CC BY
60
Аграрный вестник Урала № 12-1 (91), 2011 г-ч^уй*^^1
%$Ф
__________________Ветеринария -И*
ВОССТАНОВЛЕНИЕ КОЛОНИЗАЦИОННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ПРИ ДИАРЕЙНОМ СИНДРОМЕ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ
Е. В. МАЛИК,
кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник,
Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов,
Б. В. УША,
доктор ветеринарных наук, академик РАСХН,
И. А. РУСАНОВ,
аспирант, Московский государственный университет
прикладной биотехнологии 109316, г. М°скм, ул. т^ли™^, д. 33
Ключевые слова: диарея, телята, костный мозг, клетки эритроидного, лимфоидного и зернистого ростка, пробиотик, иммунодефициты.
Keywords: diarrhea, calves, bone marrow, erythroid cells, deficiencies.
В последние десятилетия пересмотрены методологические подходы к профилактике и лечению желудочно-кишечных болезней, выбрано направление на разработку нового поколения экологически безопасных препаратов, направленных на коррекцию кишечного биоценоза, нейтрализацию патогенной микрофлоры, — пробиотиков. Пробиотики используют для стимуляции неспецифического иммунитета, профилактики и лечения смешанных желудочно-кишечных инфекций, расстройств пищеварения алиментарной этиологии. Однако действие пробиотиков при выраженном клиническом поражении желудочно- кишечного тракта не всегда является достаточным для восстановления физиологического статуса всего организма. В этой связи лечение телят мы проводили комплексно с использованием препарата АСД-2Ф.
Цель и методика исследований.
Цель исследований — изучить состояние колонизационной резистентности кишечника при диарейном синдроме у новорожденных телят и на фоне комплексной терапии пробиотиком Пиокорм Пионер и АСД-2Ф.
Исследования проводили на телятах, которых по принципу аналогов разделили на 5 групп: 1 группа — контрольная (здоровые), 2-5 — больные (сидром диареи). С телятами 2 группы никакие лечебные манипуляции не проводились. Животных 3-й группы подвергали лечению препаратом АСД-2Ф, 4-й группы — пробиотиком Биокорм-Пионер, 5-й группы — АСД-2ф + Биокорм Пионер. До начала опытов, затем через 10, 20, 30 и 60 дней проводили взятие фекалий для микробиологических исследований.
Культивирование клостридий проводили на мясопеп-тонном печеночном бульоне Кита-Тароцци, плотной среде Вильсона-Блера, глюкозо-кровяном агаре Цейсслера. Для выделения стафилококков использовали кровяной солевой МПА. Из чистой культуры, выращенной на МПА, ставили реакции на плазмокоагуляцию, фибринолизин, лецитиназу, ДНК-азу и скрытую гемолитическую активность. Выделение бифидобактерий проводили на среде Блаурокка, лактобацилл — на среде МРС, микроскопических грибов — на средах Сабуро и Чапека. Результаты переводили в десятичные логарифмы и устанавливали относительное соотношение различных групп микроорганизмов в кишечной популяции.
Результаты исследований.
В процессе опытов содержание бифидобактерий в кишечнике телят 1 контрольной группы находились в пределах от 11,6 до 12,8 lg KOE/г. Уровень их в кишечнике
lymphoid and germ-grained, probiotics, immune
больных телят 2 группы имел тенденцию к снижению. Данный показатель уступал контролю на 10, 20, 30 и 60 дни в 1,46; 1,71; 1,97 и 2,15 раза (на 3,7; 5,3; 6,0 и 6,2 lg KOE/г).
Показатели бифидобактерий в кишечнике телят 3 группы превышали данные животных 2 группы на эти сроки опыта в 1,22; 1,39; 1,82 и 1,96 раза (на 1,8; 2,9; 5,1 и 5,2 lg KOE/г). При этом они уступали контрольным цифрам соответственно в 1,19 раза (на 1,9 lg KOE/г), в 1,23 раза (на 2,4 lg KOE/г), в 1,08 раза (на 0,9 lg KOE/г) и 1,09 раза (на 1,0 lg KOE/г). Параметры бифидобактерий в кишечнике телят 4 группы, динамично повышаясь, к 30 дню исследований достигли контрольных данных и даже несколько превысили их — в 1,02 раза (на 0,2 lg KOE/г).
Содержание бифидобактерий в кишечнике телят 5 группы было выше данных животных 2, 3 и 4 групп соответственно на 10 день — в 1,43 раза (на 3,5 lg KOE/г), в 1,17 раза (на 1,7 lg KOE/г) и 1,07 раза (на 0,8 lg KOE/г), на 20 день — в 1,67 раза (на 5,0 lg KOE/г), в 1,20 раза (на 2,1 lg KOE/г) и 1,05 раза (на 0,6 lg KOE/г), на 30 день — в 2,0 раза (на 6,2 lg KOE/г), в 1,1 раза (на 1,1 lg KOE/г) и 1,0 раз (на 0,0 lg KOE/г), на 60 день — в 2,2 раза (на 6,5 lg KOE/г), в 1,12 раза (на 1,3 lg KOE/г) и 1,03 раза (на 0,4 lg KOE/г).
Результаты исследования динамики изменения содержания лактобацилл в кишечнике телят представлены в табл. 1.
Фоновый показатель стафилококков в кишечнике телят 1 контрольной группы составил 5,0 lg KOE/г, остальных групп (со 2 по 5) был повышен до 8,6-9,2 lg KOE/г В процессе опыта у телят 1 контрольной группы стафилококки находились в пределах от 4,6 до 5,3 lg KOE/г.
Уровень стафилококков в кишечнике телят 2 группы значительно повышался и превышал контрольные цифры животных 1 группы на 10, 20, 30 и 60 дни в 1,77; 2,10; 2,54 и 2,89 раз (на 4,1; 6,6; 7,1 и 8,9 lg KOE/г).
Показатели содержания стафилококков в кишечнике телят 3 группы снижались, но превышали данные животных 1 контрольной группы на 10, 20, 30 и 60 дни опыта в 1,57; 1,55; 1,35 и 1,36 раза (на 3,0; 2,7; 1,6 и 1,7 lg KOE/г). Подобным образом и примерно на таком уровне изменялась динамика стафилококков в кишечнике телят 4 группы. Интенсивный процесс снижения уровня стафилококков наблюдался в кишечнике телят 5 группы. Однако они продолжали незначительно превышать контрольные цифры животных 1 группы на 10, 20, 30 и 60 дни опытов соответственно в 1,19; 1,04 и 1,02 раза (на 1,0; 0,2 и 0,1 lg KOE/г). При этом их уровень был ниже показателей телят 2, 3 и 4
Аграрный вестник Урала № 12-1 (91), 2011 г.—
Ветеринария
Таблица
Динамика изменения содержания лактобацилл в кишечнике телят (в lg КОЕ/г, M ± m, Cv, %, Р)
Опытные группы и использованные препараты Статистический показатель Фон Сроки исследования, в днях от начала опыта
10 20 30 60
1 Контроль — здоровые M 11,6 10,5 10,9 10,7 11,8
±m 0,18 0,11 0,13 0,20 0,14
Cv, % 3,47 2,34 2,67 4,18 2,65
2 Контроль — больные M 7,4 6,7 6,2 5,8 5,0
±m 0,12 0,18 0,14 0,10 0,07
Cv, % 3,63 6,01 5,05 3,86 3,13
P *** *** •k'k'k •k'k'k ***
3 АСД-2Ф M 6,8 7,7 7,9 8,7 8,5
±m 0,13 0,03 0,20 0,13 0,12
Cv, % 4,27 0,87 5,66 3,34 3,16
P *** *** •k'k'k ** ***
4 Биокорм-Пионер M 7,0 8,5 9,6 9,8 9,2
±m 0,18 0,13 0,14 0,20 0,06
Cv, % 5,75 3,42 3,26 4,56 1,46
P *** *** ** "k ***
5 АСД-2Ф + Биокорм-Пионер М 7,2 9,4 10,6 11,3 10,7
±m 0,16 0,14 0,19 0,14 0,10
Cv, % 4,97 3,33 4,01 2,77 2,09
P *** ** ‘k'k
Примечание: * Р > 0,95, ** Р > 0,99, *** Р > 0,999. групп соответственно на 10 день в 1,49; 1,31 и 1,14 раза (на 3,1; 2,0 и 0,9 lg KOE/г), на 20 день — в 2,02; 1,49 и 1,27 раза (на 5,2; 2,5 и 1,4 lg KOE/г), на 30 день — в 2,49; 1,32 и 1,06 раза (на 7,0; 1,5 и 0,3 lg KOE/г), на 60 день — в 2,83; 1,33 и 1,08 раза (на 8,8; 1,6 и 0,4 lg KOE/г).
Фоновый уровень клостридий у телят 1 контрольной группы составил 4,5 lg KOE/г, остальных групп (со 2 по 5) — колебался от 10,5 до 11,3 lg KOE/г. В процессе опытов показатели клостридий в контрольной группе не имели существенных изменений. Содержание клостридий в кишечнике телят 2 группы имело тенденцию к динамичному повышению и превышало контрольные цифры на 10, 20, 30 и 60 дни в 2,47; 2,90; 2,93 и 3,15 раз (на 6,9; 8,0; 8,5 и 9,9 lg KOE/г).
Уровень клостридий в кишечнике телят 3 группы по срокам исследований оставался значительно повышенным по сравнению с контрольным значением. Он уступал лишь показателям животных 2 группы на 10, 20, 30 и 60 дни в 1,16; 1,33; 1,77 и 2,38 раза (на 1,6; 3,0; 5,6 и 8,4 lg KOE/г).
Содержание клостридий в кишечнике телят 4 группы превышало данные животных 1 группы на 10, 20, 30 и 60 дни опыта соответственно в 2,02; 1,97; 1,48 и 1,28 раза (на 4,8; 4,1; 2,1 и 1,3 lg KOE /г), но было ниже, чем у телят 2 и 3 групп, на 10 день в 1,22 и 1,05 раза (на 2,1и 0,5 lg KOE/г), на 20 день — в 1,46 и 1,11 раза (на 3,9 и 0,9 lg KOE/г), на 30 день — в 1,98 и 1,12 раза (на 6,4 и 0,8lg KOE/г), на 60 день — в 2,46 и 1,03 раза (на 2,45 и 0,2 lg KOE/г).
Максимально приблизился к контрольным цифрам телят 1 группы уровень клостридий в кишечнике животных 5 группы. К 10, 20, 30 и 60 дням исследований описываемый показатель был ниже его значений у больных телят 2-й группы соответственно в 1,43 раза (на 3,5 %), в 1,6 раза (на 4,6 %), в 3,0 раза (на 8,6 %) и в 3,29 раза (на 10,1 %). Во все сроки опытов уровень клостридий в кишечнике телят описываемой группы был ниже его содержания у животных 2, 3 и 4 групп.
Содержание микрогрибов из рода Candida в кишечнике больных телят к началу опытов было повышено, по сравнению с контрольной цифрой. В организме животных 2-й группы данный показатель в процессе эксперимента имел тенденцию к дальнейшему активному увеличению. Уровень микрогрибов Candida в кишечнике животных 3, 4 и 5 опытных групп в процессе опыта динамично
снижался. Этот процесс имел разную степень проявления и выраженности и был максимальным в 5-й группе. Здесь к 20 дню исследований содержание микрогрибов Candida соответствовало физиологическому уровню и показателю контроля.
В кишечнике здоровых телят микрогрибы из рода Aspergillus не выделялись. Фоновый уровень микрогрибов из рода Aspergillus в кишечнике больных животных опытных групп (со 2 по 5) колебался от 2,7 до 3,3 lg KOE/г.
Содержание микрогрибов в кишечнике телят 2 группы значительно превышало фоновое значение на 10, 20, 30 и 60 дни опыта — в 1,21; 1,52; 1,69 и 1,93 раза (на 0,6; 1,5; 2,0 и 2,7 lg KOE/г). Уровень микрогрибов в кишечнике телят 3 группы незначительно варьировал, по сравнению с фоновым показателем, и во все сроки опыта был ниже по сравнению с данными животных 2 группы. Показатели микрогрибов из рода Aspergillus в кишечнике телят 4 группы были ниже их уровня у животных 2 и 3 групп соответственно на 10 день в 1,13 и 1,09 раза (на 0,4 и 0,3 lg KOE/г), на 20 день — в 2,44 и 1,83 раза (на 2,6 и 1,5 lg KOE/г), на 30 день — в 4,08 и 2,91 раза (на 3,7 и 2,3 lg KOE/г), на 60 день — в 28,0 и 17,0 раз (на 5,4 и 3,2 lg KOE/г).
Содержание микрогрибов из рода Aspergillus в кишечнике телят 5 группы динамично снижалось. На 10 день исследований они составили 1,0 lg KOE/г, на 20 день — лишь 0,4 lg KOE/г. В последующие сроки опытов микрогрибы из рода Aspergillus из содержимого кишечника телят 5 группы не выделялись.
Выводы.
1. Диарейный синдром у новорожденных телят вызывают глубокие вторичные дисбактериозы, проявляющиеся дисбалансом между нормо- и условно-патогенными микроорганизмами и микроскопическими грибами в виде значительного снижения уровня бифидобактерий и лактобацилл, повышения активизации стафилококков, клостридий, микрогрибов из рода Candida, появлением и активным размножением микроскопических грибов из рода Aspergillus.
2. Введение в состав основного рациона телят пробиотика Биокорм Пионер и АСД-2Ф способствует восстановлению колонизационной резистентности кишечника.
