CC BY
21
УДК 661.158:615.015
Кушшр 1.М., канд.с.-г. наук (igorku70@gmail.com) © Державный науково-дослгдний контрольный тститут ветеринарных препарат1в та кормових добавок, м. Львгв
ВПЛИВ ПОВТОРНО! СГЕРИЛ1ЗАЩ1 НА ПОКАЗНИКИ ЯКОСТ1 ГОТОВИХ Л1КАРСЬКИХ ЗАСОБ1В
У статт1 висвтлено питання впливу повторног стерил1зацп фгзюлоггчного розчину та води для т'екцт, розфасованих у ргзну за об'емом пакувальну тару (2,5 та 200 см3'), що тддавались автоклавуванню при температурних режимах 121 °С упродовж 15 хв I 134 °С упродовж 20 хв. Встановлено, що при повторнт стерил1зацп при ргзних температурних режимах змт показнитв якост1 дослгджуваних розчитв для т'екцт не було виявлено.
Ключо^^ слова: бактер1йш ендотоксини, ЛАЛ-тест, питома електропров1дшсть, автоклавування, повторна стерил1защя
Вступ. При промисловому виробництвi стерильних лжарських засобiв (ЛЗ) постшно виникае цший ряд питань щодо забезпечення контролю за вмютом бактершних ендотоксишв. У зв'язку з тим, що бактершш ендотоксини володшть широким спектром патолопчних для оргашзму людини i тварин бюлопчних ефекив [1] !х визначення е одним iз важливих тестiв бiологiчного контролю ЛЗ.
Традицшно визначення бактерiйних ендотоксинiв проводять за допомогою тесту на кролях та ЛАЛ-тестом, проте, не у вах випадках застосування тесту на кроликах е доцшьним [2].
У лабораторий практищ ветеринарно! та гуманно! медицини Укра!ни визначення бактерiйних ендотоксишв за допомогою ЛАЛ-тесту (Лiзату амебоциив лiмулюса-тест) не знайшло широкого застосування [3]. Впровадження ЛАЛ-тесту у практику виробництва стерильних ЛЗ, призначених для ветеринарно! медицини, а також у клшчш дослщження мае певнi труднощ^ що пов'язано, в першу чергу, з економiчними чинниками, а також з вщсутшстю нормативно! документацi!' [1, 3].
Препарати, що не вщповщають вимогам нормативно! документацп за вмштом бактерiйних ендотоксинiв пiдлягають утилiзацi!, тому метою нашо! роботи було визначення впливу повторно! стерилiзацi! на показники якост води для iн'екцiй та фiзiологiчного розчину.
Матерiали i методи. Для дослiдження використовували фiзiологiчний розчин та воду для ш'екцш, як повторно автоклавували за температури 121 °С упродовж 15 хв. та 134°С — 20 хв. Визначення бактершних ендотоксишв та анал^ичш дослщження проводили згщно з методиками нормативно! документацп та вщповщних фармакопейних статей [4, 5, 6]. Бактершш
© Кушшр 1.М., 2011
ендотоксини визначали методом А, для постановки ЛАЛ-тесту використовували набори реактив!в «Associates of Cape Cod 1пс.»(США): ЛАЛ-реактив Pyrotell (заявлена чутливкть — 0,03 МО/мл), ЛАЛ-вода Pyroclear, контрольний стандарт ендотоксину (Esherichia coli 0113 :Н10) i буферний розчин Pyrosol (0.2M трис-НС1 буфер, рН =7,4). Для розведення використовували ашрогенш наконечники та пpобipки 13х75 мм. Iнкубaцiю реакцшно! сумiшi проводили при тeмпepaтуpi 37±1 °С впродовж 60±2 хв у сухопов!тряному тepмоблоцi «PYROTHERM». Робота проводилась стльно з лaбоpaтоpieю бiологiчного контролю корпораци Аpтepiум АТ "Галичфарм".
Результати дослщження. Згiдно з вимогами нормативно! документаци та вiдповiдних фармакопейних статей, piвeнь бaктepiйних eндотоксинiв у водi для ш'екцш повинен становити менше 0,25 МО/мл. Проте, досягнути такого piвня при виpобництвi пpeпapaтiв не зажди вдаеться. Тому нами з метою розробки методу тдвищення якостi препараив за показником бaктepiйнi ендотоксини було вивчено вплив повторно! стepилiзaцi! на показники якост готового продукту. Результати дослщження води для ш'екцш, розфасовано! у ампули об'емом 2 см3, подано у таблищ 1.
Таблиця 1
Вплив повторно*! стерашзащ!' на показники якост води для ш'екцш
у ампулах по 2 см3
Показники Готовий л!карський зaс!6 Повторна стepил!зaц!я, температура/час
121°С - 15 хв. 134°С - 20 хв.
Зовн!шн!й вигляд Прозора безбарвна р!дина Прозора безбарвна р!дина Прозора безбарвна р!дина
Питома електропров!дн!сть, не б!льше, мкСм/см 14,5±0,1 14,6±0,1 15,8±0,1
Хлориди, не б!льше % <0,00005 <0,00005 <0,00005
Н!трати, не б!льше % <0,00002 <0,00002 <0,00002
Амон!ю сол!, не б!льше % <0,00002 <0,00002 <0,00002
Сухий залишок, не б!льше мг 3,0±0,05 3,0±0,1 2.9±0,08
Механ!чн! включення - - -
Невидим! частки 10 мкм 25 мкм 280±2,6 21±0,5 280±3,4 21±0,7 280±3,9 21±0,4
Стерильн!сть Стерильний Стерильний Стерильний
Бaктep!йн! ендотоксини, менше МО/мл < 0,25 < 0,25 < 0,25
Як видно з даних, наведених у таблищ 1, при повторнш стepилiзaцi! води для ш'екцш у ампулах по 2 см3, суттевих змш у дослщжуваних показниках не виявлено. Встановлено лише збшьшення питомо! електропровщност при
повтоpнiй стеpилiзaцiï зa темпеpaтypи 134 °C нa 8,9 %, поpiвняно 1з готовим пpепapaтом, пpоте дaний покгзник не виходить зa межi деклapовaних покaзникiв якост1
У подaльшомy визнaчили вплив piзних темпеpaтypних pежимiв нa покaзники якост води для ш'екцш y флaконaх по 5 см3. Резyльтaти дослщжень подaно y тaблицi 2.
Taблuця 2
Вплив повторно*! стернлпацп на показники якост води для ш'екцш у
ампулах по 5 см3
Готовий лiкapський зaсlб Повтоpнa стеpилlзaцlя,
Покaзники темпеpaтypa/чaс
121°C - 15 хв. 134°C - 20 хв.
Зовн1шн1й вигляд Пpозоpa безбapвнa piдинa Пpозоpa безбapвнa piдинa Пpозоpa безбapвнa plдинa
Питомa електpопpовiднlсть, не
б1льше, мкCм/см 10,6±0,07 10,8±0,09 13,5±0,14
Хлоpиди, не б1льше % <0,00005 <0,00005 <0,00005
Hlтpaти, не б1льше % <0,00002 <0,00002 <0,00002
Aмонiю сол1, не б1льше % <0,00002 <0,00002 <0,00002
Cyхий зaлишок, не б1льше мг 1,02±0,04 1,3±0,04 1,3±0,03
Mехaнiчнi включення - - -
Hевидимl чaстки
10 мкм 325±2,5 328±2,2 328±3,3
25 мкм 51±0,6 52±0,6 52±0,5
Cтеpильнlсть Cтеpильний Cтеpильний Cтеpильний
Бaктеplйнl ендотоксини, менше
МО/мл < 0,25 МО/мл < 0,25 МО/мл < 0,25 МО/мл
Як видно з дaних, таведених y тaблицi 2, пpи повтоpнiй стеpилiзaцiï води для ш'екцш, y флaконaх по 5 см3, встaновлено незнaчне збiльшення питомо1' електpопpовiдностi зa темпеpaтypи 121 °C нa 1,9 % тa зa темпеpaтypи 134 °C нa 27,3 %, поpiвняно 1з готовим пpепapaтом, вс1 pештa покгзники 6ули без зм1н.
У подaльшомy ми вивчили вплив piзних умов повтоpноï стеpилiзaцiï нa погазники якост1 ф1з1олог1чного pозчинy. Визнaчення впливу повтоpноï стеpилiзaцiï нa aнaлiтичнi покгзники pозчинy нaтpiю хлоpидy, pозфaсовaного по 10 тa 200 см3, подaно у тaблицях 3, 4.
Таблиця 3
Вплив повторно? стернлпацй' на показники якост натр1ю хлориду у _ампулах по 10 см3_
Показники Готовий лжарський зааб Повторна стерил1зац1я, температура/час
121°С - 15 хв. 134°С - 20 хв.
Зовшшнш вигляд Прозора безбарвна Прозора безбарвна Прозора безбарвна
рвдина рвдина рвдина
Об'ем, що витягаеться, не менше,
мл 5,01 5,01 5,01
Мехашчш включения - - -
Невидим! частки 10 мкм 652±1,1 677±1,7 650±1,4
25 мкм 25±0,4 25±0,3 25±0,3
Стерильшсть Стерильний Стерильний Стерильний
Бактершш ендотоксини, менше МО/мл 0,5 0,5 0,5
Кшьшсть натрш хлориду, в мл 9.1±0,03 9.1±0,06 9,1±0,05
рН 5,3±0,04 5,7±0,07 5.7±0,05
Зал1зо, не бшьше % < 0,0002 < 0,0002 < 0,0002
Таблиця 4
Вплив повторно? стерилпацй' на показники якостi натр1ю хлориду у _флаконах по 200 см3_
Показники Готовий л1карський зас1б Повторна стерил1зац1я, температура/час
121°С - 15 хв. 134°С - 20 хв.
Зовшшнш вигляд Прозора безбарвна рвдина Прозора безбарвна р1дина Прозора безбарвна рвдина
Об'ем, що витягаеться, не менше 5,01 5,01 5,01
Мехашчш включення - - -
Невидим! частки 10 мкм 25 мкм 652±1,7 25±0,3 677±1,5 25±0,4 612±1,6 25±0,4
Стерильшсть Стерильний Стерильний Стерильний
Бактершш ендотоксини, менше МО/мл 0,5 0,5 0,5
Кшьшсть натрш хлориду, в 1 мл 9.1±0,07 9.1±0,04 9,1±0,06
рН 5,30±0,04 5,74±0,04 5.75±0,05
Зал1зо, не бшьше % < 0,0002 < 0,0002 < 0,0002
Результати, наведеш в таблицях 3 та 4, свщчать про те, що повторна стерилiзацiя за температури 134 °С упродовж 20 хв. не спричинюе значних вщхилень вiд задекларованих показникiв якостi розчину натрiю хлориду.
Висновки. 1. Незалежно вщ об'ему фасувальних одиниць розчину натр!ю хлориду та води для ш'екцш, повторна стерил!защя за температури 134°С упродовж 20 хв. не впливае на !х показники якост!
Перспективи подальших дослiджень. Дослщження впливу повторно! стерил!заци на р!вень бактершних ендотоксишв у стерильних лжарських засобах.
Лггература
1.Доклш!чш дослщження ветеринарних лжарських засоб!в / За ред. док.вет.наук, проф. I. Я. Коцюмбаса — Льв!в: Тр!ада плюс, 2006. — 360 с.
2. Ситников А. Г. ЛАЛ-тест. Современные подходы к определению пирогенности / А. Г. Ситников, Л. А. Травина, В. Л. Багирова. — М. — 1997. — 96 с.
3.Коцюмбас I. Я. Проблема визначення ендотоксишв, як основно! причини трогенност / I. Я. Коцюмбас, Г. Ю. Тесляр, А. О. Костюк [та ш.] // Ветеринарна медицина Укра!ни. — 2001. — № 8. — С. 34-36.
4.Державна фармакопея Укра!ни/ Державне пщприемство «Науково-експертний фармакопейний центр». — 1-е вид. — Харюв: Р1РЕГ, 2001. — 556 с.
5.Державна фармакопея Укра!ни / Державне пщприемство «Науково-експертний фармакопейний центр». — 1-е вид. — Доповнення 1. — Харюв: Державне пщприемство «Науково-експертний фармакопейний центр», 2004. — 520 с.
6.Державна Фармакопея Укра!ни / Державне пщприемство «Науково-експертний фармакопейний центр». — 1-е вид. — Доповнення 2. — Харюв: Державне пщприемство «Науково-експертний фармакопейний центр», 2008. — 620с.
Summary I. M. Kushnir
REPEATED STERILIZATION INFLUENCE ON QUALITY OF PROVIDED MEDICINES INDICATORS
In the article the question of repeated sterilization influence of saline and water for injection packaged in different containers by volume (2,5 and 200 cm3,) that underwent autoclaving at temperatures 121 °C within 15 min and 134 °C within 20 min is highlighted. It was established that at repeated sterilization at different temperatures changes in the indices of solutions for injection quality hadn't been observed.
Key words: bacterial endotoxins, LAL-test, specific conductivity, autoclaving, repeated sterilization
Стаття надшшла до редакцИ 13.05.2011
