CC BY
10
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
которых находятся на поверхности клеток донорского костного мозга.
Цель. Исследование возможной связи сочетаний полиморфных аллелей генов CCR5-delta 32, CCR2-64I, SDF1-3>A, IL-6~<572 C/G в парах реципиент/донор с общей выживаемостью, временем восстановления гемопоэза, риском возникновения РТПХ и инфекционными осложнениями у пациентов после ТКМ.
Материалы и методы. В исследование включены 43 пациента НМИЦ гематологии в возрасте от 18 до 64 лет (медиана 32 года), 13 мужчин и 30 женщин, после аллогенной ТКМ. Распределение по диагнозам следующее: 26 человек с ОМЛ, 9 человек с ОЛЛ, 3 — с апластической анемией, 2 — с МДС, 2- с ХМЛ и 1 — с ХЛЛ. Образцы ДНК, выделенной из крови доноров и реципиентов до ТКМ, проанализировали на наличие полиморфных аллелей CCR5-delta 32(rs333), CCR2-64I(rs1799864), SDF1-3>A(rs1801157), IL6-572 C/G (rs1800796). Аллель-специфичную ПЦР проводили с праймерами и флюоресцентными пробами TaqMan собственного дизайна. Результаты генетического анализа были сопоставлены с клиническими данными. Для статистического анализа использовали лицензионное программное обеспечение SAS.
Результаты. По каждому исследуемому полиморфному аллелю когорта пациентов была разделена на 4 группы: 1 — нет мутантных аллелей у донора и реципиента; 2 — одинако-
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
вое количество мутантных аллелей у донора и реципиента; 3 — у донора меньше мутантных аллелей, чем у реципиента (0 уб 1, 0 уб 2, 1 уб 2); 4 — у донора больше мутантных аллелей, чем у реципиента. Группы сбалансированы по возрасту, полу, диагнозу, стадии заболевания и источнику трансплантата. Для полиморфных аллелей ССЯ5-ёеН:а 32, SDF1-3>A, ^-6~<572 С/0 не было найдено связи с общей выживаемостью, временем реконституции, риском развития РТПХ и инфекционными осложнениями до 30 дня после ТКМ. Однако для группы пациентов, в которой у донора было больше мутантных аллелей гена ССЯ2-641, чем у реципиента, восстановление гемопоэза происходило медленнее, чем в остальных группах (р<0.0001). Для этой же группы была выявлена повышенная частота инфекционных событий с 30 по 120 день после трансплантации (р<0,0016): 91 % (10 из 11 пациентов) против 22-50 % (среднее 25 %, 8 из 32 пациентов в остальных группах).
Выводы. Сниженные темпы восстановления гемопоэза и повышенная частота инфекционных осложнений у реципиентов после ТКМ могут быть связаны с приобретенными при трансплантации полиморфными аллелями гена ССЯ2. Исследование несовпадения полиморфных аллелей генов цитокинов и рецепторов цитокинов у донора и реципиента в перспективе может быть использовано для прогнозирования осложнений после ТКМ.
Г. А Цаур1234, Т. А. Мухачева4, П. А. Сибиряков1, С. Ю. Ковалев4, А. Е. Друй5, Ю. В. Ольшанская5, О. И. Солдаткина5, А. М. Попов5, Т. Ю. Вержбицкая1,2, Е. С. Нохрина1, Л. И. Савельев1,2,3, О. Р. Аракаев1,2, Л. Г. Фечина1,2
ВЫЯВЛЕНИЕ БСЯАБЫПОДОБНОГО ОЛЛ У ДЕТЕЙ
Государственное автономное учреждение здравоохранения
Свердловской области Областная детская клиническая больница, г. Екатеринбург
Государственное автономное учреждение здравоохранения Свердловской области «Центр специализированных видов медицинской помощи «Институт медицинских клеточных технологий», г. Екатеринбург Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Уральский государственный медицинский университете» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Екатеринбург Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Уральский Федеральный Университет имени первого Президента России Б. Н. Ельцина», г. Екатеринбург Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии, трансплантологии имени Дмитрия Рогачева» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
Цель. Отработка способа выявления БСЯ-АБЬ1-подобного ОЛЛ; клиническая и генетическая характеристика детей с БСЯ-АБЫ-подобным ОЛЛ; оценка прогноза этой группы пациентов.
Материалы и методы. На основании ранее опубликованных данных нами была отрабо-
тана система анализа экспрессии 5 генов методом ПЦР в режиме реального времени (/б/, БРАТБ21, МиС4, СЯЬЕ2, СА6) для верификации группы БСЯ-АБЫ-подобного ОЛЛ. Экспрессию генов оценивали методом ёекаС: по отношению к экспрессии контрольного гена АБЬ1, после чего формировали единый интегральный
2
3
4
5
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
показатель. В том случае, если он был близок к результату, полученному у пациентов с BCR-ABL1 -позитивным ОЛЛ, то пациентов относили в группу BCR-ABL1 -подобного ОЛЛ. В исследуемую группу было включено 147 детей с ОЛЛ из B-линейных предшественников в возрасте от 1,2 до 17 лет (медиана 4,0 лет). Из этого числа было 10 пациентов с Ph-позитивным ОЛЛ, 59 пациентов с известными структурными и количественными цитогенетическими аберрациями, включая транслокации t(9;22)(q34; q11), t(12;21) (p13; q22), t(1;19)(q23; p13), перестройки 11q23/ MLL, высокую гипердиплодию (n=51-65), гипо-диплоидию (n<45), а 78 пациентов сформировали группу без повторяющихся генетических перестроек («другие B-ОЛЛ»). Перестройки генов ABL1, ABL2, CRLF2, IgH, JAK2, PDGFRb/CSFRl оценивали методом FISH. Делеции в гене IKZF1 выявляли методом MLPA. Наличие химерного гена CRLF2-P2RY8 проводили методами ПЦР в геномной ДНК, MLPA и FISH. Химерный ген CRLF2-IgH выявляли методом FISH. Результаты терапии оценивали по кривым бессобытийной выживаемости (БСВ) и кумулятивной частоте развития рецидива (КЧР)
Результаты. Иерархический кластерный анализ и анализ главных компонент показали, что 16 пациентов с ОЛЛ кластеризовались совместно с 9 из 10 случаев Ph-позитивного ОЛЛ. Из 16 человек с BCR-ABL1 -подобным профилем экспрессии было 3 пациента с ОЛЛ и синдромом Дауна, 1 пациент с внутрихромосомной амплификацией 21, 1 пациент с транслокацией t(12;21)/ETV6-RUNX1, а также 11 пациентов без повторяющихся перестроек («другие B-ОЛЛ»). Пациент с наличием транслокации t(12;21) был исключен из дальнейшего анализа. У пациентов с BCR-ABL1 -подобным ОЛЛ достоверно чаще выявлялись делеции в гене IKZF1 и высокая
экспрессия СЯЬР2 по сравнению с пациентами без ВСЯ-АВЫ-подобного профиля (67 % и 11 %, 40 % и 6 %, соответственно; р<0,001 в обоих случаях). У 9 пациентов, у которых определяли наличие химерных генов с участием тиро-зинкиназ, перестройки гена]АК2 выявлены в двух случаях, СЯЬР2 — в четырех (по 2 случая СЯЬр2-1дИ и СЯЬР2-Р2ЯУ8), еще в двух случаях перестройки ни одного из исследованных генов выявлено не было. Среди пациентов с ВСЯ-АВЫ-подобным ОЛЛ превалировали девочки (80 % против 57% в оставшейся группе, р=0,011), у них чаще выявлялся инициальный лейкоцитоз более 30х109/л (67 % и 18 %, соответственно, р=0,001) и М3 статус костного мозга на 15-й день индукции ремиссии (27% и 4%, соответственно, р=0,010). Пациенты с ВСЯ-АВЫ -подобным ОЛЛ чаще стратифицировались в группу высокого риска (40 % и 9 %, соответственно, р=0,001). БСВ пациентов с ВСЯ-АВЫ-подобным ОЛЛ, лечившихся по протоколу ALL-MB2008 (п=10), была достоверно ниже по сравнению с группой «другие В-линейные ОЛЛ» пациентами без ВСЯ-АВЫ-подобного профиля экспрессии (п=57) (0,28±0,17 и 0,93±0,04, соответственно, р<0,001), а КВР — статистически значимо выше (0,57±0,19 и 0,02±0,02, соответственно, р<0,001). Диагностическая эффективность ВСЯ-АВЫ-подобного профиля экспрессии генов для предсказания рецидива составляет 0,939 (95 % ДИ 0,881-0,997).
Выводы. Таким образом, нами показана технология быстрой идентификации пациентов с ВСЯ-АВЫ-подобным ОЛЛ методом ПЦР в режиме реального времени. В данной группе пациентов часто выявляются случаи с делециями 1К1Р1, а также перестройки с участием киназ. Прогноз для пациентов с ВСЯ-АВЫ-подобным ОЛЛ при лечении по протоколу АЬЬ-МВ2008 — неблагоприятный.
