CC BY
10
УДК 618.11:611.018.7]-006-07:616-091.8:615.277 https://doi.Org/10.26641/2307-0404.2018.2.133693
О.А. Савченко, АНАЛ1З Р1ВНЯ ЕКСПРЕСП
L С Шпонька ПАНЦИТОКЕРАТИН1В В ЕП1ТЕЛ1АЛЬНИХ
ТА ГРАНУЛЬОЗОКЛ1ТИННИХ ПУХЛИНАХ ЯСЧНИК1В
ДЗ «Днiпропетровська медична академiя МОЗ УкраХни»
кафедра патологiчноi анатома i судовоХ медицини
(зав. - к. мед. н., доц. О.А. Алексеенко)
вул. В. Вернадського, 9, Днтро, 49044, УкраХна
SE «Dnipropetrovsk medical academy of Health Ministry of Ukraine»
Department of Pathological Anatomy and Forensic Medicine
V. Vernadsky str., 9, Dnipro, 49044, Ukraine
e-mail: [email protected]
Ключовi слова: епiтелiальнi пухлини яечниюв, гранульозоклтинт пухлини, iмуногiстохiмiя Ключевые слова: эпителиальные опухоли яичников, гранулезоклеточные опухоли, иммуногистохимия Key words: epithelial ovarian tumors, granulo-cellular tumors, immunohistochemistry
Реферат. Анализ уровня экспрессии панцитокератинов в эпителиальных и гранулёзоклеточных опухолях яичников. Савченко О.А., Шпонька И.С. Дифференциальная диагностика новообразований яичников проводится среди групп эпителиальных и гранулёзоклеточных опухолей и остаётся актуальной проблемой онкогинекологии. В основном встречаются эпителиальные опухоли (до 60%), но на долю гранулёзоклеточных опухолей приходится до 5% из всех неоплазий яичника. Материалы и методы. В работе было проведено ретроспективное исследование 43 наблюдений опухолевых поражений яичников за период январь-декабрь 2017 г. Целью исследования было проанализировать комплекс морфологических и им-муногистохимических характеристик Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 - негативних фенотипов и Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 - позитивних фенотипов неоплазий яичников, для совершенствования алгоритмов диагностики. Результаты. Фенотип эпителиальных опухолей яичников в 100% наблюдений соответствует панцито-кератину Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 «+», в свою очередь фенотип гранулезоклеточных опухолей в основном отвечал экспрессии маркера Cytokeratin, Pan АЕ1 / АЕ3 "-" в 62,5%; а вариант в части клеток «+»/«-» Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 обнаружен в 37,5% гранулезоклеточных опухолей, независимо от потенциала их злокачественности. Таким образом, гранулезоклеточные опухоли имеют вариабельную экспрессию маркера Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 и требуют включения в первичную панель других диагностических ИГХмаркеров.
Abstract. Analysis of the level of expression of pancytokeratins in epithelial and granulocellular tumors of the ovaries. Savchenko O.A., Shponka I.S. Differential diagnosis of ovarian neoplasms is carried out among groups of epithelial and granulocellular tumors and remains an actual problem of oncogynecology. In general, epithelial tumors occur (up to 60%), but granulocellular cell tumors account for up to 5% of all ovarian neoplasia. Materials and methods. A retrospective study of 43 observations of ovarian tumor lesions over the period of January-December 2017 was conducted in the work. The aim of the study was to analyze the complex of morphological and immunohistochemical characteristics of Cytokeratin, Pan AE1 / AE3 - negative phenotypes and Cytokeratin, Pan AE1 / AE3 - positive phenotypes of ovarian neoplasia to improve diagnostic algorithms. Results. The phenotype of epithelial ovarian tumors in 100% of observations corresponds to pancytokeratin Cytokeratin, Pan AE1 / AE3 "+", in its turn the phenotype of granulocellular tumors basically responded to expression of the Cytokeratin marker, Pan AE1 / AE3 "-" in 62.5%; and the variant in the part of the cells "+" / "-" Cytokeratin, Pan AE1 / AE3 was found in 37.5% of granulocellular tumors, regardless of their malignant potential. Thus, granulocellular tumors have variable expression of the Cytokeratin marker, Pan AE1 / AE3 and require the inclusion of other diagnostic IGH markers in the primary panel.
Рання дiагностика, попередження рецидивiв та проведення диференщально! дiагностики пухлин яечниюв залишаеться актуальним пи-танням на сьогодшшнш день. Епiтелiальнi пухлини яечниюв (ЕПЯ) - рiзноманiтна за складом група i зус^чаеться до 55-60% Bcix неоплазш ще! локатзаци [4, 5, 10]. У свою чергу,
гранульозоклггинш пухлини яечниюв (ГрПЯ) зус^чаються в 2-5% та пов'язаш з клггинами гранульози. Пстолопчно видшяють два рiз-новиди ГрПЯ, яю мають певш ктшчш та пстолопчш особливостк гранульозоклггинна пухлина дорослого (95%) та ювеншьного типу (вш пащенток - пубертатний перюд та рщше
18/ Том XXIII/ 2
21
тсля 30 pokíb). Перший BapiaHT мае пстолопчну схожiсть з ендометрио!дними злояюсними епiтелiaльними пухлинами (ендометрио!дними карциномами) яечниюв, що часто потребуе додаткового iмуногiстохiмiчного дослiдження. ГрП ювенiльного типу демонструе фенотип, характерний, навпаки, для св^локттинних карцином яечниюв; у той час, як пухлини з клгтин Сеpтолi та Лейдiгa будують структури серозних та муцинозних ЕПЯ [3, 4, 6, 9]. Досвщ пато-морфолога визначае суб'ективнiсть пстолопч-ного висновку тсля рутинного зафарбовування гематоксилшом-еозином, що викликае не-обхiднiсть упорядкування диференцшно^агнос-тичних критерив пухлин ще! локатзацп.
Мета - покращити дiaгностичнi критери па-тогiстологiчного дослiдження епiтелiaльних пухлин яечникiв на пiдстaвi вивчення та поpiв-няння piвня експресп маркера панцитокератину (АЕ1/АЕ3) в епiтелiaльних та гранульозокл^ин-них пухлинах яечниюв.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛ1ДЖЕНЬ
У робот проведено ретроспективний aнaлiз пстолопчних та 1ГХ дослiджень шсляоперацш-ного мaтеpiaлу 43 пухлин яечникiв, з них: 35 випадюв епiтелiaльних пухлин (вшом вiд 24 до 74 роюв (середне 47,6±12,61; медiaнa 49) та 8 -гранульозоклгтинних пухлин яечниюв дорослого типу (вiком вщ 40 до 50 pокiв, середне 46,5±10,33; медiaнa 47), що зверталися з КЗ «ДОКОД» ДОР, КЗ «КОД» ДОР, КЗ «ОКЛМ» ДОР продовж сiчня-гpудня 2017 року з метою проведення 1ГХ дослiдження для виключення злоякiсного новоутворення в морфолопчний вiддiл дiaгностичного центру ТОВ «Аптеки медично! академп» м. Днiпpa. Дiaгнози встанов-лювались двома досвiдченими патоморфологами незалежно один вiд одного за сучасними класи-фiкaцiями ВООЗ [10]. Для проведення 1ГХ дослiдження ми використовували формалш-фiксовaнi i парафш-залит зразки шсляоперацш-ного мaтеpiaлу. 1ГХ дослiдження проводилось згiдно з протоколами компани TermoScientific (TS), (США). У зpiзaх завтовшки 4 мкм використовували систему вiзуaлiзaцil Lab Vision Quanto (TS, США) з виявленням бшкового лан-цюга за допомогою DAB Quanto Chromogen (TS, США). Первинна панель 1ГХ aнтитiл включала дiaгностичнi aнтитiлa до Рancytokeratin АЕ1/АЕ3 (TermoScientific, США). Титр aнтитiл тдбираетъся iндивiдуaльно для кожного маркера з ви-користанням спецiaльного розчину antibody diluent (Рancytokeratin АЕ1/АЕ3, розведення 1:200).
Статистичш методи дослiдження. Дaнi до-слiджень пiдлягaли стaтистичнiй обpобцi в
nporpaMi Microsoft Excel, з використанням ва-рiацiйних методiв, що включали визначення таких характеристик: середня арифметична; дис-персiя; середне квадратичне вщхилення; коефь цieнт варiацiï; помилка середнього квадратичного вщхилення.
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ÏX ОБГОВОРЕННЯ
Рутинне зафарбовування (Г-Е) не завжди дозволяе вiдокремити головт морфологiчнi характеристики ЕПЯ. У цьому дослщжент було встановлено: епiтелiальнi пухлини (n=35), дiагнози гранульозоклiтинних пухлин дорослого типу (n=8) та жодного випадку пухлин з клiтин Сертолi та Лейдта за визначений перiод. Еш-телiальнi пухлини доброякiснi (n=3), вистелет серозними або муциноподiбними клiтинами (ен-доцервiкальний тип), або ендометриоïдними клггинами (менш часто зустрiчалися перехiднi або плосю клiтини), пограничнi пухлини яеч-никiв (n=22), складалися бiльше шж з одного типу епiтелiальних кттин, найбiльш часто серозних та ендоцервшального типу; злоякiснi пухлини (n=10). Аналiзуючи розподiл пстоло-гiчних типiв ПЯ серед випадкiв, можна виявити певну тенденцiю до перевищення кiлькостi еште-лiальних пухлин (81,4%), нiж неепiтелiального походження, а саме гранульозоклiтинних дорослого типу (18,6%), за вказаний перюд ювеншьних ГрПЯ у вибiрцi визначено не було. Ц статистичт дат розподiлу не ствпадають з результатами шших авторiв [3, 4, 5, 6, 10], тому що не були враховат випадки епiтелiальних пухлин, як не потребували 1ГХ пiдтвердження.
У ГрПЯ дорослого типу частше зустрiчався дифузний малюнок, при якому пухлинт клiтини росли в трабекулах, гшздах, хвилястих стрiчках, менш часто зустрiчався мiкрофолiкулярний малюнок, в якому кл^ини гранульози оточували невелик простори. Ядра блiдi, кутастi чи оваль-нi, часто рифленi (жолобоподiбнi), якi були розташованi безсистемно по вщношенню один до одного та до фолiкулiв, з мiтотичною ак-тивнiстю вiд 3% до 17%. За лтературними джерелами, ГрПЯ ювеншьного типу в^^з-няються вищою м^отичною активнiстю i мають округлi клггини з гiперхромними ядрами, якi втрачають рифленiсть, та еозинофiльною (лю-тешзованою) цитоплазмою [5, 10].
У 35 (100%) випадках епiтелiальних пухлин яечниюв виявлена експресiя маркера Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 - позитивних (+) (рис. Б), незалежно вщ ïхнього рiвня диференцiювання. У 3 випадках (37,5%) гранульозокл^инних пухлин виявлений варiант експресiï маркера Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 - у частинi клiтин (+) / у частит
клгтин (-) (рис. В), та в 5 випадках (62,5%) гранульозоклгтинних пухлин виявлений BapiaHT eKcnpecii' маркера Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 - (-) (рис. Д). Зазначений маркер можна використову-
вати в панелi дiагностичних антитiл як ет-телiальних, так i гранульозоклiтинних пухлин яечниюв, але з урахуванням морфолопчних ознак та експресieю iнших маркерiв (табл.).
А. Серозна аденокарцинома яечника (пролiферацiя епiтелiю зсередини капсули), зафарбовування Г-Е. х400. Б. Серозна аденокарцинома яечника, позитивна реакщя з маркером АЕ1/АЕ3, 1ГХ метод з гематоксилшом Майера. х400. В. Гранульозоклiтинна пухлина яечника, зафарбовування Г-Е, х400. Г. Гранульозокл^инна пухлина яечника: вогнищева позитивна та негативна реакцп з маркером АЕ1/АЕ3, 1ГХ метод з гематоксилшом Майера. х400. Г. Гранульозоклiтинна пухлина яечника, зафарбовування Г-Е. х400. Д. Гранульозокл^инна пухлина яечника: негативна реакщя з маркером АЕ1/АЕ3, 1ГХ метод з гематоксилшом Майера х400
18/ Том XXIII/ 2
23
Експрес1я маркера Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3 в еп1тел1альних та гранульозоклггинних пухлинах яечника
Г1столог1чний тип пухлини Експрес1я маркера Cytokeratin, Pan АЕ1/АЕ3
яечника «+» «+/-» «-»
(позитивна), n (в частит клпин), n (негативна), n
Еп1тел1альн1 33
Гранульозоклпинт, дорослого типу - 3 5
П1ДСУМОК
Таким чином, фенотип епiтелiальних пухлин яечниюв вiдповiдаe панцитокератину АЕ1/АЕ3 «+» 100%, фенотип гранульозокттинних пухлин, навпаки, здебшьшого вiдповiдав експресiï маркера панцитокератину АЕ1/АЕ3 «-» 62,5%; варiант у частиш клiтин «+»/«-» експресiя маркера панцитокератину АЕ1/АЕ3 виявлена в 37,5% гранульозоклггинних пухлинах, незалежно вщ потенцiалу злоякiсностi. ГрПЯ мають варiабельну
експресiю панцитокератину АЕ1/АЕ3 i потре-бують включення в первинну панель шших дiагностичних маркерiв.
Перспективи подальших дослiджень пов'язанi з вивченням дiагностичних критерiïв патопсто-логiчного дослiдження епiтелiальних пухлин яеч-никiв на пiдставi визначення рiвнiв експресiï рiзних маркерiв порiвняно з iншими групами пухлин яечниюв.
СПИСОК Л1ТЕРАТУРИ
1. Иммуногистохимические особенности клеток серозной аденокарциномы яичников, определяющее клиническое течение заболевания и выживаемость больных / К.М. Пожарский, Г.А. Раскин, В.Л. Винокуров [ и др.] // Архив патологии. - 2015. - № 1. - С. 38-40.
2. Adult granulosa cell tumors of the ovary: a retrospective study of 30 cases with respect to the expression of steroid synthesis enzymes / Sachiko Kitamura, Kaoru Abiko, Noriomi Matsumura [et al.] // J. Gynecologic Oncology. - 2017. - Vol. 28, N 4. - P. 31-39.
3. Hanahan D. Hallmarks of cancer: the next generation / D. Hanahan, R.A. Weinberg // Cell. - 2011. - N 4. -P. 646-674.
4. Fletcher C.D.M. Diagnostic histopatology of tumors Vol. 1. / C.D.M. Fletcher . - Hardcower: Churchill Livingstone, 2013. - 2296.
5. Kurman R.J. Blausteins pathology of the female genital tract / R.J Kurman // Springer. - 2001. - P. 791-904.
6. Mills S.E. Diagnostic surgical pathology / S.E. Mills., D. Carter, J.K. Greenson // Wolters Kluwer. -2010. - Vol 2. - P. 2278-2308.
7. Seromucinous component in endometrioid endometrial carcinoma as a histological predictor of prognosis / Morikazu Miyamoto, Masashi Takano, Tadashi Aoyama [et al.] // J. Gynecologic Oncology. - 2018. - Vol. 29, N 2. - P. 20-27.
8. The molecular mechanism of ovarian granulosa cell tumors / Li Jiaheng, Bao Riqiang, Peng Shiwei [et al.] // J. Ovarian Research. - 2018. - N 11. - P. 13-20.
9. Tummala M. Recurrent ovarian cancer / M. Tum-mala, W. McGuire // Clin. Advances Hematology Oncology. - 2005. - N 3. - P. 723-736.
10. WHO Classification of tumors of female reproductive organs / R.J. Kurman, M.L. Carcangiu, C.S. Herrington [et al.]. - Revised 4th ed. - Lyon: IARC, 2014. - 307 p.
REFERENCES
1. Pozharsky KM, Raskin GA, Vinokurov VL, Yur-kova LE, Mukhina MS. [Immunohistochemical features of cells of serous ovarian adenocarcinoma, determining the clinical course of the disease and the survival of patients]. Arkhiv patologii. 2015;1:38-40. Russian.
2. Sachiko Kitamura, Kaoru Abiko, Noriomi Matsu-mura. Adult granulosa cell tumors of the ovary: a retrospective study of 30 cases with respect to the expression of steroid synthesis enzymes. Journal of Gynecologic Oncology. 2017;28(4):31-39.
3. Hanahan D, Weinberg RA. Hallmarks of cancer: the next generation. Cell. 2011;4:646-74.
4. Fletcher CDM. author. Diagnostic histopatology of tumors. PA: Elsevier. 2013;1:658-88.
5. Kurman RJ. Blausteins pathology of the female genital tract. Springer. 2001;791-904.
6. Mills SE, Carter D, Greenson JK. Diagnostic surgical pathology. Wolters Kluwer. 2010;2:2278-308.
7. Morikazu Miyamoto, Masashi Takano, Tadashi Aoyama. Seromucinous component in endometrioid endo-
metrial carcinoma as a histological predictor of prognosis. Journal of Gynecologic Oncology. 2018;29(2):20-27.
8. Jiaheng Li, Riqiang Bao, Shiwei Peng The molecular mechanism of ovarian granulosa cell tumors. Journal of Ovarian Research. 2018;11:13-20.
9. Tummala M, et al. Recurrent ovarian cancer. Clinical Advances in Hematology and Oncology. 2005;3:723-36.
10. Kurman RJ, Carcangiu ML, Herrington CS, Young RH. WHO Classification of tumors of female reproductive organs. Revised 4th ed. Lyon, IARC. 2014;307.
CraTra Hagrnmga go pegaKmï 16.04.2018
♦
18/ TOM XXIII/ 2
25
