CC BY
11
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
Никифорова Н. М., Дроков М. Ю., Королева О. М., Попова Н. Н., Васильева В. А., Довыденко М. В., Дубняк Д. С., Михальцова Е. Д., Дмитрова А. А., Конова З. В., Старикова О. С., Масликова У. В., Ахмедов М. И., Омарова Ф. А., Кузьмина Л. А., Паровичникова Е. Н., Савченко В. Г.
МОНИТОРИНГ ПИТАНИЯ БОЛЬНЫХ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Известно, что пациенты, которым проводится трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (ал-ло-ТГСК), в той или иной степени имеют проблемы с питанием. Тошнота и рвота, мукозиты, нарушение работы желудочно-кишечного тракта, тяжелые инфекции —— факторы, которые приводят к недостаточности питания, что, в свою очередь, является причиной многих неблагоприятных последствий — повышает риск инфекционных эпизодов и иммунологических осложнений, снижает общую выживаемость больных, увеличивает длительность госпитализаций. Однако в литературе нет данных, показывающих реальную глубину ежедневного дефицита калорий, белков, жиров и углеводов у больных при алло-ТГСК.
Цель работы. Оценить обеспеченность эссенциальными нутриен-тами с помощью электронного мониторинга у больных при алло-ТГСК.
Материалы и методы. 12 пациентов с заболеваниями системы крови, которым выполнялась алло-ТГСК в условиях отделения вы-сокодозной химиотерапии и трансплантации костного мозга ФГБУ «НМИЦ гематологии» МЗ РФ, были включены в исследование. Мониторинг питания больных проводился с помощью электронного приложения, в котором пациенты вносили данные об употребленных за день продуктах питания. Количество калорий в сутки для каждого больного, необходимое для сохранения текущего веса, было рассчитано по формуле Миффлина-Сан Жеора: для мужчин: (10 х вес (кг) + 6.25 х рост (см) — 5 х возраст (г) + 5) х А; для женщин: (10 х вес (кг) +
А
6.25 х рост (см) — 5 х возраст (г) — 161) х А, где А — коэффициент, равный 1,2, отражающий минимальную физическую активность в течение дня. Ежедневная потребность в макронутриентах определялась из расчета: белки — 1,0 г/кг/сутки, жиры — 1.5 г/кг/сутки, углеводы —— 4,0 г/кг/сутки. Никто из больных не получал парентеральное питание, за исключением раствора 5% глюкозы, что не учитывалось при подсчете. Данные представлены в виде диаграммы рассеяния.
Результаты и обсуждение. Медиана ежедневной потребности в калориях, позволяющей сохранить вес, который больной имел до алло-ТГСК, в условиях минимальной физической активности, составила 2110 ккал/сутки. Как можно видеть на рисунке 1А, все больные имеют выраженный дефицит калорий в разные сроки ал-ло-ТГСК. Значения потребляемых больными белков (рис. 1Б), жиров (рис. 1В) и углеводов (рис. 1Г) также оказались ниже медиан рассчитанных норм ежедневного потребления (белки — 69 г/сутки, жиры 103,5 г/сутки, углеводы 276 г/сутки).
Заключение. Таким образом, использование электронного мониторинга позволяет получить объективные сведения для оценки нарушения питания больных при алло-ТГСК. Наши данные показывают, что пациенты на разных сроках алло-ТГСК находятся в состоянии выраженного дефицита калорий и макронутриентов (белков, жиров и углеводов). Проблема требует дальнейшего изучения, что в будущем может способствовать разработке и улучшению текущих протоколов сопроводительной терапия при алло-ТГСК.
Б
В
Г
Николаева М. Г., Момот А. П., Ясафова Н. Н., Тараненко И. А.
АССОЦИАЦИЯ АКТИВНОСТИ ПРОТРОМБИНА ПРИ МУТАЦИИ F2(21210)GA С ТРОМБОТИЧЕСКИМИ СОБЫТИЯМИ
У ЖЕНЩИН РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА
Алтайский филиал ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии»; ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет»
Цель работы. Определить связь активности протромбина (фактора II) при носительстве мутации гена протромбина, генотип F2(20210) GA, с клинической реализацией в виде тромботических осложнений.
Материалы и методы. Проведено проспективное клиническое когортное исследование 290 женщин репродуктивного возраста. Выделено 2 когорты: основная группа — 140 пациенток с генотипом F2(20210)GA и группа контроля —— 150 женщин с генотипом F2(20210)
GG. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета статистического программного обеспечения М^СаЬУетоп 17.9.7 (лицензия BU556-P12YT-BBS55-YAH5M-UBE51).
Результаты и обсуждение. За период наблюдения с 2012 по 2017 год тромботические события зарегистрированы у 2 пациенток контрольной группы (1,3%) и 32 женщин — носительниц мутации F2(20210)GA (22,8%) ^=17,1; р<0,0001). В основной группе было
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2020; ТОМ 65; №1 |
39 эпизодов тромботических событий: у 26 (81,3%) — однократный эпизод тромбоза; у 5 (15,6%) — один случай ретромбоза; в одном наблюдении (3,1%) — два случая ретромбоза. В 66,7% наблюдений тромбозы имели венозную локализацию. Артериальные тромбозы в виде острого инфаркта миокарда и ишемического инсульта диагностированы в 33,3% случаев. На фоне приема комбинированных гормональных контрацептивов (КГК) возникли 13 эпизодов острого тромбоза ^13,9; 95% С1: 1,8-105,1; р<0,0106], на фоне беременности и послеродового периода зарегистрировано 10 тромботических событий (25,6% от 39 эпизодов тромбоза). В 13 наблюдениях (33,3% от 39 эпизодов тромбоза) причину тромбоза установить не удалось. У 4 пациенток с идиопатическим острым тромбозом в течение первого года случился эпизод ретромбоза на фоне приема КГК (п=2) и во время беременности (п=2). У нормозиготных пациенток медиана активности протромбина определена как 108,0% [95% С1: 103,0111,2], что в 1,4 раза меньше, чем у носительниц мутации F2 (20210)
GA, — 148,5% [95% С1: 145,3-156,9%] без эпизода тромбоза в личном анамнезе. При развитии ВТЭО (п=26) медиана активности протромбина составила 178,2% [95% С1: 151,5-190,3%], а при реализации артериальных тромбозов (п=13) — 180,1% [95% С1: 172,4-201,3%]. Медиана активности протромбина сопоставима при тромбозах в венозном и артериальном сосудистых бассейнах (р=0,1469), и ее показатели значимо отличаются от аналогичных у носительниц мутации гена протромбина F2(20210)GA без эпизода тромботического события (р < 0,0001). С помощью ROC-анализа определен порог критической активности протромбина (178,2%), позволяющий на доказательной основе прогнозировать риск развития тромботических событий
с точностью 90,4%, АиС = 0,904 (95% С1: 0,825-0,955), р<0,0001.
Заключение. Клиническая реализация генотипа F2(20210)GA в виде тромботических событий у женщин репродуктивного возраста происходит при выраженном повышении активности протромбина в сочетании с временно действующими факторами риска.
Николаева М. Г., Момот А. П., Терехина В. Ю., Щеклеина К. В., Корчагина А. В.
ОСОБЕННОСТИ АКТИВАЦИИ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ ПРИ РАЗВИТИИ ПРЕЭКЛАМПСИИ
Алтайский филиал ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии»; ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет»
Цель работы. Определить особенности активации свертывания крови при развитии преэклампсии.
Материалы и методы. Проведено проспективное когортное исследование с участием 109 беременных. Основную группу составили 59 пациенток, беременность которых осложнилась развитием умеренной или тяжелой преэклампсии (ПЭ), контрольную — 50 женщин с благоприятным течением беременности. Критерии включения в исследование: возраст 18-45 лет; информированное согласие на проведение дополнительных методов исследования. Критерии исключения: многоплодная беременность; аномалии развития внутренних половых органов; экстрагенитальные заболевания в стадии декомпенсации; ан-тифосфолипидный синдром; наличие хромосомных аберраций у супругов. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета статистического программного обеспечения MedCalcVersion 17.9.7 (лицензия BU556-P12YT-BBS55-YAH5M-UBE51).
Результаты и обсуждение. Клинико-анамнестический анализ показал, что пациентки основной группы значимо чаще страдали хронической гипертензией [OR2,3; р=0,0043], избыточной массой тела [OR1,7; р=0,001] и хроническими заболеваниями почек [OR2,2; р=0,0054], что сопоставимо с данными метаанализов, проведенных ранее. Исследование отдельных параметров системы гемостаза, свидетельствующих о повышении активации свертывания крови, показало, что за 2-3 дня до развития клинической картины ПЭ отмечается достоверно значимое
повышение уровня D-димеров: в основной группе медиана показателя
определена как 570 95% Cl: 400-655 нг/мл против 365 95% Cl: 309-410 нг/ мл в контрольной группе (р=0,0035). При исследовании уровня тканевого фактора (TF) и его ингибитора (TFIP) определено, что в эти же сроки уровень TF увеличивается в 8 раз: 54,4 95%Cl:51,1-60,7 пмоль/мл против 7,5 95% Cl: 4,5-8,5 пмоль/мл в группе контроля (р<0,0001). Отношение уровня тканевого фактора к его ингибитору (TF/TFIP), возрастало в 13 раз: 41,0 95% Cl: 35,5-46,7 против 3,2 95% Cl: 2,8-4,6 соответственно (р<0,0001). Также в группе женщин, течение беременности которых осложнилось развитием ПЭ, характерно снижение активности физиологического антикоагулятнта AT III. Медиана активности АТ Шсоставила 96,5% 95% Cl: 79,48-113,15 в случае развития ПЭ и 107% 95% Cl: 88,6-124,0 при физиологическом течении беременности (р=0,0015). По данным интегрального теста тромбографии установлено, что развитие ПЭ сопровождается усилением тромбинообразования с 18 недель гестации. За 2-3 дня до развития клинической картины ПЭ медианы показателя Peak thrombin достигали достоверных отличий: 2530 95% Cl: 2324-2678 нмоль/мл в основной группе против 1735 95% Cl: 1619-1960 нмоль/мл (р<0,0001) в группе контроля.
Заключение. Проанализированные в работе лабораторные параметры являются объективными предикторами развития ПЭ, что позволяет рассматривать активацию свертывания крови в качестве обоснованной предпосылки для проведения гепаринопрофилактики.
Никулина Е. Е., Сидорова Ю. В., Глинщикова О. А., Рисинская Н. В., Смирнова С. Ю., Рыжикова Н. В., Судариков А. Б.
ПРИМЕНЕНИЕ ДОП-ПЦР ПРИ НИЗКИХ КОНЦЕНТРАЦИЯХ ДНК
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. В диагностике ряда гематологических патологий, в том числе лимфопролиферативных заболеваний (ЛПЗ), большое значение имеют молекулярные исследования, для которых критичны качество и количество выделенной ДНК. Известно, что свободно циркулирующая ДНК в биологических жидкостях (плазма крови, ликвор, содержимое серозных полостей) находится в низкой концентрации и фрагментированном состоянии. Помимо этого, при необходимости исследования некоторых типов образцов, в частности кожи, ногтей, волос, биоптата кости, стекловидного тела, срезов парафиновых блоков и др., имеются проблемы с экстракцией генетического материала. Количество и качество ДНК, выделенной из этих тканей, зачастую оказываются недостаточными. Для работы с низкими концентрациями ДНК разработан метод ДОП-ПЦР (ПЦР с дегенеративным олигонуклеотидным праймером). Это двухэтапная реакция с особым температурным режимом и праймером, содержащим гексамерную последовательность со случайным нуклеотидным составом, обеспечивающая неспецифическую амплификацию фрагментов ДНК. Полученные фрагменты затем используются для проведения молеку-лярно-генетических исследований. Однако вопрос о том, насколько
данный метод искажает конечный результат теста, нуждается в дополнительном изучении.
Цель работы. Определить целесообразность использования ДНК, амплифицированной при помощи ДОП ПЦР, для диагностики ЛПЗ.
Материалы и методы. В работе использовали геномную ДНК, полученную от здорового донора и от пациента с выявленной точечной мутацией гена MYD88 L265P и В-клеточной моноклональ-ностью. Серийные разведения ДНК (1,25; 0,6; 0,3; 0,15 и 0,075 нг) с ДОП-ПЦР и без ДОП-ПЦР были исследованы различными мо-лекулярно-генетическими методами: аллель-специфичная ПЦР (АС-ПЦР) в реальном времени для определения мутации MYD88, анализ STR профилей с использованием набора COrDIS PLUS (Россия) и метод фрагментного анализа реаранжировок генов IgH по протоколу BIOMED 2.
Результаты и обсуждение. При концентрации ДНК 0,15 и 0,075 нг после ДОП-ПЦР в STR-профиле пациента выявлялись стохастические изменения, которые выражались в потере локусов и пиковом дисбалансе. При всех разведениях (1,25; 0,6; 0,3; 0,15 и 0,075 нг) после
