CC BY
27
БАКТЕРИОЛОГИЯ
Я. Ю, Арсентьева, Д. Ю. Нохрин
САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ И ГИДРОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ОЗЕРА ВТОРОГО В РЫБОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЦЕЛЯХ
Проведено санитарно-бактериологическое и гидрохимическое исследование воды оз. Второго (Челябинская область). Исследования указывают на соответствие озера ветеринарно-санитарным требованиям, позволяющим вести на нем рыбохозяйственную деятельность.
Оз. Второе расположено в Красноармейском районе Челябинской обл. Площадь водоема — 2053 га, длина — 5,7 км, ширина — 3,75 км, максимальная глубина — 8 м, средняя — з_4 в южной части водоем сообщается с оз. Шелюгино, в северной—имеет канал в р. Миасс. Ихтиофауна озера представлена следующими аборигенными и разводимыми в культуре видами: карп, лещ, окунь, плотва, ерш, судак, сиг, рипус. Естественная рыбопродуктивность составляет 20-24 кг/га.
Озеро испытывает влияние сельскохозяйственных объектов пос. Петровского, садов товарищества «Чурилово», выбросов Челябинского металлургического и электрометаллургического комбинатов, вод оз. Шелюгино, в балансе которого сточные воды составляют более 80 %. Значительное антропогенное воздействие может приводить к ухудшению гидрохимического режима и санитарно-бактериологического состояния, эпизоотическому неблагополучию, поэтому контроль химического состава и бактериальной обсеме-ненности является необходимым условием успешной рыбохозяйственной деятельности на водоеме. Целью нашей работы было проведение химического и санитарно-бактериологического анализа воды оз. Второго.
Отбор проб воды проводился 1 ноября 2007 г., на 5 станциях, расположенных по оси водоема через приблизительно равные интервалы (1-я станция — в центральной части южного залива, 5-я — в начальном отрезке канала). Пробы отбирали со среднего уровня с соблюдением правил асептики в стерильную посуду.
Определение прозрачности, температуры и содержания растворенного кислорода проводили m situ. Концентрацию главных ионов и соединений азота и фосфора определяли методом капиллярного электрофореза на системе «Капель 103-Р» [1]. Общую щелочность определяли титрованием с метиловым оранжевым, окисляемость — перманга-натным методом Кубеля, сероводород — свинцово-уксусной индикаторной бумагой [3].
Санитарно-бактериологическую оценку водоема проводили по следующим показателям: мезофильно-аэробные и факультативно анаэробные микроорганизмы (МАФАнМ), коли-титр, коли-индекс, наличие аэромонад и псевдомонад (МУ № 13-4-2/1742).
Основные результаты исследования представлены в таблице. По величине минерализации вода оз. Второго относится к категории солоноватых вод. По классификации
О. А. Алекина она имеет хлоридный класс, натриевую группу, тип I.
Особенностью состава воды является высокое для данного класса содержание сульфатов и гидрокарбонатов, а также присутствие в составе главных ионов анионов брома, которые регистрировались в виде дополнительных пиков на электрофореграммах. Поскольку специальной калибровки на бромид-ион не проводилось, приблизительные значения его концентраций были рассчитаны исходя из площади пика и разности эквивалентов анионного и катионного составов птэоб 50
Химический состав и бактериальная обсеменённость воды оз. Второго
в ноябре 2007 г.
№ Станции
п/п 1 2 3 4 5
Общ ие
1 Глубина, м 1,6 4,0 7Д 6,8 0,7
2 Температура, °С 6,0 5,0 5,0 5,0 7,0
3 Прозрачность, см 0,8 1.0 0,5 0,4 >0,7
4 Водородный показатель pH 7,42 8,39 7,19 8,18 7,20
5 Щелочность общая, мг-экв/дм3 4,54 3,88 3,94 4,10 4,00
6 Жесткость общая, мг-экв/дм3 9,96 10,42 8,38 8,66 9,69
7 Минерализация, мг/дм3 1340 1195 1150 1175 1126
Главные ионы, мг/дм3
8 Хлориды (С1“) 287,1 274,2 284,2 291,4 265,8
9 Сульфаты (ЭО/") 242,0 227,2 242,5 252,9 212,4
10 Бромиды (Вг~) 446,2 -38,6 -34,8 -40,9 -15,5
И Гидрокарбонаты (НСО,-) 277,0 235,8 240,2 232,6 241,1
12 Карбонаты (СО,2-) -0,5 -3,6 -0,2 ~2,3 -0,3
13 Калий (К") И,9 13,4 12,0 11,3 13,0
14 Натрий (Иа+) 213,8 233,1 201,9 202,4 222,3
15 Магний (Mg2+) 68,5 73,6 58,4 61,7 68,4
16 Кальций (Са2+) 86,7 87,5 71,7 71,8 81,5
Биогенное (мг/дм3) и органическое вещество
17 Аммоний (NHd+) 2,404 1,564 0,860 4Д60 3,052
18 Нитриты (N02“) 0,036 Н.Ч.М. 0,036 0,004 0,072
19 Нитраты (NO,-) 2,596 6,260 3,372 3,464 2,380
20 Гидрофосфаты (НРО|~) 0,748 НЛ.М. 0,319 0,116 0,346
21 БПК полное 4,42 2,21 2,31 4,44 2,47
22 Окисляемость по Кубелю, мгО/дм3 11,0 5,2 3,7 4,4 4,1
Растворенные газы, мг/дм3
23 Кислород (О2) 6,50 6,33 6,39 6,57 6,74
24 Углекислый газ (СО2) -25,7 -2,4 -39,1 -4,2 ~3б,6
25 Сероводород (H,S) Не обнаружен ни в одной из проб
Бактериальная обсемененность
26 МАФАнМ 106,0 ±33,2 25,0 ±7,07 31,5 ±2,12 32,0 ±2,83 105,0 ±27,6
27 Коли-тито, мл 1 1 од 1 ОД
28 Коли-индекс 36 36 73 36 73
29 Аэромонады 0 0 0 0 0
30 Псевдомонады 0 0 0 0 0
Примечание, Знаком в*-*» отмечены расчетные показатели и приблизительные оценки.
Величины концентраций катионов аммония свидетельствовали о протекании процессов разложения «свежего» органического вещества. Однако превышения ПДКВр были обнаружены только по сульфатам и минерализации, что отражает естественную специфику водоема и не является критическим для ихтиофауны данного водоема.
По степени бактериальной обсемененности водоемы, используемые в рыбоводстве, условно разделяют на три категории: I — чистая» II загрязненная и Ш ■ грязная.
МАФАнМ (общее микробное число) отражает общую бактериальную обсемененность водоема. Согласно нормативам, наличие МАФАнМ в 1 мл должно быть не более 103. Как видно из таблицы, превышения нормы содержания МАФАнМ не было зарегистрировано.
Коли-индекс (количество бактерий группы кишечной палочки в 1 мл) является показателем фекального загрязнения водоема. По данному показателю озеро относится к категории П (загрязненное). Несмотря на превышение нормативных показателей, это не дает основания на дачу рекомендаций к принятию мер по устранению причин фекального загрязнения (п. 4.5 методических рекомендаций) [2].
Аэромонады и псевдомонады—показатели возможного неблагополучия водоемов по инфекционным заболеваниям рыб аэромонозу и псевдомонозу — не обнаружены.
Таким образом, по показателям химического состава и качества вода оз. Второго на исследуемый период удовлетворяла требованиям для рыбохозяйственных водоемов. По санитарно-бактериологическим показателям водоем, в целом, следует отнести к первой категории (чистые). Проведенные исследования указывают на соответствие оз. Второго ветеринарно-санитарным требованиям, позволяющим вести на нем рыбохозяйственную деятельность.
Список литературы
1. Каменцев, Я. С. Капиллярный электрофорез. Аппаратурное оформление и области применения / Я. С. Каменцев, Н. В* Комарова // Партнеры и конкуренты. 2002. № 1, С. 12-15.
2. Методические рекомендаци департамента ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия России № 1 3-4-2/1742 от 27 сентября 1999 г.
3. Новиков, Ю. В. Методы исследования качества воды водоемов / Ю. В. Новиков, К, О. Ласточкина, 3* Н. Болдина. М., 1990.400 с.
А. В. Поспелова, А. Л, Бурмистрова, С В. Квятковская, Ю. С. Хомич
ВЫЯВЛЕНИЕ В-ИНТЕГРИНОВ НА ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ ГРИБОВ РОДА CANDIDA МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ
С целью обнаружения $~интегринов на поверхности клеточной стенки дрооюжеподобных грибов рода Candida было осуществлено окрашивание моноклональными антителами к CD lib и CD 21 суспензии 6 грибных культур. Детекция результатов регистрировалась методом проточной цитометрии. Данное исследование молекулы CD 11b и CD 21 на поверхности дрожжевых клеток не выявило.
Адгезия дрожжевых клеток Candida к тканевым элементам организма человека — важный этап в патогенезе кандидоза, от которого зависит инитша гш^ягщч инфекционного процесса. Считается, что адгезивные способности обусловливаются специфическими и неспецифическими механизмами взаимодействия. Частично адгезивность Candida spp. зависит от гидрофобных свойств клеточной стенки [1], Специфическая адгезия возможна при наличии на поверхности взаимодействующих клеток соответствующих адгезинов. В организме человека рецепторами, осуществляющими взаимодействие между клетками и веществом межклеточного матрикса, являются интегрины. В настоящее время ведутся исследования по изучению аналогий интегринов и некоторых адгезинов Candida spp. [1]. 52
Кандндные рецепторы C3d и iC3b фракций комплемента проявляют сходство с р2-интегринами человека, несущими ту же функцию, а именно с рецепторами CR2, CR3, CR4 (CD 11с и CD 21), расположенными на нейтрофилах, макрофагах, В-лимфоцитах, NK-клетках.
Целью нашей работы было непосредственное выявление интегринов на поверхности клеточной стенки грибов рода Candida при помощи специфических мышиных моноклональных антител CD ПЬ и CD 21 (Dako Cytomation, USA).
Материалы и методы. Для исследования использовали суспензии дрожжевых клеток 6 грибных культур (С. albicans — 3 штамма, С. kefyr, С. glabrata, С. rodotorula). Окраска производилась мышиными моноклональными антителами против человеческих молекул CD lib и CD 21 (Dako Cytomation, USA). Визуализация результата достигалась путём докрашивания суспензий антиантителами, меченными флуоресцентным красителем ИТС (Dako Cytomation, USA).
Результаты оценивались методом проточной цитометрии [3].
Принцип метода заключается в том, что суспензия окрашенных клеток прогоняется через канал аппарата, при этом исследуемые объекты поодиночке пересекают сфокусро-ванный лазерный световой пучок. Свет возбуждает молекулы флуоресцирующих красителей, связанных с клеточным компонентом. Испускаемая красителем флуоресценция детектируется м преобразуется в форму, удобную для компьютерной обработки. В В данном случае результат фиксировался в виде графического изображения и процента позитивных клеток. Позитивными считаются клетками, испускающие флуоресценцию, то есть несущие краситель.
Краситель прочно удерживается на поверхности объекта только при условии образования специфического иммунного комплекса «антиген-антитело», в данном случае— Р-ннтегрин-специфическое монокяониалыюе антитело».
Результаты представлены в таблице.
Количество позитивных (несущих краситель) клеток, %
Исследуемая культура CD lib CD 21
С. albicans 68 0,1 0,1
С. albicans 3 0Л 0,3
С. albicans ATCC 0,3 0,4
С. kefyr 0,5 0,2
С. glabrata 0,0 0,0
С. rodotorula 0,6 0,3
Учитывая однородность суспензий дрожжевых клеток в пределах штамма, в случае специфического окрашивания (обнаружение на поверхности исследуемой клетки специфического иммунного комплекса) объем позитивности должен приближаться к 100 %,
Вывод. Таким образом, CD lib и CD 21 на поверхности дрожжевых клеток грибов рода Candida методами проточной цитометрии не обнаружены.
Список литературы
1. Сергеев, А. Ю. Кандидоз / А. Ю. Сергеев, Ю. В. Сергеев. М., 2001
2. Епег, В. Correlation between cell-surface hydrophobiciti of С. albicans and adgesionto buccal epithelial cells / B. Ener, L. J, Douglas // FEMS Microbiol. Lett. 1992. № 78. P. 37—42.
Т. А. Головина, О. С. Кузнецова
ВЫДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГРИБНОЙ МИКРОФЛОРЫ НА ДОКУМЕНТАХ ОБЪЕДИНЁННОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО АРХИВА
ЧЕЛЯБИНСКОЙ ОБЛАСТИ
Представлены результаты исследования документов из фондов государственного архива Челябинской области. Данное исследование показало, что документы были поражены микромщетами-хилотрофами, а также грибами-сапротрофами группы плесени (11 сортов микромицетое).
Катализируемая кислотами гидролитическая деструкция целлюлозы является реальной причиной порчи документов в хранилищах. Наиболее распространенными деструкторами бумаги являются микромицеты. Споры и фрагменты мицелия, присутствующие в воздухе и на поверхности документов, переносятся с их основного природного резервуара — почвы — через вентиляцию, форточки, на одежде.
Сухое рассеивание спор увеличивается в жаркую погоду и снижается во влажный период. В то же время повышение влажности способствует активизации к росту спор и мицелия плесневых грибов, уже попавших на поверхность или в толщу документов. Интенсивное проникновение микроорганизмов в хранилище происходит весной и осенью в сухую теплую погоду, зимой их количество снижается.
Кислая среда, температура 21. ..25 °С и влажность 65 % являются оптимальными для развития грибов, однако в условиях хранилищ и при меньших значениях температуры и влажности возможен их рост, хотя и не такой активный. Свет существенного влияния на развитие грибов не оказывает, хотя на некоторых из них действует угнетающе.
Микромицеты, развивающиеся на бумаге, относятся к экологической группе грибов-ксилотрофов, обладающих уникальным для живых организмов комплексом целлюлозоразрушающих ферментов. Встречаются также представители из группы плесневых гри-бов-сапротрофов, заселяющие уже разрушенную ксилотрофами бумагу.
На сегодняшний день известно более 280 видов грибов, обнаруженных в архиво- и книгохранилищах [2]. Помимо бумаги они поражают клей, нитки, ткани, кожу, восковые печати, чернила. Современная мелованная бумага имеет щелочную реакцию и потому неблагоприятна для развития грибов, а бумага XIX—начала XX в. с повышенной кислотностью, а также казеиновый клей, крахмал, желатин являются для них подходящей средой.
В процессе ферментативного расщепления целлюлозы выделяются органические кислоты и вода, при этом влажность и кислотность бумаги возрастают. Образующиеся в результате выработки мицелием пигментов пятна различных цветов маскируют текст, делают его трудночитаемым. Продукты разложения целлюлозы склеивают страницы, что при перелистывании может привести к выпадению целых фрагментов документа. Бумага делается ветхой, ломкой.
Материалы и методы. Исследовались на грибную заспоренностъ 10 документов из фондов государственного архива Челябинской области с различным характером поражения: порошистый налет, пятна, изъеденная по обрезами местам сшивания бумага, корка споровых масс.
Документы датированы серединой и концом XVIII, серединой XIX и началом XX вв. Бумага, производимая в то время на основе текстиля и древесных волокон, является благоприятной средой для Грибов-ксилотрофов, а также вторично заселяющих субстрат са-протрофов^Из исследуемых документов 8 прошли обработку 1 %-м раствором препарата << етатин ОТ» влажным способом и с использованием сухих прокладок, пропитанных
этим же раствором, один документ подвергался обработке паром с последующим просушиванием и, наконец* один из исследуемых документов антифунгальными средствами не обрабатывался. Шесть документов исследовались на наличие грибной микрофлоры повторно (2006-2007 гг.).
Образцы повреждений, взятые путем соско-ба в местах наибольшего поражения, либо фрагменты бумаги, отделившиеся произвольно от целого документа, помещались на поверхность стерильной агаризованной среды Чапека без глюкозы. Материал подвергался инкубации при средней температуре 25 °С в течение 14 дней, с последующим микроскопированием.
Результаты. В исследуемых образцах наблюдались грибы, относимые Ю. П. Нюкшей [2], к следующим эколого-физиологйческим группам: грибы, проникающие в волокно и приводящие целлюлозу к разрушению: Stachybotris chartarum, Myxotrichum chartarum, Aspergillus fumiga-tus, p. Trichoderma, p. Cladosporium, p. Scopulariopsis; грибы, постоянно встречающиеся на бумаге и вызывающие некоторое нарушение ее текстуры, и только при благоприятных условиях значительно ее повреждающих: Aspergillus flavus; грибы, усваивающие специфические компоненты на бумаге (воск, краски): Geotriehum candidum; группа грибов, постоянно обнаруживающихся на бумаге, вредоносность которых не столь велика: p. Penicillium, p. Mucor, p. Rhizopus. Большинство выявленных микромицетов относятся к кл. Deuteromycota: Geotrichum candidum, Stachybotris chartarum, p.p. Scopulariopsis, Phoma, Trichoderma, Cladosporium, Penicillium, Aspergillus; кл. Ascomycota: Myxotrichum chartarum; кл. Zygomycota: p.p. Mucor, Rhizopus.
На документах, повторно анализируемых после обработки препаратом «Метатин GT», отсутствовали споры p. Cladosporium, пикниды p. Phoma, на одном из образцов, датируемом серединой XIX в., были уничтожены представители p.p. Penicillium, Aspergillus. Однако в целом эффективность одноразовой обработки препаратом «Метатин GT» невелика. Наименьшую заспоренность проявили все документы, обработанные в 2006 г., по сравнению с обработанными в 2007 г. Возможно, это связано со сниженным уровнем метаболизма грибов в условиях хранилища. Совершенно недостаточна для освобождения от грибной микрофлоры обработка паром, более того, неизбежное повышение влажности портит документ и способствует массовому заспориванию. Не избавляют от грибов и сухие прокладки с метатином, так как гибель микроорганизмов под действием биоцида происходит только в жидкой среде [1]. Бблыдая часть грибов, поселяющихся на книгах, представляет собой условно патогенную группу, опасную для человека [2]. Из обнаруженных микромицетов токсичны для лиц с ослабленной иммунной системой р.р. Trichoderma; Penicillium, Mucor. Представители p. Aspergillus могут являться причиной аспергил лезов, особенно легочных. В связи с этим задача микробиологического (в том числе микологического) контроля состояния фондов и воздуха книгохранилищ является многогранной и актуальной.
Список литературы
1. Защита документов от биоповреждения: материалы Всерос. обучающего семинара / сост. Т. Д. Великова. СПб., 2005.160 с.
2. Нюкша, Ю. П. Биологическое повреждение бумаги и книг / Ю. П, Нюкша. СПб.,
1994. НО с.
