CC BY
11
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
Результаты анализа биологического микро-чипирования был подтвержден путем исследований химерного онкогена t(9;22) BCR/ABL p190 в ПЦР. При этом результаты тестирования контрольных и диагностических образцов показали полное совпадение. Все остальные образцы, возможно, содержали другие соматические мутации, которые возможно идентифицировать с помощью других молекулярных методов (ПЦР, FISH иммунофенотипирование, секвенирование и т.д.), что подтверждает гетерогенность соматических мутаций опухолевых клеток при ОЛ.
Выводы. Применение технологии биологического микрочипа с использованием набора «ЛК-биочип» является наиболее высокопродуктивной технологией исследования специфических химерных онкогенов опухолевых кроветворных клеток, заметно сокращающей время анализа, по сравнению с другими методами, снижающей его себестоимость, и, самое главное, позволяющей одномоментно анализировать не менее 13 «горячих» химерных онкогенов у больных острыми лейкозами.
Х.Я. Каримов, Б. Р. Алланазарова, Ю. Ю. Ассесорова, Н. Р. Латипова, К. Т. Бобоев
Научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Министерства здравоохранения Республики Узбекистан, г. Ташкент.
ЗНАЧЕНИЕ КЛАССИЧЕСКОГО ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА В СЛУЧАЕ ОСТРОГО ЛИМФОБЛАСТНОГО ЛЕЙКОЗА С ПЕРВИЧНО-РЕЗИСТЕНТНЫМ ТЕЧЕНИЕМ ЗАБОЛЕВАНИЯ
Введение. Генетический анализ бластных клеток с использованием ОТО-бэндинга хромосом является важным методом исследования, поскольку позволяет оценивать состояние всего кариотипа и выявлять количественные и структурные хромосомные изменения, возникающие при острых лейкозах. Особое значение стандартный цитогенетический метод исследования имеет для идентификации редких реаранжировок, а также спонтанных перестроек с неизвестными локусами разрывов хромосом, являющихся следствием нестабильности генома, способных определять вариант течения заболевания. В настоящей работе мы продемонстрировали возможности цитоге-нетического исследования с использованием метода ОТО-бэндинга для оценки кариотипа больной с ОЛЛ, у которой была выявлена новая, клональная, не описанная ранее транслокация с участием 2-й и 22-й хромосом.
Материалы и методы. Исследование кариотипа больной с диагнозом острый лимфобласт-ный лейкоз, было выполнено стандартным цитогенетическим анализом с использованием метода ОТО-бэндинга. Биологическим материалом для цитогенетического исследования был костный мозг (2,0 мл), полученный при стернальной пункции до начала проведения курса полихимиотерапии по протоколу Нурег-Суаё Блок А. Дифференцированная сегментация хромосом составляла 350 бэндов на кариотип.
Всего было проанализировано 30 метафазных пластинок.
Результаты. Диагноз острый лимфобласт-ный лейкоз был установлен на основании данных гемограммы, миелограммы и цитохимического исследования. У больной отмечалось первично-резистентное течение заболевания с тяжелым состоянием, прогрессией и летальным исходом через полтора месяца после постановки диагноза.
Стандартный цитогенетический анализ показал, что 100 % бластных клеток пациентки содержали дериваты хромосом 2 и 22. В деривате хромосомы 22 в области длинного плеча был обнаружен добавочный фрагмент с тем-ноокрашенными бэндами. Локус соединения добавочного фрагмента с хромосомой 22 находился в регионе 22q13. Дериват хромосомы 2 характеризовался утратой концевого фрагмента р-плеча и появлением в данном регионе более короткого и светлоокрашенного терминального участка. Локус разрыва на хромосоме 2 идентифицировался в области р22. Таким образом, у больной ОЛЛ методом ОТО-бендинга была установлена новая, не описанная ранее, хромосомная реаранжировка — "Ъ(2;22)(р22; q13). Изначально тяжелое течение и первично-резистентная форма заболевания, а также ранняя смерть больной, возможно, свидетельствуют о неблагоприятном прогностическом значении данной транслокации.
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
Выводы. Стандартный цитогенетический анализ не утратил своей актуальности при исследовании больных с острыми лейкозами, поскольку позволяет выявлять не только маркерные и рекуррентные аномалии хромосом, но также и редкие реаранжировки, возможно, связанные с вариантом течения заболевания. Кроме того, цитогенетическое исследование
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
на основе вТв-бэндинга позволяет идентифицировать хромосомные локусы разрывов, сужая дальнейший поиск молекулярных маркеров патологии, которые могут стать новыми прогностическими факторами и расширить современные представления о механизмах патогенеза острых лейкозов.
Х.Я. Каримов, Н. С. Пулатова
Научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Министерства здравоохранения Республики Узбекистан, г. Ташкент.
РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА RS1042522 ГЕНАСУПРЕССОРА ОПУХОЛЕВОГО РОСТА TP53 В ОНКОГЕНЕЗЕ ОМЛ
Введение. Известно, что в основе формирования бластных клеток при гемобластозах лежат соматические мутации, возникающие в одной из гемопоэтических стволовых клеток костного мозга. Формирование гемобластозов, также как и возникновение любого другого опухолевого заболевания, является результатом взаимодействия множества генов, среди которых одна из главных ролей традиционно отводится онкогенам и генам-супрессорам опухолевого роста.
Цель. Анализ роли полиморфизма rs1042522 гена TP53 в формировании мутантного клона у пациентов с острым миелобластным лейкозом (ОМЛ).
Материалы и методы. Нами обследован 41 больной с диагнозом ОМЛ (основная группа) и 43 условно здоровые доноры (контрольная группа). ДНК выделяли из периферической крови с использованием набора Рибо-сорб (AmpliSens®, Россия). Тестирование полиморфизма rs1042522 гена TP53 проводили путем стандартной полимеразной цепной реакции на термоциклере CG-1-96 «Corbett Research» (Австралия), с использованием наборов НПО «Литех», согласно инструкции производителя. Статистический анализ результатов проведен с использованием пакета статистических программ «OpenEpi 2009, Version 2.3».
Результаты. Частоты встречаемости Arg и Pro аллелей полиморфизма rs1042522 гена TP53 в исследованных основной и контрольной группах составили 73.2 % и 26.8 % против 75.6 % и 24.4 %, соответственно. Различия по мутантному аллелю в этих группах были статистически незначимыми (х2 = 0.1; р=0.6). Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов, риск развития ОМЛ у носителей данного аллеля статистически недостоверно повышен почти в 1.1 раза (OR = 1.1; 95 %CI 0.56-2.2). Распределение генотипов было следующим: дикий гомозиготный вариант Arg/ Arg незначимо превалировал в группе условно здоровых доноров по сравнению с группой пациентов (55.8 % против 51.2 % соответственно; р>0.05). При этом неблагоприятные гетеро-и гомозиготные генотипы чаще встречались среди больных, по сравнению с группой контроля (43.9 % и 4.9 % против 39.5 % и 4.6 %, соответственно; р>0.05 и х2<3.9). Полученные предварительные данные свидетельствуют о недостоверной ассоциации полиморфизма rs1042522 гена TP53 с развитием ОМЛ.
Выводы. Влияние полиморфизма rs1042522 гена TP53 на формирование мутантного клона у пациентов оказалось незначительным, соответственно, данный локус является малоэффективным самостоятельным классификатором для маркировки развития ОМЛ.
