CC BY
41
6. Coutsoudis A., Pillay K., Kuhn L., Spooner E., Tsai W. Y., Coovadia H. M. & South African Vitamin A Study Group. Method of feeding and transmission of HIV-1 from mothers to children by 15 months of age: Prospective cohort study from Durban, South Africa. AIDS (London, England), 2001, vol. 15, no. 3, pp 379-387. doi:10.1097/00002030-200102160-00011.
7. Davanzo R., Moro G., Sandri F., Agosti M., Moretti C., Mosca F. Breastfeeding and coronavirus disease-2019: Ad interim indications of the Italian Society of Neonatology endorsed by the Union of European Neonatal & Perinatal Societies. Matern. Child Nutr., 2020, vol. 16, no. 3. doi: 10.1111/mcn.13010.
8. Dong L., Tian J., He S., Zhu C., Wang J., Liu C., Yang J. Possible Vertical Transmission of SARS-CoV-2 From an Infected Mother to Her Newborn. JAMA, 2020, vol. 323, no. 18, pp. 1846-1848. doi: 10.1001/jama.2020.4621.
9. Fornari F. Vertical Transmission of Covid-19 - A Systematic Review. J. Pediatr. Perinatol. Child Health, 2020, vol. 4 (2), pp. 007-013.
10. Gagneur A., Dirson E., Audebert S., Vallet S., Legrand-Quillien M. C.., Laurent Y., Collet M., Sizun J., Oger E., Payan C. Materno-fetal transmission of human coronaviruses: a prospective pilot study. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis., 2008, vol. 27, no. 9, pp. 863-866. doi: 10.1007/s10096-008-0505-7.
11. Guo, L., Ren L., Yang S., Xiao M., Chang D., Yang F., Dela Cruz C. S., Wang Y., Wu C., Xiao Y., Zhang L., Han L., Dang S., Xu Y., Yang Q. W., Xu S. Y., Zhu H. D., Xu Y. C., Jin Q., Sharma L., Wang L., Wang J. Profiling Early Humoral Response to Diagnose Novel Coronavirus Disease (COVID-19). Clin. Infect. Dis., 2020, vol. 71, no. 15, pp. 778-785. doi: 10.1093/cid/ciaa310.
12. Iliff P. J., Piwoz E. G., Tavengwa N. V., Zunguza C. D., Marinda E. T., Nathoo K. J, Moulton L. H., Ward B. J., Humphrey J. H. Early exclusive breastfeeding reduces the risk of postnatal HIV-1 transmission and increases HIV-free survival. AIDS (London, England), 2005, vol. 19, no. 7, pp. 699-708.
13. Jain P., Thakur A., Kler N., Garg P. Manifestations in Neonates Born to COVID-19 Positive Mothers. Indian J. Pediatr., 2020, vol. 87, no. 8, p. 644. doi:10.1007/s12098-020-03369-x.
14. Karimi-Zarchi M., Neamatzadeh H., Dastgheib S. A, Abbasi H., Mirjalili S. R., Behforouz A., Ferdosian F., Bahrami R. Vertical Transmission of Coronavirus Disease 19 (COVID-19) from Infected Pregnant Mothers to Neonates: A Review. Fetal Pediatr. Pathol., 2020, vol. 39, no. 3, pp. 246-250. doi: 10.1080/15513815.2020.1747120.
15. Robertson C. A., Lowther S. A., Birch T., Tan C., Sorhage F., Stockman L., McDonald C., Lingappa J. R., Bresnitz E. SARS and pregnancy: a case report. Emerg. Infect. Dis., 2004, vol. 10, no. 2, pp. 345-348. doi: 10.3201/eid1002.030736.
16. Stagno S., Cloud G. A. Working parents - The impact of day-care and breast-feeding on cytomegalovirus infections in offspring. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1994, vol. 91, no. 7, pp. 2384-2389. doi:10.1073/pnas.91.7.2384.
17. Wang L., Shi Y., Xiao T., Fu J., Feng X., Mu D., Feng Q., Hei M., Hu X., Li Z., Lu G., Tang Z., Wang Y., Wang C., Xia S., Xu J., Yang Y., Yang J., Zeng M., Zheng J., Zhou W., Zhou X., Zhou X., Du L., Lee S. K., Zhou W. Working Committee on Perinatal and Neonatal Management for the Prevention and Control of the 2019 Novel Coro-navirus Infection. Chinese expert consensus on the perinatal and neonatal management for the prevention and control of the 2019 novel coronavirus infection (First Edition). Ann. Transl. Med., 2020, vol. 8, no. 3, pp. 47. doi: 10.21037/atm.2020.02.20.
18. Zaigham M., Andersson O. Maternal and perinatal outcomes with COVID-19: A systematic review of 108 pregnancies. Acta. Obstet. Gynecol. Scand., 2020, vol. 99, no. 7, pp. 823-829. doi: 10.1111/aogs.13867.
19. Zeng L., Xia S., Yuan W., Yan K., Xiao F., Shao J., Zhou W. Neonatal Early-Onset Infection With SARS-CoV-2 in 33 Neonates Born to Mothers With COVID-19 in Wuhan, China. JAMA Pediatr, 2020, vol. 174, no. 7, pp. 722-725. e200878. doi: 10.1001/jamapediatrics.2020.0878.
20. Ziegler J. B., Cooper D. A., Johnson R. O., Gold J. Postnatal transmission of aids-associated retrovirus from mother to infant. Lancet, 1985, vol. 1, no. 8434, pp. 896-898. doi: 10.1016/s0140-6736(85)91673-3.
03.02.03 -Микробиология (медицинские науки)
УДК 579.6:616.9
DOI 10.17021/2020.15.4.29.39
© А.А. Вакарина, А.В. Алешкин, Е.О. Рубальский,
Т.Ф. Степанова, И.А. Киселева, Л.В. Катаева, 2020
ВЛИЯНИЕ ВИРУЛЕНТНЫХ БАКТЕРИОФАГОВ НА АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ БАКТЕРИЙ STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Вакарина Арина Александровна, младший научный сотрудник бактериологической лаборатории, ФБУН «Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии» Роспотребнадзора, Россия, 625026, г. Тюмень, ул. Республики, д. 147, тел.: (3452)28-99-92, e-mail: VakarinaA.A@Tniikip.rospotrebnadzor.ru.
Алешкин Андрей Владимирович, доктор биологических наук, профессор РАН, руководитель лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспот-ребнадзора, Россия,125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д.10, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: ava@gabri.ru.
Рубальский Евгений Олегович, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспот-ребнадзора, Россия, 125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: 8-965-447-90-84, e-mail: e.o.rubalsky@gmail.com.
Степанова Татьяна Федоровна, доктор медицинских наук, профессор, директор ФБУН «Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии» Роспотребнадзора, Россия, 625026, г. Тюмень, ул. Республики, д. 147, тел.: (3452) 28-99-92, e-mail: info@tniikip.rospotrebnadzor.ru.
Киселева Ирина Анатольевна, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов, ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспот-ребнадзора, Россия,125212, г. Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10, тел.: (495) 452-18-16, e-mail: irina6804@mail. ru.
Катаева Любовь Владимировна, кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник, заведующая бактериологической лабораторией, ФБУН «Тюменский научно-исследовательский институт краевой инфекционной патологии» Роспотребнадзора, Россия, 625026, г. Тюмень, ул. Республики, д. 147, тел.: (3452) 28-99-92, e-mail: KataevaLV@Tniikip.rospotrebnadzor.ru.
Изучено влияние вирулентных бактериофагов на антибиотикочувствительность бактерий Staphylococcus aureus. Полученные результаты свидетельствуют о том, что до и после совместного культивирования штаммов S. aureus со специфичным бактериофагом интерпретация диаметров зон задержки роста микроорганизмов под воздействием антибактериальных препаратов находилась в пределах своей категории: «чувствительный», «умеренно-резистентный» и «устойчивый». Зарегистрированы незначительные колебания показателей измерения зон подавления роста бактерий после культивирования с бактериофагом. По расчетам критериев знаковых рангов Вилкоксона для связанных выборок представленные данные не обладали статистической значимостью. Таким образом, результаты экспериментальных исследований свидетельствуют об отсутствии влияния вирулентных бактериофагов на чувствительность микроорганизмов S. aureus к антибактериальным препаратам, что позволяет рекомендовать проведение терапии бактериальных инфекций вирулентными бактериофагами совместно с антибиотиками.
Ключевые слова: антибиотикочувствительность, бактерии, вирулентные бактериофаги, антибактериальные препараты, зоны задержки роста.
EFFECT OF VIRULENT BACTERIOPHAGES ON ANTIBIOTIC SENSITIVITY OF STAPHYLOCOCCUS AUREUS BACTERIA
Vakarina Arina A., Junior Researcher of the Bacteriological Laboratory, Tyumen Region Infection Pathology Research Institute, 147 Republic St., Tyumen, 625026, Russia, tel.: (3452) 28-99-92, e-mail: VakarinaA.A@Tniikip.rospotrebnadzor.ru.
Aleshkin Andrey V., Dr. Sci. (Biol.), Professor, Head of Laboratory of Clinical Microbiology and Biotechnology of Bacteriophages, Moscow Research Institute of Epidemiology and Microbiology G. N. Gabrichevsky, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, Russia, tel.: (495) 452-18-16, e-mail: ava@gabri.ru.
Rubalskii Evgenii O., Cand. Sci. (Biol.), Leading researcher of Laboratory of Clinical Microbiology and Biotechnology of bacteriophages, Moscow Research Institute of Epidemiology and Microbiology G. N. Gabrichevsky, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, tel.: 8-965-447-90-84, e-mail: e.o. rubalsky@gmail. com.
Stepanova Tat'yana F., Dr. Sci. (Med.), Professor, Director of Tyumen Region Infection Pathology Research Institute, 147 Republic St., Tyumen, 625026, Russia, tel.: (3452) 28-99-92, tel.: (3452) 28-99-92, e-mail: info@tniikip.rospotrebnadzor.ru.
Kiseleva Irina A., Cand. Sci. (Biol.), Leading researcher of Laboratory of Clinical Microbiology and Biotechnology of bacteriophages, Moscow Research Institute of Epidemiology and Microbiology G. N. Gabrichevsky, 10 Admiral Makarov St., Moscow, 125212, tel.: (495) 452-18-16, e-mail: irina6804@mail.ru.
Kataeva Lyubov' V., Cand. Sci. (Med.), Leading researcher, Head of the Bacteriological Laboratory, Tyumen Region Infection Pathology Research Institute, 147 Republic St., Tyumen, 625026, Russia, tel.: (3452) 28-99-92, e-mail: KataevaLV@Tniikip.rospotrebnadzor.ru.
The influence of virulent bacteriophages in the antibiotic susceptibility of the bacteria Staphylococcus aureus. The results indicate that before and after the joint cultivation of the strains of S. aureus with a specific bacteriophage, the interpretation of the diameters of zones of growth inhibition of microorganisms under the influence of ABP (antibacterial drugs) was within its category: "sensitive", "moderately resistant" and "stable". Minor fluctuations in the measurement parameters of zones of inhibition of bacterial growth after cultivation with bacteriophage were recorded. According to the calculation of Wilcoxon's sign rank criteria for related samples, the data presented did not have statistical significance. Thus, the results of experimental studies indicate the absence of the effect of virulent bacteriophages on the sensitivity of S. aureus microorganisms to antibacterial preparation. This makes it possible to recommend the treatment of bacterial infections with virulent bacteriophages in conjunction with antibiotics.
Key words: antibiotic sensitivity, bacteria, virulent bacteriophages, antibacterial agents, growth retardation zones.
Введение. В настоящее время проблема устойчивости микроорганизмов к антибактериальным препаратам (АБП) приобрела глобальный характер. В создавшихся условиях препараты бактериофагов имеют большую перспективу для использования в лечебных целях в качестве моно- и совместной терапии с антимикробными средствами [19, 22]. В современных зарубежных литературных источниках описаны примеры, посвященные успешному лечению инфекционных заболеваний с комбинированием антибиотико- и фаготерапии [3, 8, 27]. В связи с появлением множества клональных линий возбудителей бактериальных инфекций необходимо глубокое понимание закономерностей и ключевых факторов развития устойчивости к антибиотикам с разработкой соответствующих мер реагирования [5]. Целесообразно накапливать данные о механизмах возникновения резистентности микроорганизмов, изучать влияние бактериофагов на бактериальную клетку и ее популяцию.
Цель: изучить влияние вирулентных бактериофагов на антибиотикочувствительность бактерий Staphylococcus aureus (S. aureus).
Материалы и методы исследования. Для выполнения поставленной задачи использовали 3 штамма бактериофагов S. aureus, выделенных из коммерческих лекарственных препаратов АО НПО «Микроген», Россия (интести-фаг: серия H-125, выпуск 08.2019 г., годен до 08.2021 г.; бактериофаг стафилококковый: серия П-15, выпуск 05.2019 г., годен до 05.2021 г.; бактериофаг стафилококковый: серия Н-159, выпуск 07.2019 г., годен до 07.2021 г.) и 1 штамм бактериофага (Sa30, номер депонирования GenBank MK331931.1) из коллекции ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотреб-надзора. Бактериофаги в мягком агаре образовывали прозрачные, четкие, ровные, круглые негативные колонии, без ореола, диаметром 1-2 мм. Титр фагов составлял не менее 108 БОЕ/мл по методу Грациа [1]. Бактериофаги были протестированы на предмет отсутствия умеренных фагов, несущих известные гены интеграз стафилококковых умеренных фагов Sa1int - Sa7int [15], а также умеренных фагов PsP3, P2, Kp6, P21, Lambda при помощи специфической полимеразной цепной реакции (ПЦР). Перед выделением ДНК фаголизат пропускали через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм с последующей обработкой ДНКазой I. Выделение ДНК проводили при помощи набора К-Сорб (ООО «НПФ Синтол», Россия) согласно протоколу производителя [23]. Реакцию ПЦР осуществляли на амплификаторе «Терцик» (ООО «ДНК-Технология», Россия) по методам, изложенным ранее, с последующей детекцией специфического продукта методом горизонтального гель-электрофореза [10, 23]. Кроме того, посредством родоспецифической ПЦР подтвердили таксономическую принадлежность штаммов фагов к порядку Caudovirales, семейству Herelleviridae, подсемейству Twortvirinae, роду Kayvirus как к наиболее распространенному таксону вирулентных стафилококковых фагов, используемых в клинических целях.
Для изучения влияния вирулентных бактериофагов на антибиотикочувствительность бактерий из клинического материала выделены штаммы S. aureus. Культуры идентифицировали с помощью настольного времяпролетного масс-спектрометра с матричной лазерной десорбцией MALDI-TOF Biotyper microflex («Bruker», Германия) по белковым спектрам и оценивали высоким показателем достоверности (score более 2).
Чувствительность бактерий S. aureus к вирулентным бактериофагам определяли методом нанесения фага (spot-test) на газон бактериальной культуры. С помощью бактериологической петли осуществляли секторальный посев штаммов микроорганизмов на подсушенную поверхность
питательной среды Мюллер-Хинтон («Conda», Испания). Далее на поверхность каждого сектора наносили капли исследуемого бактериофага. Чашки переворачивали агаром вверх и инкубировали при температуре 37° С. Результаты интерпретировали через 24 часа. Для дальнейшего проведения экспериментальной работы были отобраны только 5 штаммов S. aureus, литическую активность фагов к которым оценивали по пятибалльной системе на «+++» и характеризовали как зону лизиса с единичными колониями вторичного роста (табл. 1) [7].
Таблица 1
Литическая активность вирулентных бактериофагов штаммов S. aureus_
Наименование Номер штамма Оценка
бактериофага S. aureus S. aureus литической активности бактериофага
Sa30 4022 «+++»
Н125/4037 3059 «+++»
Sa30 3059 «+++»
П15/4037 3255 «+++»
Н159/4040 3255 «+++»
П15/4037 75 «+++»
Н125/4037 75 «+++»
Н159/4040 75 «+++»
Н159/4040 2731 «+++»
Гетерогенность популяции бактериальных культур и способность микроорганизмов включать генетически детерминированные механизмы выживания в неблагоприятных условиях окружающей среды, в том числе с формированием некультивируемых форм, позволила выделить линии бактерий для изучения экосистемы «бактерия - вирулентный бактериофаг».
Серия экспериментов по определению чувствительности бактерий S. aureus к АБП проведена трижды в трех повторах с 9 дисками АБП до взаимодействия микроорганизмов с бактериофагами и после их совместного культивирования.
Первым этапом из суточных культур бактерий второго пассажа с помощью денситометра готовили бактериальную суспензию 0,5 ЕД по МакФарланду (1,5 х 108 КОЕ/мл). Инокулят наносили тампоном на агар Мюллер-Хинтон («Conda», Испания) в течение 15 мин после приготовления. Не позднее этого же времени на поверхность питательной среды раскладывали диски с АБП. Чувствительность микроорганизмов к АБП определяли диско-диффузионным методом в соответствии с нормативными документами [4]. Использовали диски индикаторные картонные с противомикробными средствами производства ООО «Научно-исследовательский центр фармакотерапии» (оксациллин 1 мкг, серия - 111118; эритромицин 15 мкг, серия - 030319; клиндамицин 2 мкг, серия - 040419; гентамицин 30 мкг, серия - 111118; норфлоксацин 10 мкг, серия - 090919; цефтриаксон 30 мкг, серия - 111118; цефепим 30 мкг, серия - 090919; ампициллин 10 мкг, серия - 111119;цефуроксим 30 мкг, серия - 030319). Контроль качества дисков АБП проводили коллекционными штаммами E. coli АТСС 25922, S. aureus АТСС 25923, P. aeruginosa ATCC 27853.
Вторым этапом 200 мкл бактериальной суспензии штамма S. aureus 0,5 ЕД по МакФарланду (1,5 х 108 КОЕ/мл) и 200 мкл бактериофага с концентрацией 108 БОЕ/мл соединяли в пробирке с мясо-пептонным бульоном и инкубировали в течение 18-24 часов при 37° С. Проводили совместное культивирование штамма 4022 с бактериофагом Sa30, штамма 3059 с бактериофагами Н125/4037 и Sa30, штамма 3255 - с П15/4037 и Н159/4040, штамма 75 - с бактериофагами П15/4037, Н125/4037, Н159/4040 и штамма 2731 - c Н159/4040, в соответствии с таблицей 1.
После суточного взаимодействия бактерий с бактериофагом из всех пробирок производили высев на плотную питательную среду Мюллер-Хинтон. После 18-24 ч инкубирования чашек осуществляли повторную идентификацию выросших единичных колоний, из этих бактерий снова готовили суспензию 0,5 ЕД по МакФарланду и повторно исследовали на чувствительность к АБП. Интерпретацию значений диаметров зон задержки роста микроорганизмов при определении антибиотикочув-ствительности проводили в соответствии с действующими нормативными документами [4, 6] и инструкциями по применению наборов дисков, предложенных производителем.
Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с использованием программного обеспечения IBM SPSS Statistics 22 («IBM», США). Гипотезу нормальности распределения проверяли с помощью критериев Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка. Для непрерывных данных рассчитывали медианы показателей (Ме). Для оценки достоверности различий использовали непараметрический критерий знаковых рангов Вилкоксона для связанных выборок, так как переменные
не подчинялись нормальному распределению. Различия результатов считали статистически значимыми при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. Все выделенные бактериофаги показали отсутствие генов, кодирующих известные интегразы, а также принадлежность к роду Kayvirus, что позволило сделать заключение об их вирулентной (строго литической) природе. Высокий титр бактериофагов и их литическая способность «+++» к подобранным штаммам S. aureus говорят об активном процессе взаимодействия вирусов и бактерий, а также о хорошей чувствительности микроорганизмов к бактериофагам.
В ходе эксперимента трижды в трехкратной повторности проведено исследование чувствительности бактерий S. aureus к каждому АБП до и после совместного инкубирования с вирулентным бактериофагом в соответствии с таблицей 1. Интерпретация значений диаметров зон задержки роста S. aureus при определении чувствительности к АБП представлена в таблице 2.
Таблица 2
Чувствительность к АБП бактерий S. Aureus до и после взаимодействия с бактериофагами
№ штамма Антибиотики До взаимодействия с бактериофагом После взаимодействия с бактериофагом
П15-4037 Н125-4037 Sa30 Н159/4040
1 2 3 4 5 6 7
3255 оксациллин S S - - S
75 оксациллин S S S - S
4022 оксациллин S - - S -
2731 оксациллин R - - - R
3059 оксациллин S - S S -
3255 эритромицин S S - - S
75 эритромицин S S S S
4022 эритромицин S - - S -
2731 эритромицин R - - - R
3059 эритромицин S - - S -
3255 клиндамицин S S - - S
75 клиндамицин S S S S
4022 клиндамицин S - - S -
2731 клиндамицин S - - - -
3059 клиндамицин S - S S -
3255 гентамицин S S - - S
75 гентамицин S S S - S
4022 гентамицин S - - S -
2731 гентамицин S - - - S
3059 гентамицин S - S S -
3255 норфлоксацин S S - - S
75 норфлоксацин S S S - S
4022 норфлоксацин I/S - - I/S -
2731 норфлоксацин S - - - S
3059 норфлоксацин I/R - I/R I/R -
3255 цефтриаксон S S - - S
75 цефтриаксон S S S - S
4022 цефтриаксон S - - S -
2731 цефтриаксон R/I - - - R/I
3059 цефтриаксон S - S S -
3255 цефепим S S - - S
75 цефепим S S S - S
4022 цефепим S - - S -
2731 цефепим R - - - R
3059 цефепим S - S S -
3255 ампициллин R R - - R
75 ампициллин S S S - S
4022 ампициллин R - - R -
2731 ампициллин R - - - R
Продолжение таблицы 2
3059 ампициллин S - S S -
3255 цефуроксим S S - - S
75 цефуроксим S S S - S
4022 цефуроксим S - - S -
2731 цефуроксим I/S - - - I/S
3059 цефуроксим S - S S -
Примечание: R - устойчивый, I - умеренно-резистентный, S - чувствительный штамм
Полученные результаты свидетельствуют о том, что до и после совместного культивирования штаммов S. aureus с литическим бактериофагом значения диаметров зон задержки роста микроорганизмов находятся в пределах своей категории: «чувствительный», «умеренно-резистентный» и «устойчивый».
Оценка наличия нормального распределения данных (тест Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка) показала, что переменные не подчиняются нормальному распределению (р < 0,05). Диаметры зон подавления роста микроорганизмов S. aureus под воздействием АБП до и после совместного культивирования с вирулентными бактериофагами указывают на незначительные изменения этого показателя (табл. 3).
Таблица 3
Диаметры зон подавления роста S. aureus при определении чувствительности к АБП, Me
Диаметр Диаметр зон задержки роста S. aureus Диаметр
№ штам ма зон после культивирования бактерий зон задержки
Антибиотики задержки с бактериофагом, мм роста S. aureus,
роста S. aureus, мм Фаг П15-4037 Фаг Н125-4037 Фаг Sa30 Фаг Н159/4040 среднее арифметическое по всем фагам, мм
3255 оксациллин 16 17 - - 18 17
75 оксациллин 22 21 22 22 22
4022 оксациллин 18 - - 18 - 18
2731 оксациллин 0 - - - 0 0
3059 оксациллин 21 - 22 23 - 22,5
3255 эритромицин 25 24 - - 25 24,5
75 эритромицин 25 24 25 24 24
4022 эритромицин 24 - - 24 - 24
2731 эритромицин 10 - - - 11 11
3059 эритромицин 25 - 25 24 - 24,5
3255 клиндамицин 29 26 - - 27 26
75 клиндамицин 27 26 27 - 25 26
4022 клиндамицин 25 - - 25 - 25
2731 клиндамицин 28 - - - 28 28
3059 клиндамицин 26 - 27 26 - 26,5
3255 гентамицин 24 24 - - 24 24
75 гентамицин 25 23 24 - 23 24
4022 гентамицин 24 - - 23 - 23
2731 гентамицин 23 - - - 23 23
3059 гентамицин 24 - 23 23 - 23
3255 норфлоксацин 29 27 - - 28 28
75 норфлоксацин 26 27 27 - 25 26
4022 норфлоксацин 16 - - 18 - 18
2731 норфлоксацин 25 - - - 25 25
3059 норфлоксацин 13 - 11 14 - 12,5
3255 цефтриаксон 26 24 - - 24 24
75 цефтриаксон 25 24 25 24 25
4022 цефтриаксон 27 - - 24 - 24
2731 цефтриаксон 13 - - - 14 14
3059 цефтриаксон 24 - 23 24 - 24
3255 цефепим 21 21 - - 19 19,5
75 цефепим 22 22 22 - 22 22
Продолжение таблицы 3
4022 цефепим 21 - - 21 - 21
2731 цефепим 13 - - - 14 14
3059 цефепим 20 - 21 23 - 22
3255 ампициллин 16 16 - - 16 16
75 ампициллин 35 35 35 - 35 35
4022 ампициллин 18 - - 18 - 18
2731 ампициллин 13 - - - 14 14
3059 ампициллин 35 - 35 34 - 35
3255 цефуроксим 26 25 - - 26 25,5
75 цефуроксим 29 27 27 - 26 27
4022 цефуроксим 28 - - 28 - 28
2731 цефуроксим 15 - - - 16 16
3059 цефуроксим 27 - 25 29 - 27
В соответствии с тестом Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка для оценки достоверности различий зон задержки роста штаммов S. aureus до и после взаимодействия с вирулентным бактериофагом использован непараметрический критерий Вилкоксона для связанных выборок. Проведенные расчеты показали, что значения изучаемых данных чувствительности бактерий к АБП S. aureus до и после сокультивирования со всеми вирулентными бактериофагам не обладали статистической значимостью (р = 0,428). Дальнейший анализ зон подавления роста микроорганизмов по группам антибиотиков установил незначительные и статистически недостоверные отличия (табл. 4).
Таблица 4
Критерий знаковых рангов Вилкоксона оценки значений диаметров зон задержки роста штаммов S. aureus под влиянием АБП _до и после взаимодействия с вирулентными бактериофагами_
Антибиотики Критерий знаковых рангов Вилкоксона, р
Оксациллин 0,180
Эритромицин 0,577
Клиндамицин 0,285
Гентамицин 0,083
Норфлоксацин 1,000
Цефтриаксон 0,285
Цефепим 0,593
Ампициллин 0,317
Цефуроксим 0,593
Кроме того, оценили влияние специфического бактериофага на каждый штамм S. aureus: 3255, 75, 4022, 2731 и 3059. Расчет критерия Вилкоксона показал, что различия диаметров задержки роста бактерий до и после сокультивирования с фагом незначимы, так как асимптоматическая значимость больше 0,05.
Известно, что антибиотики и бактериофаги оказывают различное селективное действие на бактериальную клетку [26]. Этим можно воспользоваться для регулирования механизмов резистентности микроорганизмов к АБП и достижения комбинированных терапевтических эффектов [14, 18, 25, 27]. В некоторых случаях сочетанная терапия по эффективности превосходит использование одного бактериофага, либо только антибиотика. Примечательно, что терапевтический успех синергетического применения препаратов может быть достигнут даже при субингибирующих концентрациях антибиотика, которые недостаточны для контроля роста бактерий, но становились эффективными в сочетании с фагом. Сублетальные концентрации антибиотиков могут улучшить литические особенности бактериофагов посредством морфологических изменений бактериальной клетки, при этом не вмешиваясь в цикл репликации фага [21].
С точки зрения положительного фармакодинамического воздействия бактериофагов на бактерии результат влияния можно разделить на бактерицидные эффекты, бактериолитические и образование бактериофагами вирионов [9]. Бактерии могут противостоять атаке фагов с помощью различных механизмов, включая спонтанные мутации, системы модификации рестрикции и адаптивный иммунитет через систему CRISPR-Cas. Спонтанные мутации микроорганизмов могут реализовывать-ся за счет изменения структуры бактериальных поверхностных компонентов (к ним относятся
липополисахариды, белки наружных мембран, тейхоевые кислоты клеточной стенки, капсулы и другие) [16, 20]. При использовании умеренных бактериофагов описаны варианты формирования множественной лекарственной резистентности бактериальных штаммов, так как возможен горизонтальный перенос генетических элементов. Это способствует распространению клональных линий возбудителей инфекций бактериальной этиологии и обеспечивает возможность их паразитического существования в организме пациентов [2]. К сожалению, геном литических фагов полностью не изучен. Нерасшифрованные гены могут кодировать различные функции и участвовать в выработке вспомогательных белков, которые могут оказывать воздействие на физиологию бактерий [16].
В сообщениях об изучении воздействия литических фагов на штаммы бактерий были получены устойчивые к фагу линии «бактерий-мутантов». Селективное давление фагов сформировало штаммы S. aureus со сниженной скоростью роста и нарушением продукции капсульного полисахарида. Доказано, что «мутанты» Salmonella enterica serovar paratyphi B полностью потеряли вирулентность и имели более короткую продолжительность жизни. При исследовании штаммов Acinetobacter baumannii наблюдали потерю бактериальной капсулы. Влияние фагов на популяцию Pseudomonas aeruginosa привело к формированию штаммов, которые имели значительное увеличение чувствительности к антибиотикам [11, 12, 13, 17, 24]. Устойчивость к фагам часто (хотя и не всегда) происходит за счет приспособления бактерий. Этот компромисс объясняет, почему фаг-резистентные и фаг-чувствительные микроорганизмы сосуществуют и обеспечивают разнообразие в бактериальной популяции [12].
Таким образом, сравнение чувствительности микроорганизмов к АБП до и после сокультиви-рования с бактериофагами показало, что параметры значений диаметров зон подавления роста бактерий имеют статистически недостоверные различия.
Заключение. Изучение экосистемы с участием бактерий Staphylococcus aureus и вирулентных бактериофагов выявило отсутствие фагового влияния на чувствительность к антимикробным препаратам, что позволяет рекомендовать антибиотикотерапию в комбинации с вирулентными бактериофагами.
Список литературы
1. Васильев, Д. А. Разработка биотехнологических параметров создания бактериофаговых биопрепаратов для деконтаминации микрофлоры, вызывающей порчу пищевого сырья животного происхождения и мясных, рыбных, молочных продуктов (биопроцесссинг) / Д. А. Васильев, Н. А. Феоктистова, А. В. Алешкин, С. Н. Золотухин, А. В. Мастиленко, И. А. Киселева, Е. В. Сульдина, Д. В. Никитенко. - Ульяновск: ООО «Колор-Принт», 2019. - 450 с.
2. Зуева, Л. П. Роль бактериофагов в эволюции штаммов возбудителей инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи / Л. П. Зуева, Б. И. Асланов, А. А. Долгий, Л. В. Белова // Профилактическая и клиническая медицина. - 2019. - № 4 (73). - С. 4-8.
3. Летифов, Г. М. Особенности комплексного лечения вульвовагинита у девочек-дошкольниц с различными формами пиелонефрита / Г. М. Летифов // Журнал в журнале. Актуальные проблемы урологии. - 2017. -Т. 21, № 5. - С. 59-64.
4. МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. - М. : Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004.- 91 с.
5. Рекомендации ВОЗ. Эпиднадзор за устойчивостью к противомикробным препаратам. - 2020. - Режим доступа: https://www.who.int/antimicrobial-resistance/global-action-plan/surveillance/ru/, свободный. - Заглавие с экрана. - Яз. рус. - Дата обращения: 15.02. 2020.
6. Рекомендации Европейского комитета по определению чувствительности к антимикробным препаратам (EUCAST), версия 10.0. - 2020. - Режим доступа: http://www.eucast.org, свободный. - Заглавие с экрана. -Яз. рус. - Дата обращения: 25.02.2020.
7. Федеральные клинические (методические) рекомендации. Рациональное применение бактериофагов в лечебной и противоэпидемической практике. - М., 2014. - 39 с.
8. Щербенков, И. М. Бактериофаги. Что мы знаем о них? / И. М. Щербенков // Медицинский совет. -2013. - № 2-3. - С. 56-63.
9. Abedon, S. T. Phage-Antibiotic Combination Treatments: Antagonistic Impacts of Antibiotics on the Phar-macodynamics of Phage Therapy? / S. T. Abedon // Antibiotics. - 2019. - Vol. 8, № 4. - e182. doi: doi.org/10.3390/antibiotics8040182.
10. Balding, C. Diversity of phage integrases in Enterobacteriaceae: development of markers for environmental analysis of temperate phages / C. Balding, S. A. Bromley, R. W. Pickup, J. R. Saunders // Environmental Microbiology. - 2005. - Vol. 7. - P. 1558-1567. doi: 10.1111/j.1462-2920.2005.00845.x.
11. Capparelli, R. Bacteriophage therapy of Salmonella enterica: a fresh appraisal of bacteriophage therapy / R. Capparelli, N. Nocerino, M. Iannaccone, D. Ercolini, M. Parlato, M. Chiara, D. Iannelli // The Journal of infectious diseases. - 2010. -Vol. 201, № 1. - P. 52-61. doi:10.1086/648478.
12. Capparelli, R. Bacteriophage-resistant Staphylococcus aureus mutant confers broad immunity against staphylococcal infection in mice / R. Capparelli, N. Nocerino, R. Lanzetta, A. Silipo, A. Amoresano, C. Giangrande, K. Becker, G. Blaiotta, A. Evidente, A. Cimmino, M. Iannaccone, M. Parlato, C. Medaglia, S. Roperto, F. Roperto, L. Ramunno, D. Iannelli // PLoS One. - 2010. - Vol. 5, № 7. - e11720. doi: 10.1371/journal.pone.0011720.
13. Chan, B. K. Phage selection restores antibiotic sensitivity in MDR Pseudomonas aeruginosa / B. K. Chan, M. Sistrom, J. E. Wertz, K. E. Kortright, D. Narayan, P. E. Turner // Scientific reports. - 2016. - Vol. 6. doi: 10.1038/srep26717.
14. Chatterjee, A. Bacteriophage resistance alters antibiotic-mediated intestinal expansion of Enterococci / A. Chatterjee, C. N. Johnson, P. Luong, K. Hullahalli, S. W. McBride, A. M. Schubert, K. L. Palmer, P. E. Jr. Carlson, B. A. Duerkop // Infection and immunity. - 2019. -Vol. 87, № 6. - P. 1-14. doi: 10.Ш8/Ш.00085-19.
15. Goerke, C. Diversity of prophages in dominant Staphylococcus aureus clonal lineages / C. Goerke, R. Pantucek, S. Holtfreter, B. Schulte, M. Zink, D. Grumann, B. M. Bröker, J. Doskar, C. Wolz // Journal of bacteriology. - 2009. - Vol. 191, № 11. - P. 3462-3468. doi:10.1128/JB.01804-08.
16. Gordillo Altamirano, F. L. Phage Therapy in the Postantibiotic Era / F. L. Gordillo Altamirano, J. J. Barr // Clinical microbiology reviews. - 2019. - Vol. 32, № 2. - e00066-18. doi: 10.1128/CMR.00066-18.
17. Hyman, P. Phages for Phage Therapy: Isolation, Characterization, and Host Range Breadth / P. Hyman // Pharmaceuticals (Basel). - 2019. - Vol. 12, № 1. - P. 35. doi: 10.3390/ph12010035.
18. Lin, Y. Synergy of nebulized phage PEV20 and ciprofloxacin combination against Pseudomonas aeruginosa / Y. Lin, R. Y. K. Chang, W. J. Britton, S. Morales, E. Kutter, H.-K. Chan // International journal of pharmaceutics. -2018. -Vol. 551, № 1-2. - P. 158-165.
19. Morrisette, T. Bacteriophage-antibiotic combinations: A promising alternative for refractory infections? / T. Morrisette, R. Kebriaei, S. Morales, M. J. Rybak // ContagionLive. - 2020. - Vol. 5, № 1. - Режим доступа : https://www.contagionlive.com/publications/contagion/2020/february/bacteriophageantibiotic-combinations-a-promising-alternative-for-refractory-infections, свободный. - Заглавие с экрана. - Яз. англ. - Дата обращения: 13.05.2020.
20. Oechslin, F. Resistance development to bacteriophages occurring during bacteriophage therapy / F. Oechslin // Viruses. - 2018. - Vol. 10, № 7. - P. 351. doi:10.3390/v10070351.
21. Rodriguez-Gonzalez, R. A. Quantitative models of phage-antibiotic combination therapy / R. A. Rodriguez-Gonzalez, C. Y. Leung, B. K. Chan, P. E. Turner, J. S.Weitz // mSystems. - 2020. - Vol. 5, № 1. - e00756-19. doi: 10.1128/mSystems.00756-19.
22. Rubalskii, E. Bacteriophage therapy for critical infections related to cardiothoracic surgery / E. Rubalskii, S. Ruemke, C. Salmoukas, E. C. Boyle, G Warnecke, I. Tudorache, M. Shrestha, J. D. Schmitto, A. Martens, S. V Rojas, S. Ziesing, S. Bochkareva, C. Kuehn, A. Haverich //Antibiotics. - 2020. - Vol. 9, № 5. - P. 232.
23. Rubalskii, E. O. Integrative approach for control of temperate bacteriophages in phage-based products / E. O. Rubalskii, A. V Aleshkin, S. S. Afanasiev, V. A. Aleshkin, Kh. M. Galimzyanov, A. R. Umerova,O. V. Rubalsky, O. N. Ershova, E. E. Rubalskaya, I. A. Kiseleva, S. S. Bochkareva, E. R. Zul'Karneev, A. Kh. Akhmineeva, M. O. Rubalsky, I. O. Lunina, V V Uskov, M. M. Karnaukh, O. Yu. Borisova, N. T. Gadua, A. D. Teply, S. Rümke, Ch. Salmoukas, Ch. Kühn, A. Haverich //Астраханский медицинский журнал. - 2017. -Vol. 12, № 3. - P. 56-63.
24. Schooley, R. T. Development and Use of Personalized Bacteriophage-Based Therapeutic Cocktails To Treat a Patient with a Disseminated Resistant Acinetobacterbaumannii Infection / R. T. Schooley, B. Biswas, J. J. Gill,
A. Hernandez-Morales, J. Lancaster, L. Lessor, J. J. Barr, S. L. Reed, F. Rohwer, S. Benler, A. M. Segall, R. Taplitz, D. M. Smith, K. Kerr, M. Kumaraswamy, V Nizet, L. Lin, M. D. McCauley, S. A. Strathdee, C. A. Benson, R. K. Pope,
B. M. Leroux, A. C. Picel, A. J. Mateczun, K. E. Cilwa, J. M. Regeimbal, L. A. Estrella, D. M. Wolfe, M. S. Henry, J. Quinones, S. Salka, K. A. Bishop-Lilly, R. Young, T. Hamilton // Antimicrobial agents and chemotherapy - 2017. - Vol. 61, № 10. e00954-17. doi: 10.1128/AAC.00954-17.
25. Torres-Barceló, C. A window of opportunity to control the bacterial pathogen Pseudomonas aeruginosa combining antibiotics and phages / C. Torres-Barceló, F. I. Arias-Sánchez, M. Vasse, J. Ramsayer, O. Kaltz, M. E. Hochberg // PLoS One. - 2014. - Vol. 9, № 9. doi: 10.1371/journal.pone.0106628.
26. Torres-Barceló, C. The disparate effects of bacteriophages on antibiotic-resistant bacteria / C. Torres-Barceló // Emerging microbes & infections. - 2018. - Vol. 7, № 1. - P. 168. doi: 10.1038/s41426-018-0169-z.
27. Verma, V. Restricting ciprofloxacin-induced resistant variant formation in biofilm of Klebsiella pneumoniae B5055 by complementary bacteriophage treatment / V. Verma, K. Harjai, S. Chhibber // Journal of Antimicrobial Chemotherapy. - 2009. - Vol. 64, № 6. - P. 1212-1218.
References
1. Vasil'ev D. A., Feoktistova N. A., Aleshkin A. V, Zolotukhin S. N., Mastilenko A. V., Kiseleva I. A, Sul'dina E. V, Nikitenko D. V. Razrabotka biotekhnologicheskikh parametrov sozdaniya bakteriofagovykh bioprepara-tov dlya dekontaminatsii mikroflory, vyzyvayushchey porchu pishchevogo syr'ya zhivotnogo proiskhozhdeniya i myas-nykh, rybnykh, molochnykh produktov (bioprotsesssing) [Development of biotechnological parameters for creating bacteriophage biologics for decontamination of microflora that causes spoilage of food raw materials of animal origin and meat, fish, and dairy products (Bioprocess)]. Ulyanovsk, 2019, 450 p.
2. Zueva L. P., Aslanov B. I., Dolgiy A. A., Belova L. V. Rol' bakteriofagov v evolyutsii shtammov voz-buditeley infektsiy, svyazannykh s okazani-em meditsinskoy pomoshchi [The role of bacteriophages in the evolution of strains of pathogens associated with medical care]. Profilakticheskaya i klini-cheskaya meditsina [Preventive and clinical medicine], 2019, no. 4 (73), pp. 4-8.
3. Letifov G. M. Osobennosti kompleksnogo lecheniya vul'vovaginita u devochek-doshkol'nits s razlichnymi formami pielonefrita [Features of complex treatment of vulvovaginitis in preschool girls with various forms of pyelonephritis]. Zhurnal v zhurnale. Aktual'nye problemy urologii [Magazine in the magazine. Actual problems of urology], 2017, vol. 21, no. 5, pp. 59-64.
4. MUK 4.2.1890-04 Opredelenie chuvstvitel'nosti mikroorganizmov k antibakterial'nym preparatam [Determination of the sensitivity of microorganisms to antibacterial drugs]. Moscow, Federal center of Gossanepidnad-zor of the Ministry of health of Russia, 2004, 91 p.
5. Rekomendatsii VOZ. Epidnadzor za ustoychivost'yu k protivomikrobnym preparatam [WHO recommendations. Antimicrobial Resistance Surveillance]. Available at: https://www.who.int/antimicrobial-resistance/global-action-plan/surveillance/ru/ (accessed 15 Febrary 2020).
6. Rekomendatsii Evropeyskogo komiteta po opredeleniyu chuvstvitel'nosti k antimikrobnym prepara-tam (EUCAST), versiya 10.0. [Guidelines of the European Committee for the Determination of Antimicrobial Sensitivity (EUCAST), version 10.0.]. Available at: http://www.eucast.org (accessed 25 Febrary 2020).
7. Federal'nye klinicheskie (metodicheskie) rekomendatsii. Ratsional'noe primenenie bakteriofagov v lechebnoy i protivoepidemicheskoy praktike [Federal clinical (methodological) recommendations. Rational use of bacteriophages in medical and anti-epidemic practice], Moscow, 2014, 39 p.
8. Shcherbenkov I. M., Bakteriofagi. Chto my znaem o nikh? [Bacteriophages. What do we know about them?]. Meditsinskiy sovet [Medical advice], 2013, no. 2-3, pp. 56-63.
9. Abedon S. T. Phage-Antibiotic Combination Treatments: Antagonistic Impacts of Antibiotics on the Pharmacodynamics of Phage Therapy? Antibiotics, 2019, vol. 8, no. 4, e182. doi.org/10.3390/antibiotics8040182.
10. Balding C., Bromley S. A., Pickup R. W., Saunders J. R. Diversity of phage integrases in Enterobacteriaceae: development of markers for environmental analysis of temperate phages. Environmental Microbiology, 2005, vol. 7, pp. 1558-1567. doi: 10.1111/j.1462-2920.2005.00845.x.
11. Capparelli R., Nocerino N., Iannaccone M., Ercolini D., Parlato M., Chiara M., Iannelli D. Bacteriophage therapy of Salmonella enterica: a fresh appraisal of bacteriophage therapy. The Journal of infectious diseases, 2010, vol. 201, no. 1, pp. 52-61. doi: 10.1086/648478.
12. Capparelli R., Nocerino N., Lanzetta R., Silipo A., Amoresano A., Giangrande C., Becker K., Blaiotta G, Evidente A., Cimmino A., Iannaccone M., Parlato M., Medaglia C., Roperto S., Roperto F., Ramunno L., Iannelli D. Bacteriophage-resistant Staphylococcus aureus mutant confers broad immunity against staphylococcal infection in mice. PLoSOne, 2010, vol. 5, no. 7: e11720. doi: 10.1371/journal.pone.0011720.
13. Chan B. K., Sistrom M., Wertz J. E., Kortright K. E., Narayan D., Turner P. E. Phage selection restores antibiotic sensitivity in MDR Pseudomonas aeruginosa. Scientific reports, 2016, vol. 6. doi: 10.1038/srep26717.
14. Chatterjee A., Johnson C. N., Luong P., Hullahalli K., McBride S. W., Schubert A. M., Palmer K. L., Carlson P. E., Duerkop B. A. Bacteriophage resistance alters antibiotic-mediated intestinal ehpansionof Enterococci. Infection and immunity, 2019, vol. 87, no. 6, pp. 1-14. doi:10.1128/IAI.00085-19.
15. Goerke C., Pantucek R., Holtfreter S., Schulte B., Zink M., Grumann D., Bröker B. M., Doskar J., Wolz C. Diversity of prophages in dominant Staphylococcus aureus clonal lineages. Journal of bacteriology, 2009, vol. 191, no. 11, pp. 3462-3468. doi:10.1128/JB.01804-08.
16. Gordillo Altamirano F. L., Barr J. J. Phage therapy in the postantibiotic era. Clinical microbiology reviews, 2019, vol. 32, no. 2, e00066-18. doi: 10.1128/CMR.00066-18.
17. Hyman P. Phages for phage therapy: Isolation, characterization, and host range breadth. Pharmaceuticals (Basel), 2019, vol. 12, no. 1, p. 35. doi: 10.3390/ph12010035.
18. Lin Y., Chang R. Y. K., Britton W. J., Morales S., Kutter E., Chan H.-K. Synergy of nebulized phage PEV20 and ciprofloxacin combination against Pseudomonas aeruginosa. International journal of pharmaceutics, 2018, vol. 551, no. 1-2, pp. 158-165.
19. Morrisette T., Kebriaei R., Morales S., Rybak M. J. Bacteriophage-antibiotic combinations: A promising alternative for refractory infections? ContagionLive, 2020, vol. 5, no. 1. Available at: https://www.contagionlive.com/publications/contagion/2020/february/bacteriophageantibiotic-combinations-a-promising-alternative-for-refractory-infections(accessed 13.05 2020).
20. Oechslin, F. Resistance development to bacteriophages occurring during bacteriophage therapy. Viruses, 2018, vol. 10, no. 7, p. 351. doi: 10.3390/v10070351.
21. Rodriguez-Gonzalez R. A., Leung C. Y., Chan B. K., Turner P. E., Weitz J. S. Quantitative models of phage-antibiotic combination therapy. mSystems. 2020, vol. 5, no. 1, e00756-19. doi: 10.1128/mSystems.00756-19.
22. Rubalskii E., Ruemke S., Salmoukas C., Boyle E. C., Warnecke G., Tudorache I., Shrestha M., Schmitto J. D., Martens A., Rojas S. V., Ziesing S., Bochkareva S., Kuehn C., Haverich A. Bacteriophage therapy for critical infections related to cardiothoracic surgery. Antibiotics, 2020, vol. 9, no. 5, p. 232.
23. Rubalskii E. O., Aleshkin A. V., Afanasiev S. S., Aleshkin V. A., Galimzyanov Kh. M., Umerova A. R., Rubalsky O. V., Ershova O. N., Rubalskaya E. E., Kiseleva I. A., Bochkareva S. S., Zul'Karneev E. R., Akhmi-neeva A. Kh., Rubalsky M. O., Lunina I. O., Uskov V. V., Karnaukh M. M., Borisova O. Yu., Gadua N. T., Teply A. D., Rümke S., Salmoukas Ch., Kühn Ch., Haverich A. Integrative approach for control of temperate bacteriophages in phage-based products. Astrakhanskiy meditsinskiy zhurnal [Astrakhan Medical Journal], 2017, vol. 12, no. 3, pp. 56-63.
24. Schooley R. T., Biswas B., Gill J. J., Hernandez-Morales A., Lancaster J., Lessor L., Barr J. J., Reed S. L., Rohwer F., Benler S., Segall A. M., Taplitz R., Smith D. M., Kerr K., Kumaraswamy M., Nizet V, Lin L., McCauley M. D., Strathdee S. A., Benson C. A., Pope R. K., Leroux B. M., Picel A. C., Mateczun A. J., Cilwa K. E., Regeimbal J. M., Estrella L. A., Wolfe D. M., Henry M. S., Quinones J., Salka S., Bishop-Lilly K. A., Young R., Hamilton T. Development and use of personalized bacteriophage-based therapeutic cocktails to treat a patient with a disseminated resistant Acinetobacter baumannii infection. Antimicrobial agents and chemotherapy, 2017, vol. 61, no. 10, e00954-17, doi: 10.1128/AAC.00954-17.
25. Torres-Barceló C., Arias-Sánchez F. I., Vasse M., Ramsayer J., Kaltz O., Hochberg M. E. A window of opportunity to control the bacterial pathogen Pseudomonas aeruginosa combining antibiotics and phages. PLoS One, 2014, vol. 9, no. 9. doi: 10.1371/journal.pone.0106628.
26. Torres-Barceló C. The disparate effects of bacteriophages on antibiotic-resistant bacteria. Emerging microbes & infections, 2018, vol. 7, no. 1, р. 168. doi:10.1038/s41426-018-0169-z.
27. Verma V., Harjai K., Chhibber S. Restricting ciprofloxacin-induced resistant variant formation in biofilm of Klebsiella pneumoniae B5055 by complementary bacteriophage treatment. Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 2009, vol. 64, no. 6, pp. 1212-1218.
14.01.25 - Пульмонология (медицинские науки) 03.02.03 - Микробиология (медицинские науки)
УДК 616.98:578.828HIV:616.211/.22-078:615.371 DOI 10.17021/2020.15.4.39.49 © М.О. Золотов, С.С. Собина, А.В. Лямин,
О.В. Борисова, О.Э. Чернова, Д.Д. Исматуллин, А.В. Жестков, 2020
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СТРУКТУРЫ МИКРОФЛОРЫ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ И ВИЧ-ОТРИЦАТЕЛЬНЫХ ДОБРОВОЛЬЦЕВ
Золотов Максим Олегович, аспирант кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел.: (846) 260-33-61, e-mail: m.o.zolotov@gmail.com.
Собина Светлана Сергеевна, студентка VI курса лечебного факультета, ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел.: (846) 260-33-61, e-mail: sobina_svetlana@mail.ru.
Лямин Артем Викторович, кандидат медицинских наук, доцент кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел.: (846) 260-33-61, e-mail: avlyamin@rambler.ru.
Борисова Ольга Вячеславовна, доктор медицинских наук, профессор кафедры детских инфекций, ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел.: (846) 994-75-38, e-mail: olgaborisova74@mail.ru.
Чернова Оксана Эдуардовна, кандидат медицинских наук, главный врач государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Самарский областной клинический центр профилактики и борьбы со СПИД», Россия, 443029, г. Самара, ул. Ново-Садовая, д. 178, тел.: (846) 374-31-74, e-mail: aids_samara@mail. ru.
Исматуллин Данир Дамирович, ассистент кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел.: (846) 260-33-61, e-mail: danirhakitov@mail. ru.
Жестков Александр Викторович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, ФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, д. 89, тел.: (846) 260-33-61, e-mail: avzhestkov2015@yandex.ru.
