CC BY
4
Выводы. Таким образом, разработанный импеди-метрический метод позволил оценить антимикробную активность стоматологических материалов. Показано, что исследованные стоматологические материалы обладали выраженным антимикробным действием в концентрации 0,081 г/мл на следующие тест-культуры: Streptococcus oralis, Streptococcus mitis, Clostridium acetobutiri-cum, Candida albicans. Характер антимикробного действия стоматологических материалов в концентрации 0,081 г/мл для бактериальных культур и дрожжевых грибов является бактериостатическим.
Литература
1. Дудчик Н. В., Мельникова Л. А. // Материалы Международной конф. "Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии". 26-28 мая 2004 г., Минск. - С. 199-201.
2. Ferreira CI. М. К., Bonifatio С., Froner I. Сг. // Braz. Dent. J. - 1999. - Vol. 10, N 1. - P. 245-248.
3. Hao Yu-qing, Zhou Xue-dong, Xiao Xiao-rong et al. // Chin. Med. J. - 2005. - Vol. 118, N 2. - P. 155-160.
4. Lai С. С., Huang F. M., Yang H. W. et al. // Clin. Oral Invest. - 2001. - Vol. 5, N 4. - P. 236-239.
5. Yesilsoy C., IVhitaker E., Cleveland D. et al. // J. Endo-don. - 1995. - Vol. 21. - P. 513-515.
Поступила 12.07.06
Summary. The authors propose a procedure to determine the antimicrobial activity of dental materials, by applying the principles of impedance technology. The procedure is based on the determination of the growth inhibition of test culture microorganisms by the study materials. The following parameters: the type of a test; the parameters of measurement; the qualitative and quantitative composition of culture media; the working cell concentration in the inoculum; the temperature and time of a test, were optimized.
О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2038 УДК 614.777:579.842.141-078
С. В. Головина, О. П. Панасовец, В. В. Алешня, П. В. Журавлев, А. А. Сибилева, О. Л. Ковалевская ЖИДКАЯ СРЕДА НАКОПЛЕНИЯ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛ ИЗ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ
Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону; Центр гигиены и эпидемиологии в Азове и Азовском районе
Основным критерием опасности биологического загрязнения водоемов и питьевой воды является возникновение острых кишечных инфекций (ОКИ) среди населения, пользующегося недоброкачественной питьевой водой. В последние годы, по данным отечественных и зарубежных авторов, отмечается тенденция к увеличению числа водных вспышек ОКИ [5, 6, 8, 9].
Исследования последних лет свидетельствуют об ухудшении качества воды открытых водоемов, что связано не только с антропогенным воздействием на водоемы, но и с неблагоприятным действием донных отложений, аккумулирующих биогенные и токсические компоненты, которые могут служить источником вторичного загрязнения водных объектов. При воздействии неблагоприятных факторов водной среды гибели патогенных эн-теробактерий может предшествовать сублетальное повреждение микробных клеток, проявляющееся во временной утрате их способности к росту на питательных средах, обычно используемых в рутинном бактериологическом исследовании, что может быть причиной ошибочного заключения об отсутствии сальмонелл в исследуемых биоптатах [1, 7].
В настоящее время для выделения сальмонелл из водных объектов в практике здравоохранения РФ в основном используют селенитовую, магниевую и тетратионат-ную среды [4]. Недостатком упомянутых выше сред является то, что наряду с угнетением сопутствующей микрофлоры ингибиторами, входящими в их состав, происходит подавление роста некоторых сероваров сальмонелл, тем самым снижается достоверность санитарно-эпидемиологической оценки водоисточника [2, 3].
Все это предопределяет необходимость разработки более эффективных сред обогащения для выделения сальмонелл из водной среды, которые позволят получать объективную информацию о количественном содержании их в исследуемом объекте.
В связи с изложенным выше нами была разработана среда обогащения, содержащая в качестве питательной основы экстракт кормовых дрожжей и минеральные соли. Для ингибиции сопутствующей микрофлоры введены бриллиантовый зеленый и кристаллический фиолетовый красители. Средами сравнения явились селенитовая и магниевая.
В процессе разработки среды были использованы: Salmonella typhi N 1196, Salmonella typhimurium N 9640,
Salmonella paratyphi В N 8006 (получены из коллекции музея живых культур ГИСК им. JI. А. Тарасевича), Salmonella enteritidis, Salmonella anatum, Salmonella typhimurium, Streptococcus faecalis, Esherichia coli, Klebsiella pneumoniae (выделены из воды водоема, имеют типичные морфологические культуральные, биохимические и серологические свойства).
Оценку ростовых свойств сред проводили по следующим критериям: чувствительность и показатель эффективности накопления. Полученные экспериментальные данные свидетельствуют о том, что опытная среда являлась более чувствительной, чем магниевая и селенитовая среды. Рост тест-штаммов на ней наблюдался вплоть до разведения 10~s (за исключением S. typhi N 1196, рост которой зарегистрирован до 10~6 и S. enetritidis — до Ю-7), в то время как на магниевой среде рост S. typhi N 1196 и S. enteritidis в изучаемых разведениях отсутствовал, a S. paratyphi В N 8006 росла в разведении 10~7. На селективной среде рост тест-штаммов регистрировался в разведении 10~7, а рост S. typhimurium N 9640 — лишь в 10"6 (таблица).
Изучение эффективности сравниваемых сред выявило, что накопление тест-штаммов на опытной среде больше, чем магниевой: S. enteritidis в 104 раз, S. paratyphi В N 8006 в 103 раз, S. typhimurium N 9640, S. typhimurium и S. anatum в 10 раз. Что касается селенитовой среды, то
Сравнение чувствительности сред накопления для выделения сальмонелл в эксперименте
Тест-штамм Опытная да cpc- Магниевая среда Селенитовая среда
разведения
I0"6 10" 10"s О"6 ю-' 10-" О"6 10"' 10"8
S. typhi N 1196 + + + -
S. paratyphi В N 8006 + + + + + - + + -
S. typhimurium N 9640 + + + + + + + - -
S. typhimurium + + + + + + + + -
S. enteritidis + + - - - - + + -
S. anatum + + + + + + + +
Примечание. — отсутствие роста.
77
Iii 2008
120-1 100-80-60-40 20-I
Зима Весна Лето Осень
опытная среда 13 магниевая среда □ селенитовая среда
Частота выделения сальмонелл по сезонам года из воды р. Дон с использованием различных накопительных сред.
По оси ординат — процент проб воды, в которых были обнаружены сальмонеллы.
по эффективности накопления сальмонелл она уступает не только опытной, но и магниевой среде. Данные, полученные в экспериментальных условиях, свидетельствуют, что опытная среда по чувствительности и эффективности накопления превосходит среды сравнения и соответствует требованиям, предъявляемым к средам накопления.
Была изучена возможность практического применения разработанной среды накопления для выделения сальмонелл из водных объектов разной степени биологического загрязнения. Исследована вода р. Дон из пяти биотопов, расположенных в черте Ростова-на-Дону, и трех биотопов Азова, а также хозяйственно-бытовые стоки городов Ростова-на-Дону и Азова. Количественное определение сальмонелл проводили в двух параллельных рядах в объемах 100, 10, 1, 0,1 мл и т. д. в зависимости от степени бактериального загрязнения исследуемой воды.
В натуральных условиях исследована 71 проба воды р. Дон. При этом с применением опытной среды сальмонеллы были обнаружены в 93,1% проб, тогда как при использовании магниевой среды — в 69,0%, а селенитовой — в 41,0% со средними индексами 674,0 ± 122,6 КОЕ/л, 35,6 ± 7,4 КОЕ/л и 12,9 ± 3,4 КОЕ/л соответственно. Различия количественного содержания сальмонелл в 1 л при использовании опытной и магниевой, опытной и селенитовой сред существенны и статистически достоверны (р < 0,001).
На изучаемом участке водоема с помощью опытной среды выделено 284 культуры 53 сероваров. Преобладали сальмонеллы, относящиеся к серологической группе В — 67,6%, С - 14,1%. Е - 12,3%, D - 5,9%. Чаще других выделены S. derby, S. heidelberg, S. brandenburg, S. typh-imurium. С использованием магниевой среды выделено всего 76 культур 26 сероваров. Преобладала группа В — 71,1%, С - 21,1%, Е - 6,6%, D - 1,4%. Наиболее часто встречались S. derby, S. heidelberg, S. abortus ovis. С применением селенитовой среды выделена 21 культура 11 сероваров (группа В - 75%, D - 10%, Е - 10%, С - 5%). Чаще всего при помощи данной среды были выделены S. derby, S. kimuenza, S. typhimurium.
На рисунке показана частота выделения сальмонелл по сезонам года при исследовании воды р. Дон с помощью разных сред накопления. Наиболее высокий процент положительных проб (исключая селенитовую среду) был в летне-осенний, а наименьший — в зимний пе-
риод. Наибольший процент находок отмечен с применением опытной среды — 100% в летний период, 93,3% — в осенний, 88,9 и 83,3% в весений и зимний периоды соответственно.
Было исследовано 37 проб хозяйственно-бытовых сточных вод городов Ростова-на-Дону и Азова на разных этапах очистки.
В сточных водах, отобранных до очистки, сальмонеллы были обнаружены в 100% проб с использованием опытной среды в количестве от 500 до 29 000 клеток на 1 л (мкл/л). Выделено 24 серовара, из которых наиболее часто встречались S. derby, S. essen, S. heidelberg, S. typhimurium. С помощью магниевой среды также в 100% исследованных проб обнаружены сальмонеллы 13 сероваров в количестве от 23 до 240 мкл/л с преобладанием S. derby, S. essen, S. brandenburg. С применением селенитовой среды в 66,7% проб в количестве от 6 до 13 мкл/л обнаружены сальмонеллы 2 сероваров — S. heidelberg и S. brandenburg.
В сточных водах, прошедших механическую и биологическую очистку и обеззараживание, в 66,7% исследуемых проб с помощью опытной среды были обнаружены сальмонеллы 16 сероваров в количестве от 63 до 900 мкл/ л, преобладали S. derby, S. essen, S. brandenburg. При использовании магниевой среды в 55,6% проб выделены 8 сероваров в количестве от 23 до 62 мкл/л, превалировали -S. typhimurium, S. brandenburg, S. heidelberg. С использованием селенитовой среды сальмонеллы не были обнаружены.
Таким образом, результаты экспериментальных и натурных исследований свидетельствуют о том, что опытная среда накопления более чувствительна и эффективна, чем среды, применяемые в практике здравоохранения, и может быть использована при санитарно-эпидемиологической оценке водных объектов разной степени биологического загрязнения.
Литература
1. ГинсбургА. Л., Романова Ю. М., Алексеева Н. В. и др. // Журн. микробиол. - 1999. - № 6. - С. 3-8.
2. Захарова H. Е., Суханова С. М., Беляева Г. А. // Журн. микробиол. - 2004. - № 5. - С. 101-103.
3. Калина Г. П. Сальмонеллы в окружающей среде. — М., 1978.
4. МУК 4.2.1884-04, Санитарно-микробиологический и санитарно-паразитологический анализ воды поверхностных водных объектов. — М., 2005.
5. Онищенко Г. Г. // Гиг. и сан. - 2003. -Nsl.-C.4-10.
6. Онищенко Г. Г. // Гиг. и сан. - 2003. - № 6. - С. 3-4.
7. Павлова И. Б., Зуев В. С. // Журн. микробиол. — ' 2004. - № 5. - С. 16-19.
8. Grover P. S., Thakur // J. Commun. Dis. — 2001. — Vol. 33, N 1. - P. 44-52.
9. Puyment P., Berte A., Prévost V. et al. // Can. J. Microbiol. - 2000. - Vol. 46, N 6. - P. 565-576.
Поступила 07.08.06
Summary. The paper presents the data of experimental and field studies into the efficiency of Salmonella isolation from differently bacterial-contaminated water, by employing 3 storage media. It shows the benefits of using the test medium versus the storage (magnesium and selenite) media commonly applied by practical laboratories. The content of Salmonella in the biotopes of varying biological contamination is shown.
ГИГИЕНА И САНИТАРИЯ
78
