CC BY
75
УДК 615.32: 612.017.1
В.Б. Хобракова, Э.В. Архипова, А.М. Водопьянова
ВЛИЯНИЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА ЛАПЧАТКИ БЕЛОЙ НА СОСТОЯНИЕ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ЗВЕНЬЕВ ИММУННОГО ОТВЕТА
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
В опытах на мышах линий СВА и F^ (CBAxC57Bl/6) установлена иммуномодулирующая активность сухого экстракта лапчатки белой. Показано, что испытуемое средство в экспериментальнотерапевтической дозе 10 мг/кг способно ослаблять супрессивное действие цитостатика азатиоприна на антителогенез и клеточноопосредованную иммунную реакцию гиперчувствительности замедленного типа, что выражается, в повышении иммунологических показателей.
Ключевые слова: сухой экстракт лапчатки белой, иммунитет, иммуномодулятор, иммунодефицит, азатиоприн, антителообразование, гиперчувствительность замедленного типа
THE INFLUENCE OF THE DRY EXTRACT FROM POTENTILLA ALBA L. ON THE STATE OF CELLULAR AND HUMORAL CHAINS OF THE IMMUNE RESPONSE
V.B. Khobrakova, E.V. Arkhipova, A.V. Vodopjanova
Institute of General and Experimental Biology SB RAS, Ulan-Ude
The immunomodulating activity of the dry extract from Potentilla alba L. has been established, in experiments on the СВА and F1 (CBAxC57Bl/6) mice. The extract in experimental-therapeutic dose of 10 mg/kg is capable to decrease suppressive action of cytostatic azatioprin on antibody genesis, cellularindirect immune reaction
— hypersensitivity of slow type, what is expressed, by the increasing of immune indices.
Kew words: the dry extract from Potentilla alba L., immunity, immunomodulator, immunodeficiency, azatioprin, antibody genesis, hypersensitivity of slow type
В связи с широким распространением заболеваний щитовидной железы в настоящее время актуальной проблемой является поиск и разработка новых эффективных лекарственных средств, способных предупреждать и корригировать нарушения, вызванные дефицитом йода в организме. Перспективным направлением является поиск средств растительного происхождения, обладающих наряду с широким спектром активности малой токсичностью и безопасностью. Одним из лекарственных растений, применяемых в традиционной и народной медицине для лечения и профилактики заболеваний щитовидной железы, является лапчатка белая (Potentilla alba L., семейство розоцветные
— Rosaceae) [2]. Полезные свойства лапчатки белой обусловлены ее уникальным химическим составом, который до настоящего времени мало изучен. Известно, что подземная часть растения (корневища с корнями) содержит углеводы (крахмал), иридоиды, сапонины, фенолкарбоновые кислоты, флавоноиды (кверцетин), дубильные вещества (галлотанин) — до 17 % (максимум в фазу цветения). Надземная часть (трава) содержит иридоиды, сапонины, фенолкарбоновые кислоты, флавоноиды (рутин), дубильные вещества — до 6 %. В листьях обнаружены фенолкарбоновые кислоты и их производные (n-кумаровая, эллаговая кислоты), флавоноиды (кверцетин, кемпферол, цианидин) [7]. Установлено, что трава лапчатки белой является концентратором микроэлементов (Mn, Zn, Cu, Se, Co, Fe, Si, AI). Также показано, что лапчатка белая содержит элементарный йод и анион йодистой кислоты [2]. Препараты лапчатки белой издавна применяли в народной медицине для лечения заболеваний щитовидной железы. В Белоруссии
благодаря широкому употреблению отвара лапчатки белой практически не было очагов эндемического зоба. Кроме того, в белорусской народной медицине отвар травы лапчатки белой используют для лечения гинекологических и кожных заболеваний. В Болгарии отвар корневищ этого растения используют при диарее, желудочно-кишечных коликах как вяжущее и гемостатическое средство. Экспериментальными исследованиями установлено, что извлечения из травы лапчатки белой оказывают диуретическое и антибактериальное действие, стимулируют функции центральной нервной системы [7]. Особое значение приобретает использование лапчатки белой в зонах с особым социально-экономическим статусом («чернобыльская» и т.п.) с целью выведения из организма человека радионуклидов, а также в йоддефицитных регионах. Как известно, недостаток йода сопровождается развитием вторичных иммунодефицитов. В связи с этим, представляет интерес определение иммуномодулирующих свойств сухого экстракта из корневищ лапчатки белой при экспериментальной иммунодепрессии.
Целью настоящего исследования явилось определение влияния сухого экстракта из корневищ лапчатки белой на показатели клеточного и гуморального звеньев иммунного ответа при экспериментальной иммунодепрессии, вызванной азатиоприном.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Эксперименты проведены на мышах самцах линии СВА массой 18 — 20 г. Действие исследуемого средства было изучено на животных, находящихся в состоянии иммунодепрессии, вызванной цитоста-
ПІІІІІІІІІІІІІІ ІПII IIIII I I ІІГП □ I I I I I I III Г nil I I I II I
195
тиком азатиоприном, который вводили контрольной группе животных в дозе 50 мг/кг перорально 1 раз в сутки в течение 5 дней [3].
Сухой экстракт лапчатки белой вводили опытной группе на фоне азатиоприна в экспериментально-терапевтической дозе 10 мг/кг перорально 1 раз в сутки в течение 14 дней. Интактная группа животных получала воду очищенную по аналогичной схеме.
Состояние гуморального иммунитета оценивали по количеству антителообразующих клеток (АОК), определяемых методом локального гемолиза по A.J. Cunningham [10]. Мышей иммунизировали внутрибрюшинно ЭБ в дозе 2х108 клеток/ мышь. Величину иммунного ответа оценивали по числу АОК на селезенку и на 106 клеток с ядрами на 5-е сутки после иммунизации.
Состояние клеточного звена иммунного ответа оценивали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) согласно стандартной методике локальной ГЗТ [6]. Мышей сенсибилизировали внутрибрюшинным введением 0,1% взвеси эритроцитов барана (ЭБ) в физиологическом растворе. На 4-е сутки под подошвенный апоневроз задней лапки вводили разрешающую дозу антигена — 50 мкл 50% взвеси ЭБ. В контралатеральную лапку инъецировали физиологический раствор в том же объеме. Оценку реакции ГЗТ проводили спустя 24 часа по разнице массы опытной (Ро) и контрольной (Рк) лапок. Полученные результаты обработаны статистическим методом с помощью t-критерия Стьюдента [5].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При исследовании влияния экстракта лапчатки белой на процессы антителообразования установлено, что данное средство восстанавливает показатели гуморального иммунного ответа в условиях азатиоприновой иммуносупрессии. При введении экстракта лапчатки белой на фоне иммуносупрессии наблюдали достоверное увеличение количества АОК как в абсолютных значениях, так и при расчете на 106 спленоцитов в среднем в 1,7 раза по сравнению с контролем (тогда как введение азатиоприна приводило к снижению как абсолютного числа АОК, так и числа АОК на 106 спленоцитов на 39 и 38 %, соответственно, по сравнению с теми же показателями в интактной группе) (табл. 1).
Таблица 1 Влияние экстракта лапчатки белой на антителообразование
Группы животных Абсолютное число АОК на селезенку Число АОК на 106 спленоцитов
Интактная, п = 10 87524±4114 606 ± 34
Контрольная (азатиоприн), п = 10 53013±3691 373 ± 16
Опытная (азатиоприн + экстракт лапчатки белой), п = 10 90610 ± 5988* 647 ± 47*
Примечание: (здесь и далее) п - количество животных в группе, * - означает, что разница существенна (р < 0,05) по сравнению с контролем.
При исследовании влияния экстракта лапчатки белой на клеточно-опосредованную реакцию ГЗТ установлено, что испытуемое средство восстанавливает индекс данной реакции (ИР ГЗТ) в условиях азатиоприновой иммуносупрессии. При введении испытуемого средства на фоне иммунодепрессии наблюдали увеличение ИР ГЗТ в 2,6 раза по сравнению с контролем (тогда как введение азатиоприна приводило к снижению ИР ГЗТ на 50 % по сравнению с тем же показателем в интактной группе) (табл. 2).
Таблица 2
Влияние экстракта лапчатки белой на выраженность реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ)
Группы животных ИР ГЗТ, %
Интактная, п = 10 32,50 ± 2,58
Контрольная (азатиоприн), п = 10 16,22 ± 0,90
Опытная (азатиоприн + экстракт лапчатки белой), п = 10 41,57 ± 3,76*
Таким образом, сухой экстракт лапчатки белой способен ослаблять супрессивное действие азатиоприна на показатели клеточного и гуморального звеньев иммунного ответа. Эффективность исследуемого экстракта обусловлена совокупным действием комплекса биологически активных веществ, преимущественно, флавоноидами, фенол-карбоновыми кислотами, дубильными веществами, тритерпеновыми сапонинами, обладающими выраженными иммуномодулирующими свойствами [1, 4, 8, 9].
Полученные данные позволяют заключить, что сухой экстракт лапчатки белой является эффективным иммуномодулирующим средством, что аргументирует целесообразность его применения в комплексном лечении и профилактике иммуно-дефицитных состояний, в том числе, заболеваний щитовидной железы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бакуридзе А.Д., Курцикидзе М.Ш., Писарев В.М. и др. Иммуномодуляторы растительного происхождения // Хим.-фармац. журн. — 1993. — № 8. - С. 43-47.
2. Гриценко О.М. Фитохимический состав лапчатки белой // Фармацевтический журнал. -1977. - № 1. - С. 88-91.
3. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. - М.,1985. - 256 с.
4. Лазарева Д.Н., Плечев В.В., Моругова Т.В., Самигуллина Л.И. Растения, стимулирующие иммунитет. - Уфа, 2005. - 96 с.
5. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М., 1990. - 352 с.
6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р.У. Хабриева. - М., 2005. - С. 80.
7. Смык Г.К. Лапчатка белая - эффективное средство для лечения заболеваний щитовидной
196
пмммпммиимп 11 11II мт □ II11 Ii III □ nil и 111
железы // Фармацевтический журнал. — 1975. — № 2. - С. 58-62.
8. Токешова Л.Е. Лекарственные растения и их препараты, используемые в качестве иммуномодуляторов // Materials of the II International Conference "Natural Products: Chemistry, Technology and Medicinal Perspectives”. — Алматы, 2007. — С. 161.
9. Толкачев О.Н., Шипулина Л.Д., Шейчен-ко О.П. Новые растительные полифенолы — активные противовирусные агенты и иммуномодуляторы // Int. J. Immunorehabil. — 1999. — № 14. — С. 9.
10. Cunningham A.J. A method of increased sensitivity for detecting single antibodyforming cells // Nature. — 1965. — Vol. 207, N 5001. — P. 1106 — 1107.
Сведения об авторах
Хобракова Валентина Бимбаевна - к.б.н., с.н.с. лаборатории экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: (3012) 43-47-43; факс: (3012) 43-30-34; e-mail: [email protected]).
Архипова Эржена Владимировна - аспирант Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (670047, г Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: (3012) 43-47-43; факс: (3012) 43-30-34).
Водопьянова Анна Михайловна - аспирант Института общей и экспериментальной биологии СО РАН (670047, г Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: (3012) 43-47-43; факс: (3012) 43-30-34).
nilllllllllllllllllin IIIIII 1111ГП □ I I I I I I III □ nil I I I I I I
197
