CC BY
53
Костюк С.С. ©
Науково-дослгдний ¡нститут ф1зюлогп та еко1мунологп тварин I птиц ЛНУВМ та БТ ¡мет С.З.Гжицького. м. Львгв
АКТИВН1СТЬ ФЕРМЕНТ1В Б1ЛКОВОГО ОБМ1НУ ТА Б1ЛКОВ1 ФРАКЦП КРОВ1 КРОЛ1В ПРИ ГОСТР1Й ПРОМЕНЕВ1Й ХВОРОБ1 НА
ФОН1 ДП В1ТАМ1НУ Вб.
Основною метою було дослгдження деяких показнитв бткового обмту у крол1в при променевш хворобг , на фонг дп тридоксину (втамту В6), як радюпротектора.
При тотальному I одномоментному опромшенш крол\в рентгетвськими пременями загинуло два кролг контрольног групи. У крол1в контрольног групи встановлен змти концентрацп загального быку та бткових фракцш, активност1 алатнамтотрансферази . У дослгдый грут, крол1в, де ми застосовували шридоксин, ц показники були значно ближними до норми.
Ключовi слова: крол\, рентгетвське опромшення, загальний бшок, быков\ фракцп, амтотрансферази, пгридоксин.
Вступ. Ефективне використання тварин в умовах штенсифжаци тварин-ництва вимагае глибокого розумшня особливостей фiзiологiчних процеав у тварин i птищ, а також змш, яю виникають в органiзмi тд впливом рiзноманiтних факторiв зовшшнього середовища, серед яких юшзуюча радiацiя.
Через iнтенсивне випробовування ядерно! енергетики, виникненням аварш на атомних електростанщях виникають новi завдання вивчення особливостей дп iонiзуючого випромiнення на живий органiзм та пошук засобiв, якi змен-шували б шкщливий вплив юшзуючо! радiацil на живий оргашзм.
Бiлки плазми кровi альбумши i фiбриноген утворюються виключно в печшщ, тодi як глобулiни, - ще i в кiстковому мозку, селезiнцi, лiмфатичних вузлах, брижейцi кишечника. Вони виконують рiзноманiтнi функци. Пщтримують нормальний об'ем кровi i постшну кiлькiсть води в тканинах. Як високомолекулярш колощш частинки, бiлки не можуть проходити через стiнки артерiальних судин у тканинну рiдину, вони притягують певну кiлькiсть води з тканин у кров i збшьшують онкотичний тиск. Особливо велике значення в створеннi онкотичного тиску належить альбумiнам, якi мають меншу молекулярну масу i вiдрiзiняються бiльшою рухливютю, нiж глобулiни. На !х долю приходиться приблизно 80% онкотичного тиску. Велику роль ввдграють бiлки в транспорт поживних речовин.
Результати електрофоретичного аналiзу сироваткових бiлкiв у поромше-их щурiв свiдчать про фазовий характер змш бшюв кровi при гострому променевому пораженi. Перша фаза характеризуеться падшням концентрацп
© Костюк С.С., 2010
110
сироваткових бшюв, в першу чергу альбумшв i наступав зразу ж тсля поромьення. Повшьне оновлення сироваткових альбумiнiв у щурiв може бути пояс-ене ураженням печшки, де синтезуеться цей бiлок кровi (Кургалюк Н.М. з спiвав. 2000).
У другш, бiльш довшiй фазi проходить поступове вiдновлення в кровi рiвня бiлкiв з приростом альбумшв i ß -глобулiнiв, що тривае 9-10 днiв (Бело-усова О.Н. з ствав., 1990 ). Автори вiдзначають, що гостра променева хвороба супроводжуеться кiлькiсними змiнами сироваткових протехшв в опромiнених тварин, цi змши носять фазовий характер i проявляються зниженням вмiсту альбумiнiв i у-глобулшв при збiльшеннi a i ß -глобулiнiв.
Активнiсть аланiнамiнотрансферази в сироватщ кровi у тварин пiсля гострого ращацшного пораження пiддаеться чiтким змшам ( Metzler David T, Jansonius Jahan N., Arnone Artur C, Proc. 1982). У кролиюв i мишей, тотально опромiнених, на вiдмiну вiд щурiв активнiсть сироваткових амшотрасфераз явно пiдвищувалась, що свiдчить про видовi вiдмiнностi.
Вже через три години тсля опромшення активнiсть аланшамшотранс-ферази в сироватцi кровi самщв явно знижуеться. Це зниження протжае одинаково у всiх тварин i середш показники в цш фазi знаходяться в межах 37-44 % (Rosler F.F.,1980)
Метою наших дослiджень було вивчення концентрацп загального бiлка, бiлкових фракцiй та активной ферментiв переамiнування в опромiнених кролiв пiд впливом вiтамiну В6.
Матер1ал i методика.
Дослiдження проводились на чотирьох кроликах породи " Бiлий велетень", яких пiдбирали за принципом аналопв ( Табл.1).
Таблиця 1.
№ кролика В1к (мю.) Маса тша (кг.)
Групи I група II група I група II група
1 5 5 3,2 3,4
2 5 5 3,3 3,5
3 5 5 3,6 3,3
4 5 5 3,7 3,2
Тварини були роздшеш на двi групи - контрольну (I) i дослщну (II). Дослiднiй групi за день до опромшення i протягом усього дослщження вводили внутрiм'язово 0,1 мл тридоксину гiдрохлориду ( Вггамш В6).
Тварини опромiнювали рентгетвськими променями DL=50, яка складала 1000 рентгешв -190 кв, А - 20 тА, фокусна вiддаль - 62 см, фшьтри Cu - 0,5, Al - 1 мм., потужшсть 20 Р /хв. Для фшьтраци м'яких про-менiв застосовувались алюмiнiевий та мiдний фiльтри. Опромшювання було тотальним та одномоментним.
Пiдрахунок кiлькостi еритроцитiв, лейкоцитiв та тромбоциив здiйснювали за допомогою атки камери Горева. Загальну кiлькiсть бшку в сиворотцi кровi
111
визна-чали рефрактометрично за допомогою рефрактометра 1Р-22М. Бiлковi фракци розганяли в агаровому гелi з наступним визначенням кожно! фракци окремо.
Дослiдження проводилися у НД1 фiзюлоri та е^мунологи тварин i птиц ЛНАВМ iменi С.З.Гжицького.
Активнiсть аланшамшотрансферази визначали за методом Рейтмана i Френкеля в модифжаци К.Г. Каштанаю (Капитанаки К.Г.,1962)
Статистичну обробку отриманого матерiалу проводили за методом Ойвша (Ойвин И.А.,1960).
Результати дослщжень.
До опромшення кiлькiсть загального бiлку в першш групi пiддослiдних тварин складав 6,8 % (див. Дiагр.1). В першi днi пiсля опромiнення процент загального бшку знижувався до 6,49. На 7-й день спостер^алось ще бiльше змен-шення - 5,45. Ця величина була мшмальною протягом всього дослiду. На 11-й день % загального бшку зрю до 5,51. У подальшому вш продовжував зростати до 14-го дня. На 17-й день концентрация бшку значно зменшилась i складала 6,16%. На 20-й день зареестровано максимальне значення концентраци бiлку -8,39 %. На 26-й день тсля опромшення концентращя загального бiлку знизилась до 6,01 % , а далi вона зростала.
Дiагр.1.Концентрацiя загального бтка в кров1
кролiв
8,5 8
7,5 7
6 5,5 5
/ ч*
—♦—контроль —■—досл1д
На 56-й день променево! хвороби кiлькiсть бiлку була близькою до вихщно! - 6,55 %.
Таким чином концентращя загального бшку тд впливом рентгешвського опромшення перюдично знижувалась i пiдвищувалась.
У кролiв дослщно! групи, на вiдмiну вiд контрольно!, концентрацiя загального бшку сироватки кровi не зазнала рiзких коливань (Дiагр.1) i утри-
112
мувалася в межах норми ( 6+1,5%), що вказуе на нормалiзуючи дш пiридоксину на загальний бiлок кровi в опромшених кролiв.
У контрольнiй групi тварин спостер^алась специфiчна реакцiя бiлкових фракцш сироватки кровi на тотальне гама опромшення, i в цьому повщомленш ми представляемо вмiст альбумiнiв i загальний вiдсоток глобулiнiв.
На дiаграмi 2 подана реакцiя вмiсту альбумшв в сироватцi кровi кролiв контрольно! i дослiдноi групи. Слiд вщзначити, що концентрацiя альбумiнiв у кровi кролiв контрольно! групи зросла в середиш дослiду порiвняно з вихщною величиною на 12%, в той час у кролiв дослiдноi групи - лише на 4%, що вказуе на позитивний вплив вiтамiну В6 на бiлкову картину кровi опромiнених кролiв.
Глобулiнова фракцiя змшювалася пiд впливом пiридоксину протилежно альбумшам.
Дiагр.2.Концентрацiя альбумiнiв в кров1 кролiв
39 37 35 ^ 33 31 29 27 25
--1 А ^-
и=| 1=1 \ • ►
"Т"
ДН1
-контроль ДОСЛ1Д
Актившсть аланiн амiнотрансферази до опромiнення складала 6,33 мкмолю/мл/год iнкубацii. На перший день тсля опромiнення спостерiгалося зростання активностi ферменту з наступним спаданням. Слщ вiдмiтити, що актившсть АЛТ пiд час дослiду була надзвичайно мiнливою i в кшщ майже на половину меншою вiд вихiдного рiвня.
Характерною особливютю впливу пiридоксину при променевiй хворобi кролiв е нормалiзацiя активностi аланш амiнотрансферази протягом дослiду i навт повернення до вихiдного рiвня пщ кiнець дослiду, на вiдмiну вщ кролiв контрольно! групи, що тдтверджуе залежнiсть активностi цього ферменту вщ вiтамiну В6 в опромiнених кролiв..
113
Внсновкн:
1. Рентгешвське опромшення викликало зменшення концентраци загального бшку при збiльшеннi проценту альбумшв.
2. Пiридоксин пiдвищував iмунну здатшсть органiзму, нормалiзував концентрацiю загального бшку та бiлкових фракцiй кровi.
3. В^амш В6 позитивно впливае на показники бшкового обмiну у кровi опромiнених кролiв.
Л1тература
1.Белоусова О.Н., Горизонтов Т.Д., Федотова М.И. Радиация и система крови. - М.: Атомиздат, 1990- 126 с.
2.Капитанаки К.Г. К методике определения активности трансаминаз (аминотранфераз) в сыворотке крови // Лабораторное дело. -1962, №1. с.19-23.
3.Кургалюк Н.М., Горинь О.В., 1ккерт О.В., Гальюв М.О., Гордш С.К. Роль процеЫв лшероксидацп та антиоксидативно! системи при iонiзуючому опромшенш та введеннi iнтермедiатiв циклц три карбонових кислот. -Науковий вшник ЛДАВМ iменi С.З.Гжицького, Львiв, 2000, - С. 29-32.
4. Ойвш И. А. Статистическая обработка результатов экспериментальних исследований //Патологическая физилогия и экспериментальная терапия. -1960.-№4.-с.76-85.
5. Metzler David T, Jansonius Jahan N., Arnone Artur C/ Transamidases/ Fed/ Proc. 1982, 41,8, - P.2432 - 2436.
6. Rosier F.F. Изменение активности АлАТ в сыворотке крови крыс в период острого лучевого синдрома. Вызванного общим рентг.обл. Рад. Биолог., рад. Терапия, 1980, 11,1. - С.84-96.
Summary
S.S.Kostiuk
Research Institute of Animal and Birds Physiology and Ekoimmunology of LNAVM named after S.Gzyckij. Lviv. Ukraine SOME INDEXES OF BLOOD OF RABBITS AT RADIATION ILLNESS ON A BACKGROUND THE ACTION OF VITAMIN B6.
1.The x-ray radiation caused reduction the concentration of the general albumen at the increase to the percent of albumens.
2.Pyridoxine increased the immune ability of the organism, normalized concentration of the general albumen and albuminous factions of blood.
3.Vitamin B6 positively affects the indexes of protein metabolism in the blood of the exposed rabbits to the x-rays.
Стаття надшшла до редакцИ 20.09.2010
114
