CC BY
2
российский жж w» ш а
онкологический y у \ж i конгресс-2022 /\/\ v i
сяцев (от 4 до 16 мес.), до развития второго — 5 месяцев (от 1 до 8 мес.). Протокол иммунотерапии включал комбинированное введение аутологичной вакцины на основе дендритных клеток (ДВ) и повторные интратекальные инъекции донорских аллогенных иммунокомпетентных клеток в течение не менее 2 лет. Применялась комбинированная схема иммунотерапии, включающая интратекальные введения аллогенных лимфоцитов от родственного И1.Д частично-совместимого донора и дендритных вакцин, нагруженных опухолевым лизатом. Результаты: Общая продолжительность лечения составляла 2 года. Период наблюдения составил от 3 месяцев до 12 лет. У двух из трех пациентов с АА интервал без прогрессирования составил 67 и 71 месяц. Один пациент с третьим рецидивом МГ жив без какой-либо терапии через 13,3 года после начала иммунотерапии. Среднее время наблюдения составило 67 месяцев, общая двухлетняя выживаемость составила 58%. Два пациента умерли от прогрессирования заболевания в течение 6 и 7 месяцев от начала иммунотерапии. За период лечения пациенты получали в среднем 20 (от 8 до 60) инъекций аллогенных иммунокомпетентных клеток и 18 (от 8 до 44) инъекций ДВ. Побочных эффектов не наблюдалось. Заключение: Персонализированная иммунотерапия — вариантом лечения пациентов со злокачественными глиомами и заслуживает дальнейшего изучения.
ОЦЕНКА НЕФРОТОКСИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА ГИБРИДНЫХ ОЛОВООРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ПРИ ОДНОКРАТНОМ ВНУТРИЖЕЛУДОЧНОМ ВВЕДЕНИИ
М.А. Додохова1, И.М. Котиева1, А. В. Сафроненко1, М.С. Ал-хусейн-Кулягинова1, Д.Б. Шпаковский2, Е.Р. Милаева2 Место работы: 1. ФГБОУ ВО Ростовский государственный медицинский университет Минздрава России, Ростов-на-Дону, Россия; 2. ФГБОУ ВО Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия Эл. почта: dodohova@mail.ru
Цель: Одним из основных побочных эффектов химио-терапевтического лечения является нефротоксичность. При терапии соединениями платины у 27% пациентов диагностировано тяжелое поражение почек — острый тубу-лярный (канальцевый) некроз. На этапе доклинического изучения перспективных кандидатов в лекарственные средства для лечения злокачественных новообразований актуальной задачей является оценка нефротоксического потенциала тестируемых соединений. В настоящее время активно ведется поиск и разработка новых противоопухолевых и/или антиметастатических агентов на основе органических производных металлов, среди которых большой интерес вызывают соединения олова.
Целью данного исследования является доклиническая морфологическая оценка нефротоксического потенциала бис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) диме-тилолова (Ме-3) и ( (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил-тиолат) трифенилолова (Ме-5) при однократном внутри-желудочном введении в максимально переносимых дозах (МПД) на пике проявлений токсического процесса (7 сутки). Материалы и методы: Исследование выполнено на крысах Wistar (самки). Соединения Ме-3 и Ме-5 в дозах 2000 мг/кг и 750 мг /кг соответственно вводили однократно внутри-желудочно через зонд в виде взвеси, полученной путем суспензирования в 1 % водном растворе желатина, объемом не более 2 мл. Животным из контрольной группы вводили носитель в аналогичных режимах и объемах. После декапитации на гильотине изготавливали гистологические срезы ткани почек толщиной 4-5 мкм, окраску препаратов проводили: гематоксилин-эозином и по Ван Гизону. Микроскопию полученных гистологических препаратов осуществляли при 10, 20, 40-кратном увеличении с помощью светового микроскопа «LEICA DM4000B». Результаты: В результате изучения гистологического материала ни в одной группе животных тубулярного некроза выявлено не было. При введении Ме-3 зафиксирован — отек, неравномерное полнокровие, гломерулы клеточные, в интерстиции — отек, очаговые геморрагии, нефротелий канальцев набухший, местами десквамирован. При введении Ме-5-отек, неравномерное полнокровие, гломерулы разнокалиберные, перигломерулярный отек, в интерстиции — отек, очаговые геморрагии, нефротелий канальцев набухший, местами десквамирован, в состоянии гиалиново-капельной дистрофии.
Заключение: На основании полученных результатов проведенного исследования можно сделать выводы, что изучаемые кандидаты в ЛС противоопухолевой группы Ме-3 и Ме-5 в максимально переносимых дозах (2000 мг/кг и 750 мг / кг соответственно) обладают минимальной и средневыраженной нефротоксичностью, морфологические изменения теоретически обратимы. Оценка нефроток-сичности на ранних этапах доклинических исследований может служить одним из показателей целесообразности продолжения исследований тестируемых соединений. Работа выполнена при поддержке РФФИ (грант № 20-0300471) и РНФ (грант №22-23-00295).
ВОЗДЕЙСТВИЕ НА БИОМОДЕЛЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЛУЧЕВЫХ МУКОЗИТОВ У КРЫС ОЗОНИРОВАННОГО РАСТВОРА 0,9 %
И.П. Мошуров13, Н.В. Коротких13, В.В. Шишкина23, П. Ю. Андреев3, Д.А. Семенов3, К.Н. Коротких2 Место работы: 1. БУЗ ВО «Воронежский областной клинический онкологический диспансер», Воронеж, Россия; 2. НИИ экспериментальной биологии и медицины ФГБОУ ВО «ВГМУ имени
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Н.Н. Бурденко» Минздрава России, Воронеж, Россия; 3. ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко» Минздрава России, Воронеж, Россия
Эл. почта: kornat78@mail.ru
Цель: Лучевой мукозит продолжает оставаться одним из самых тяжелых и часто регистрируемых осложнений противоопухолевого лечения, существенно снижающим качество жизни онкологических пациентов. Развитие му-козита приводит к прерыванию курсов проводимого лучевого лечения и тем самым к снижению его эффективности, что неблагоприятно сказывается на прогнозе заболевания. Кроме этого, мукозит существенно повышает расходы на лечение онкологических пациентов и увеличивает сроки госпитализации. В связи с этим возникает необходимость в поиске и разработке высокоэффективных средств профилактики и лечения различных форм муко-зита с целью повышения эффективности противоопухолевого лечения онкологических заболеваний. Целью данной экспериментальной работы является оценить эффективность применения озонированного раствора 0.9 % NaCl с целью профилактики и лечения радиационно-индуци-рованных мукозитов.
Материалы и методы: Объектом исследования являлись 20 беспородных половозрелых крыс-самок с начальным возрастом 4 месяца и массой 200-300 г, разделенные на две группы контрольную (1 группа, n = 10) и экспериментальную (2 группа, n = 10). В обеих группах была проведена дистанционная лучевая терапия на область ротовой полости на гамма терапевтическом аппарате «Тератрон» с источником ионизирующего излучения кобальт-60, РОД — 10Гр, С0Д-10Гр, однократно. Для профилактики и лечения мукозита во 2 группе экспериментальным животным проводилось орошение полости рта озонированным 0,9% физиологическим раствором: орошение ротовой полости 1 мл-8 мг х 1 раз в сутки, 7 дней. В контрольной группе профилактика и лечение мукозитов не проводилось. Содержание, кормление, уход за животными и выведение их из эксперимента осуществлялся в соответствии с установленными нормами согласно правилам лабораторной практики Российской Федерации (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.), со строгим соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986). Ежедневно проводилось наблюдение /клинический осмотр, измерение массы тела. Вывод животных из эксперимента осуществлялся на 8 сутки после воздействия с дальнейшим забором фрагментов слизистой оболочки ротовой полости, незамедлительной фиксацией в 10 % забуференном формалине и проведением стандартной процедуры про-боподготовки. Изготавливались серийные срезы толщиной 4 мкм для проведения обзорных методик окрашивания — гематоксилин и эозин, раствор Май-Грюнвальд Гимза. Для иммуногистохимического способа окрашивания изготавливали срезы толщиной 2 мкм с дальнейшей детекцией макрофагов: CD 68 (Abcam #ab201340, разве-
дение 1:200, Великобритания) и CD 163 (Abcam #ab182422, разведение 1:500, Великобритания) и фактора роста эндотелия сосудов VEGF (Abcam #ab32152, разведение 1:150, Великобритания). Количественный анализ гистологических срезов проводился с использованием микроскопа Zeizz Imager. A2, программного обеспечения ImagePro. Анализ микропрепаратов производился по 30 полям зрения при увеличении х 40 с дальнейшим пересчетом распределения на 1 мм2.
Результаты: Морфологический анализ микропрепаратов контрольной (1 группы), окрашенных гематоксилином и эозином выявил признаки развивающегося воспаления слизистой оболочки — субэпителиальную нейтрофильно-лимфоцитарную инфильтрацию, истончение эпителия с возникновением микротрещин и изъязвлений, полнокровие сосудов. Окрашивание раствором Май-Грюнвальд Гимза позволило обнаружить очаговые скопления тучных клеток и эозинофилов, преимущественно локализованных периваскулярно и на границе с эпителием. Тучные клетки активно дегранулировали, высвобождая продукты секретома во внеклеточный матрикс и порою образовывали скопления гранул вокруг себя. Экспериментальная группа животных (2 группа) также имела признаки воспаления слизистой оболочки, однако выраженность данных изменений была ниже. Обращало на себя внимание снижение как количественного представительства тучных клеток и их разобщенность, так и качественное, проявившееся в снижении активности дегрануляции. В данном аспекте, тучные клетки рассматриваются как одни из главных продуцентов провоспалительных цитокинов, что особенно важно учитывать в патогенезе развития лучевых мукозитов и возникающего цитокинового шторма. Повышение уровня цитокинов, ассоциированное с развитием мукозита повлекло за собой количественное снижение макрофагального ответа M1 (CD 68)/M2 (CD 163) в контрольной группе по сравнению с экспериментальной группой, подтвержденное иммуногистохимическим методом. Под воздействием озонированного раствора происходила активация макрофагов CD 68 и CD 163 в десятки раз со смещением баланса M1/ M2 в сторону М2, что является положительным прогностическим критерием в оценке репаративных процессов слизистой оболочки ротовой полости. Иммуногистохимическая реакция на VEGF продемонстрировала значительное снижение фактора роста в слизистой оболочке ротовой полости животных контрольной группы (130 ± 12,6), в то время как под воздействием озонированного раствора 0,9% NaCl происходило достоверное увеличение данного биомаркера (201 ± 18,2). Заключение: На данный момент актуальными и перспективными являются исследования, направленные на изучение различных средств, предотвращающих развитие лучевых мукозитов. Полученные данные показали обнадеживающие результаты применения озонированного раствора 0,9% NaCl с целью профилактики и лечения радиа-ционно-индуцированных реакций со стороны слизистых ротовой полости. Макрофагов и тучные клетки как клю-
российский жж w» ш а онкологический Y Y \ж I конгресс-2022 /\/\ v i
чевые участники различных морфогенетических процессов, в том числе репарации и поддержания локального гомеостаза, визуализировали положительные эффекты озонированного раствора в патогенезе мукозита ротовой полости. Экспериментальные исследования эффектов использования озонированных растворов на лабораторных животных будут продолжены с целью дальнейшей оптимизации режимов и доз применения.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМБИНАЦИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ С ДОНОРОМ ОКСИДА АЗОТА И ФЕНОЛЬНЫМ АНТИОКСИДАНТОМ НА ЛЕКАРСТВЕННО-УСТОЙЧИВЫХ ШТАММАХ ЛИМФОЛЕЙКОЗА P388 МЫШЕЙ С ИЗМЕНЕННЫМ РЕДОКС-СТАТУСОМ КЛЕТОК ТЕЗИСЫ
Т.А. Раевская1, Д.В. Казакова2, Ю.В. Солдатова1, С.А. Гончарова1, Т.Н. Богатыренко1, Н.В. Кандалинцева3, И.И. Файнгольд1
Место работы: 1. Федеральный исследовательский центр проблем химической физики и медицинской химии Российской академии наук, Черноголовка, Россия; 2. Ивановский государственный университет, Иваново, Россия; 3. Носибирский государственный педагогический университет, Новосибирск, Россия
Эл. почта: tara@icp.ac.ru
Цель: Редокс-гомеостаз клеток в организме определяется балансом между выработкой активных форм кислорода (АФК) и активностью антиокислительных (АО) ферментов. Во многих типах опухолевых клеток и, в частности в лейке-мических клетках, этот баланс сохраняется при повышенных уровнях АФК. Когда уровень АФК превышает рамки, приемлемые для жизнедеятельности, клетки претерпевают окислительное повреждение, приводящее к клеточной смерти. Изменение редокс-состояния клеток имеет большое значение для терапии. В клинической практике используются многие АФК-продуцирующие противоопухолевые (п /о) средства, склоняющие редокс-баланс от роста и выживаемости в сторону клеточной гибели. В результате применения таких лекарственных средств в клетках происходит активация различных АО ферментных и неферментных систем (включая супероксиддисму-тазу, каталазу, гемоксигеназу, тиоредоксин, глутатион и др.), что является причиной уменьшения их эффективности. Адаптация к окислительному стрессу не только дает возможность раковым клеткам выжить, но также обеспечивает механизм лекарственной устойчивости (ЛУ) ко многим п /о средствам и радиотерапии. Для раковых клеток, которые адаптировались к более высокому уровню окислительного стресса, увеличив свою АО способность, применение только АФК-генерирующих лекар-
ственных средств может быть неэффективным. В связи с этим, можно комбинировать АФК-генерирующие препараты с соединениями, подавляющими антиокислительные возможности клетки. С другой стороны установлено, что использование доноров оксида азота (NO) способно повысить эффективность терапии экспериментальных опухолей, например, цисплатином,циклофосфа-ном, а также комбинацией циклофосфана и доксоруби-цина. Поиск химиопрепаратов или комбинаций веществ с различными механизмами действия, способных усилить окислительное повреждение и вызвать гибель опухолевых клеток, продолжается.
Цель: Исследовать эффективность применения комбинаций субтерапевтических доз цисплатина (cPt) и адриамицина (ADR) с серосодержащим фенольным антиоксидантом 3- (3'-трет-бутил-4'-гидроксифенил) — пропилтиосульфонатом натрия (ТС-13) и донором NO нитритом натрия (NaNO2) на мышах с двумя ЛУ-вариантами лимфолейкоза Р388 с измененным редокс-статусом клеток. Материалы и методы: Исследования проводились на животных с ЛУ-штаммами Р388, которые были получены ранее in vivo путем последовательной перевивки опухолевых клеток от мышей, которым вводили соответствующие ци-тостатики, постепенно увеличивая дозу препарата в ходе последующих трансплантационных генераций. В предшествующих работах было установлено, что опухолевые клетки устойчивого к циклофосфану (Р388 / ЦФ) и цисплатину (Р388 /cPt) штаммов Р388, используемых в данной работе, обладают измененным редокс-статусом по сравнению с лекарственно-чувствительным штаммом Р388. Содержание глутатиона в клетках штамма Р388/ cPt было достоверно повышено, а в клетках штамма Р388 / ЦФ было повышено более чем в два раза по сравнению с клетками чувствительного штамма Р388. В клетках обоих ЛУ-штаммов наблюдался повышенный уровень экспрессии гена GCLM (одной из субъединиц глутаматцистеинлигазы, катализирующей реакцию глутамата с цистеином в ходе синтеза глутатиона). Кроме того, в клетках штамма Р388/ЦФ была повышена экспрессия других генов биосинтеза глутатиона (глутатионпероксидазы (GPX1) и глутатионредуктазы (GSR)) и была обнаружена активация транскрипционного фактора антиоксидантного ответа Nrf2 на фоне высокой внутриклеточной концентрации АФК. Химиотерапевти-ческие опыты проводили на мышах-гибридах BDF1. Критерием эффективности п / о терапии служил показатель УПЖ% (увеличение средней продолжительности жизни леченых мышей по сравнению с контрольными). Терапевтические дозы определяются как 1/ 3 от LD50 и составляют для ADR 5 мг / кг, для cPt 4 мг/ кг. Однако в данном исследовании использовали субтерапевтические дозы, составлявшие для cPt — 0,6 мг/кг, для ADR — 1 мг/кг. ТС-13 вводили в дозе 30 мг/кг (1/8 от LD50), а NaNO2-40 мг/кг. Результаты: На штамме Р388 / ЦФ применение cPt ТС-13 (УПЖ 163 %) и cPt NaNO2 (УПЖ 223%) обеспечило повышение УПЖ по сравнению с монотерапией cPt (УПЖ 100%) на 63 % и 123%, соответственно. Комбинация cPt
