CC BY
36
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2021 - N 2
УДК: 61 DOI: 10.24412/2075-4094-2021-2-3-3
АДСОРБЦИОННАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ Н-ГЕКСАНОВОГО ЭЛЮАТА ЭТАНОЛЬНОГО ЭКСТРАКТА ЗЕЛЁНОГО ГРЕЦКОГО ОРЕХА И ЕГО ЛИСТЬЕВ (JUGLAS REGIA L, СЕМЕЙСТВО ОРЕХОВЫЕ - JUGLANDACEAE)
(Сообщение I)
В.В. ПЛАТОНОВ*, А.А. ХАДАРЦЕВ**, М.В. ВОЛОЧАЕВА***, Ф.С. ДАТИЕВА****, И.В. ДУНАЕВА**
ООО «Террапроминвест», ул. Перекопская, д. 5б, г. Тула, 300045, Россия Медицинский институт, Тульский государственный университет, ул. Болдина, д. 128, г. Тула, 300012, Россия ФГБУ Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова, ул. Опарина, д.4, г. Москва, 117513, Россия ИМБИ Владикавказского научного центра РАН, ул. Пушкинская, д. 47, г. Владикавказ, респ. Северная Осетия-Алания, 362025, Россия
Аннотация. Цель исследования - выполнить разделение этанольного экстракта из зелёных грецких орехов и их листьев методом адсорбционной жидкостной колоночной хроматографии на кремнеземе, с получением н-гексанового, толуольного, хлороформного, ацетонового и этанольного элюатов, определить их выход (масс. % от экстракта), выполнить хромато-масс-спектрометрию н-гексанового элюата, установить количественное содержание инфицированных соединений, получить их масс-спектры и структурные формулы, рассчитать структурно-групповой состав н-гексанового элюата. Материалы и методы исследования. Исходным сырьем являются зелёные грецкие орехи и их листья, собранные до 24 июня. Согласно литературным данным данное сырье имеет следующие показатели химического состава и фармакологического действия. Зелёные грецкие орехи и листья, собранные до 24 июня, пропускают через мясорубку, помещают в стеклянную посуду, смешивают с этанолом с массовой долей 95%, последнюю помещают в темное прохладное место на 12 месяцев, при этом периодически встряхивают, получая этанольный экстракт, который в конце экстракции отфильтровывают и изучают химический состав хромато-масс-спектрометрией, ИК-Фурье спектрометрией, рентгено-флуоресцентной спектроскопией. Результаты и их обсуждение. Приведены результаты хромато-масс-спектрометрии н-гексанового элюата продукта адсорбционный жидкостной хроматографии на кремнеземе этанольного экстракта зелёных грецких орехов и их листьев. В элюате идентифицировано 107 индивидуальных соединений, для которых определено их количественное содержание, получены масс-спектры и структурные формулы, рассчитан структурно-групповой состав элюата. Его основу составляют сложные эфиры (60,11) и углеводороды (33,35) (масс. % от элюата). Также обнаружены стерины (2,85), карбоновые кислоты (1,92) и спирты (0,76), (масс. % от элюата): альдегиды, кетоны и фенолы представлены по одному соединению. Особенностью сложных эфиров является участие в их образовании предельных, ароматических моно- и дикарбоновых кислот, а также сульфокислот, отдельные из которых замещены фтором (Pentafluoropropionic acid, clodecyl ester, Hexatiakontyl pentafluopropionat, Eicosil heptafloourobural). Углеводороды (С15-С60) в качестве заместителей содержат хлор и бром (Hexadecan, 1-chloro, Octatriacontan, 1,38-dibrom, Tetrapentacontan, 1,54-dibrom, Triacontan). Хлор, бром и фторзамещенные представители углеводородов, карбоновых кислот, а также стероидные соединения, производные бензтиазола, меркап-тобензола, по-видимому, будут определяющими в формировании направленности фармакологического действия н-гексанового элюата этанольного экстракта - зелёных грецких орехов и их листьев. Заключение. Впервые для детализации особенностей химического состава этанольного экстракта грецкого оре-ха+листьев использована колоночная адсорбционная жидкостная хроматография, позволившая получить ряд узких по составу элюатов.
Ключевые слова: зеленый грецкий орех, листья грецкого ореха, этанольный экстракт, жидкостная колоночная адсорбционная хроматография, н-гексаноый элюат, хромато-масс-спектрометрия.
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ. Электронное издание - 2021 - N 2 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2021 - N 2
ADSORPTION LIQUID CHROMATOGRAPHY OF N-HEXANE ELUATE OF ETHANOL EXTRACT OF GREEN WALNUT AND ITS LEAVES (JUGLAS REGIA L., NUT FAMILY - JUGLANDACEAE)
(Report I)
V.V. PLATONOV*, A.A. KHADARTSEV**, M.V. VOLOCHAEVA***, F.S. DATIEVA****, I.V. DUNAEVA**
LLC "Terraprominvest", Perekopskaya Str., 5b, Tula, 300045, Russia Medical Institute, Tula State University, Boldin Str., 128, Tula, 300012, Russia
FSBI " National Medical Research Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology named after V.I. Kulakov", Oparin Str., 4, Moscow, 117513, Russia IMBI of the Vladikavkaz Scientific Center of the Russian Academy of Sciences, Pushkinskaya Str., 47, Vladikavkaz, Rep. North Ossetia-Alania, 362025, Russia
Abstract. The research purpose was to separate the ethanol extract from green walnuts and their leaves by the method of adsorption liquid column chromatography on silica, to obtain n-hexane, toluene, chloroform, acetone and ethanol eluates, to determine their yield (wt.% of the extract), to perform chromatography - mass spectrometry of the n-hexane eluate, to establish the quantitative content of infected compounds, to obtain their mass spectra and structural formulas, to calculate the structure-group composition of the n-hexane eluate. Materials and research methods. The raw material is green walnuts and their leaves, harvested before 24 June. According to the literature, this raw material has the following indicators of chemical composition and pharmacological action. Green walnuts and leaves, harvested before June 24, are passed through a meat grinder, placed in a glass dish, mixed with ethanol with a mass fraction of 95%. The latter it is placed in a dark cool place for 12 months. At the same time, it is periodically shaken to obtain an ethanol extract. At the end of the extraction, the extract is filtered and its chemical composition is studied by gas chromatography-mass spectrometry, FTIR spectrometry, X-ray fluorescence spectroscopy. Results and its discussion. The results of gas chromatography-mass spectrometry of n-hexane eluate of the product of adsorption liquid chromatography on silica of ethanol extract of green walnuts and their leaves are presented. In the eluate, 107 individual compounds were identified, for which their quantitative content was determined. The mass spectra and structural formulas were obtained, and the structure-group composition of the eluate was calculated. It is based on esters (60.11) and hydrocarbons (33.35) (wt% of the eluate). Also it was found sterols (2.85), carboxylic acids (1.92) and alcohols (0.76), (wt.% of the eluate): aldehydes, ketones and phenols by one compound. A feature of esters is the participation in their formation of saturated, aromatic mono- and dicarboxylic acids, as well as sulfonic acids, some of which are substituted by fluorine (Pentafluoropropionic acid, clodecyl ester, Hexatiakontyl pentafluopropionat, Eicosil heptafloourobural). Hydrocarbons (C15-C60) contain chlorine and bromine as substituents (Hexadecan, 1-chloro, Octatriacontan, 1,38-dibrom, Tetrapentacontan, 1,54-dibrom, Triacontan). Chlorine, bromine and fluorine-substituted representatives of hydrocarbons, carboxylic acids, as well as steroid compounds, derivatives of benzthiazole, mercaptobenzene, will apparently be decisive in the formation of the direction of the pharmacological action of the n-hexane eluate of ethanol extract - green walnuts and their leaves. Conclusion. For the first time to detail the features of the chemical composition of ethanol extract of walnut + leaves, column adsorption liquid chromatography was used, which made it possible to obtain a number of eluates narrow in composition.
Keywords: green walnut, walnut leaves, ethanol extract, liquid column adsorption chromatography, n-hexane eluate, gas chromatography-mass spectrometry.
Цель исследования - выполнить разделение этанольного экстракта из зелёных грецких орехов и их листьев методом адсорбционной жидкостной колоночной хроматографии на кремнеземе, с получением н-гексанового, толуольного, хлороформного, ацетонового и этанольного элюатов, определить их выход (масс. % от экстракта), выполнить хромато-масс-спектрометрию н-гексанового элюата, установить количественное содержание инфицированных соединений, получить их масс-спектры и структурные формулы, рассчитать структурно-групповой состав н-гексанового элюата, что в целом расширит наше познание в вопросе особенностей химического состава органического вещества зелёных грецких оре-хов+листьев, выбрать новые направления фармакологического действия, именно данного элюата.
Введение. В зелёных орехах обнаружены витамины С1, B1, B2, PP, каротин, хиноны, в зрелых -ситостерины, витамины С1, B1, B2, PP, каротин, дубильные вещества, хиноны и жирное масло, содержащее линолевую, линоленовую, пальмитиновую и другие органические кислоты, а также клетчатка, соли Fe, Co. Скорлупа обогащена фенолкарбоновыми кислотами, дубильными веществами, кумаринами, пе-ликула (тонкая бурая кожица, покрывающая плод) - стероиды, фенолкарбоновые кислоты, дубильные вещества и кумарины.
Листья грецкого ореха имеют в своём составе эфирное масло, содержащее а-пинен, р-пинен, лимонен, камфен, борнилацетат, хамазулен и другие терпены; также обнаружены алкалоиды. Главную лечебную ценность листьев составляет исключительно большое количество каротина, т.е. провитамина А,
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ. Электронное издание - 2021 - N 2
йсйр^
витамины B1, дубильные вещества и красящее вещество юглон, обладающее бактерицидным действием, флавоноиды, гликозиды. Полифенольное вещество нафтохиноновой группы - юглон проявляет также выраженную противоопухолевую активность, что характерно и для алкалоида югландина [1, 3, 10].
Листья грецкого ореха, благодаря большому количеству содержащихся в них дубильных веществ, используются при воспалительных заболеваниях кожи и слизистых оболочек (кишечник, желудок, полость рта и горла, глаз). Но больше всего листья грецкого ореха подходят для лечения различных кожных заболеваний (экзема, угревая сыпь, обморожение; особенно хорошо помогают для снижения уровня сахара в крови при диабете, регулирования менструального цикла).
Настой незрелых плодов и листьев рекомендуют в виде ванн для детей при золотухе, лишае, высыпаниях на коже, экссудативной диатезе, сухой и влажной экземе, нейродермите, воспалении лимфатических желез, туберкулезе, как неспецифическое средство при лечении туберкулеза кожи, хронической эпидернофитии, а также атрептококковных и стафилококковых заболеваниях кожи и слизистых оболочек. Ещё Гиппократ использовал зелёные грецкие орехи для изгнания глистов. В народной медицине Средней и Южной Америки, Ирана, Средней Азии и Кавказа и поныне незрелые плоды используют против аскарид и солитёра.
Мазь из листьев грецкого ореха и оливкового масла применяется для лечения труднозаживляю-щихся язв, рака кожи, ожогов, фиброза кистозных образований и узлов молочной железы, щитовидной железе, мастопатии и аденомы груди, ревматизма, злокачественных опухолей (мазь на основе спиртовой настойки). В медицине ряда стран Европы и Азии XV века в лечении раковых заболеваний используются зелёные грецкие орехи, настоянные на очищенном керосине. Изучался химический состав грецкого ореха, листьев, околоплодников, ядер. Листья также содержат гидроциннамическую, кофейную, хлорогено-вую, ферулическую, р-кумарическую, синаптическую кислоты, мегастигманные, тетралонные, фенил-пропаноидные, неолигнанные и юглонные гликозиды, производные мегастигманных гликозидов (югла-ниозиды A-K) и производные тетралонных гликозидов (югланозиды J-O). Эфирное масло листьев орехов содержат эвгенол (27,5%), метил салицилат (16,2%), сесквитерпены - гермакрен D (21,4%) и (Е) - бета-фарнезен (8,2%), а-пинен (15,1%), ^-пинен (30,5%), ^-кариофиллен (15,5%), лимонен (3,6%). Ядра содержат до 75% жирного масла, до 6000 мг% аминокислот, витамин Е, /-каротин, витамин С, соли К, Са, М?, Р. Сочетание компонентов грецкого ореха и нафтеновых производных обеспечивают хорошую проницаемость через кожу, слизистые оболочки и клеточные мембраны; препарат повышает антиокси-дантную защиту клеток и тканей организма нормальных (не опухолевых) тканей от токсических воздействий (эндотоксинов, химиотерапевтического и радиационного); восстанавливает нормальную циркуляцию лимфы, снимает отёки, обусловленные лимфостазом; обладает выраженным противовоспалительными, иммуномодулирующим свойствами, предотвращает кровоизлияния, в том числе и при онкологических заболеваниях на фоне проводимой химио- и лучевой терапии [9].
Материалы и методы исследования. Исходным сырьем являются зелёные грецкие орехи и их листья, собранные до 24 июня. Согласно литературным данным данное сырье имеет следующие показатели химического состава и фармакологического действия [2, 4-6, 8, 9].
Зелёные грецкие орехи и листья, собранные до 24 июня, пропускают через мясорубку, помещают в стеклянную посуду, смешивают с этанолом с массовой долей 95%, последнюю помещают в темное прохладное место на 12 месяцев, при этом периодически встряхивают, получая этанольный экстракт, который в конце экстракции отфильтровывают и изучают химический состав хромато-масс-спектрометрией, ИК-Фурье спектрометрией, рентгено-флуоресцентной спектроскопией.
Перечисленные методы анализа указали на весьма сложный химический состав этанольного экстракта, в котором было идентифицировано 67 индивидуальных соединений: стерины, углеводороды, при значительном содержании терпенов, производных циклогексана, декалина, бициклических структур; сложные эфиры и карбоновые кислоты. В незначительном количестве обнаружены фуран и пиран-производные, спирты, кремний, азот- и серосодержащие соединения, фенолы и кетоны; практически не обнаружены гликозиды и альдегиды.
Приняв во внимание сложный качественный состав этанольного экстракта, с целью из детализации особенностей вещественного состава органической массы исходного сырья и углубления наших знаний в данном вопросе было принято решение разделить этанольный экстракт на ряд узких фракций (элюатов) с использованием колоночной адсорбционной жидкостной хроматографии на кремнеземе, колонка стеклянная длиной 150 см, диаметр 15 мм. Этанольный экстракт наносился сверху сорбента, а затем через колонку медленно (1 капля/мин.) пропускали растворители в следующей последовательности: н-гексан, толуол, хлороформ, ацетон и этанол. Каждый элюат при достижении коэффициента преломления используемого растворителя, значения равного исходному, освобождался от растворителя в вакуумном роторном испарителе, взвешивался с определением выхода элюата (масс. % от экстракта) и подробно исследовался методами указанными выше.
В настоящем сообщении приведены результаты изучения особенностей химического состава н-гексанового элюата. Условия хромато-масс-спектрометрии следующие: хромато-масс-спектрометрия
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ. Электронное издание - 2021 - N 2 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2021 - N 2
осуществлялась с использованием газового хроматографа GC-2010, соединенного с тройным квадру-польным масс-спектрометром GCMS-TQ-8030 под управлением программного обеспечения (ПО) GCMS Solution 4.11 [7].
Результаты и их обсуждение. Хроматограмма н-гексанового элюата этанольного экстракта приведена на рис. 1.
Рис. 1. Хроматограмма
Список соединений
Таблица 1
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2021 - N 2
Продолжение таблицы 1
38 69.770 0.09 1-Hexadecanol
39 70.488 0.44 Heptadecane, 2.6.10.15-tetramethvl-
40 71.881 0.08 Triacontanoic acid, methyl ester
41 73.616 0.26 n-Propyl 9,12-octadecadienoate
42 73.955 0.06 9,12,15-Octadecatrien-l-ol. CZ.Z.Z)-
43 74.282 0.02 cis-9-Hexadecenal
44 74.666 0.17 Octadecanoic acid
45 76.471 1.14 Heneicosane
46 77.032 0.36 Heptadecyl acetate
47 79.646 0.23 1,2-Benzenedicarboxylic acid, butvl decyl ester
48 80.032 0.20 Tributyl acetylcitrate
49 82.352 0.07 6,7-Dibromo-Z-l l-tetradecene-l-ol acetate
50 83.571 0.08 Octadecanoic acid, propyl ester
SI 84.747 2.16 Hexacosane
52 85.316 0.06 Sulfurous acid, octadecyl 2-propyl ester
53 87.863 0.15 Octatriacontane. 1,38-dibromo-
54 89.095 0.18 17-Pentatriacontene
55 90.183 0.34 Tridecanol, 2-ethyl-2-methyl-
56 90.827 0.36 Sulfurous acid, 2-propyl tetradecyl ester
57 91.405 0.41 Cyclohexane, (1,3-dimethylbutyl)-
58 91.866 0.49 Hexanedioic acid, mono(2-ethylhexyl)ester
59 93.088 4.17 Eicosane
60 93.667 0.41 Eicosyl heptafluorobutyrate
61 94.833 0.61 Sulfurous acid, 2-ethylhexyl hexadecyl ester
62 95.633 0.30 Oxalic acid, octadecyl propyl ester
63 96.378 0.53 2-methyloctacosane
64 97.005 1.43 Bis(2-ethylhexvl) phthalate
65 97.378 0.48 Cyclohexane, (1 -methylpropyl)-
66 98.444 5.19 Methoxyacetic acid, 4-hexadecyl ester
67 98.957 0.38 Pentafluoropropionic acid, dodecyl ester
68 99.979 32.82 Di-n-octyl phthalate
69 101.505 4.46 Octadecane, 3-methyl-
70 102.691 6.35 6-Tetradecanesidfonic acid, butyl ester
71 105.175 1.47 Nonacosane
72 105.613 0.84 Disparlure
73 106.479 5.41 Dotriacontane
74 107.213 1.33 Phthalic acid, cyclohexylmethyl octyl ester
75 109.099 0.22 Pentacosane
76 109.539 3.69 Bis(tridecyl) phthalate
77 111.114 5.07 2-methylhexacosane
78 111.804 3.75 Didecyl phthalate
79 112.547 0.86 Ethanol, 2-(hexadecyloxy)~
80 113.514 0.61 Methoxyacetic acid, 2-tetradecyl ester
81 114.337 0.17 Triacontane
82 115.307 0.44 17. alfa. ,21. beta. -28,30-Bisnorhopane
83 115.804 0.62 Cyclopentane, undecyl-
84 117.805 0.67 2,4,7-Trioxabicyclo[4.4.0]9-decene, 8-[4-(4-pentylcyclohexylJcyclohexyloxyJ-3-phenyl-
85 118.629 0.63 Hexatriacontyl pentafluoropropionate
86 119.494 0.70 2-methyltetracosane
87 119.883 0.38 Tetrapentacontane, 1,54-dibromo-
88 120.483 0.41 Hexacontane
89 121.693 0.41 Heneicosane, 1 l-(l-ethylpropyl)-
90 122.912 0.18 1 -Heptatriacotanol
91 127.565 0.29 Cholest-5-en-3-ol (3.beta.)~, propanoate
92 128.760 0.10 Octadecane, 3-ethyl-5~(2-ethylbutyl)-
93 129.362 0.15 Hexatriacontane
94 130.374 0.23 Triacontane, 1-bromo-
95 131.105 0.16 A '-Neogammacer-22(29)-ene
96 132.114 0.07 Octacosanol
97 133.330 1.04 Pentatriacontane
98 140.270 0.11 Tritetracontane
99 141.427 0.20 7.8-Epoxylanostan-1 l-ol, 3-acetoxy-
100 152.852 0.24 .beta.-Sitosterol
101 160.889 0.37 Tetratetracontane
102 163.932 0.08 9,19-Cyclolanostan-3-ol, acetate, (3.beta.)~
103 172.680 0.26 Stigmast-4-en-3-one
104 181.059 0.25 Pentadecane, 8-hexyl-
105 184.329 0.06 Heptasiloxane, hexadecamethyl-
106 207.385 0.16 Tetrapentacontane
107 211.001 0.03 Tetracosamethyl-cyclododecasiloxane
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2021 - N 2
Перечень идентифицированных соединений, их количественное содержание даны в табл. 1, которая была использована для расчета структурно-группового состава н-гексанового элюата. Масс-спектры и структурные формулы соединений - рис. 2.
В н-гексановом элюате было идентифицировано 107 индивидуальных соединений, для которых определено их количественное содержание, получены масс-спектры и структурные формулы, рассчитан структурно-групповой состав.
Особенностью н-гексанового элюата является доминирование в его составе сложных эфиров, содержание которых составляет - 60,11 (масс. % от элюата), а также углеводородов - 33,35 (масс. % от элюата). В образовании сложных эфиров велика доля фталевой кислоты: Diethyl phthalan; Phthalic acid, heptyl tridec-z-yn-1-yl ester, Di-n-octil phthalat, Didecyl phthalat, Bis (tridecyl) phthalat Phthalic acid cyclohexylmethyl octyl ester, на эфиры которой приходится ~ 75,0 (масс. % от суммы эфиров). Также существенна доля эфиров серной кислоты: Sulfurous acid, octadecyl-2-propyl ester. Sulfurous acid, Z-propyl tetradecyl ester, Sulfurous acid, 2-ethylhexyl hexadecyl ester,-b-Tetradecanesulfonic acid, butyl ester - 16,2 (масс. % от эфиров); присутствуют фрагменты кислот (Pentafluopropinic acid, dodecyl ester) и спиртов (6,7-dibromo-Z-11-tetradecene-1-ol, Eicosyl heptaflouorobutyrat, Hexatriocontil pentafluoropropionat). Кроме того, идентифицированы эфиры адипиновой, 1.2-бензолдикарбоновой кислоты, щавелевой, ряда предельных карбоновых кислот.
Замещенность соединений бромом и фтором является характерной особенностью сложных эфиров в сравнении с другими классами соединений (углеводородов, стеринов, спиртов, карбоновых кислот). В составе углеводородов доминируют н-алканы от С15 до C60 2,6,10-trimethyl Dodecan^Hexacontan), на который приходится - 92,3 (масс от суммы углеводородов); присутствуют арены типа: Ethybenzen, Phenanthren, 1H-Cyclopropa[L]phenantren, 1a, 9b-dihydro, 2.5-dimethyl phenanthren, циклоалканы; как и в случае сложных эфиров идентифицированы хлор-, бром- и фторзамещенные углеводороды. Содержание стеринов составляет - 2,85 (масс. % от элюата), среди которых существенно содержание: Disparlure (29,52); 17.a., 21.ß - 28,30 - Bisnorgopan (15,00), Stigmast-4-en-3-one (9,12); ß-Sitosterol-(8,42), Cholest-5-en-3-ol(3.ß.)-propanoat(10,20),7,8-Epoxylanostan-11-ol,3-acetoxy-(7,00), (масс. % от суммы стеринов), соответственно. В составе карбоновых кислот присутствуют: Benzoic acid, 4-formyl (66,7) (масс. % от суммы кислот), Hexadecanoic, Octadecanoic и 3-Jsopropyl-2-methoxy-5-methyl benzoic acid.
Альдегиды, кетоны и фенолы представлены по одному соединению: cis-9-Hexadecenal, Ethanon, 1-(5,6,7,8-tetrahydro-2,8.8-trimethyl-4H-cyclohepta[6]furan-5-yl; 2-methoxy-4-vinylphenol. В образовании спиртов участвовали как предельные: 1-Hexadecanol, Tridecanol-Z-ethyl-Z-methyl, 1-Heptatriacontrol, Octacosanol (от С1б до С37), так и непредельный углеводород, имеющий в цепи три двойные связи -9,12,15-Octaolecatrien-1-ol(ZZZ)-C18.
Характерной особенностью н-гексанового элюата является отсутствие в его составе гликозидов, что можно объяснить высокой силой сорбции последних на кремнеземе и неполярностью н-гексана; также низкая доля производных - фурана, пирана, алкалоидов. Алкалоиды представлены фрагментами: 2-mercaptobenzothiazol: Benzathiazol, Z-(methylthio), на которые приходится - 0,31 (масс. % от суммы стеринов).
Масс-спектры и структурные формулы соединений н-гексанового элюата даны на рис. 2.
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ. Электронное издание - 2021 - N 2
исй^^
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИИ. Электронное издание - 2021 - N 2
йсйр^
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ. Электронное издание - 2021 - N 2
исй^^
Рис. 2. Масс-спектры и структурные формулы соединений н-гексанового элюата
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ. Электронное издание - 2021 - N 2 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2021 - N 2
Особенность вещественного состава н-гексанового элюата, а именно, его обогащённость сложными эфирами, в образовании которых на 75% участвует фталевая кислота, что является специфической особенностью эфиров грецкого ореха+листья, а также 16,2% серосодержащих, янтарной, бензойной и щавелевой кислот, выделяющиеся в живом организме в свободном виде за счёт сложных биохимических и гидролитических процессов, их обогащенность бромом и фтором, позволяет сделать определенный вывод о их сложной роли в формировании специфичности фармакологического действия изученного элюата.
Определенный вклад в последнее несомненно вносят углеводороды, содержащие в качестве заместителей хлор, бром и фтор - важнейшие микроэлементы, играющие важную роль катализаторов и необходимы для нормального функционирования определённых ферментов, синтеза тиреоидных гормонов, работы физиологической антиоксидантной системы. Наличие данных микроэлементов в н-гексановом элюате было подтверждено методом рентгено-флуоресцентной спектрометрии.
Следует также учитывать роль стеринов, фенолов, спиртов, меркаптотиазолов, бензтиазолов - отдельных фрагментов специфических по физиологическому действию алкалоидов, несмотря на их невысокое содержание элюате, так как, по всей видимости, направление фармакологического действия растительных препаратов определяется всем комплексом соединений химического состава.
Выводы.
1. Впервые для детализации особенностей химического состава этанольного экстракта грецкого ореха+листьев использована колоночная адсорбционная жидкостная хроматография, позволившая получить ряд узких по составу элюатов.
2. Выполнены хромато-масс-спектрометрия и рентгенофлуоресцентный анализы элюата, в котором идентифицировано 107 индивидуальных соединений, получены их масс-спектры и структурные формулы, определено количественное содержание различных групп соединений. Основу н-гексанового элюата определяют сложные эфиры и углеводороды, при несущественном количестве стеринов, фенолов, спиртов, кетонов, отсутствуют гликозиды.
3. Направленность фармакологического действия н-гексанового элюата определяется сложными эфирами, углеводородами, а также микроэлементами (хлор, бром, фтор, кобальт, марганец, молибден, селен, сера), идентифицированных в составе элюата рентгено-флуоресцентной спектрометрией.
Литература
1. Аслонова И.Ж., Кароматов И.Д., Тураева Н.И. Химический состав грецкого ореха // Биология и интегративная медицина. 2019. № 10 (38). С. 77-83.
2. Дайронас Ж.В. Сравнительный анализ эфирного масла листьев ореха грецкого, ореха серого и ореха чёрного // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2015. № 7. С. 16-20.
3. Лежава Д.И., Стреляева А.В., Сологова С.С., Кузнецов Р.М. Фармакогностическое изучение коры грецкого ореха и настойки, полученной из коры грецкого ореха. В сборнике: Актуальные вопросы фармации, фармакологии и клинической фармакологии. Сборник материалов всероссийской научно-практической конференции, посвященной 20-летию фармацевтического фак-та ДГМУ. Махачкала, 2020. С. 101-108.
4. Литвиненко А.А., Дайронас Ж.В., Жилина О.М. Фармакогностическое исследование ореха грецкого цветков. В сборнике: Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Сборник научных трудов. Пятигорск, 2020. С. 67-73.
5. Литвиненко А.А., Мыкоц Л.П., Жилина О.М., Степанова Н.Н. Изучение адсорбционных свойств природных сорбентов, полученных из ореха грецкого (Juglans Regia l.). В сборнике: Беликовские чтения. Материалы VIII Всероссийской научно-практической конференции. Пятигорск: Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России, 2020. С. 223-230.
6. Малышева З.Г. Мелиоративная способность насаждений ореха грецкого и ореха черного аккумулировать тяжелые металлы в надземной фитомассе // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2015. № 106. С. 151-161.
7. Платонов В.В., Хадарцев А.А., Дунаева И.В., Сухих Г.Т., Волочаева М.В. Хромато-масс-спектрометрия этанольного экстракта зелёных грецких орехов и листьев (Iuglans regia L., семейство ореховые - Iuglandaceae) // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2020. № 4. Публикация 3-1. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/ Bulletin/E2020-4/3- 1.pdf (дата обращения: 22.07.2020). DOI: 10.24411/2075-4094-2020-16596
8. Стреляева А.В., Лежава Д.И., Луферов А.Н., Карташова Н.В., Кузнецов Р.М., Поддубиков А.В., Сидоров Н.Г. Стандартизация настойки матричной гомеопатической из плодов грецкого ореха в стадии молочно-восковой зрелости. В сборнике: Гомеопатический ежегодник - 2019. Сборник материалов XXIX научно-практической конференции. Москва, 2019. С. 209-211.
9. Чу Э., Де Вита-младший В. Химиотерапия злокачественных новообразований / Пер. с англ. М., «Практика», 2009. 445 с.
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ. Электронное издание - 2021 - N 2 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2021 - N 2
10. Naumova N.L., Kameneva K.S., Shevieva K.V. About the possibility of modifying the recipe of "fitness" buckwheat bread by using walnut flour // Современная наука и инновации. 2020. № 2 (30). С. 66-72.
References
1. Aslonova IZ, Karomatov ID, Turaeva NI. Himicheskij sostav greckogo oreha [Chemical composition of walnut]. Biologija i integrativnaja medicina. 2019;10(38):77-83. Russian.
2. Dajronas ZhV. Sravnitel'nyj analiz jefirnogo masla list'ev oreha greckogo, oreha serogo i oreha chjornogo [Comparative analysis of essential oil of walnut leaves, gray walnut and black walnut]. Voprosy biologicheskoj, medicinskoj i farmacevticheskoj himii. 2015;7:16-20. Russian.
3. Lezhava DI, Streljaeva AV, Sologova SS, Kuznecov RM. Farmakognosticheskoe izuchenie kory greckogo oreha i nastojki, poluchennoj iz kory greckogo oreha [Pharmacognostic study of walnut bark and tincture obtained from walnut bark]. V sbornike: Aktual'nye voprosy farmacii, farmakologii i klinicheskoj farmakologii. Sbornik materialov vserossijskoj nauchno-prakticheskoj konferencii, posvjashhennoj 20-letiju farmacevticheskogo fak-ta DGMU. Mahachkala; 2020. Russian.
4. Litvinenko AA, Dajronas ZhV, Zhilina OM. Farmakognosticheskoe issledovanie oreha greckogo cvetkov [Pharmacognostic study of walnut flowers]. V sbornike: Razrabotka, issledovanie i marketing novoj farmacevticheskoj produkcii. Sbornik nauchnyh trudov. Pjatigorsk; 2020. Russian.
5. Litvinenko AA, Mykoc LP, Zhilina OM, Stepanova NN. Izuchenie adsorbcionnyh svojstv prirodnyh sorbentov, poluchennyh iz oreha greckogo (Juglans Regia l.) [Study of the adsorption properties of natural sorbents obtained from walnut (Juglans Regia L.)]. V sbornike: Belikovskie chtenija. Materialy VIII Vserossijskoj nauchno-prakticheskoj konferencii. Pjatigorsk: Pjatigorskij mediko-farmacevticheskij institut -filial FGBOU VO VolgGMU Minzdrava Rossii; 2020. Russian.
6. Malysheva ZG. Meliorativnaja sposobnost' nasazhdenij oreha greckogo i oreha chernogo akkumulirovat' tjazhelye metally v nadzemnoj fitomasse [Meliorative ability of walnut and black walnut plantings to accumulate heavy metals in aboveground phytomass]. Politematicheskij setevoj jelektronnyj nauchnyj zhurnal Kubanskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2015;106:151-61. Russian.
7. Platonov VV, Hadarcev AA, Dunaeva IV, Suhih GT, Volochaeva MV. Hromato-mass-spektrometrija jetanol'nogo jekstrakta zeljonyh greckih orehov i list'ev (Iuglans regia L., semejstvo orehovye - Iuglandaceae) [Chromato-mass spectrometry of ethanol extract of green walnuts and leaves (Iuglans regia L., nut family-Iuglandaceae)]. Vestnik novyh medicinskih tehnologij. Jelektronnoe izdanie. 2020 [cited 2020 Jul 22];4 [about 22 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/ Bulletin/E2020-4/3-1.pdf. DOI: 10.24411/2075-4094-2020-16596
8. Streljaeva AV, Lezhava DI, Luferov AN, Kartashova NV, Kuznecov RM, Poddubikov AV, Sidorov NG. Standartizacija nastojki matrichnoj gomeopaticheskoj iz plodov greckogo oreha v stadii molochno-voskovoj zrelosti [Standardization of matrix homeopathic tincture from walnut fruits at the stage of milk-wax maturity]. V sbornike: Gomeopaticheskij ezhegodnik - 2019. Sbornik materialov XXIX nauchno-prakticheskoj konferencii. Moscow; 2019. Russian.
9. Chu Je, De Vita-mladshij V. Himioterapija zlokachestvennyh novoobrazovanij [Chemotherapy of malignant tumors]. Per. s angl. Moscow; «Praktika»; 2009. Russian.
10. Naumova NL, Kameneva KS, Shevieva KV. About the possibility of modifying the recipe of "fitness" buckwheat bread by using walnut flour. Sovremennaja nauka i innovacii. 2020;2(30):66-72.
Библиографическая ссылка:
Платонов В.В., Хадарцев А.А., Волочаева М.В., Датиева Ф.С., Дунаева И.В. Адсорбционная жидкостная хроматография н-гексанового элюата этанольного экстракта зелёного грецкого ореха и его листьев (Juglas Regia L., семейство ореховые - Juglandaceae) (сообщение I) // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2021. №2. Публикация 3-3. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2021-2/3-3.pdf (дата обращения: 13.04.2021). DOI: 10.24412/2075-4094-2021-2-3-3* Bibliographic reference:
Platonov VV, Khadartsev AA, Volochaeva MV, Datieva FS, Dunaeva IV. Adsorbcionnaja zhidkostnaja hromatografja n-geksanovogo jeljuata jetanol'nogo jekstrakta zeljonogo greckogo oreha i ego list'ev (Juglas Regia L., semejstvo orehovye -Juglandaceae) (soobshhenie I) [Adsorption liquid chromatography of n-hexane eluate of ethanol extract of green walnut and its leaves (Juglas Regia L., Nut Family - Juglandaceae) (Report I)]. Journal of New Medical Technologies, e-edition. 2021 [cited 2021 Apr 13];2 [about 19 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2021-2/3-3.pdf. DOI: 10.24412/2075 -4094-2021-2-3-3
* номера страниц смотреть после выхода полной версии журнала: URL: http://medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2021-2/e2021-2.pdf
