al.]. // J. Dairy Sci. - 2007. - Vol. 90. - P.
АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ У КОРОВ РАЗЛИЧНЫХ ГЕНОТИПОВ
Крупин Е.О., Тагиров М.Ш.
Резюме
Исследованиями установлено, что в исследуемой популяции животных максимально высокая активность ферментов ACT и AJ1T установлена у особей с гомозиготными генотипами TG5n по гену TG5, альфа-амилазы у животных с гетерозиготным генотипом PRL48 но гену PRL, а самая низкая активность фермента ЩФ выявлена у животных с гомозиготным генотипом BLGAA по гену BLG. По изучаемым генам максимально высокая активность фермента ACT установлена у животных с комплексным генотипом CSN3ARGH'/VTG5TCBL(/4APRLAA (п=1) - 100,00 Е/л, АЛТ - у животных с комплексным генотипом CSN3/LiGHLVTG5TCBLGABPRI.AA (п=1) - 55.60 Е/л, альфа-амилызы - у животных с комплексным генотипом CSN3ABGHl'yTG5Г( BLGAAPR LAB (n=l) - 105.0 Е/л. наиболее низкая активность фермента ЩФ - у животных с комплексным генотипом CSN3AAGHyvTG5 BLGdAPRLAA (п=1) - 62,33 Е/л.
ACTIVITY OF BLOOD SERUM ENZYMES IN COWS OF VARIOUS GENOTYPES
Krupin E.O., Tagirov M.Sh.
Summary
Studies have shown that in the studied animal population the highest activity of AST and ALT enzymes was established in individuals with homozygous genotypes TG5 genotypes for the TG5 gene, alpha-amylase in animals with the PRLAh heterozygous genotype for the PRL gene, and the lowest activity of the enzyme ALP was detected in animals with a homozygous BLGAA genotype gene BLG. According to the studied genes, the highest activity of the AST enzyme was established in animals with the complex, genotype CSN3ABGHn'TG5rcBLGAAPRLAA (n = 1) - 100.00 E / L. ALT in animals with the complex genotype CS.\'3AAGil' l TG5n B!.G'W PRI." (n = 1) - 55.60 E/L. alpha-amylases - in animals with the complex genotype CSN3abGH'' TG5rcBLGAAPRlAH (n = !) -105.0 U / 1, the lowest activity of th.c enzyme ALP - in animals with the complex genotype CSN3aaGHvvTG5ccBLGaaPRLaa (n - 1) - 62.33 U /1.
УДК 636.22/.28.033; 636.22/.28.034
БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ БЕЛКОВОГО И УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА У КОРОВ РАЗЛИЧНЫХ ГЕНОТИПОВ
Кручин Е.О. - к.в.н., Тагиров М.Ш. - д.с/х.н., академик АН РТ
ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр «Казанский научный центр
Российской академии наук»
Ключевые слова: животные, корм, гены, кровь, метаболизм
Keywords: animal feed, genes, blood, metabolism
Постоянное стремление сельхоз- повышению нродукивности животных и
товаропроизводителей к максимальному получению, в конечном счете, наибольшей
