CC BY
10
STUDYING THE GROWTH OF MICROORGANISMS OF THE GENUS STREPTOCOCCUS ON VARIOUS NUTRIENTS
Takhaviev I.G., Alimov A.M.
Summary
The article reflects the original data obtained during the study of the growth of microorganisms belonging to the strain of SLA from the genus Streptococcus in various nutrient media. An estimate of the growth rate of microorganisms was carried out taking into account changes in the density of bacterial suspension at different stages of cultivation. The media with the optimal composition for use in the growth of streptococci of the strain under study were determined. It was found that a synthetic nutrient medium, the composition of which was developed by the authors, can be effectively used in the cultivation of microorganisms belonging to the genus Streptococcus.
УДК 591.1:636.92
ВОЗРАСТНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ ТРАНСФЕРАЗ В ТКАНЯХ ТОНКОГО КИШЕЧНИКА У КРОЛИКОВ
*Терентьева М.Г. - к.б.н., доцент, Иванова Н.Н. - к.б.н., ст. преподаватель
*ФГБОУ ВО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» ФГБОУ ВО Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова
Ключевые слова: ферменты, аланинаминотрансфераза,
аспартатаминотрансфераза, возрастные изменения, тощая кишка, кролики.
Key words: enzymes, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, age-related changes, jejunum, rabbits.
Известно, что функциональная активность различных отделов тонкого кишечника неодинаковая. Кроме этого, она может изменяться в зависимости от возраста, типа питания, условий содержания животных и многих других факторов. Одним из методов определения функционального состояния того или иного органа является оценка активности внутриклеточных ферментов, так как они являются показателями интенсивности обмена веществ, происходящего в его тканях. В научной литературе имеются многочисленные работы по изучению активности таких ферментов. Так, для выявления уровня белкового обмена, связанной с переаминированием аминокислот, рассматривается активность таких ферментов, как аланинаминотранфераза, аспар-татаминотрансфераза, глутамилтрансфе-
раза [2, 4, 5, 8, 11, 12], активности амило-литических процессов - амилаза [1, 3, 6, 10], уровня процессов отщепления фосфорной кислоты от ее органических соединений - фосфатазы [7, 9, 13].
Целью нашей работы было изучение возрастных изменений физиологического состояния среднего отдела тонкого кишечника кроликов - тощей кишки. В качестве одного из показателей, который позволил бы сделать это, мы выбрали определение некоторых параметров уровня белкового обмена в его тканях. Нами была рассмотрена активность ферментов переаминирования - аланинаминотранс-феразы (АлАТ) и аспартатаминотрансфе-разы (АсАТ). Известно, что в тонком кишечнике происходят процессы расщепления и всасывания питательных веществ, перемешивания и продвижения
содержимого в толстый кишечник. В связи с этим, для более детальной оценки функционального состояния данного органа выбранные показатели исследовались как в слизистом, так и в мышечном слое проксимальной, медиальной и дис-тальной частей тощей кишки.
Материалы и методы исследований. Для проведения исследовательской работы были использованы кролики породы серый великан, выращенные в условиях личного хозяйства с соблюдением всех необходимых санитарно-вете-ринарных норм и правил. Активность ферментов изучалась у 50 крольчат в возрасте 1, 6, 12, 18, 24, 30, 45, 60, 90 и 120 суток. Крольчат усыпляли и затем проводили вскрытие. Извлеченные кишки
У новорожденных крольчат активность АлАТ (мкмоль/г*час) в тканях слизистого слоя наибольшая в проксимальном участке кишки (33,84±2,1)и невысокая в медиальной и дистальной (13,74±0,9 и 12,24±0,9). К шестому дню уровень фермента в тканях проксимальной части существенно не изменяется, медиальной - возрастает более чем в 4 раза, до 58,53±3,43, р<0,001, дистальной - в 7,3 раза, до 89,81±5,5, р<0,001. У двенадцатидневных крольчат активность АлАТ в тканях слизистого слоя проксимальной части увеличивается по сравнению с шестидневными на 50% и составляет 54,08±2,3, р<0,001, медиальной -остается на прежнем уровне, а дисталь-ной -снижается на 27% и составляет 65,45±4,8, р<0,01. Через шесть дней активность фермента в тканях слизистого
очищали от содержимого, промывали физиологическим раствором, выделяли тощую кишку, разделяли на проксимальную, медиальную и проксимальную части, слизистый и мышечный слои.
Выделенные ткани гомогени-ировали и в фильтрате из гомогената определяли активность АлАТ и АсАТ по методу Райтмана и Френкеля с использованием набора реагентов ОАО «Витал Девелопмен Корпорэйшен» СПб.
Активность ферментов определяли по построенным калибровочным кривым.
Результаты исследований. Полученные в ходе работы данные по активности АлАТв тканях слизистого слоя тощей кишки приведены в таблице 1.
слоя проксимальной части определяется на уровне 67,20±3,9, что на 24% выше, чем у двенадцатидневных, р<0,01, в тканях медиальной - 84,41±6,8, что выше на 36%, р<0,001, дистальной - 108,36±6,4, что выше на 66%, р<0,001. До 24 дня жизни уровень АлАТ продолжает возрастать в тканях слизистой проксимальной части (до 100,07±6,4, на 49%, р<0,01) и медиальной (до 109,38±6,6, на 31%, р<0,05), а в тканях дистальной - значительно не изменяется. У месячных крольчат существенных изменений в активности данного фермента в тканях слизистой тощей кишки не наблюдается. Через две недели активность АлАТ определяется на более низком уровне. В тканях проксимальной части она ниже на 30%, р<0,01 и составляет 68,36±4,7, медиальной - на 35%, р<0,01 и составляет 62,99±4,3, дис-
Таблица 1 - Активность АлАТ в тканях слизистого слоя тощей кишки у разновозрастных кроликов_
Часть Возраст, сут
кишки 1 6 12 18 24 30 45 60 90 120
Проксим 33,84 35,93 54,08 67,20 100,0 97,32 68,36 101,8 92,80 96,29
альная ±2,1 ±1,6 ±2,3 ±3,9 7±6,4 ±6,4 ±4,7 2±5,7 ±6,8 ±6,4
Медиаль 13,74 58,53 61,37 83,41 109,3 96,73 62,99 64,18 85,33 101,0
ная ±0,9 ±3,4 ±3,2 ±6,8 8±6,6 ±5,9 ±4,3 ±3,2 ±4,9 9±5,1
Дисталь 12,24 89,81 65,45 108,3 103,5 88,53 41,18 56,91 75,64 105,4
ная ±0,9 ±5,5 ±4,8 6±6,4 6±6,3 ±5,5 ±2,1 ±3,6 ±4,5 5±6,3
тальной - на 54%, р<0,001 и составляет 41,18±2,1. У двухмесячных животных активность данного фермента увеличивается в тканях проксимальной и дисталь-ной части кишки на 49%, р<0,01 до 101,82±5,7 и 38%, р<0,01 до 56,91±3,6 соответственно, а медиальной - не изменяется. К трехмесячному сроку уровень фермента возрастает по сравнению с двухмесячными в тканях медиальной части до 85,33±4,9, на 35%, р<0,01, дис-тальной - до 75,64±4,5, на 33%, р<0,01, в
Таблица 2 - Активность АлАТ в разновозрастных кроликов
Активность АлАТ у суточных крольчат в тканях мышечного слоя тощей кишки определяется на сравнительно невысоком уровне. В тканях проксимальной части она составляет 22,59±1,9, медиальной -19,76±1,2, в тканях дистальной она наибольшая и составляет 26,35±1,8. К шестидневному возрастув тканях проксимального участка активность данного фермента увеличивается на 28%, р<0,05 до 28,80±1,1, медиального - в 4,3 раза, р<0,001 до 52,66±3,5, дистального -в 3 раза, р<0,001 до 80,21±5,1. В дальнейшем, к двенадцатидневному сроку, уровень фермента возрастает в тканях проксимальной части тощей кишки на 22%, р<0,01 до 35,15±1,2 и снижается в тканях медиальной на 20%, р<0,05 до 41,97±2,6, дистальной - на 29%, р<0,01 до 56,91±3,0. Через шесть дней активность АлАТ в тканях всех участков кишки определяется на более высоком уровне: в проксимальной она составляет 51,04±3,7, что выше на 45%, р<0,01, медиальной - 82,56±5,1, что выше на 97%, р<0,001, дистальной - 97,75±5,4,
тканях проксимальной существенно не изменяется. Через месяц активность АлАТ в тканях проксимальной части также значительно не изменяется, а в тканях медиальной и дистальной увеличивается соответственно на 19%, р<0,05 до 101,09±5,1 и 39%, р<0,01 до 105,45±6,3. Полученные в ходе работы данные по активности АлАТ в тканях мышечного слоя тощей кишки приведены в таблице 2.
тканях мышечного слоя тощей кишки у
что выше на 72%,р<0,001. К 24 дню жизни крольчат уровень фермента увеличивается на 44%, р<0,01 до 73,60±4,8 в тканях проксимальной части, уменьшается на 18%, р<0,05 в тканях медиальной и существенно не изменяется в тканях дистальной, но здесь она по-прежнему остается наиболее высокой. У месячных животных наблюдается снижение уровня АлАТ в тканях проксимальной (на 34%, р<0,01 до 48,81±2,1) и дистальной (на 31%, р<0,01, до 74,18±4,6) частей. К 45 дню жизни наибольшая активность фермента так же отмечается в тканях дис-тальной части, где составляет 65,45±4,7, в тканях проксимальной и медиальной она уменьшается соответственно на 35%, р<0,001 до 31,74±2,1 и 56%, р<0,001 до 31,06±2,6. У двухмесячных крольчат активность АлАТ в тканях проксимального участка мышечного слоя тощей кишки составляет77,09±4,6, что выше, чем у месячных в 2,4 раза, р<0,001, медиального -99,64±6,4, что выше в 3,2 раза, р<0,001, дистального - 52,66±3,1, что ниже на 20%, р<0,05. Через месяц жизни крольчат
Часть Возраст, сут
кишки 1 6 12 18 24 30 45 60 90 120
Проксим 22,59 28,80 35,15 51,04 73,60 48,81 31,74 77,09 98,91 91,73
альная ±1,9 ±1,1 ±1,2 ±3,7 ±4,8 ±2,1 ±2,1 ±4,6 ±6,4 ±5,6
Медиаль 19,76 52,66 41,97 82,56 67,78 71,27 31,06 99,64 83,20 66,04
ная ±1,2 ±3,5 ±2,6 ±5,1 ±3,7 ±4,4 ±2,6 ±6,4 ±5,9 ±4,7
Дисталь 26,35 80,21 56,91 97,75 106,7 74,18 65,45 52,66 53,87 82,56
ная ±1,8 ±5,1 ±3,0 ±5,4 6±7,9 ±4,6 ±4,7 ±3,1 ±3,5 ±4,3
изменение уровня изучаемого фермента наблюдается только в тканях проксимальной части, где он возрастает на 28%, р<0,05 до 98,91±6,4. У четырехмесячных крольчат, наоборот, существенных изменений в тканях проксимального участка не происходит, а в тканях медиального -снижается на 21%, р<0,05 до 66,04±4,7, дистального - возрастает в 1,5 раза, р<0,01 до 82,56±4,3. Также расчеты показывают, что между активностью
АлАТ в тканях слизистого и мышечного слоя тощей кишки у кроликов наблюдается определенная корреляция: в тканях проксимальной и дистальной частей она сильная положительная (соответственно г=0,83 и г=0,88), в тканях медиальной - средняя положительная (г=0,61). Полученные в ходе работы данные по активности АсАТ в тканях слизистого слоя тощей кишки приведены втабл.3.
Часть кишки Возраст, сут
1 6 12 18 24 30 45 60 90 120
Проксим альная 11,47 ±0,8 37,22 ±1,4 43,85 ±2,3 31,59 ±2,5 33,88 ±1,9 34,86 ±2,1 35,67 ±2,5 32,41 ±2,0 31,33 ±2,2 34,69 ±2,4
Медиаль ная 15,20 ±0,7 34,78 ±2,2 44,15 ±2,8 15,60 ±1,2 29,73 ±1,2 35,51 ±2,6 32,82 ±2,4 35,76 ±2,1 34,45 ±2,5 33,55 ±2,1
Дисталь ная 16,46 ±1,1 37,39 ±1,6 37,71 ±1,9 18,20 ±1,1 30,93 ±2,2 28,93 ±1,7 30,00 ±2,2 23,42 ±1,5 28,67 ±1,3 28,27 ±1,6
Таблица 3 - Активность АсАТ в тканях слизистого слоя тощей кишки у разновозрастных кроликов
Активность АсАТ (мкмоль/г*час) у новорожденных крольчат в тканях слизистого слоя тощей кишки невысокая: в проксимальной части она составляет 11,47±0,8, медиальной -15,20±0,7, дис-тальной - 16,46±1,1. К шестидневному возрасту она значительно увеличивается в тканях всех частей: проксимальной - в 3,2 раза, р<0,001 до 37,22±1,4, медиальной и дистальной - в 2,3 раза, р<0,001 до 34,78±2,2 и 37,39±1,6 соответственно. К двенадцатидневному сроку активность данного фермента также повышается в тканях проксимальной (на 20%, р<0,05 до 43,85±2,3) и медиальной (на 27%, р<0,05 до 44,15±2,8) частей и остается неизменной в тканях дистальной. Через шесть дней жизни крольчат отмечается снижение уровня АсАТ: в тканях проксимального участка до 31,59±2,5, на 28%, р<0,01, медиального - до 15,60±1,2, на
65%, р<0,001, дистального - до 18,20±1,1, на 52%, р<0,001. С этого периода в тканях слизистой проксимального участка отмечается относительная стабилизация активности фермента. У 24-суточных крольчат активность АсАТ вновь возрастает в тканях медиальной и дистальной части, соответственно в 1,9 раза, р<0,001 до 29,73±1,2 и в 1,7 раза, р<0,001 до 30,93±2,2. В тканях медиальной части в дальнейшем существенных изменений уровня изучаемого фермента не наблюдается. Ко второму месяцу жизни актив-ностьв тканях дистального участка снижается на 22%, р<0,05 до 23,42±1,5, а к третьему- увеличивается на 22%, р<0,05 до 28,67±1,3 и далее значительно не из-меняется.Полученные в ходе работы данные по активности АсАТ в тканях мышечного слоя тощей кишки приведены в таблице 4.
Таблица 4 - Активность АсАТ в тканях мышечного слоя тощей кишки у
разновозрастных кроликов
Часть Возраст, сут
кишки 1 6 12 18 24 30 45 60 90 120
Проксим 11,87 31,76 45,69 22,61 33,31 26,93 28,93 30,13 36,90 35,67
альная ±0,7 ±2,1 ±2,3 ±1,1 ±2,3 ±1,7 ±1,5 ±2,4 ±1,7 ±2,1
Медиаль 12,53 37,88 40,62 18,20 27,30 34,04 30,00 31,33 34,45 41,08
ная ±0,8 ±2,1 ±2,7 ±1,0 ±1,9 ±2,1 ±1,7 ±2,5 ±1,9 ±2,2
Дисталь 18,78 34,45 38,53 20,99 29,73 23,42 31,47 18,78 29,33 28,00
ная ±1,1 ±1,5 ±2,5 ±1,5 ±1,8 ±1,5 ±1,6 ±1,3 ±1,4 ±1,4
У односуточных крольчат активность АсАТ в тканях мышечного слоя также относительно невысокая и составляет в проксимальной части 11,87±0,7, медиальной - 12,53±0,8, дистальной -18,78±1,1. К шестидневному сроку она возрастает в тканях проксимальной части в 2,7 раза, р<0,001 до 31,76±2,1, медиальной - в 3 раза, р<0,001 до 37,88±2,1, дис-тальной - в 1,8 раза, р<0,001 до 34,45±1,5. У двенадцатидневных крольчат существенные изменения отмечаются только в тканях проксимального участка, где активность увеличивается на 18%, р<0,05 до 45,69±2,3. Через шесть дней наблюдается значительное, но временное снижение уровня фермента: в тканях проксимальной части на 51%, р<0,001 до 22,61±1,1, медиальной - на 55%, р<0,001 до 18,20±1,0, дистальной - на 46%, р<0,001 до 20,99±1,5. К 24-дневному возрасту активность АсАТ вновь увеличивается в тканях проксимального участка на 47%, р<0,01 до 33,31±,23, медиального -на 50%, р<0,01 до 27,30±1,9, дистального - на 42%, р<0,01 до 29,73±1,8. У месячных крольчат отмечается снижение уровня фермента в тканях проксимальной (на 19%, р<0,05 до 26,93±1,5) и дистальной (на 21%, р<0,05 до 23,42±1,5) частей и увеличение в тканях медиальной (на 25%, р<0,05 до 34,04±2,1). В дальнейшем существенное изменение активности АсАТ в тканях проксимального участка мышечного слоя тощей кишки определяется только к трехмесячному возрасту (возрастает на 22%, р<0,05 до 36,90±1,7), в тканях медиального - к четырехмесяч-
ному (возрастает на 19%, р<0,05 до 41,08±2,2). В тканях дистального участка определяются колебания уровня данного фермента: к 45-дневному сроку он повышается (на 34%, р<0,01 до 31,47±1,6), к двухмесячному снижается (на 40%, р<0,001 до 18,87±1,3), а к трехмесячному - вновь увеличивается (на 56%, р<0,001 до 29,33±1,4) и более в исследуемый нами период не изменяется.
Изучение полученных данных показывает, что между активностью АсАТ в тканях слизистого и мышечного слоя тощей кишки наблюдается сильная положительная корреляция: проксимальной части г=0,85, медиальной - г=0,92, дистальной - г=0,91.
Заключение. Крольчата рождаются с относительно невысокой и неодинаковой в различных участках слизистого слоя тощей кишки активностью АлАТ. В дальнейшем до 18-24-дневного возраста она значительно возрастает в тканях всех частей и достигает максимальных в изучаемый период значений. К полутора и двухмесячному возрасту крольчат уровень АлАТ существенно снижается, но затем начинает возрастать и к четырехмесячному сроку вновь достигает достаточно высоких значений. В возрастных колебаниях активности данного фермента в тканях мышечного слоя тощей кишки наблюдаются схожие закономерности.
Активность АсАТ в тканях слизистого и мышечного слоя тощей кишки у новорожденных крольчат также невысокая. С возрастом она начинает увеличиваться: уже к 12-суточному сроку она
достигает максимальных в изучаемый период жизни значений. У 18-дневных крольчат отмечается временное снижение активности данного фермента, но в дальнейшем он определяется на относительно высоком уровне.
Кроме этого активность изучаемых ферментов отличается в различные периоды жизни в тканях проксимальной, медиальной и дистальной частей тощей кишки, как слизистого, так и мышечного слоев, что может быть связано с неравномерным ростом и развитием тканей кишки и неодинаковой функциональной нагрузкой.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Иванова, Н.Н. Активность а-амилазы и фосфатаз в тканях печени у поросят в ранний постнатальный период / Н.Н. Иванова, Н.Г. Игнатьев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2010. - Т. 204. - № 1. - С. 103108
2. Иванова, Н.Н. Коэффициент де Ритиса в сыворотке крови, в тканях печени и поджелудочной железы у поросят крупной белой породы в постнатальном онтогенезе / Н.Н. Иванова // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2011. - Т. 3. - № 31-1. - С. 136-138.
3. Игнатьев, Н.Г. Активность а-амилазы и фосфатаз в тканях поджелудочной железы у поросят/ Н.Г. Игнатьев, Н.Н. Иванова // Ветеринарный врач. -2011. - № 1. - С. 43-46.
4. Игнатьев, Н.Г. Активность гамма-глутамилтрансферазы в тканях желудка у поросят / Н.Г. Игнатьев, М.Г. Терентьева // Аграрный вестник Урала. -2011. - № 9. - С. 12-13.
5. Игнатьев, Н.Г. Возрастные изменения аминотрансфераз в тканях поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят / Н.Г. Игнатьев, Н.Н. Иванова // Ветеринарный врач. - 2011. -№ 4. - С. 36-39.
6. Кузнецова, Т.В. Транс-феразы и а-амилаза в тканях пищевода у
поросят / Т.В. Кузнецова, М.Г. Терентьева, О.П. Нестерова, М.А. Ершов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2014. - № 3. -С. 197-202.
7. Терентьева, М.Г. Активность аланин- и аспртатами-нотрансфераз, а - амилазы, щелочной и кислой фосфатаз в тканях ободочной кишки у разновозрастных чистопородных и помесных поросят / М.Г. Терентьева, Н.Г. Игнатьев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -2010. - Т. 204. - № 1. - С. 283-290.
8. Терентьева, М.Г. Аланин-аминотрансфераза в тканях двенадцатиперстной кишки у крольчат / М.Г. Терентьева, Н.Г. Игнатьев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2016. - Т. 225. - № 1. - С. 5962.
9. Терентьева, М.Г. Амилаз-ная и фосфатазная активность в тканях слепой кишки у растущих чистопородных и помесных поросят / М.Г. Те-рентьева, Н.В. Мардарьева, Т.В. Кузнецова // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Агрономия и животноводство. - 2013. - № 3. - С. 5359.
10. Терентьева, М.Г. Амино-трансферазы, фосфатазы и а-амилаза в тканях подвздошной кишки у поросят / М.Г. Терентьева, Т.В. Кузнецова, О.П. Нестерова, Н.В. Мардарьева // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2015. - № 224. - С. 228232.
11. Терентьева, М.Г. Уровень активности трансфераз в тканях различных участков тонкой кишки у новорожденных поросят / М.Г. Терентьева // В сборнике: Молодежь и инновации: материалы XIII Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых,
спирантов и студентов. - 2017. - С. 107110.
12. Терентьева, М.Г. Глутамил-трансфераза в тканях толстого кишечника у молодняка свиней / М.Г. Теренть-ева, Н.Г. Игнатьев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -2014. - № 3. - С. 266-270.
13. Терентьева, М.Г. Трансфе-разы, фосфатазы, а-амилаза в тканях прямой кишки у поросят / М.Г. Теренть-ева, Н.Г. Игнатьев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -2014. - Т. 218. - № 2. - С. 260-266.
ВОЗРАСТНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ ТРАНСФЕРАЗ В ТКАНЯХ ТОНКОГО
КИШЕЧНИКА У КРОЛИКОВ
Терентьева М.Г., Иванова Н.Н. Резюме
В статье приведены данные по возрастным колебаниям активности ферментов аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы в тканях слизистого и мышечного слоя проксимальной, медиальной и дистальной части тощей кишки у кроликов. Установлено, что крольчата рождаются с невысокой активностью данных ферментов во всех слоях тощей кишки, но с возрастом она увеличивается. Определено в какие периоды уровень ферментов возрастает, снижается или стабилизируется. Выявлено, что в различных участках тощей кишки в изучаемый период активность трансфераз неодинаковая.
AGE CHANGES OF ACTIVITY OF TRANSFERASES IN THE TISSUES OF THE SMALL
INTESTINE IN RABBITS
Terenteva M.G., Ivanova N.N.
Summary
The article presents data on age-related fluctuations in the activity of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase enzymes in the tissues of the mucous and muscular layers of the proximal, medial and distal parts of the jejunum in rabbits. It was found that rabbits are born with low activity of enzymes in all layers of the jejunum, but with age it increases. It is determined in what periods the level of enzymes increases, decreases or stabilizes. It is revealed that in different areas of the jejunum during the studied period the activity of transferases varies.
