CC BY
44
Каримов Х. Я., Бобоев К. Т.
Научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Министерства Здравоохранения Республики Узбекистан, г. Ташкент.
ВНЕДРЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДЫ В ДИАГНОСТИКЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ СИСТЕМЫ КРОВИ В УЗБЕКИСТАНЕ
Молекулярно-биологические исследования гематологических патологий в Узбекистане проводятся в основном в отделе молекулярной медицины и клеточной технологии НИИГ и ПК МЗ РУз, и пока касаются лишь наиболее частых и социально значимых заболеваний, и число таких исследований увеличивается. Необходимо отметить, что лаборатория располагает серьёзной материально-технической базой, укомплектованной всем необходимым ультрасовременным импортным оборудованием, отвечающим международным стандартам.
К настоящему времени в лаборатории проводится работа по разработке эффективных способов раннего прогнозирования развития наследственной тромбофилии и идеопатической тромбоцитопенической пурпуры. Впервые в узбекской популяции изучены частоты и вклад полиморфизмов генов факторов дисфункции плазменного и тромбоцитарного звеньев гемостаза -FII, FV (Лейден), MTGFR, MTRR, MTR, PAII, ApoE, GP и eNOS в развитие наследственной тромбофилии, а также цитокинов — TNF-a, CTLA4, RANTES, GSTT1, GSTM1, IL-4 и рецептора IL-4 в развитие аутоиммунных состояний. В результате этих исследований разработаны эффективные критерии прогнозирования развития и течения данных патологий.
С целью усовершенствования методов обследования больных гемобластозами оптимизированы методы культивирования и цитогенетическо-го исследования клеток костного мозга и периферической крови. Разработаны новые способы
диагностики и контроля эффективности лечения хронического миелолейкоза и острого лимфо-бластного лейкоза, путем оптимизации и внедрения высокочувствительных молекулярно-биоло-гических методов детекции и оценки экспрессии химерного онкогена BCR/ABL (маркеры р190 и р210) методами ОТ-ПЦР и ПЦР в режиме реального времени. Следует отметить, что некоторые результаты этих исследований уже внедрены в клиническую практику института.
Проводятся работы по совершенствованию методов диагностики, верификации форм и мониторинга эффективности терапии больных с хроническими миелопролиферативными заболеваниями (ХМПЗ). К настоящему времени в клиническую практику внедрено молекулярное тестирование генной мутации V617F-JAK2 у больных с ХМПЗ. Разрабатывается методологический подход к выявлению ключевых генов, контролирующих синтез и работу ферментов метаболизма лекарственных средств и канцерогенов, в частности изоферментов цитохрома Р-450 и ферментов II фазы биотрансформации (глута-тион 8Н-8-трансферазы). На основе этих данных будут разработаны эффективные критерии раннего прогнозирования развития резистентных опухолевых субклонов к полихимиотерапии и монотерапии у больных с гемобластозами. Результаты фармакогенетического тестирования позволяют клиницисту провести персонализированный подбор лекарственного средства и режима его дозирования, обеспечивая тем самым максимальную эффективность и безопасность терапии.
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ГЕМОБЛАСТОЗОВ
В целом, проблема внедрения молекулярно-биологических методов обследования генных и хромосомных заболеваний системы крови в лаборатории, по сути, принципиально решена. Дальнейший прогресс этих исследований будет
достигнут на пути широкого привлечения методов молекулярной цитогенетики ^КН-анализ) и секвенирования генных последовательностей, которые позволят более детально анализировать структурные изменения генома человека.
Князева А. С., Страмбовская Н. Н.
Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Читинская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения России, г. Чита.
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ЦИТОКИНА TNF (G-308A) У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКОЙ ИШЕМИЕЙ МОЗГА В ЗАБАЙКАЛЬСКОМ КРАЕ
Сосудистые заболевания головного мозга находятся на втором месте среди причин общей смертности, поэтому изучение патогенетических механизмов, обеспеченных системами иммунитета, гемостаза и неспецифической резистентности организма, составляющими единую интегрированную клеточно-гуморальную систему защиты особенно актуально. Одним из связующих звеньев в этой системе являются цитокины, гены которых обладают чрезвычайно высокой степенью полиморфизма и изменяют функцию белка.
Цель работы. Изучить частоту генетического полиморфизма провоспалительного цитокина TNF (G-308A) у больных хронической недостаточностью мозгового кровообращения с синдромом когнитивной дисфункции и без него.
Материалы и методы. Цельная кровь, взятая на цитрате натрия в соотношении 1:9, сыворотка крови 195 больных хронической цереброва-скулярной патологией с синдромом когнитивной дисфункции (ХИГМ с Д)(62,5 ± 4,95 лет), находящимся на стационарном лечении в ЛПУ г. Читы, 149 здоровых резидентов соответствующего возраста (51 ± 4,24), не имеющих объективных признаков цереброваскулярной патологии, 99 больных хронической цереброваскулярной патологии
без синдрома когнитивной дисфункции (ХИГМ без Д)(53,3 ± 4,52). В качестве критериев включения для ХИГМ с Д использовались оценочные баллы: MMSE — 19,95 ± 1,31; Хачински — 6,47 ± 0,97; Гамильтон — 7,3 ± 1,97. В качестве критериев включения для ХИГМ без Д использовались оценочные баллы: MMSE — 30; Хачински — 5,11 ± 0,32; Гамильтон — 7,79 ± 1,5. Генотипирование проводилось на ДНК лейкоцитов венозной крови с помощью полимеразной цепной реакции (тест-система для определения генетического полиморфизма TNF (G-308A) (НПФ «Литех», Москва)) с детекцией продукта амплификации в агарозном геле. Соответствие распределение генотипов TNF (G-308A) оценивалось согласно закону Харди-Вайнберга. Степень риска развития ХИГМ оценивали по величине отношения шансов (odds ratio (OR)) с расчетом для него 95 % доверительного интервала (CI).
Результаты. В результате исследования обнаружены все искомые аллели в гомо- и гетерозиготном состоянии с частотным подчинением закону Харди-Вайнберга (таблица 1).
Частота генотипов и аллелей полиморфизма TNF (G-308A) у здоровых резидентов, пациентов, страдающих хронической ишемией головного мозга с когнитивным дефектом и без него.
Таблица 1.
Аллель Частота аллеля, Р Генотип Частота генотипа, %
Контроль 308G 0,93 308GG 87,92
308A 0,07 308GA 10,14
308AA 2,03
ХИГМ с Д 308G 0,89 308GG 81,03
308A 0,11 308GA 16,41*
308AA 2,56
