CC BY
4
190
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
клеточной терапии [1]. Его преимущества — системное влияние на пациента, опосредованное иммуномодулиру-ющим, противовоспалительным и антиапоптотическим действием. Недостатки — необходимость высокой терапевтической дозы МСК (1-2 млн/кг веса), риски неблагоприятных реакций и осложнений (лихорадка, микротромбозы, короткий срок жизни, быстрая утилизация) [2, 3]. Локальное (внутрисуставное, внутрисердечное, ин-тратрахеальное, в область поражения) или региональное (внутримышечное, внутрибрюшинное, эндолюмбальное) введение МСК позволяют снизить (в 5-10 раз) терапевтическую дозу клеток и оказать адресное воздействие на поврежденную ткань. Локально вводимые МСК проявляют регенеративную активность, мобилизуя прогени-торные клетки в очаг поражения [2, 4]. Усиление эффективности и пролонгирование локального воздействия может быть достигнуто праймированием МСК при культивировании in vitro и/или введении вместе с биодегра-дируемым гелем [2].
Наш опыт проведения клеточной терапии пациентам с нейродегенеративными заболеваниями базировался на использовании как системного/внутривенного, так и локального/эндолюмбального введения МСК. Один курс клеточной терапии пациентов с боковым амиотро-фическим склерозом или симптоматической эпилепсией предполагал оба пути введения МСК. Такая тактика позволила обеспечить клинический ответ у 80% (в контроле — 5-15%) пациентов в течение 12 месяцев наблюдения.
Сделано заключение о целесообразности комбинированного подхода к использованию МСК для лечения ней-родегенеративных заболеваний человека.
Литература:
1. Kabat M., Bobkov I., Kumar S.et al. Stem cells Transl. Med.
2020; 9:17-27.
2. Levy O., Kuai R., Siren E.M.J.et al. Sci. Adv. 2020;6: eaba6884
3. Zhuang W.Z., Lin Y.H., Wu M.S.et al. J. Biomed. Sci. 2021;
28:28
4. Caplan H., Olson S.D., Kumar A. et al. Front Immunol. 2019;
10:1645.
АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ САПЛИМЕНТОВ НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ И ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ФИБРОБЛАСТОВ ЧЕЛОВЕКА
В.Р. Потапова1, И.В. Гилевич1, 2, Е.А. Коломийцева2
1 ФГБОУ ВО Кубанский государственный медицинский университет Минздрава России, Краснодар, Россия
2 ГБУЗ НИИ Краевая клиническая больница
№ 1 им. профессора С.В. Очаповского МЗ КК, Краснодар, Россия
Ключевые слова: фибробласты, лизат тромбоцитов, сапли-мент, условия культивирования.
Выбор условий культивирования имеет важное значение при разработке биомедицинского клеточного продукта. Используемые при культивировании добавки должны быть безопасны, эффективны и доступны для технологического процесса. Фетальная бычья сыворотка (ФБС), широко используемая при культивировании, как саплимент для продукта клинического назначения, не подходит, так как является ксеногенным материалом. Целью нашей работы стало определение оптимального
саплимента, который будет обеспечивать жизнеспособность и повышать пролиферативную активность клеток.
В эксперименте сравнивали влияние разных условий культивирования на морфофункциональные свойства трёх клеточных линий дермальных фибробластов, 4 пассажа. Фибробласты культивировали в питательной среде DMEM (Gibco, США) и 100 ед/мл антибиотика-антими-котика. В качестве саплиментов использовали: 1) 10% ФБС — контрольная группа (КГ); 2) 10% плазму человека АВ группы, полученную на станции переливания крови — опытная группа (ОГ) № 1; 3) 5% обогащенную тромбоцитами плазму (ОбТП) — ОГ № 2; 4) 5% лизат тромбоцитов (ЛТ) — ОГ № 3. ОбТП выделяли из периферической крови путём двойного центрифугирования и хранили при -20°С. ЛТ готовили из ОбТП, подвергшейся циклу глубокой заморозки при -800С и разморозке при +370С, с последующим хранением при -200С.
Анализ пролиферативной активности клеток при разных условиях показал, что время удвоения популяции клеток в ОГ№ 1 было длиннее и составило в среднем 70,17 часов, в ОГ № 2 и ОГ № 3 наблюдалось сокращение времени удвоения — 58,67 ч. и 47,67 ч., соответственно, по сравнению сКГ (59,17ч.). При одинаковой плотности засеивания наибольшее количество клеток было получено в ОГ № 2 и № 3 по сравнению с КГ и ОГ № 1, что дополнительно подтвердило факт повышения пролиферативной активности клеток с сапли-ментами на основе продуктов из тромбоцитов. Время достижения конфлюэнтности в КГ составило 7 суток, в ОГ № 1 — 9 суток, в ОГ № 2 — 8 суток, и наименьшим время было в ОГ № 3 — 6 суток. Результаты ХТТ-теста показали, что ни один из саплиментов не оказывал ци-тотоксического действия на фибробласты, но при этом наблюдалось значительное увеличение жизнеспособности клеток в ОГ № 2 и № 3 по сравнению с ОГ № 1 и КГ. Цитохимический тест Live and Dead визуально подтвердил сохранение жизнеспособности клеток при разных условиях. Все клетки вне зависимости от условий экспрес-сировали виментин, отсутствовала экспрессия а-sma.
Таким образом, культивирование с 5% ЛТ (ОГ № 3) более эффективно по сравнению с другими, так как использование данного саплимента в качестве добавки к питательной среде даёт возможность в наиболее короткие сроки достичь конфлюэнтности, а также позволяет получить высокую пролиферативную активность и сохраняет жизнеспособность клеток. Культивирование фибро-бластов таким способом может быть рекомендовано для разработки биомедицинского клеточного продукта.
ВЛИЯНИЕ ГЕН-АКТИВИРОВАННОГО МАТЕРИАЛА НА РЕГЕНЕРАЦИЮ ГИАЛИНОВОГО ХРЯЩА И СУБХОНДРАЛЬНОЙ КОСТИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VIVO
Е.В. Пресняков1' 2, Н.И. Жемков1, П.С. Подлужный1, В.В. Церцеил1, Е.С. Рочев2, И.Я. Бозо2, Р.В. Деев1' 2
1 Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова», Санкт-Петербург, Россия,
2 ООО «Гистографт», Москва, Инновационный центр «Сколково», Россия,
e-mail: uvpres@gmail.com
Ключевые слова: ген-активированные остеопластические материалы, октакальциевый фосфат, гидрогелевые материалы для регенерации, репаративный остеогенез, репаратив-ный хондрогенез.
Гены & Клетки XVII, №З, 2G22
