Научная статья на тему 'ЖИДКОСТНАЯ БИОПСИЯ ПРИ РАКЕ ПРОСТАТЫ ПОСРЕДСТВОМ ВЫДЕЛЕНИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ИЗ КРОВИ, МОЧИ И СПЕРМЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ МИКРОФЛЮИДНОГО ЧИПА. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ'

ЖИДКОСТНАЯ БИОПСИЯ ПРИ РАКЕ ПРОСТАТЫ ПОСРЕДСТВОМ ВЫДЕЛЕНИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ИЗ КРОВИ, МОЧИ И СПЕРМЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ МИКРОФЛЮИДНОГО ЧИПА. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
46
9
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — А.С. Ржевский, А.Ю. Капитанникова, Т.А. Карашаева, Д.В. Бутнару, А.В. Звягин

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «ЖИДКОСТНАЯ БИОПСИЯ ПРИ РАКЕ ПРОСТАТЫ ПОСРЕДСТВОМ ВЫДЕЛЕНИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ИЗ КРОВИ, МОЧИ И СПЕРМЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ МИКРОФЛЮИДНОГО ЧИПА. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ»

российский \ж w» ш а онкологический Y У \ж I конгресс-2022 /\/\ v i

Онкоурология

Глисона, группы риска, гистопатологические характеристики, методы проведенного лечения. Определение генотипов изученных полиморфных локусов гена PTEN проводилось с применением метода аллельной дискриминации и технологии TaqMan.

Результаты: Проведенный сравнительный анализ выборки пациентов с РП и контрольной группы здоровых индивидов для жителей Республики Башкортостан показал, что в основной группе с III и IV стадиями заболевания статистически значимо чаще встречается генотип rs2735343*CG гена PTEN по сравнению с контрольной выборкой, данный генотип является рисковым в отношении развития РП тяжелого течения (p = 0,002, OR = 2,05, 52 % CI = 1,31-3,22), в то время как генотип rs2735343*GG является протективным в отношении развития заболевания тяжелого течения (p = 0,004, OR = 0,51, 52% CI = 0,320,81). Пациенты с РП были разделены по группам риска в соответствии с классификацией D'Amico. Среди пациентов группы высокого риска РП выявлено носительство генотипа rs2735343*CG гена PTEN (х2 = 6,78; p = 0,008; OR = 3,36; CI = 1,27-4,38), что может являться маркером повышенного риска развития РП, тогда как гомозиготный генотип rs2735343*GG гена PTEN (х2 = 6,9; p = 0,006; OR = 0,41; CI = 0,22-0,77) может быть протективным маркером в отношении развития РП.

Заключение: Данное исследование проведено с целью изучения влияния полиморфных вариантов гена PTEN на риск развития РП в качестве факторов прогноза течения заболевания. Представление о молекулярно-генети-ческих маркерах позволят врачу индивидуализировать лечение в соответствии с генетическими характеристиками каждого отдельного пациента. Полученные нами данные расширяют знания о генетических основах предрасположенности к РП.

АССОЦИАЦИИ ОПТИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ РЕЦИДИВА И ПРОГРЕССИИ НЕМЫШЕЧНО-ИНВАЗИВНОГО РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ

В.Н. Павлов, Р.Ф. Гильманова, М.Ф. Урманцев Место работы: ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа, Россия Эл. почта: margaritagilmanova@mail.ru

Актуальность: Разработка новых и усовершенствование существующих методов и технологий диагностики рака мочевого пузыря является одним из приоритетных направлений современной урологии. Улучшение методов диагностики позволяет раньше начать эффективное лечение, снизить частоту рецидивов. Рамановская спектроскопия — это метод, позволяющий с высокой специфичностью исследовать ткани на молекулярном уровне во время патологической трансформации. Цель исследования: оценка

перспективности использования молекулярных оптических маркеров в определении прогрессии и рецидива не-мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря. Материалы и методы: Был изучен материал, полученный у 150 пациентов с диагнозом рак мочевого пузыря. У 18 пациентов на фоне лечения (внутрипузырной БЦЖ-терапии) был выявлен рецидив и прогрессия опухоли. Исследование образцов проводилось на аппарате Horiba Scientific. Конфигурация: длина волны 785 нм. Анализ спектральных данных проводился с использованием программного обеспечения Spectragryph.

Результаты: Прогрессия и рецидив немышечно-инвазив-ного рака мочевого пузыря характеризуются выявлением пиков, характерных для гипоксантина (1328 см — 1), дез-оксирибозы (1455 см — 1), триптофана (1558 см — 1), оснований ДНК (725 см — 1), низкой интенсивности пиков, характерных для коллагена (729 см — 1), комплексов жирных кислот (1100 см — 1).

Заключение: В мониторинге пациентов с немышечно-ин-вазивным раком мочевого пузыря раман-спектроскопия является перспективным методом раннего выявления рецидива и прогрессии заболевания.

ЖИДКОСТНАЯ БИОПСИЯ ПРИ РАКЕ ПРОСТАТЫ ПОСРЕДСТВОМ ВЫДЕЛЕНИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ИЗ КРОВИ, МОЧИ И СПЕРМЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ МИКРОФЛЮИДНОГО ЧИПА. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

А.С. Ржевский, А.Ю. Капитанникова, Т.А. Карашаева, Д.В. Бутнару, А.В. Звягин

Место работы: Институт молекулярной тераностики, Сеченовский Университет, Москва, Россия; Институт урологии и репродуктивного здоровья человека, Сеченовский Университет, Москва, Россия Эл. почта: rzhevskiy_a_s@staff.sechenov.ru

Цель: Целью данного исследования являлась оценка таких биологических жидкостей, как моча, кровь и сперма, в качестве источника циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в рамках сравнительного анализа с использованием микрофлюидной методики выделения клеток у пациентов с локализованным раком предстательной железы (РПЖ). Материалы и методы: Для выделения опухолевых клеток из предварительно обработанных образцов мочи, крови и спермы был применен микрофлюидный чип, посредством которого каждая из биологических жидкостей пропускалась с помощью шприцевого насоса через спиральный микроканал с последующим разделением на таргетную фракцию, содержащую преимущественно опухолевые клетки и подвергающуюся дальнейшему анализу, и мусорную фракцию, по большей части состоящую из здоровых клеток. В ходе исследования были задействованы

ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии

том / vol. 12 № 3s1 • 2022

MALIGNANT TUMOURS

Russian Society of Clinical Oncology

ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ

Онкоурология

клеточные линии рака простаты — DU-145, PC3, LNCaP. Опухолевыми клетками каждой линии в количестве, ориентировочно составляющем 1000, были обогащены здоровые образцы мочи, спермы и крови, отобранные в объеме 20 мл, 2-3 мл и 7,5 мл соответственно. Клинические образцы трех биологических жидкостей были получены от 13 пациентов с подтвержденным диагнозом локализованного рака простаты в объеме, равном объему образцов от здоровых доноров. Суспензии клеток таргетных фракций, полученных после обработки через микрофлюидный чип обогащенных здоровых образцов и образцов пациентов, фиксировали 4% раствором формальдегида и наносили на предметные стекла. На предметных стеклах осажденные клетки были помечены двумя панелями антител: anti-PSMA, anti-CK и anti-GPC-1-для образцов мочи и спермы, и anti-PSMA, anti-CK и anti-CD45-для образцов крови. После проведения иммуноцитохимического окрашивания предметные стекла анализировали с использованием конфокального микроскопа. На основе полученных изображений подсчитывался процент выделенных опухолевых клеток от их первоначального количества для обогащенных здоровых образцов каждой их трех биологических жидкостей и оценивалась прогностическая значимость и клиническая применимость каждой их трех биологических жидкостей, исходя из корреляций между количеством выделенных ЦОК.

Результаты: Выделение опухолевых клеток из предварительно обогащенных здоровых образцов трех биологических жидкостей с использованием микрофлюидного чипа показало следующие результаты: 1) в случае крови удалось выделить 82 (± 7) % клеток линии DU-145, 78 (± 4) % клеток линии PC3 и 83 (± 3) % клеток линии LNCaP; 2) в случае мочи удалось выделить 80 (± 3) % клеток линии DU-145, 85 (± 6) % клеток линии PC3 и 85 (± 5) % клеток линии LNCaP; 3) в случае спермы удалось выделить 84 (± 4) % клеток линии DU-145, 82 (± 7) % клеток линии PC3 и 81 (± 6) % клеток линии LNCaP. Сравнительный анализ мочи, крови и спермы, полученных от пациентов с локализованным раком простаты, в качестве источника циркулирующих опухолевых клеток, показал, что ЦОК (PSMA, CK, CD45-) были обнаружены в образцах спермы у 13 / 13 (100 %) пациентов, в образцах мочи у 12/ 13 (92,3 %) пациентов и в образцах крови у 3/ 13 (23,1%) пациентов. При этом общее количество выделенных клеток для спермы варьировало от 49-810 единиц, для мочи — от 0-107 единиц и для крови — 0-6 единиц. В сравнительном анализе непосредственно мочи и спермы, ЦОК (PSMA, CK, GPC-1) были обнаружены в образцах спермы у 13 /13 (100%) пациентов и в образцах мочи у 10 /13 (76,9 %) пациентов, при этом для спермы общее количество выделенных ЦОК варьировало от 17-560 единиц, для мочи — от 0-85 единиц. Заключение: В данном исследовании было проведено прямое сравнение трех биологических жидкостей — мочи, крови и спермы, полученных от пациентов с неметастатическим раком простаты — с точки зрения эффективности выделения из них опухолевых клеток с использованием

микрофлюидного чипа в рамках жидкостной биопсии. Согласно результатам исследования, лишь незначительное количество ЦОК было выделено из образцов крови пациентов с локализованным РПЖ, в то время как результаты выделения ЦОК из мочи оказались более многообещающими в сравнении с образцами крови. И, наконец, выделение ЦОК из образцов спермы показало лучшие результаты, с детекцией клеток у 13/ 13 (100%) пациентов в случае использования как первой (ап^-РБМА, ап^-СК, агШ-СР45), так и второй (агШ-РБМА, агШ-СК, апИ-СРС-1) панели антител.

ВЗАИМОСВЯЗЬ ОДНОНУКЛЕОТИДНОГО ПОЛИМОРФИЗМА 3^/С ГЕНА СУРВИВИНА С РИСКОМ ВОЗНИКНОВЕНИЯ РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ

Д.В. Черняев1,2, Р.А. Зуков1,2, Е.В. Слепов2, Е.Е. Башмакова3, Л.А. Франк3,4, А.Р. Черняева1, М.С. Сербаева1,2 Место работы: 1. ФГБОУ ВО КрасГМУ им. проф. В. Ф. Войно-Ясе-нецкого, Красноярск, Россия; 2. КГБУЗ КККОД им. А. И. Крыжа-новского, Красноярск, Россия; 3. ФГБУН Институт биофизики СО РАН, ФИЦ КНЦ СО РАН, Красноярск, Россия; 4. ФГБАОУ ВО Сибирский федеральный университет, Красноярск, Россия Эл. почта: denisonco@mail.ru

Цель: Изучить корреляционную связь однонуклеотид-ного полиморфизма 31G / С (rs9904341) в промоторной области гена белка сурвивина с риском возникновения рака мочевого пузыря.

Материалы и методы: В исследовании приняли участие 158 больных с доказанным РМП, из них 30 женщин и 128 мужчин (средний возраст 65,6 ± 10,7, медиана: 66,5; С25 — С75:59-72). У всех участников производился однократный забор 2 мл венозной крови с последующим выделением ДНК и определением аллельного состава исследуемого гена. Группа контроля состояла из 117 здоровых доноров без признаков РМП, а именно 27 женщин и 90 мужчин, средний возраст 60,2 ± 5,1 (медиана: 60; С25 — С75: 57-63,25). Аллельный состав определяли разработанным ранее институтом биофизики (СО РАН, ФИЦ КНЦ СО РАН, Красноярск) биолюминесцентным способом. Контрольным образцом являлся материал с генотипом GC, подтвержденный секвенированием по Сэнгеру (ЦКП Геномика, Новосибирск, Россия). Полученные в ходе исследования данные обрабатывались программным обеспечением Microsoft Excel для Windows 10 и STATISTICA 12 (Statsoft, Россия). Для сравнения количественных данных применяли U-тест Манна-Уитни. Выборка участников находилась в равновесии Харди-Вайнберга (p > 0,05). Критерий х2 Пирсона использовали для сравнения частот вариантов гена среди случаев РМП и контрольных образцов. Ассоциация между вариантами rs9904341 и РМП оценивалась по отношению

ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии

том / vol. 12 № 3s1 • 2022

MALIGNANT TUMOURS

Russian Society of Clinical Oncology

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.