CC BY
9Г.В. Ескин
ЦСИО с.-х. животных
ВЛИЯНИЕ СПОСОБА РАЗБАВЛЕНИЯ СПЕРМЫ НА ЕЕ КАЧЕСТВО И ОПЛОДОТВОРЯЮЩУЮ СПОСОБНОСТЬ ПОСЛЕ ЗАМОРАЖИВАНИЯ-ОТТАИВАНИЯ
Метод криоконсервации спермы позволяет широко использовать искусственное осеменение в практике свиноводства. Однако при замораживании-оттаивании спермы часть спермиев погибает. Качество за-морожено-оттаянной спермы зависит от многих факторов.
В данных исследованиях мы изучали влияние способа разбавления спермы перед замораживанием на ее качество и оплодотворяющую способность после замораживания-оттаивания.
Одной из причин гибели спермиев в процессе замораживания - это замораживание одномоментно больших доз спермы хряков. Это косвенным образом сказывается и на расходе жидкого азота, при хранении больших объемов спермы, а также на ее транспортировке.
Поэтому снижение объема замораживаемой спермы имеет очень большое значение. Для снижения объема спермы ранее применялись способы центрифугирования с последующим удалением части плазмы. Однако результаты не удовлетворяли исследователей и в даль-
нейшем для замораживания спермы хряков без увеличения объема спермы был использован метод диализа.
Данная криопротекторная обработка спермы диализом позволяет воздействовать на сперму без увеличения ее объема с одновременным введением защитных веществ в плазму. Доказано, что разбавление спермы перед замораживанием неблагоприятно действует на сперматозоиды (Robertson L. Watson IP, 1986), к тому же увеличивается ее объем. Метод диализа позволяет исключить разбавление спермы перед замораживанием, что значительно снижает объемы замораживаемой спермы.
Диализная обработка спермы производится в специальной диализной камере, внутрь которой помещается сперма. Во внешние камеры заливается среда, которая насыщает сперму через полупроницаемые мембраны.
Состав среды для использования в диализной камере следующий: лактоза или сахароза - 50 г, глюкоза - 16 г, ЭДТА - 8 г, оксид калия - 0,6 г, оксид магния - 0,4 г гид-роксид натрия - 0,3 г, гидроксид калия - 0,1
Таблица 1
Влияние способа обработки спермы на ее качество при замораживании-оттаивании
Показатели Способ обработки спермы
Обычное разбавление Обычное разбавление концентрированной Разбавление спермы с помощью диализа
Подвижность, % 37 41 44
Выживаемость при 39° С, усл. ед. 3,3 3,5 3,9
Сохранность акросом, % 45 49 53
Способ обработки спермы
Осеменено свиноматок
Опоросилось
%
Многоплодие
Обычное разбавление спермы
45
22
48,9
9,13
Разбавление концентрированной спермы
43
23
54,5
9,21
Разбавление спермы с помощью диализа
49
29
59,2
9,27
число
Таблица 2
Влияние обработки спермы перед замораживанием на результативность осеменения свиноматок
Таблица 3
Влияние способа обработки спермы на выживаемость сперматозоидов при замораживании-оттаивании
Способ обработки спермы Заморожено эякулятов Из них с подвижностью 30 и более %
число %
Обычное разбавление спермы 45 23 51,1
Разбавление концентрированной спермы 45 33 73,3
Разбавление спермы диализом 46 38 82,6
г, цитрат аммония трехзамещенный - 3 г, глицерин - 40 мл, желток куриного яйца -50 мл, вода дистиллированная - 1000 мл.
В данных исследованиях использовалось обычное разбавление спермы (после получения спермы отфильтровывались секреты куперовых желез и сперма разбавлялась 1:1 средой), - обычное разбавление концентрированной спермы (для разбавления использовалась только густая флакция спермы) и разбавление спермы диализом.
В опытах использовалась сперма основных хряков ЗАО «Константиново» Московской области, замораживание проводилось на ЦСИО с.-х. животных Московской области. От хряков крупной белой породы в возрасте 1,5 - 2,5 лет получали сперму и замораживали ее, разбавляя тремя способами, описанными выше.
Показатели качества спермы в зависимости от способа разбавления приведены в таблице 1
Из данных таблицы 1 следует, что наилучшим способом обработки спермы перед замораживанием является диализ, т.к. по сравнению с обычным разбавлением после оттаивания подвижность после диализа была выше на 7,0% выживаемость на 0,4 часа, а сохранность акросом - на 8,0%.
Спермой, замороженной при различных способах разбавления были осеменены свиноматки подсобного хозяйства. Для осеменения использовались основные свиноматки после отъема поросят. Доза спермы 100 мл с содержанием 3 млрд. подвижных сперматозоидов в дозе. Осеменение двухкратное в одну охоту. Данные приведены в таблице 2.
Наибольшее количество свиноматок опоросилось в группе, где производилась диализная обработка спермы. Этот показатель выше на 10,3% по сравнению с обычным разбавлением спермы и на 5,6 % при разбавлении концентрированной среды. Многоплодие отличалось незначительно, превалируя во второй и третьей группах.
При исследовании эякулятов, пригодных для осеменения свиноматок, наилучшее результаты получены при обработке спермы диализным методом. Данные приведены в таблице 3.
Разбавление спермы методом диализа позволяет значительно увеличить число эякулятов, пригодных для осеменения свиноматок. По сравнению с обычным разбавлением при разбавлении концентрированной спермы этот показатель выше на 22,2% а при диализе - на 31,5%. Это дает значительную экономию при выбраковке спермы после замораживания, а учитывая, что оплодотворяемость этой спермы выше, чем при обычном разбавлении, можно сделать вывод о более эффективном использовании спермы, используя даже один из приемов - способ разбавления спермы.
Но если учесть, что при разбавлении спермы диализом в 2 раза сокращается объем замораживаемой спермы более высокой сохранности акросом сперматозоидов, можно рекомендовать перед замораживанием-оттаиванием обрабатывать сперму хряков данным способом. Такое преимущество позволит более широко внедрить использование замороженной спермы хряков в селекционно-племенной работе.
