Воздействие препарата фоспренил на поляризацию иммунного ответа, обусловленную CagA+ фрагментом хромосомыhelicobacter pylori Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue

Экспериментальные модели Experimental models

видностью демонстрировало, что индекс модуляции при применении M в дозе 108 КОЕ/ мышь и Линекса 5 х 107 КОЕ/мышь определялся со знаком «—», свидетельствуя о токсическом действии этих препаратов и необходимости ограничения их дозы. В отношении действия на фагоцитоз макрофагов, подтверждалось, что M в дозе 2 х 107 КОЕ/мышь, эффективно увеличивает концентрацию макрофагов в перитонеальном экссудате и их поглотительную активность (p < 0,001). Показано, что M в дозе 107 M существенно превосходил влияние Линекса на фагоцитарную активность макрофагов (p < 0,001). Однако высокая доза (2 х 108 КОЕ/мышь) М приводило к снижению фагоцитарного индекса.

Таким образом, разрабатываемый препарат М, в состав которого входят штаммы E. faecium L3, L. rhamnosus K32, B. longum GT15, в дозе 107 КОЕ/мышь, не нарушает функционирование иммунной системы, а по стимуляции фагоцитарной активности превосходит Линекс. При включении пробиотиков в схемы таргетной терапии различных заболеваний нужно учитывать, что дозы препаратов могут существенно влиять на реализации важных функции иммунной системы.

ВОЗДЕЙСТВИЕ ПРЕПАРАТА ФОСПРЕНИЛ НА ПОЛЯРИЗАЦИЮ ИММУННОГО ОТВЕТА, ОБУСЛОВЛЕННУЮ CagA+ ФРАГМЕНТОМ ХРОМОСОМЫ HELICOBACTER PYLORI

Николаева Т.Н., Козлов В.В., Григорьева Е.А., Белый Ю.Ф., Пронин А.В.

ФГБУ «Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия

Иммунные механизмы являются ключевыми в формировании Helicobacter pylori (Н.р), ассоциированной га-стродуоденальной патологии.

Функциональные белки CagA M.M.120-145-kDa, кодируемые островком патогенности сagA(cagPAI) в 40kb, интегрированным в хромосому Н.р., воздействуют на множественные сигнальные пути, которые регулируют естественный клеточный иммунитет, в том числе Th-клетки. С CagA ассоциировано смещение поляризации иммунного ответа с Th1 на Th2 с параллельным возрастанием активности регуляторных T-клеток и прогрессией тяжелых форм поражения желудка вплоть до аде-номокарциномы. При инфекции, вызванной CagA- Н.р., такого смещения не наблюдается.

В связи с этим актуален поиск путей иммунокор-рекции естественного и адаптивного иммунитета при хеликобактериозе. Фоспренил (ФП) относится к фос-фориллированным полиизоприноидам, которые являются интегральными компонентами мембран всех живых клеток, где выполняют функции промежуточных акцепторов сахаров (в частности маннозы) при биосинтезе гликопротеинов. Ранее было показано, что препарат способен подавлять взаимодействие IL-2 с CD25 и, таким образом, препятствовать активации ре-гуляторных Т-клеток. В связи с этим цель настоящего исследования состояла в изучении действие препарата ФП на иммунный ответ экспериментальных животных, инфицированных живыми бактериями генетически родственных штаммов E. coli BL21, отличающихся наличием островка cagA H.pylori.

Материалы и методы. бактерии генетически родственных штаммов живых бактерий E. coli BL21p119(CagA+) и E. coli BL21рЕТ-28с (CagA-). Мышам интрагастрально через металлический зонд вводили живые бактерии изученных штаммов в количестве 5 х 109 КОЕ/0,5 мл. Клеточные иммунные реакции оценивали по уровню пролиферации спленоцитов в реакции бласттрансформации (РБТЛ), цитотоксической активности ЕК-клеток селезенки, синтезу цитокинов методом ELISA. Анализ экспрессии поверхностных антигенов на мононуклеарных лимфоцитах селезенки проводили методом проточной цитофлуорометрии с использованием моноклональных антител анти-CDi-FITC, CD4-PE-Cy7, CD8-APC (BD Biosciences, USA). Образцы анализировали на проточном цитофлуориме-тре BD FACS CantoII (BD Biosciences, USA).

Результаты. Введение животным E. coli CagA+ уже через сутки сопровождается резким усилением про-лиферативной активности спленоцитов, чего не наблюдается после заражения изогенным CagA- штаммом E. coli BL21. Предварительное введение животным ФП за 3 часа до заражения нивелирует различия между штаммами. При этом ФП усиливал активацию естественных киллеров у мышей, зараженных штаммом E. coli BL21p119 (CagA+), значительно сильнее, чем у животных зараженных штаммом, не продуцирующим CagA белки (Р < 0,05).

Методом проточной цитофлуориметрии показано, что ФП сильнее снижает число CD3+CD4+T клеток у мышей, инфицированных CagA+ по сравнению с мышами, инфицированными CagA- мутантом и подавляет продукцию IL-2 Т-клетками, оставляя неизменным соотношение IFNy, IL-4 и IL-10, что свидетельствует об ингибиру-ющем воздействии ФП на регуляторные T-клетки.

Таким образом, ФП, подавляя активность регуляторных Т-клеток, может препятствовать поляризации иммунного ответа с Th1 на Th2, связанной с активностью CagA.

ЭФФЕКТЫ ДЕЙСТВИЯ АНТИМИКРОБНЫХ ПЕПТИДОВ НА ЦИТОТОКСИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ МОНОНУКЛЕАРОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА В ОТНОШЕНИИ КЛЕТОК МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ IN VITRO

Пазина Т.Ю.1, Артамонов А.Ю.1, Орлов Д.СЛ 2, Филатенкова Т.А., Шамова О.В.1, 2

1ФГБНУ«Институт экспериментальной медицины», Санкт-Петербург, Россия

2 Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия

Нейтрофилы, циркулирующие в периферической крови и мигрирующие в очаги развития патологических процессов, способны посредством биологических активных молекул модулировать иммунный ответ, а именно влиять на функцию цитотоксических Т- и ЕК-клеток. Роль нейтрофильных гранулоцитов в опухолеобразова-нии неоднозначна, так как секретируемые этими клетками факторы могут, как стимулировать опухолевый рост, так и способствовать его ограничению. Известно, что катионные пептиды (АМП) нейтрофилов, проявляющие антимикробные свойства, обладают также и противоопухолевой активностью.