CC BY
75
2. Evdokimov, V.V. Primenenie protochnoj citometrii dlya ocenki zhiznesposobnosti spermatozoidov cheloveka/ V.V. Evdokimov, L.A. Harlamova, D.T. Ajbyatov // EHksper. i klin. urologiya. - 2012. - № 3. - S. 48-50. [In Russ].
3. Ploskonos, M.V. «Abortivnyj» apoptoz spermatozoidov fertil'-nyh muzhchin/ M.V. Ploskonos // Mezhdunarodnyj zhurnal ehksperi-mental'nogo obrazovaniya. -2014. - N° 3. - S. 147. [In Russ].
4. Ploskonos, M.V. Issledovanie ehkspressii belkov - markyorov apoptoza Fas i FasL na chelovecheskih spermatozoidah/ M.V. Ploskonos // Problemy reprodukcii. - 2015. - № 2 (21). - S. 94-97. [In Russ].
5. Ploskonos, M.V. EHksternalizaciya fosfatidilserina na poverh-nost' membran spermatozoidov pod dejstviem oksidativnogo stressa/ M.V. Ploskonos// Rossijskij immunologicheskij zhurnal. - 2015, № 9 (1). - S. 156-157. [In Russ].
6. Ploskonos, M.V., Nikolaev A.A. Vliyanie lipopolisaharidov CHlamydia trachomatis na apoptoz spermatozoidov i razvitie muzhskogo besplodiya/ M.V. Ploskonos, A.A. Nikolaev // Urologiya. - 2014. - № 1. - S.84-87. [In Russ].
7. Agarwal, A. A unique view on male infertility around the globe/ A. Agarwal, A. Mulgund, A. Hamada // Reprod. Biol. Endocrinol. -2015. - Vol. 13. - P. 37.
8. Comninos, A. The relationship between gut and adipose hormones, and reproduction/ A. Comninos, C. Jayasena, W. Dhillo // Hum. Reprod. Update. - 2014. - Vol. 20, № 2. - P. 153-174.
9. Kashanian J. Male Infertility / J. Kashanian, R. Brannigan // JAMA. - 2015. - Vol. 313. - P. 1770.
10. Komija, A. Clinical factors associated with sperm DNA fragmenta-tion in male patients with infertility/A. Komija, T. Kato, Y. Kawau-chi // The Scient World J. - 2014. - Article ID 868303:1-11.
11. Simon, L. Sperm DNA damage has a negative association with live-birth rates after IVF/L. Simon, I. Proutski, M. Stevenson // Reprod. Biomed. Online. - 2013. - Vol. 26, № 1. - P. 68-78.
12. World Health Organization. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. - 5th ed. - WHO (Geneva), 2010. - 270 p.
УДК 616.9-08: 615.779.9 © Коллектив авторов, 2019
Г.А. Идиатуллина, Ю.З. Габидуллин, |З.Г. Габидуллин|. М.М. Туйгунов, А.Г. Губайдуллин, Ф.Ф. Мусыргалина, А.Ф. Ахметзянова АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ КЛИНИЧЕСКИХ ШТАММОВ HAFNIA ALVEI
ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа
Целью нашего исследования явилось определение спектра лекарственной устойчивости клинических штаммов Hafnia alvei к наиболее востребованным антибактериальным препаратам. Оценивалась чувствительность бактериофагов к штаммам Hafnia alvei. Антибиотикорезистентность изучали на 80 клинических штаммах Hafnia alvei, выделенных от больных с желудочно-кишечными, урологическими и гнойно-воспалительными заболеваниями с помощью метода «стандартных дисков», пропитанных широко применяемыми в клинической практике 23 антибиотиками: пенициллин, ампицилин, ампициллин/сульбактам, оксациллин, карбенициллин, линкомицин, канамицин, эритромицин, рифампицин, стрептомицин, гентамицин, тобрамицин, норфлоксацин, гемифлоксацин, моксифлоксацин, тетрациклин, цефуроксимаксетин, цефтадизим, цефепим, левомицетин, нистатин, нитрофуранами (фурадонин, фурагин). Клинический материал получали из разных бактериологических лабораторий Республики Башкортостан. Бактериофаг выделяли по общепринятой методике из клинических отходов лабораторий. Для определения чувствительности бактериофага к клиническим штаммам Hafnia alvei использовали метод пятна (spot-test). Анализ результатов показал, что среди клинических штаммов Hafnia alvei к цефепиму проявили устойчивость - 7.5% (6 шт.), к це-фтадизиму - 11% (9 шт.), к гемифлоксацину - 15% (12 шт.), к моксифлоксацину - 13,7% (11 шт.). 90±3,75% штаммов были одинаково устойчивы к ампицилину, ампициллину/сульбактаму, цефуроксимаксетину, цефалотину. Бактериофаг оказался способен лизировать 65 культур Hafnia alvei (81%) из 80 клинических штаммов, в том числе 60 антибиотикоустойчивых штаммов (75%). Обобщая результаты исследований, можно заключить, что цефтадизим, цефепим, гемифлоксацин, моксифлоксацин, бактериофаг могут быть использованы в качестве лечебно-профилактических препаратов при антибактериальной терапии инфекций, вызванных бактериями Hafnia alvei, в том числе для антибиотикорезистентных штаммов.
Ключевые слова: бактерии Hafnia alvei, метод «бумажных дисков». антибиотики, ампициллин, ампицил-лин/сульбактам, цефуроксимаксетин, антибиотикорезистентность, бактериофаги.
G.A. Idiatullina, Yu.Z. Gabidullin. |Z.G. Gabidullin|. M.M. Tuigunov. A.G. Gubaidullin. F.F. Musirgalina. A.F. Akhmetzyanova ANTIBIOTIC RESISTANCE OF CLINICAL STRAINS OF HAFNIA ALVEI
The aim of the study was to determine the spectrum of drug resistance of Hafnia alvei clinical strains to the most widespread antibacterial drugs. The work evaluated sensitivity of bacteriophages to Hafnia alvei strains. Antibiotic resistance was established by disk diffusion test, where disks were saturated with 23 widely used antibiotics: penicillin, ampicillin, ampicillin/sulbactam, oxacil-lin, carbenecillin, lincomycin, kanamycin, erythromycin, rifampicin, streptomycin, gentamycin, tobramycin, norfloxacin, gemiflox-acin, moxifloxacin, tetracycline, axetine cefuroxime, ceftazidime, cefepime, chloromycetin, nystatin, and with nitrofurans: nitrofu-rantoin, furaginum on 80 Hafnia alvei clinical strains, taken from patients with gastro-intestinal, urological and pyoinflammatory diseases. Clinical material was obtained from bacteriological laboratories of the Republic of Bashkortostan. Bacteriophage was received by a common method from laboratory clinical wastes. To determine sensitivity of bacteriophage to Hafnia alvei clinical strains spot-test was applied. Analysis of the results showed that among Hafnia alvei clinical strains 7.5% (6 units) were resistant to cefepime, 11% (9 units) to ceftazidime, 15% (12 units) - to gemifloxacin, 13.7% (11 units) - to moxifloxacin and were equally resistant to ampicillin, ampicillin/sulbactam, axetine cefuroxime, cefolatin - 90±3.75. Bacteriophage can lyze 65 cultures (81%) from 80 Hafnia alvei clinical strains, including antibiotic resistant - 60 strains (75%). Summering the results, one may conclude, that ceftazidime, cefepime, gemifloxacin, moxifloxacin and bacteriophage can be used as treatment and preventive drugs during antibacterial therapy of infections caused by Hafnia alvei bacteria, including antibiotic resistant strains.
Key words: Hafnia alvei bacteria, disk diffusion test, antibiotics, ampicillin, ampicillin/sulbactam, axetine cefuroxime, antibiotic resistance, bacteriophages.
В последние годы значительно возрос удельный вес инфекционных заболеваний человека, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Одним из таких микроорганизмов является представитель семейства Enterobacteriaceae На:1ша аТуеь Несмотря на то, что бактерии вида На:£ша alvei известны как условно-патогенные представители нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта, ротоглотки человека и животных, они способны вызывать ряд заболеваний, таких как менингит, диарея, некротизирующий энтероколит, пневмония, инфекции мочевыво-дящих путей, эндофтальмит, инфекции мягких тканей, гастроэнтериты, сепсис [5,8-12]. Клинические штаммы Hafnia alvei являются возбудителями внутрибольничной инфекции у пациентов с ослабленным иммунитетом [5]. Способность бактерий Найша alvei образовывать биопленки, снижающие проницаемость антимикробных средств, а также наличие генов лекарственной устойчивости осложняют лечение вызываемых ими инфекций [13-15].
Успех борьбы с любым инфекционным заболеванием зависит от своевременного рационального применения антибактериальных препаратов. Одним из провоцирующих механизмов роста устойчивости микроорганизмов к антибиотикам является нерациональное использование антимикробных препаратов.
Бактериофаги сегодня называют «светлой надеждой в эпоху антибиотикорезистент-ности». Антибактериальный эффект бактериофагов обусловлен внедрением генома фага в бактериальную клетку с последующим лизисом инфицированной клетки. Вышедшие во внешнюю среду в результате лизиса бактерий бактериофаги лизируют уже другие бактериальные клетки до полного уничтожения патогенных бактерий в очаге воспаления. Лечебно-профилактические препараты на основе бактериофагов являются актуальными антибактериальными средствами и широко используются в последнее время. В состав этих препаратов входят литические бактериофаги, способные проявлять антимикробные свойства в отношении определенного вида бактерий - хозяев. По спектру действия бактериофаги могут поражать несколько видов микроорганизмов, проявляя себя как полифаги [3]. Исходя из этого, можно предположить, что существующие биологические препараты (бактериофаги) могут быть чувствительны к Hafnia alvei.
Целью нашего исследования явились определение спектра лекарственной устойчивости клинических штаммов Hafnia alvei и
рассмотрение возможности применения бактериофагов против инфекции, вызванной Haf-nia alvei.
Материал и методы
Нами было проведено изучение спектра лекарственной устойчивости клинических штаммов Hafnia alvei, выделенных при желудочно-кишечных, урологических и гнойно-воспалительных заболеваниях. Антибиотико-резистентность определяли с помощью метода «стандартных дисков», пропитанных широко применяемыми в практике антибиотиками [6,7], на 80 клинических штаммах Hafnia alvei. От пациентов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта выделено 30 штаммов, от больных с гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей - 30 штаммов, а при инфекционных процессах мочевыдели-тельного системы - 20 штаммов. Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России.
Клинический материал получали из бактериологических лабораторий Республиканской клинической больницы им. Г.Г. Ку-ватова, Городской клинической больницы № 21, Детской республиканской клинической больницы, Больницы скорой медицинской помощи № 22 г. Уфы и Ишимбайской центральной районной больницы Республики Башкортостан. Пробы клинического материала были получены от больных с желудочно-кишечными, урологическими и гнойно-воспалительными инфекциями. Среды для определения антибиотикоустойчивости готовили по методу Дж. Миллера: 2% агар Хот-тингера с pH 7,4 (охлажденный до 45°С) хорошо перемешивали, разливали в чашки Петри по 12 мл и сушили в термостате при 37°С в течение 40 минут [4]. Лекарственную устойчивость определяли диско-диффузионным методом EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing), используя диски с антибактериальными препаратами: пенициллин, ампицилин, ампицил-
лин/сульбактам, оксациллин, карбенициллин, линкомицин, канамицин, эритромицин, ри-фампицин, стрептомицин, гентамицин, тобрамицин, норфлоксацин, гемифлоксацин, моксифлоксацин, тетрациклин, цефурокси-максетин, цефтадизим, цефепим, фурадонин, фурагин, левомицетин, нистатин. Изучение антибиотикочувствительности микроорганизмов проводили в соответствии с методическим указаниям МУК 4.2. 1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам».
Бактериофаги выделяли по общепринятой методике [1] из клинических отходов бактериологических лабораторий Республиканской клинической больницы им. Г.Г. Кувато-ва, Городской клинической больницы № 21, Детской республиканской клинической больницы, Больницы скорой медицинской помощи № 22 г. Уфы и Ишимбайской центральной районной больницы Республики Башкортостан. Для определения чувствительности к клиническим штаммам Hafnia alvei использовали метод пятна (spot-test) [2]. Дополнительно использовали пиобактериофаг поливалентный очищенный и интестин-бактериофаг. Учет результатов проводили через 24 часа. Рассев бактериофагов проводили методом двухслойных агаров [1].
Результаты и обсуждение Анализ результатов показал, что среди клинических штаммов Hafnia alvei 79% являются антибиотикочувствительными и 21% антибиотикорезистентными (см. таблицу).
Таблица
Резистентность штаммов Hafnia alvei к антибактериальным препаратам
В результате проведенных исследований было выявлено, что количественные соотношения антибиотикорезистентности штаммов Найша alvei не отличались от источника выделения. Штаммы На:1ша alvei (53,75±1,25%) были слабочувствительными к пенициллину, ок-сациллину, карбенициллину, рифампицину, 57,5±1,25% штаммов На:1ша alvei были слабочувствительными к линкомицину, канамицину, левомицетину, нистатину, эритромицину, стрептомицину, фурадонину, фурагину, 64,75±1,25% - умеренно чувствительными к гентамицину, тобрамицину, норфлоксацину, тетрациклину, 88,75% штаммов сохранили чувствительность к цефалоспоринам и фторхинолонам III - IV поколений (цефтази-дим, цефепим, гемифлоксацин, моксифлокса-цин). Штаммов На:1ша устойчивых к це-фепиму было 7,5% (6 шт.), к цефтадизиму -11% (9 шт.), к гемифлоксацину - 15% (12 шт.),
к моксифлоксацину - 13,7% (11 шт.). Большинство штаммов (72 шт.) были резистентными к ампицилину, ампициллину/сульбактаму, цефуроксимаксетину, цефалотину - 90±3,75%.
В зависимости от происхождения клинического материала установлено, что культуры от больных с гнойно-воспалительными процессами мягких тканей в 100% случаев были устойчивы к ампицилину, ампицилли-ну/сульбактаму, цефуроксимаксетину. Штаммы от пациентов с желудочно-кишечными и урологическими инфекциями имели меньший процент резистентности (90±3,75%) к ампицилину ампициллину/сульбактаму, цефуроксимаксети-ну, цефалотину, в 47,5% случаев резистентны к пенициллину, оксациллину, карбенициллину, рифампицину, в 41,25% - к линкомицину, ка-намицину, эритромицину, стрептомицину, ле-вомицетину, нистатину, фурадонину, фурагину и в 35% случаев к гентамицину, тобрамицину, норфлоксацину, тетрациклину.
Анализ антибиотикочувствительности показал, что из всех выделенных штаммов 100% обладали устойчивостью к 3 препаратам -ампицилину ампициллину/сульбактаму, це-фуроксимаксетину, ни один штамм не обладал чувствительностью ко всем вышеперечисленным антибиотикам, что свидетельствует о множественной лекарственной устойчивости клинических штаммов На:1ша alvei.
Определение антибактериальной активности методом 8ро^теста двух бактериофагов (пиобактериофаг поливалентный очищенный и интестибактериофаг) в отношении 50 клинических штаммов не выявило чувствительности. Поэтому мы сделали вывод, что в вышеназванных препаратах содержатся только специфические бактериофаги, заявленные в инструкции по применению, не оказывающие влияния на клинические штаммы Найша аТуеь
Рис. Чашка Петри с культурой Найша а^е1 после лизирования бактериофагом
В дальнейшем нами из клинического материала был выделен бактериофаг (см. рисунок), способный лизировать 65 культур (81%) из 80 клинических штаммов НайШа в том числе 60 (75%) антибиотикоустойчивых штаммов.
Лекарственный препарат Количество штаммов Резистентность в % от общего числа штаммов
Ампицилин, ампицил-лин/сульбактам, цефалотин, цефуроксимаксетин 72±3 90±3,75
Пенициллин, оксациллин, карбенициллин, рифампицин 37±1 46,25±1,25
Линкомицин, канамицин, эритромицин, стрептомицин, левомицетин, нистатин, фура-донин, фурагин, 33±1 42,5±1,25
Гентамицин, тобрамицин, норфлоксацин, тетрациклин 29±1 36,25±1,25
Цефтадизим, цефепим, ге-мифлоксацин, моксифлоксацин 9±3 11,25±3,75
Заключение. Обобщая результаты данного исследования, можно сделать вывод, что среди клинических штаммов Найша а1уе1, циркулирующих на территории Республики Башкортостан, преобладают возбудители с устойчивостью к широко применяемым в практике антибиотикам: ампициллину, ампи-
циллину/сульбактаму, цефуроксимаксетину, цефалотину. Препаратами выбора для лечения инфекций, вызванных Найша а1уе1, включая резистентные штаммы, являются представителя цефалоспоринов и фторхинолонов Ш-1У поколений (цефтазидим, цефепим, гемифлок-сацин, моксифлоксацин) и бактериофаги.
Сведения об авторах статьи: Идиатуллина Гульнур Азатовна - д.м.н., ассистент кафедры микробиологии, вирусологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: gulnur.idiatullina@mail.ru.
Габидуллин Юлай Зайнуллович - д.м.н., доцент кафедры микробиологии, вирусологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Туйгунов Марсель Маратович - д.м.н., профессор, зав. кафедрой микробиологии, вирусологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Губайдуллин Азат Гирфанович - к.м.н., ассистент кафедры микробиологии, вирусологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: azat.gubaidullin@mail.ru.
Мусыргалина Фарзана Фаритовна - к.м.н., доцент кафедры микробиологии, вирусологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
Ахметзянова Адель Фанилевна - студент фармацевтического факультета ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России, Адрес: 450008, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: 4393024@mail.ru.
ЛИТЕРАТУРА
1. Адамс, М. Н. Бактериофаги/ М.Н. Адамс. - М.: Изд-во иностранной литературы,1961. - 527 с.
2. Асланов, Б.И. Бактериофаги - эффективные антибактериальные средства в условиях глобальной устойчивости к антибиотикам/ Б.И. Арсланов // Медицинский совет. - 2015. - № 13. - С. 3-7.
3. Ворошилова, H.H. Сравнительное изучение антибактериальной и клинической эффективности препаратов бактериофагов и антибиотиков при лечении энтеральных заболеваний, вызванных условно-патогенными бактериями/ Н.Н. Ворошилова [и др.]// Гастроэнтерология. - 2010. - Т. 3, N° 2. - С.19.
4. Миллер, Д. Эксперименты в молекулярной генетике / Д. Миллер. - М.: Мир, 1976. - 110 с.
5. Жумагельдина, З.Т. Клинико-эпидемиологические особенности гафниоза человека: автореф. дис. ...канд. мед. наук. - Алматы, 2010. - 26 с.
6. Сидоренко, С.В. Антибиотикограмма: Диско-диффузионный метод. Интерпретация результатов / С.В. Сидоренко, В.Е. Колупа-ев // Клиническая фармакология и терапия. - 2004. - № 2. - С. 5.
7. Семина, Н.А. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: методические указания МУК 4.2.1890-04 / Н.А. Семина [и др.]. - Смоленск: Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии, 2004. - 40 с.
8. Caravalho J. Jr. Endogenous ophthalmitis due to Salmonella arizonae and Hafnia alvei / J.Jr.Caravalho [et al.] // South Med. J. - 1990. -V. 83. - P. 325-327.
9. Cassanova-Roman, M. Late-onset neonatal sepsis due to Hafnia alvei/ M. Cassanova-Roman, A. Sanchez-Porto, M. Casanova-Bellido// Scand. J. Infect. Dis. - 2004. - V. 36. - P.70-71.
10. Fields, B.N. The so-called "paracolon" bacteria/ B. N. Fields [et al.] // Am. J. Med. - 1967. - V. 42. - P. 89-106.
11. Ginsberg, H. G. Halnia alvei septicemia in an infant with necrotizing enterocolitis / H. G. Ginsberg [et al.] // J. Perinatal. - 1998. - № 8. -P.122-123.
12. Redondo, J. Halnia alvei in a rare case of severe pneumonia in a postanesthesia recovery unit / J.Redondo [et al.] // Rev. Esp. Anestesiol. Reanim. - 2005. - V. 52, № 6. - P. 359-362.
13. Viana, E.S. Biofilm formation and acyl homoserine lactone production in Hafnia alvei isolated from raw milk / E.S. Viana [et al.]// Biol Res. - 2009. - V.42. - P. 427-436.
14. Vivas, J. Influence of environmental conditions on biofilm formation by Hafnia alvei strains/ J.Vivas [et al.]// Vet Microbiol. - 2008. -V. 129. - P.150-155.
REFERENCES
1. Adams, M. N. Bakteriofagi/ M.N. Adams. - Moskva: Izdatel'stvo inostrannoj literatury, 1961. - 527 s.
2. Aslanov, B.I. Bakteriofagi effektivnye antibakterial'nye sredstva v usloviyah global'noj ustojchivosti k antibiotikam/ B.I. Arslanov // ZHurnal Medicinskij sovet. - 2015. - № 13. - str. 3-7.
3. Voroshilova, H.H. Sravnitel'noe izuchenie antibakterial'noj i klinicheskoj effektivnosti preparatov bakteriofagov i antibiotikov pri lech-enii enteral'nyh zabolevanij, vyzvannyh uslovno-patogennymi bakteriyami/ N.N. Voroshilova [i dr.]// Gastroenterologiya Sankt-Peterburga. - 2010. - № 2. - T. 3 - s. 19.
4. Miller, D. Eksperimenty v molekulyarnoj genetike / D. Miller. - Moskva: Mir, 1976. - 110s.
5. Zhumagel'dina, Z.T., Kliniko-epidemiologicheskie osobennosti gafnioza cheloveka: avtoref. dis. ...kand. med. nauk. - Almaty, 2010. - 26 s.
6. Sidorenko, S.V. Antibiotikogramma: Disko-diffuzionnyj metod. Interpretaciya rezul'tatov / S.V. Sidorenko, V.E. Kolupaev // Klinich-eskaya farmakologiya i terapiya. - 2004. - № 2. - s. 5.
7. Semina, N.A. Opredelenie chuvstvitel'nosti mikroorganizmov k antibakterial'nym preparatam: metodicheskie ukazaniya MUK 4.2.189004 / N.A. Semina [i dr.]. - Smolensk.: Central'nyj nauchno-issledovatel'skij institut epidemiologi. - 2004. - 40 s.
8. Caravalho J.Jr. Endogenous ophthalmitis due to Salmonella arizonae and Hafnia alvei / J.Jr.Caravalho [et al.] // South Med. J. - 1990. -V. 83. - P. 325-327.
9. Cassanova-Roman, M. Late-onset neonatal sepsis due to Hafnia alvei/ M. Cassanova-Roman, A. Sanchez-Porto, M. Casanova-Bellido// Scand. J. Infect. Dis. - 2004. - V. 36. - P.70-71.
10. Fields, B.N. The so-called "paracolon" bacteria/ B. N. Fields [et al.] // Am. J. Med. - 1967. - V. 42. - P. 89-106.
11. Ginsberg, H. G. Hafnia alvei septicemia in an infant with necrotizing enterocolitis /H. G. Ginsberg [et al.]// J. Perinatol.1998. - № 8. - P.122-123.
12. Redondo, J. Hafnia alvei in a rare case of severe pneumonia in a postanesthesia recovery unit / J.Redondo [et al.] // Rev. Esp. Anestesiol. Reanim. - 2005. - V. 52, №6. - P. 359-362.
13. Viana, E.S. Biofilm formation and acyl homoserine lactone production in Hafnia alvei isolated from raw milk / E.S. Viana [et al.]// Biol Res. - 2009. - V.42. - P. 427-436.
14. Vivas, J. Influence of environmental conditions on biofilm formation by Hafnia alvei strains/ J.Vivas [et al.]// Vet Microbiol. - 2008. -V. 129. P.150-155.
