ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ПРИ АНАЛИЗЕ ТРИТЕРПЕНОВЫХ САПОНИНОВ GYNOSTEMMA PENTAPHYLLUM Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА

УДК 615.322

© Коллектив авторов, 2021

А.А. Низамова1, Э.Х. Галиахметова1, Н.В. Кудашкина1, С Р. Хасанова1, Т.В. Булгаков2, Э.Р. Хакимова1 ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ПРИ АНАЛИЗЕ ТРИТЕРПЕНОВЫХ САПОНИНОВ GYNOSTEMMA PENTAPHYLLUM

ФГБОУ ВО «Башкирский медицинский государственный университет»

Минздрава России, г. Уфа 2ФГКУ «Экспертно-криминалистический центр Министерства внутренних дел Российской Федерации», г. Москва

Цель исследования: изучить тритерпеновые сапонины травы Gynostemma pentaphyllum, интродуцированной в Республике Башкортостан, методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии.

Материал и методы: объектом исследования служила трава Gynostemma pentaphyllum, представляющая собой высушенные надземные части: стебли с простыми длинночерешковыми глубоко пальчато-рассеченными листьями и мелкими цветками в метельчатом или кистевидном соцветии. Исследования проводили методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ), который основан на получении хроматограмм на тонком слое сорбента с последующей записью фингерпринтов в программном обеспечении видеоденситометра Sorbfil TLC.

Результаты и выводы: в процессе лабораторных исследований подобраны оптимальные условия для проведения хро-матографического анализа спиртовых извлечений из травы. Результаты качественного анализа сырья гиностеммы пятилистной методом ВЭТСХ показали наличие тритерпеновых сапонинов, из которых идентифицированы гинсенозиды и P-эсцин, последний впервые установлен в интродуцированном сырье. Также установлено, что доминирующим тритерпено-вым сапонином в анализируемых пробах явился P-эсцин (Rf=0,45), имеющий темно-оранжевой флюоресценцию в ультрафиолетовом свете после окрашивания специфическим реагентом. Количественное содержание доминирующего сапонина в траве гиностеммы пятилистной составило 0,317±0,011%.

Ключевые слова: трава Gynostemma pentaphyllum, хроматоденситометрия, тритерпеновые сапонины, фингерпринты, P-эсцин, гинсенозиды, гипенозиды.

A.A. Nizamova, E.Kh. Galiakhmetova, N.V. Kudashkina, S.R. Khasanova, T.V. Bulgakov, E.R. Khakimova HIGH-PERFORMANCE THIN-LAYER CHROMATOGRAPHY IN THE ANALYSIS OF TRITERPENE SAPONINS GYNOSTEMMA

PENTAPHYLLUM

Objective: to study the triterpene saponins of the herb Gynostemma pentaphyllum, introduced in the Republic of Bashkortostan, by the method of high-performance thin-layer chromatography.

Material and methods: the object of the study was the herb of Gynostemma pentaphyllum, which is a dried aerial part: stems with simple long-petiolate deeply palmately dissected leaves and small flowers in paniculate or racemose inflorescences. The studies were carried out by the method of high-performance thin-layer chromatography (HPTLC), which is based on obtaining chroma-tograms on a thin layer of sorbent with subsequent recording of «fingerprints» in the software.

Results and conclusions: in the course of laboratory studies, optimal conditions were selected for conducting chromatographic analysis of alcoholic extracts of the herb. The results of a qualitative analysis of the gynostemma pentaphyllum raw materials by the HPTLC method showed the presence of triterpene saponins, of which ginsenosides and P-escin were identified, the latter was first established in the introduced raw material. It was also found that the dominant triterpene saponin in the analyzed samples was P-escin (Rf = 0,45), which has a dark orange fluorescence in ultraviolet light after staining with a specific reagent. The quantitative content of the dominant saponin in the herb of Gynostemma pentaphyllum was 0,317±0,011%.

Key words: herb Gynostemma pentaphyllum, chromatodensitometry, triterpene saponins, fingerprints, P-escin, ginsenosides, hypenosides.

Каждое лекарственное растительное сырье, входящее в Государственную Фармакопею, регламентировано на подлинность и доброкачественность. Малоизученные (не фармакопейные) виды лекарственного растительного сырья подвергаются целому ряду исследований, которые в дальнейшем позволят разработать нормативный документ для внедрения изучаемого сырья в медицинскую практику. Чаще всего в оценке качества и идентификации растительного сырья используются инструментальные методы анализа (хроматографические, спектроскопические и

т. д.), основанные на получении так называемых отпечатков пальцев - фингерпринтов [5,9]. Одним из простых способов первичного скрининга является тонкослойная хроматография (ТСХ), обладающая рядом преимуществ (простотой, универсальностью, высокой скоростью исполнения, чувствительностью и воспроизводимостью) перед сложными и трудоемкими инструментальными методами она является более доступным методом получения фингерпринтов лекарственных растений [6]. При оснащении ТСХ денсито-метрическим сканером, называемым высоко-

эффективной тонкослойной хроматографией (ВЭТСХ), появляется уникальная возможность записать «фингерпринты» ТСХ в программном обеспечении и детектировать пятна с переводом их в форму хроматографических пиков, а также рассчитать значения факторов удерживания (Rf), площади (S) и высоты (H) пиков и концентрацию вещества в пятнах. Хроматоденситометрия обеспечивает возможность качественного и количественного определения изучаемых веществ и документирования результатов. Метод ВЭТСХ играет важную роль в стандартизации и оценке качества неизученного лекарственного растительного сырья [3].

Ученые обратили внимание на потенциально новое южное растение - гиностемма пятилистная (Gynostemma pentaphyllum), обладающую целым рядом лечебно-профилактических свойств. Благодаря комплексу ценных биологически активных веществ, гиностемма оказывает влияние на органы кроветворения, кровообращения, дыхания, пищеварения, центральную и периферическую нервные системы, иммунную и мочеполовую системы, систему желез внутренней секреции и др. [8]. Терапевтические свойства данного растения проявляются за счет наличия обширного комплекса следующих биоактивных компонентов: сапонинов (гипенозиды 3,4,8,12), каротиноидов (а-каротин и в-каротин, цис-неоксантин, виолаксантин, аук-сантин, лютеоксантин, лютеин), полисахаридов (GPP1a, GPP2b, GPP3a PGSP), флавонои-дов (омбуин, изорамнетин-3-О-рутинозид, изорамнетин, кверцетин, кемферол-3-О-рутинозид, рутин, омбуозид), аминокислот и микроэлементов (Cu, Fe, Zn, Mn, Co, Ni, Se, Mo, Sr), органических кислот (кофейная и малоновая кислоты) [4,8]. Из вышеперечисленных соединений особое внимание вызывают тритерпеновые сапонины, проявляющие стимулирующие, адаптогенные, жаропонижающие, отхаркивающие и другие свойства. На сегодняшний день описано около 200 различных сапонинов, присутствующих в гиностем-ме пятилистной. Некоторые из них схожи с теми, что содержатся в женьшени настоящей - Panax ginseng (гинсенозиды Rg1, Rg3, Rd и F2 P.ginseng идентичны гипенозидам 3,4,8,12 G.pentaphyllum соответственно) [7]. Сапонины вносят существенный вклад в многообразие химического состава и терапевтическую эффективность растения, вызывая тем самым интерес для более детального их изучения.

В Российской Федерации Gynostemma pentaphyllum встречается на северо-восточной

границе Дальнего Востока. Гиностемма известна в основном по немногим гербарным образцам с Охотоморской стороны острова Кунашир (рис. 1). За пределами Российской Федерации гиностемма широко распространена в Китае, Корее, Японии, Индии и Малайзии [2].

Рис. 1. Гербарный образец гиностеммы пятилистной

Цель исследования: изучить тритерпе-новые сапонины травы Gynostemma pentaphyl-1ит методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии, интродуцированной в Республику Башкортостан.

Материал и методы

Основным материалом для исследования служила трава Gynostemma pentaphyllum, интродуцированная на Урале. Сырье Gynostemma реп1арЬу11ит заготавливали в период вегетации в Республике Башкортостан в 2020 г., высушивали воздушно-теневым способом и хранили в соответствии с требованиями ОФС.1.1.0011.15 «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» (рис. 2) [1].

I Г.Т J J

Рис. 2. Сырье Gynostemma pentaphyllum

Трава Gynostemma pentaphyllum представляет собой высушенные надземные части стеблей толщиной до 1-2 мм и длиной 1,5-2 м (жизненная форма - травянистая лиана) с

простыми длинночерешковыми глубоко паль-чато-рассеченными листьями с 5-7 эллиптическими или ланцетно-яйцевидными долями и с цветками в метельчатом или кистевидном соцветии.

Тритерпеновые сапонины сырья анализировали хроматографически согласно следующей методике: на линию старта хроматогра-фической пластинки «Sorbfil ПТСХ-АФ-В-УФ» с закрепленным слоем силикагеля, активированной в сушильном лабораторном шкафу (серии LOIP LF с модулем управления TS87B) при температуре, равной 105 °С, в течение 60 минут микрокапилляром наносили 0,025 мл исследуемое извлечение и 0,05% спиртовые растворы стандартных образцов (РСО). Пластинку высушивали при комнатной температуре, далее помещали в камеру с предварительно насыщенной подвижной фазой и хроматогра-фировали восходящим способом при температуре 18-20 °С. После прохождения приблизительно 10 см подвижной фазы пластинку вынимали и высушивали в течение 20 минут при комнатной температуре.

В качестве подвижных фаз служили следующие системы растворителей: петролейный эфир-хлороформ-уксусная кислота (10:4:0,4), хлороформ - этилацетат (9:1), хлороформ - метанол - вода (26:14:3), бензол-ацетон (3:1).

Хроматограммы проявляли специфическим реагентом - раствором серной кислоты 20%, нанесенным пульверизатором, нагревали в термостате при 105 °С в течение 5 минут и детектировали просмотром хроматограммы в видимом и ультрафиолетовом свете при длине волны 254 и 365 нм. Для идентификации при-

На пластинке 8огЬ61 после детектирования специфическим реагентом спиртового извлечения проявлялось около 11 зон адсорбции, из которых не менее 6-7 зон сапониновой природы. При сравнении Rf -стандартных образцов со значениями Rf полученных зон адсорбции установлено присутствие в траве ги-ностеммы пятилистной тритерпеновых сапо-

родных веществ использовали стандартные образцы: гинсенозид Rg1 (CAS № 22427-39-0, производитель Carl Roth GmbH + Co KG), P-эсцин (CAS № 11072-93-8, производитель Santa Cruz Biotechnology).

Извлечения из травы Gynostemma pentaphyllum для хроматографирования получали экстракцией 95% этиловым спиртом в соотношении 1:30 [1].

Количественное определение доминирующего тритерпенового сапонина в исследуемом сырье проводили хроматоденситометри-ческим методом. Для этого полученные пластинки методом ТСХ анализировали с использованием денситометра Sorbfil TLC (ООО Имид, Россия). Прибор представлен осветительной камерой марки Sorbfil КС 4.00.000, видеокамерой Sony DCR-CX190E и программой для видеоденситометра Sorbfil TLC. в электронном варианте. После введения и сохранения изображения хроматограмм в программном обеспечении, возможно выделение на нем рабочего участка; проведение обработки пятен и переведение их в форму хромато-графических пиков для расчета значения Rf, S, H и автоматического вычисления содержания вещества в анализируемых пятнах, которые были нанесены количественно [3].

Статистический анализ проводили, используя критерий Стьюдента [1].

Результаты и обсуждения

В результате проведения хроматографии в тонком слое сорбента наиболее четкое разделение тритерпеновых сапонинов наблюдали в системе растворителей хлороформ-метанол-вода (26:14:3) (табл. 1).

1

нинов гинсенозида Rgl (Я{=0,78), имеющего розовую флюоресценцию, и Р-эсцина ^^0,45), имеющего темно-оранжевую флюоресценцию в УФ-свете (рис. 3).

Согласно литературным данным в дикорастущей гиностемме пятилистной из сапонинов присутствуют гинсенозиды [4]. В ин-тродуцированной гиностемме по полученным

Таблица

Результаты детектирования хроматограммы извлечений из Gynostemma pentaphyllum_

Rf Пятна, видимые при 1=254 Окраска пятен после проявления специфическим реагентом Сапонины

1=365 в видимом свете

0,45 - Темно-оранжевая Желто-оранжевая ß-эсцин

0,49 - Светло-зеленая Зеленая -

0,56 + Светло-оранжевая - -

0,62 - Светло-желтая Желтоватая -

0,67 + Светло-зелено-синяя Светло-коричневая -

0,70 - Светло-розовая - -

0,74 + Желто-оранжевая Темно-коричневая -

0,78 - Розовая Темно-розовая Гинсенозид Rgi

0,85 - Светло-синяя Светло-оранжевая -

0,92 + Светло-фиолетовая Темно-оранжевая -

0,95 - Темно-фиолетовая Темно-фиолетовая -

результатам оказалось, что в ней содержатся не только гинсенозиды, но и другие тритерпе-новые сапонины, доминирующим из которых был Р-эсцин (рис. 4, табл. 2).

——

±11} 0 00 0 Рис. 3. Хроматограмма в УФ-свете после детектирования раствором 20% серной кислоты при 1=365 нм: 1 - растворы стандартных образцов (РСО) Р-эсцина; 2-5 - спиртовые извлечения травы; 6 - растворы стандартных образцов (РСО) гинсенозида Rgl

В исследуемых образцах нами было определено количественное содержание индивидуальных веществ, которое устанавливали по 8 и Н на денситограмме.

Для количественного определения Р-эсцина как доминирующего сапонина измерения проводили в 4 параллельных опытах в одинаковых условиях (рис. 5): использовали 95% спиртовое извлечение травы гиностеммы пятилистной в соотношении 1:30, объем наносимых проб извлечении и стандартного образца - 25 мкл. Концентрация спиртового раствора РСО Р-эсцина составила 0,05%.

В результате экспериментальных исследований содержание в анализируемых пробах Р-эсцина составило 0,317±0,011% (табл. 3).

- Трек 1

- Трек 2-Трек 3-Трек ч -Трек 5 -Трек Б |

Рис. 4. Денситограмма (трек 1 - РСО гинсенозида Rgl; трек 2 - РСО Р-эсцина; треки 3,4,5,6 - спиртовое извлечение травы гиностеммы пятилистной)

Результаты денситограммы извлечений Gynostemma реПар!^!!^

Таблица 2

Пик Rf 8 Н Описание

1 0,78 68957 2689 Гинсенозид Rg1

2 0,45 225186 6344 Р-эсцин

3 0,78 26780 1569

0,45 32561 1872

4 0,78 16998 998

0,45 20298 1343 Исследуемый образец

5 0,78 23785 1161

0,45 18968 1321

6 0,78 30129 1509

0,45 36388 2137

Результаты расчета концентрации Р-эсцина и метрологическая характеристика методики

Таблица 3

№ трека Стандарт/Образец С, % Rf Метрологическая характеристика

2 Стандарт 0,05 0,45 -

3 Образец 0,320 0,45 Х = 0,317 8 = 0,0035 X £„ = 0,0111 Еотн = 3,51%

4 -»- 0,312 0,45

5 -»- 0,310 0,45

6 -»- 0,325 0,45

Количество вещества, мкг ♦ Стандарты ж Пробы -Аппроксимация |

Рис. 5. График расчета в анализируемых образцах Р-эсцина по высоте пика (синий - стандарт, красный - опытные образцы)

Выводы

1. В ходе лабораторных исследований подобраны оптимальные условия хроматографи-

рования травы гиностеммы пятилистной: система растворителей хлороформ-метанол-вода -26:14:3; хроматографические пластинки марки «8огЬШ ПТСХ-АФ-В-УФ» с предварительной активацией в сушильном лабораторном шкафу (105 °С в течение 5 минут); время насыщения хроматографической камеры 2 часа; температура хроматографирования 18-20 °С, проявитель -20% раствор серной кислоты.

2. Результаты качественного анализа травы гиностеммы пятилистной методом ВЭТСХ показали наличие в сырье тритерпе-новых сапонинов, из которых идентифицированы гинсенозиды и Р-эсцин, впервые установленный в интродуцированном сырье и является доминирующим.

3. Содержание Р-эсцина в сырье составляет 0,317±0,011%.

Сведения об авторах статьи: Низамова Альфина Ансафовна - аспирант и ассистент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: alfina.nizamova@bk.ru. Галиахметова Эльвира Халитовна - к.фарм.н., доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел.: 8(347)271-22-85. E-mail: galiahmetova.elvi@yandex.ru.

Кудашкина Наталья Владимировна - д.фарм.н., профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, д. 3. Тел.: 8(347)271-22-85. Email: phytoart@mail.ru.

Хасанова Светлана Рашитовна - д.фарм.н., профессор кафедры фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел.: 8(347)271-22-85. E-mail: svet-khasanova@yandex.ru.

Булгаков Тимур Вилюрович - к.фарм.н., ведущий научный сотрудник отдела научных исследований по специальным видам экспертиз и экспертно-криминалистических противодействии наркопреступности управления научных исследований, ФГКУ «ЭКЦ МВД России». Адрес: 125130, г. Москва, ул. Зои и Александра Космодемьянских, 5. E-mail: tric-ster@inbox.ru.

Хакимова Элина Рустэмовна - студентка 3 курса лечебного факультета ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3. Тел.: 8(347)271-22-85. E-mail: farmakognosia@yandex.ru.

ЛИТЕРАТУРА

1. Государственная фармакопея Российской Федерации XIV изд. [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека. 2018. URL: http://www.femb.ru (дата обращения: 10.12.20).

2. Еремин, В.М. Красная книга Сахалинской области: растения и грибы / В. М. Еремин. - Кемерово, 2019. - 354 с.

3. Хасанова, С.Р. Возможности использования денситометрии в стандартизации лекарственного растительного сырья / С.Р. Хасанова, Н.В. Кудашкина, Р.Р. Файзуллина // Человек и лекарство: сборник матер. XXI Российского национального конгресса. -2014. - С. 347-348.

4. Anti-cancer effects of Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino (Jiaogulan) / Y. Li // Journal Chinese Medicine. -2016. Vol. 11, N° 1. - P. 43-58.

5. Chromatographic and spectral fingerprinting standartization of traditional medicines: an overview as modern tools / L. Giri [et al.] // Research Journal of Phitochemistry. - 2010. - Vol. 4, № 4. - P. 234.

6. Hariprasad, P. Chromatographic fingerprint analysis of Rumex vesicarius L. by HPTLC technique/ P. Hariprasad, N. Ramakrishnan // Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. - 2012. - № 1. - P. 57.

7. Mishra, R.N. Jiao Gu Lan (Gynostemma pentaphyllum): The Chinese rasayan-current research scenario / R.N. Mishra, D. Joshi // J. Res Pharm Biomed Sci. - 2011. - Vol. 4, № 2. - P. 1483-1502.

8. Navratilova, Z. Gynostemma pentaphyllum - active compounds and therapeutic effects / Z. Navratilova. // J. Prakticke lekarenstvi. -2017. Vol. 13, № 3. - P. 116-118.

9. Nikam, P.H. Future trends in standardization of herbal drugs / P. H. Nikam, J. Kareparamban, A. Jadhav, V. Kadam. // Journal of Applied Pharmaceutical Science. - 2012. - Vol. 02, № 06. - P. 38.

REFERENCES

1. State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIV Edition: Scientific Center for Expertise of Medical Devices. Link: Available from URL: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php (as of August 1, 2019). (In English).

2. Eremin VM. Krasnaya kniga Sakhalinskoi oblasti: Rasteniya i griby. / Kemerovo.2019; 354. (In Russ.).

3. Khasanova S.R., Kudashkina N.V., Fayzullina R.R. Possibilities of using densitometry in standardization of medicinal plant raw materials. Man and medicine: proceedings of the XXI Russian National Congress. Moscow, 2014, pp. 347-348. (in Russ.).

4. Y. Li Anti-cancer effects of Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino (Jiaogulan) / Y. Li. Journal Chinese Medicine. 2016; 11 (1):43-58. DOI: 10.1186/s13020-016-0114-9. (In English).

5. L. Giri Chromatographic and spectral fingerprinting standartization of traditional medicines: an overview as modern tools. Research Journal of Phitochemistry.2010; 4 (4): 234. DOI: 10.3923/rjphyto.2010.234.241. (In English).

6. Hariprasad P., Ramakrishnan N. Chromatographic fingerprint analysis of Rumex vesicarius L. by HPTLC technique. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2012; ( 1).: 57. (In English).

7. Mishra, R.N. Jiao Gu Lan (Gynostemma pentaphyllum): The Chinese rasayan-current research scenario. J. Res Pharm Biomed Sci. 2011; 4 (2): 1483-1502. (In English).

8. Navratilova, Z. Gynostemma pentaphyllum - active compounds and therapeutic effects. J. Prakticke lekarenstvi. 2017;13 (3): 116-118. DOI: 10.36290/lek.2017.015

9. Nikam P. H., Kareparamban, A. Jadhav, V. Kadam. Future trends in standardization of herbal drugs. Journal of Applied Pharmaceutical Science. - 2012; 2 (6):06. - 38. DOI: 10.7324/JAPS.2012.2631.

УДК 615.322:582.631(470.56) © Коллектив авторов, 2021

А.А. Синеговец, А.И. Бондаренко, Н.А. Кузьмичева, И.П. Воронкова, И.В. Михайлова СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ В CАLENDULА OFFICI^LIS L., ПРОИЗРАСТАЮЩЕЙ

НА ТЕРРИТОРИИ ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Оренбург

Цель. Сравнительный анализ содержания биологически активных веществ цветков календулы лекарственной, произрастающей на территории Оренбургской области.

Материал и методы. Оценку количественного содержания биологически активных веществ (БАВ) проводили спек-трофотометрическим методом и методом кислотно-основного и окислительно-восстановительного титрования.

Результаты. Сравнительный анализ БАВ выявил максимальное содержание флавоноидов (1,61±0,16%) и аскорбиновой кислоты (1,18±0,05%) в цветках календулы, произрастающей в Асекеевском районе, органических кислот (3,0±0,16%) в цветках календулы Новосергиевского района, дубильных веществ (4,47±0,39%) в цветках календулы Шарлыкского района.

Выводы. Данные результаты достоверно превышают содержание БАВ в официнальном сырье, что позволяет рассматривать цветки Cаlendulа оfficmаlis L., произрастающей в различных районах Оренбургской области, как потенциальный источник флавоноидов, дубильных веществ, органических кислот, в том числе аскорбиновой, а изученные районы могут рассматриваться в качестве новых территорий для культивирования данного растения.

Ключевые слова: сумма флавоноидов, органические кислоты, дубильные вещества, аскорбиновая кислота, Cаlendulа оfficinаlis Cаlendulа оfficinаlis L., Оренбургская область.

A.A. Sinegovets, A. I. Bondarenko, N.A. Kuzmicheva, I.P. Voronkova, I.V. Mikhailova COMPARATIVE ANALYSIS OF THE CONTENT OF BIOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCES OF CALENDULA OFFICINALIS L., GROWING ON THE TERRITORY OF THE ORENBURG REGION

Purpose. Comparative analysis of the content of biologically active substances of the flowers of Calendula officinalis L. growing in the Orenburg region.

Material and methods. The quantitative content of biologically active substances (BAS) was assessed by the spectrophotometric method, by the method of acid-base titration and by the method of redox titration.

Results. Comparative analysis of biologically active substances revealed the maximum content of the sum of flavonoids (1,61±0,16%) and ascorbic acid (1,18±0,05%) in the flowers of Calendula officinalis L. growing in the Asekeevsky district, the sum of organic acids (3,0±0,16%) - in the flowers of Calendula officinalis L. growing of Novosergievsky district, tannins (4,47±0,39%) - in the flowers of Calendula officinalis L. growing in Sharlyksky district.

Conclusions. These results significantly exceed the content of biologically active substances in official raw materials, which makes it possible to consider the flowers of Cаlendula оfficinаlis L. growing in different areas of the Orenburg region as a potential source of flavonoids, tannins, organic acids, including ascorbic acid, and the studied areas can be considered as new territories for plant cultivation.

Key words: sum of flavonoids, organic acids, tannins, ascorbic acid, Calendula officinalis L., Orenburg region.

В последние годы возрастает популярность препаратов на основе растительного сырья и увеличивается интерес к природным биологически активным веществам (БАВ) и препаратам, создаваемым на их основе [2]. Одним из наиболее известных лекарственных растений является Calendula officinalis L., которая широко распространена на территории Российской Федерации, в том числе и в Оренбургской области. Обширный спектр фармакологической активности цветков календулы (противовоспалительные, регенерирующие,

антимикробные, желчегонные, отхаркивающие свойства) обусловлен наличием разнообразных классов БАВ: флавоноидов, органических кислот, в том числе аскорбиновой кислоты, дубильных веществ, что делает календулу перспективным ресурсом новых лекарственных растительных препаратов [3]. Актуальным является поиск новых ареалов произрастания цветков Calendula officinalis L., в качестве которых рассматриваются и районы Оренбургской области, а также влияние климатических условий данных районов на