CC BY
12
УДК 615.331:612.336-008.8:616.24-002.5
С.А. Риженко, Г.М. Кременчуцький , Д.Г. Крижановський , М.Ю. Кожушко , Т. В. Дикленко, 1.О. Гамота, М.О. Бредихина, О. В. Дробот
Дтпропетровська обласна санiтарно-епiдемiологiчна станцiя (гол. лкар - д. мед. н., проф. С.А.Риженко) Дтпропетровська державна медична академiя (ректор - академт АМН Укра'ши, д. мед. н., проф. Г.В.Дзяк)
ВПЛИВ Р1ДКОГО ПРОБ1ОТИКУ «А-БАКТЕРИН» НА М1КРОБ1ОТУ КИШЕЧНИКУ ОС1Б, ХВОРИХ НА ТУБЕРКУЛЬОЗ ЛЕГЕНЬ
Ключовi слова: «А-бактерин», пробютик, мкробюта кишечнику, туберкульоз легень Key words: «А-bacterinum», probiotic, gut microbiota, pulmonary tuberculosis
Резюме. Исследованием установлены отклонения в составе микро-биоты кишечника у 70% лиц, больных туберкулезом легких. Нормализовалась микрофлора кишечника у лиц, которые приняли курс пробиотика «А-бактерин». Уменьшилось количество лиц с отклонениями от нормы микрофлоры кишечника: E.coli на 66,6%, Lactobacterium на 33,3%, грибов рода Candida на 42,8%. В микробиоте кишечника 4 лиц после курса приема «А-бактерина» определено количество грибов рода Candida выше нормы, что будет предметом дальнейших исследований. Summary. Deviations in structure of intestinal microbiota in 70% of persons with pulmonary tuberculosis was established by the research. Microflora of intestine in persons who received a course of probiotic "A-bacterinum" normalized. A number ofpersons with deviations of intestinal microflora from the norm decreased: E.coli by 66,6%, Lactobacterium by 33,3%, fungi of sort Candida by 42,8%. A number of fungi of Candida type exceeding the norm in intestinal microbiota was revealed in 4 persons after a course of "A-bacterinum". This will be a subject of the further researches.
На тлi ешдемп туберкульозу, поширення ме-дикаментозно стшких штамiв мшобактерш туберкульозу (МБТ) та асоцшованих захворювань на туберкульоз та В1Л-шфекщю знизилась ефек-тившсть традицшно! терапи туберкульозу [5, 10].
Дослщження, що проведет у Латви i До-нецьку, свщчать про майже дворазове зростання рiвня поширеносп множинно! медикаментозно! стшкосп серед хворих на туберкульоз пащенпв з В1Л- шфекщею в порiвняннi iз хворими на туберкульоз пащентами, що не мають В1Л.
Питома вага пащенпв iз множинною меди-каментозною стшюстю серед ошб iз вперше дiагностованим захворюванням на туберкульоз склала 19,4% у Молдов^ 16% - у Донецьку (Укра!на), 15% - у Томськш област (Росшська Федеращя) i 14,8% - у Ташкент (Узбекистан) [15].
Таким чином, виршення проблеми шдви-щення ефективносп лшування туберкульозу з кожним роком стае усе бшьш актуальним, що диктуе необхщшсть пошуку нових пiдходiв у лшуванш туберкульозу.
Загальновщомо, що порушення мiкробiоти
вiдмiчаеться при бшьшосп iнфекцiйних захворювань. На сьогодш перспективним коректором та регулятором мшробюти органiзму людини е пробютики [8, 16].
З позицiй концепци, яка розглядае мiкробiоту органiзму людини як орган, що тдтримуе гомео-стаз i життедiяльнiсть органiзму людини, в т.ч. шдвищуе iмунiтет, проявляе детоксикацiйний i антимiкробний ефекти [1,6,11,12].
1стотно те, що пробiотик «А-бактерин» необидно розглядати як суттевий компонент анти-бактерiального лiкування. Обгрунтованють наших пропозицiй i шдтверджуе попереднiй пози-тивний досвiд дослщження iз застосуванням «А-бактерину» у хворих на туберкульоз [4].
Метою дослщження було вивчення впливу на мшробюту кишечнику пробютику «А-бактерин» у хворих на туберкульоз легень (ТБЛ).
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛ1ДЖЕНЬ
У дослщження було включено 20 пащенив, якi проходили стацiонарне лшування на базi легенево-туберкульозних вiддiлень Дншропет-ровського обласного комунального клiнiчного лшувально-профшактичного об'еднання «Фтиз>
09/ Том XIV/1
65
aTpiH» з приводу вперше дiагностованого тубер-кульозу легень.
Критерiями вiдбору пацieнтiв були наявшсть порожнин розпаду у легенях, вiдсутнiсть супут-ньо! гастроентеролопчно! патологи та ста-бiльнiсть перебiгу туберкульозного процесу.
Дослщну групу склали 10 пацieнтiв (7 чоло-BiKiB та 3 жшки). Середнiй BiK чоловiкiв 39 роюв, жiнок - 52 роки. Розподш за клiнiчними формами туберкульозного процесу - шфшьтративний ТБЛ у 7 хворих, дисемшований - у 3 хворих, у 6 хворих з 10 видшеш мшобактери туберкульозу (МБТ).
До контрольно! групи увшшли 10 осiб (8 чоловiкiв та 2 жшки). Середнш вiк чоловшв склав 46 рокiв, жiнок - 60 роюв. Розподiл за клшчними формами ТБ процесу - дисемь нований ТБЛ у 8 хворих, фiброзно-кавернозний -у 2 хворих, у 9 хворих з 10 видшеш МБТ.
Ушм хворим проводилося лшування за I категорieю зпдно з наказом МОЗ Укра!ни [2] за схемою: iзонiазид 300 мг, рифампщин 600 мг, пiразинамiд 2000 мг, етамбутол 1600 мг, стреп-томщин 1000 мг та доповнення прийомом по-лiвiтамiнiв, гепатопротекторiв, препаратами симптоматично! терапи. Тривалiсть курсу лшування хворих дослiдно! та контрольно! груп склала 3 мiсяцi.
У дослщженш використана рiдка добавка дieтична «А-бактерин» з кiлькiстю життездат-ного пробютичного мiкроорганiзму Aerococcus viridans у препарат не менш 1 • 108 колоше-твiрних одиниць в 1 мл (КУО/мл) вщповщно до техшчних умов ТУ У 15.8-01984033-001:2006 вiд 16.02.2006.
Пробiотичний препарат «А-бактерин» хворi дослiдно! групи вживали зпдно з шструкщею по застосуванню: по 5 мл 2 рази на день (перший прийом - через 20 хвилин тсля вживання анти-мiкобактерiальних препаратiв, другий - за 30 хвилин до шчного вiдпочинку) протягом 28 дшв.
Кiлькiсне i якiсне дослщження на окремi види мiкрофлори кишечнику проводили вщповщно до методичних рекомендацш [2, 13].
При дослiдженнi проводився кiлькiсний шд-рахунок окремих видiв бактерiй (Bifidobacterium, Lactobacterium, S.aureus, гриби рода Candida spp., загальна кшьюсть E.coli з нормальною фермен-тативною активнiстю), що виявлялись у розве-деннях 1 граму випорожнень. Для цього готу-вався ряд розведень вщ 10-1 до 10-9, як вишва-лись на елективш середовища: лактоагар, жов-точно-сольовий агар, середовище Сабуро та 5 % кров'яний агар, Ендо-агар, тюглшолеве середовище.
Для виявлення зазначених вище видiв мш-роорганiзмiв проводили висiв 0,1 мл субстрату на поживш середовища iз розведень:
• 10-3 - на жовточно-сольовий агар для виз-начення S.aureus;
• 10-3 - на середовище Сабуро для виз-начення грибiв роду Candida;
• 10-5 - на середовище Ендо для визначення загально! кiлькостi E.coli з нормальною фермен-тативною активнiстю;
• 10-5 - на лактоагар для визначення Lactobacterium;
• 10-7-10-9 - на середовище Блаурока для визначення Bifidobacterium.
Для отримання iзольованих колонш матерiал рiвномiрно розподiляли по поверхш щiльних по-живних середовищ за допомогою шпателю.
Посiви вирощували у режимi:
• на середовищi Ендо - 24 години при 37°С;
• на жовточно - сольовому агарi - 48 годин при 37°С;
• на середовищi Сабуро - 48 годин при 37°С та ще 72 години при юмнатнш температурi;
• на лактоагарi - 48 годин при 37° С в умо-вах тдвищено! концентрацi! СО2 (8-10%);
• на середовищi Блаурока - 72 години при 37°С.
Пюля iнкубацi! проводили щентифшащю мш-роорганiзмiв згiдно з рекомендованими методиками [3, 9].
Концентращю мiкроорганiзмiв визначали за формулою [12]: S = n^a^b, де S - кшьюсть мiкроорганiзмiв в 1 г фекалш; n - кiлькiсть колонш на чашщ; a - коефщент посiвно! дози (при ro^i 0,1 мл = 10); b - ступiнь розведення мате-рiалу.
Результати дослiдження статистично оброб-леш [7]. Дослiдження проведено у вщповщносп до Гельсiнсько! декларацi! Bсесвiтньо! медично! асоцiацi! про етику медичних дослщжень [14].
РЕЗУЛЬТАТИ ТА IX ОБГОВОРЕННЯ
Результати дослiджень мiкробiоти дисталь-ного вщдшу кишкового тракту осiб дослщно! та контрольно! груп наведенi у табл. 1.
Як свщчать даш таблицi, пiсля курсу прийому «А-бактерину» спостерiгались позитивнi змiни мiкробiоти кишечнику.
Змши показникiв мiкробiоти характеризу-ються нормалiзацiею концентрацi! E.coli з нормальною ферментативною активнiстю у 4 з 6 осiб (66,6%), Lactobacterium в 1 випадку з 3 (33,3%), S.aureus в 1 випадку з 1, грибiв роду Candida spp. у 3-х випадках з 7 (42,8%).
Таблиця 1
Динамика показникчв мiкробiоти в oci6, якi зад1ян1 у досл^ (n=10)
К1льк1сть ос1б:
Мжрофлора Норма дослвдно! групи контрольно!' групи
КУО/г
до прийому тсля прийому в перший день через 28 дшв
препарату препарату дослвду
Загальна тльюсть E.coli
нижче норми
Лактобактерй нижче норми
Б1фвдобактерН нижче норми
S.aureus вище норми
Candida spp. вище норми
106-108
>106 >107 <104 <104
Примiтка: * — рiзниця показника nopiBHHHO з попередшм значенням вiрогiдна (p<0,05)
Позитивних змш у мшробют oci6 контрольно! групи не встановлено, при тому, що на 2 випадки збшьшилося кiлькiсть oсiб iз вмiстoм Lactobacterium нижче норми.
Вщзначеш змiни i в кoнцентрацi! мiкрoфлoри, середнi значення яко! наданi у табл.2.
У oci6, якi приймали «А-бактерин», вщзна-чено вiрoгiдне пiдвищення середньо! концентра-
цп у мiкрoбioтi лактoбактерiй та зниження S.aureus i грибiв роду Candida spp.
Якщо вiдзначити, що в попередшх дослщ-женнях [12] A.viridans in vitro не виявляв анта-гoнiзму до грибiв роду Candida spp., то вияв-лений ефект можна вiднести до загально! дп «А-бактерину» щодо нoрмалiзацi! мiкрoбioти.
Таблиця 2
Вплив пробютику «А-бактерин» на концентрацiю мiкроорганiзмiв у мжробют кишечника осiб, хворих на туберкульоз легень (M±m; КУО/г)
6
3
4
3
2
2
4
0
0
0
0
1
0
1
2
7
7
8
М1крофлора Досл1дна група (n=10) Контрольна група (n=10)
до прийому препарату тсля прийому препарату в перший день дослвду через 28 дтв
Загальна юльюсть E.coli
2107± 7,6106
Лактобактерй
Б1фвдобактерН
4108± 1,5107
4107± 1,5106
9108 ±1,1107
S.aureus
1105±9,9104
<Ь104
Candida spp.
1,3105± 8,8104
4,7^104 ±3^103
2^104 ±5,0^103
Примiтка: * — рiзниця показника пoрiвнянo з пoпереднiм значенням вiрoгiдна (p<0,05)
В oci6, як приймали «А-бактерин», не вiдмi- Таким чином, встановлено порушення у скла-чено пoбiчнo! дi!, !х загальний стан i самопочуття дi мшробюти кишечнику до прийому препарату залишались задoвiльними протягом всього перi- у 70% ошб, хворих на туберкульоз легень. За
оду вживання препарату. результатами дослщження мiкрoфлoри дисталь-
1107± 6,2106
3107± 1,2106
4107± 1,5106
7,3108 ±1,4106
2,3105±2,2104
2105± 5,0103
09/ Том XIV/1
67
ного вщдшу кишечнику шсля 28-денного курсу застосування пробiотичного препарату «А-бак-терин» вiдзначенi позитивнi змши у складi мш-робiоти. Кшьюсть oci6 i3 вiдхиленнями вiд нор-ми мшрофлори кишечнику зменшилась щодо E.coli на 66,6%, Lactobacterium на 33,3%, ^^iB роду Candida на 42,8%.
ВИСНОВКИ
1. Встановлено вщхилення у складi мшро-бiоти кишечнику у 70% ошб, хворих на тубер-кульоз легень.
2. В ошб, яю прийняли курс пробiотику «А-бактерин», зменшилось вiдхиленнями вiд норми показниюв мiкрофлори кишечнику: E.coli на 66,6%, Lactobacterium на 33,3%, ^^iB роду Candida на 42,8%.
3. Визначено, що у мшробют 4 осiб пiсля прийняття курсу «А-бактерину» кiлькiсть грибiв роду Candida вище за норму.
Вивчення 1х взаемодп iз пробiотичним мш-рооргашзмом A.viridans буде предметом подаль-ших дослiджень.
СПИСОК Л1ТЕРАТУРИ
1. Белоусова Е.А. Всемирный конгресс по гастроэнтерологии (Монреаль, 2005) // Фарматека. - 2006.
- № 1. - С. 17-21.
2. Ддагностика та л1кування дисбактерюзу кишечника у дггей та дорослих: Метод. рекомендаци / Дзяк Г.В., Грищенко 1.1., Шостакович-Корецька Л.Р. Залевський В.1. - Дншропетровськ, 2000. - 32 с.
9. Ддагностика та лшування дисбактерюзу кишечнику у ревматолопчних хворих: Метод. рекомендаци / Лисенко Г.1., Бшко 1.П., Школьська О.1. та ш. - К.: Знання, 1999. - 22 с.
10. Кожушко М.Ю., Риженко С.А. Антитоксична д1я А-бактерина у хворих на туберкульоз легень // Мед. перспективи. - 2003. - № 2. - С. 69-71.
11. Краткое руководство по туберкулезу для работников первичной медико-санитарной помощи. -2004. Всемирная организация здравоохранения Европейское региональное бюро. [Електронний ресурс]. http://portal.arm.synisys.com/eh/resources/mdlDoc/760-r.pdf
12. Кременчуцкий Г.Н., Рыженко С.А., Валь-чук С.И. Роль микроэкологии организма человека и принципы ее коррекции. - Днепропетровск: Пороги, 2003. - 230 с.
13. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Медицина, 1990.
- 352 с.
14. Микроэкологические изменения кишечника и их коррекция с помощью лечебно-профилактических препаратов / Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Мацу-левич Т.В., Воробьев А.А. // Журнал гастроэтеро-логии, гепатологии, колопроктологии. - 2003. - № 4. -С. 66-76.
15. Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-
профилактических учреждений: Приказ Минздрава СССР № 535 от 22.04.1985.
16. План «Остановить туберкулез» для 18 приоритетных стран европейского региона ВОЗ 2007-2015 гг. - 2008. Всемирная организация здравоохранения Европейское региональное бюро. [Електронний ресурс].
http ://www.euro .who. int/Document/E91049R.pdf?langua ge=Russian
17. Рыженко С.А. Влияние А-бактерина на гомео-стаз организма человека при различных патологических состояниях // Сб. материалов междунар. науч.-практ. конф. памяти Г.И. Гончаровой «Пробиоти-ческие микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования» / Под ред. В.А. Алешкина. - М., 2002. - С. 41-42.
18. Риженко С.А.. Ппешчна оцшка аерокошв у мшробюценозах оргашзму людини в умовах антропогенного забруднення навколишнього середовища: Автореф. дис. ... д-ра. мед. наук. - К., 2005. - 34 с.
19. Харченко Н.В., Черненко В.В. Современные подходы к коррекции дисбактериоза кишечника: Метод. рекомендации. - К., 2000. - 28 с.
20. Хельсинская декларация Всемирной медицинской ассоциации (новая редакция). Этические принципы медицинских исследований, проводимых на людях // Фарматека. - 2001. - № 6. - С. 58-62.
21. Anti-tuberculosis drug resistance in the world. Fourth global report. - 2008. World Health Organization. [Електронний ресурс].
http://www.who.int/entity/tb/publications/2008/drs_report 4_26feb08.pdf
22. Potential Uses of Probiotics in Clinical Practice / Reid G., Jass J., Sebulsky M. T., McCormick J. K. // Clin. Microbiol. Rev. - 2003. - N 16. - P. 658-672.
♦
