CC BY
307
МАФАнМ (общее микробное число) отражает общую бактериальную обсемененность водоема. Согласно нормативам, наличие МАФАнМ в 1 мл должно быть не более 103. Как видно из таблицы, превышения нормы содержания МАФАнМ не было зарегистрировано.
Коли-индекс (количество бактерий группы кишечной палочки в 1 мл) является показателем фекального загрязнения водоема. По данному показателю озеро относится к категории П (загрязненное). Несмотря на превышение нормативных показателей, это не дает основания на дачу рекомендаций к принятию мер по устранению причин фекального загрязнения (п. 4.5 методических рекомендаций) [2].
Аэромонады и псевдомонады—показатели возможного неблагополучия водоемов по инфекционным заболеваниям рыб аэромонозу и псевдомонозу — не обнаружены.
Таким образом, по показателям химического состава и качества вода оз. Второго на исследуемый период удовлетворяла требованиям для рыбохозяйственных водоемов. По санитарно-бактериологическим показателям водоем, в целом, следует отнести к первой категории (чистые). Проведенные исследования указывают на соответствие оз. Второго ветеринарно-санитарным требованиям, позволяющим вести на нем рыбохозяйственную деятельность.
Список литературы
1. Каменцев, Я. С. Капиллярный электрофорез. Аппаратурное оформление и области применения / Я. С. Каменцев, Н. В* Комарова // Партнеры и конкуренты. 2002. № 1. С. 12-15.
2. Методические рекомендаци департамента ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия России № 1 3-4-2/1742 от 27 сентября 1999 г.
3. Новиков, Ю, В. Методы исследования качества воды водоемов / Ю. В. Новиков, К, О. Ласточкина, 3. Н. Болдина. М., 1990.400 с.
А. В. Поспелова, А. Л, Бурмистрова, С В. Квятковская, Ю. С. Хомич
ВЫЯВЛЕНИЕ В-ИНТЕГРИНОВ НА ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ ГРИБОВ РОДА CANDIDA МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ
С целью обнаружения $~интегринов на поверхности клеточной стенки дрооюжеподобных грибов рода Candida было осуществлено окрашивание моноклональными антителами к CD lib и CD 21 суспензии 6 грибных культур. Детекция результатов регистрировалась методом проточной цитометрии. Данное исследование молекулы CD 11b и CD 21 на поверхности дрожжевых клеток не выявило.
Адгезия дрожжевых клеток Candida к тканевым элементам организма человека — важный этап в патогенезе кандидоза, от которого зависит инитша гш^ягщч инфекционного процесса. Считается, что адгезивные способности обусловливаются специфическими и неспецифическими механизмами взаимодействия. Частично адгезивность Candida spp. зависит от гидрофобных свойств клеточной стенки [1], Специфическая адгезия возможна при наличии на поверхности взаимодействующих клеток соответствующих адгезинов. В организме человека рецепторами, осуществляющими взаимодействие между клетками и веществом межклеточного матрикса, являются интегрины. В настоящее время ведутся исследования по изучению аналогий интегринов и некоторых адгезинов Candida spp. [1]. 52
Кандндные рецепторы C3d и iC3b фракций комплемента проявляют сходство с р2-интегринами человека, несущими ту же функцию, а именно с рецепторами CR2, CR3, CR4 (CD 11с и CD 21), расположенными на нейтрофилах, макрофагах, В-лимфоцитах, NK-клетках.
Целью нашей работы было непосредственное выявление интегринов на поверхности клеточной стенки грибов рода Candida при помощи специфических мышиных моноклональных антител CD ПЬ и CD 21 (Dako Cytomation, USA).
Материалы и методы. Для исследования использовали суспензии дрожжевых клеток 6 грибных культур (С. albicans — 3 штамма, С. kefyr, С. glabrata, С. rodotorula). Окраска производилась мышиными моноклональными антителами против человеческих молекул CD lib и CD 21 (Dako Cytomation, USA). Визуализация результата достигалась путём докрашивания суспензий антиантителами, меченными флуоресцентным красителем ИТС (Dako Cytomation, USA).
Результаты оценивались методом проточной цитометрии [3].
Принцип метода заключается в том, что суспензия окрашенных клеток прогоняется через канал аппарата, при этом исследуемые объекты поодиночке пересекают сфокусро-ванный лазерный световой пучок. Свет возбуждает молекулы флуоресцирующих красителей, связанных с клеточным компонентом. Испускаемая красителем флуоресценция детектируется м преобразуется в форму, удобную для компьютерной обработки. В В данном случае результат фиксировался в виде графического изображения и процента позитивных клеток. Позитивными считаются клетками, испускающие флуоресценцию, то есть несущие краситель.
Краситель прочно удерживается на поверхности объекта только при условии образования специфического иммунного комплекса «антиген-антитело», в данном случае— Р-ннтегрин-специфическое моноклониальное антитело».
Результаты представлены в таблице.
Количество позитивных (несущих краситель) клеток, %
Исследуемая культура CD lib CD 21
С. albicans 68 0,1 0,1
С. albicans 3 0Л 0,3
С. albicans ATCC 0,3 0,4
С. kefyr 0,5 0,2
С. glabrata 0,0 0,0
C. rodotorula 0 s6 0,3
Учитывая однородность суспензий дрожжевых клеток в пределах штамма, в случае специфического окрашивания (обнаружение на поверхности исследуемой клетки специфического иммунного комплекса) объем позитивности должен приближаться к 100 %,
Вывод. Таким образом, CD lib и CD 21 на поверхности дрожжевых клеток грибов рода Candida методами проточной цитометрии не обнаружены.
Список литературы
1. Сергеев, А. Ю. Кандидоз / А. Ю. Сергеев, Ю. В. Сергеев. М., 2001
2. Епег, В. Correlation between cell-surface hydrophobiciti of С. albicans and adgesionto buccal epithelial cells / B. Ener, L. J, Douglas // FEMS Microbiol. Lett. 1992. № 78. P. 37—42.
