CC BY
53
Таблица 3. Оплодотворяемость коров и телок замороженно-оттаяной спермой с начальной концентрацией сперматозоидов 0,6-0,75 млрд/мл
Осе- Оплодотворилось от 1-го осе-
Вариант не- е м менения
но, гол голов %
Опыт 46 33 73,91±6,47
Контроль 104 67 73,08±4,35
за первый год использования не различается (81,14 и 81,18 % соответственно), следовательно, сперму устойчивую к замораживанию можно получать и в возрасте до 15 месяцев.
За первые полгода и год использования быков заморожено 107395 и 214915 спермодоз, или в среднем 3159 и 7960 доз на 1 гол. соответственно. При использовании спермы с активностью 6...7 баллов и концентрацией клеток 0,6...0,75 млрд/мл можно было бы дополнительно заморозить от 33 быков в первые полгода использования и от 28 быков за первый год использования 11270 доз, или в среднем 276 и 417 доз на быка соответственно.
Достоверных различий между показателями сперматозоидов из эякулятов, допускаемых по ГОСТу к замораживанию и из эякулятов, отнесенных к браку, до и после замораживания не установлено (табл. 2). Большинство эякулятов после оттаивания имели активность сперматозоидов в пределах 4.6 баллов и только у 8 она составляла 2 балла. Величины исследуемых показателей отвечают существующим требованиям, предъявляемым к оценке замороженно-оттаяной спермы. Доля патологических форм сперматозоидов и сперматозоидов с повреждениями акросом находится в пределах соответствующих контролю. Не наблюдалось существенных различий по повреждению мембран сперматозоидов после замораживания-оттаивания. В сперме быков с изначально низкой концентрацией сперматозоидов они составляли 50 %, а в соответствующей ГОСТу - 60 %.
Не выявлено достоверных различий и между качественными показателями после оценки полярографическим методом. В свежеполученной сперме скорость дыхания сперматозоидов из эякулятов, определенных как «норма»
Литература.
1. Sharnon P. The effect of optimal and suboptimal concentrations of sperm on the fertility of fresh and frozen bovin semen and theoretical model to explain the fertility differences. Animal Repr.Science. - 39 (1) . - 1995. - pp 1-10
2. Watson P.F. The causes of reduced fertility with cryopreserved semen. Animal Repr.Science. - 67 (1-2) . - 2001. - pp 150-156
3. Uwland J. Correlation between the number of inseminated spermatozoa and results of fertilization in dairy cattle // Tijdschr Diergeneeskd. 1984 May 15;109(10):405-12.
4. Halangk W, Bohnensack R. A quick test for the simultaneous determination of intactness and concentration of spermatozoa. Acta Biol. Med. Ger., 1982. - 41(10) . - pp 899-905.
5. Мороз Л.Г., Шапиев И.Ш., Корбан Н.В. Методические рекомендации по оценке качества спермы хряков при низкотемпературной консервации. - Л, 1980. - 61 с.
и «брак» была равна соответственно 130±9,0 наноАО2/мин и 140±11,2 наноАО2/мин, стимуляция дыхания 2,4-ДНФ -2,20±0,350 и 2,16±0,320, в заморожено-оттаянной сперме, скорость дыхания - 82±10,0 и 88±10,6 наноАО2/мин, стимуляция дыхания 2,4ДНФ - 1,59±0,072 и 1,54±0,068.
Результаты проверки оплодотворяющей способности сперматозоидов после замораживания-оттаивания спермы из опытных и контрольных эякулятов показали, что она не различается. Оплодотворяемость коров и телок от первого осеменения дозами, замороженными из эякулятов с концентрацией 0,6...0,8 млрд/мл составила 73,0 %, а дозами, полученными из спермы с концентрацией 0, 8 млрд/мл и выше - 73,3 % .
Выводы. Таким образом, оттаянная сперма из эякулятов с низкой концентрацией не отличается по исследуемым показателям качества от спермы из эякулятов с высокой активностью и концентрацией. Сперму устойчивую к замораживанию можно получать от животных в возрасте до 15 месяцев. Для ускоренного накопления спермы и интенсификации использования быков-производи-телей, можно отбирать для замораживания сперму с исходной концентрацией сперматозоидов >0,6 млрд/мл и активностью выше 6 баллов.
USE OF BOVINE SPERM WITH LOW CONCENTRATION AND ACTIVITY OF SPERMATOZOA FOR CRYOPRESERVATION
E.V.Nikitkina, I. S. Shapiev
Summary. Results of research have shown that frozen-thawed sperm with low concentration and activity of spermatozoa does not differ from frozen-thawed sperm with high activity and concentration of cells. Conception rate of sperm with 0,6-0,8 billion/ml was 73,9 % and conception rate of sperm with e” 0,8 billion/ml was 73,1 %. It is offered to use bovine sperm with initial concentration of spermatozoa more than 0,6 billion/ml for freezing.
Key words: sperm, concentration and activity of spermatozoa, conception rate, cryopreservation.
УДК 615.37:636.082.35:619:616.981.49
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА ПАНТОЛИЗАТ НА ИММУНИТЕТ ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ САЛЬМОНЕЛЛЁЗА ТЕЛЯТ
Н.И. ЗЕМЛЯНСКАЯ, кандидат ветеринарных наук, до- Резюме. Введение в рацион телят пантолизата повыша-цент ет иммунный ответ животных при проведении специфи-
З.А. ЛИТВИНОВА, старший преподаватель ческой профилактики сальмонеллёза. Иммунокоррегиру-
Дальневосточный ГАУ ющий эффект связан с увеличением в крови телят на 30-
Е-таіІ: litvinova-08@mail.ru й день общего белка на 5,34...11,19 %, уровня иммуногло-
булинов - на 3,07.9,18 % и титра противосальмонел-лёзных антител - на 7,89.23,68 %.
Достижения науки и техники АПК, №07-2010 ____________________________________________ 51
Ключевые слова: сальмонеллёз, телята, вакцинация, пантолизат, иммуностимуляция.
Важное место в борьбе с сальмонеллёзной инфекцией занимает специфическая профилактика. Однако вакцинация крупного рогатого скота против этого заболевания не всегда обеспечивает иммунитет высокой напряжённости. Так, в Амурской области титры антител телят, полученных от вакцинированных и не вакцинированных коров, отличались не существенно (1:14...1:18) [1].
Для создания иммунитета высокой напряжённости ряд исследователей рекомендует проводить вакцинацию в комплексе с иммуностимулирующими препаратами. В этом случае активируются иммунные механизмы организма, что проявляется в увеличении титра специфических антител [2].
Большой интерес представляет иммуномодулирующая способность природных адаптогенов. С этой целью мы испытали препарат пантолизат, который относится к группе тканевых препаратов и представляет собой гистолизат из отходов производства рантарина (препарат из неокостеневших рогов оленей) [7]. Он отличается низкой себестоимостью и его производство возможно в хозяйственных условиях.
Задача наших исследований изучить влияние перо-рального и парентерального применения пантолизата на иммунный ответ телят на фоне проведении специфической профилактики сальмонеллёза.
Условия, материалы и методы. Работу проводили в опытно-производственном хозяйстве ВНИИ сои в с. Лозовое Тамбовского района Амурской области. Опыт поставлен на телятах голштинизированной симметнальской породы.
По принципу аналогов были подобраны контрольная и две опытные группы однодневных телят по 7 голов в каждой. Особям первой опытной группы с первого дня жизни 2 раза в день выпаивали пантолизат в дозе 5 мл с 200 мл тёплой кипячёной воды за 30 минут до кормления в течение десяти дней. Телятам второй опытной группы его вводили на фоне первой вакцинации внутримышечно в дозе 2 мл. Животным контрольной группы препарат не применяли.
Всех животных двукратно вакцинировали концентрированной формолквасцовой вакциной против сальмонеллёза телят. Согласно наставлению по ее применению первая иммунизация проведена на 10-й день жизни животных, повторная - на 19-й день. Вакцину вводили подкожно в область средней трети шеи в дозе 2 мл.
Взятие крови проводили, на 1-й, 5-й, 9-й, 18-й и 30-й день жизни телят.
Определение количества эритроцитов, лейкоцитов проводили в день забора крови аппаратным методом (автоматизированный гематологический анализатор МЕК-6400). Лейкограмму выводили на основании исследования окрашенных мазков крови [5]. Общий белок в сыворотке крови определяли рефрактометром, количество иммунных белков - по реакции с цинком сульфатом [3]. Фагоцитарную активность определяли по методике П.Н. Смирнова с соавторами (1989), бактерицидную активность сыворотки - фотонефелометрическим методом [4]. Сыворотку дополнительно исследовали в серологической реакции агглютинации (РА) на наличие противосальмонеллёзных антител, при этом использовали сальмонеллёзный моновалентный антиген S.dublin.
Цифровой материал обрабатывали математическим методом вариационной статистики.
Результаты и обсуждение. Применение пантолиза-
та на фоне вакцинации телят против сальмонеллёза положительно влияло на иммунный ответ организма животных.
Выпаивание препарата телятам способствовало повышению уровня эритроцитов и лейкоцитов крови. Основные достоверные изменения величин этих показателей отмечены на 30-й день опыта, когда количество эритроцитов было выше фона на 6,31 %, а лейкоцитов - на 5,11 %. Положительное влияние исследуемого препарата на клеточное звено иммунитета отражено в содержании лимфоцитов. В сравнении с контролем, оно увеличилось на 18-й день эксперимента на 5,68 %, на 30-й день - на 3,43 %. Существенных изменений других клеточных показателей не отмечено.
Парентеральное применение пантолизата способствовало повышению уровня эритроцитов и лейкоцитов, по сравнению с контролем, на 18-й день эксперимента на 2,34 и 3,56 %, на 30-й день - на 4,29 и 2,01 % соотве-ственно. У телят этой группы на 18-й день опыта отмечено увеличение содержания палочкоядерных нейтрофилов на 9,25 %, лимфоцитов - на 3,22, моноцитов - на 2,99 %.
Включение пантолизата в рацион новорождённых животных привело к достоверному увеличению лейкоцитарного фагоцитоза, как до вакцинации, так и после. Различие фагоцитарной активности (ФА) с контролем на 9-й день эксперимента составило 4,60 %, фагоцитарного индекса (ФИ) - 1,90 %, на 18-й день - 2,22 и 2,03 %, на 30-й - 6,05 и 4,42 % соответственно. У телят второй опытной группы показатель ФА был выше контроля на 18-й день исследования на 4,08 %, ФИ - на 5,69 %, на 30-й день ФА превысила фон на 3,38 %, ФИ - на 7,74 %.
После выпаивания пантолизата отмечено достоверное увеличение бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК), по сравнению с контролем. На 9-й день она была выше на 12,00 %, на 18-й - на 10,68 %, на 30-й - на 13,16 %. У животных, которым препарат вводили внутримышечно, БАСК превысила фоновый уровень на 18-й день - на 7,71 %, на 30-й день - на 5,65 %.
Наибольшее увеличение уровня общего белка при выпаивании препарата (13,06 %) установлено на 9-й день. На фоне первой вакцинации величина этого показателя превысила фон на 10,35 %, после повторно-гом введении антигена - на 11,19 %. Содержание общего белка в сыворотке крови телят второй опытной группы на 18-й день было больше, чем в контроле, на 6,03 %, на 30-й день - на 5,34 %.
Выпаивание пантолизата способствовало повышению количества иммунных глобулинов в сыворотке крови вакцинированных против сальмонеллёза телят. Наибольшее увеличение их содержания, по сравнению с контролем, отмечено на 18-й день - 13,94 %. На 30-й день разница составила 9,18 %. У животных второй опытной группы уровень иммуноглобулинов был выше контроля на 18-й день на 5,29 %, на 30-й день - на 3,07 %.
Положительное влияние пантолизата на динамику иммуноглобулинов у телят сочеталось с величиной выявленных у них в крови титров противосальмонеллёзных антител (см. табл.). Низкий титр специфических антител у животных в контроле свидетельствует о слабой иммунобиологической реактивности их организма при контакте с вакцинным антигеном. У особей первой опытной группы уровень антител значительно превышал контроль еще до иммунизации, а во второй опытной группе до вакцинации он находился на уровне контроля.
Увеличение титра противосальмонеллёзных антител на фоне применения пантолизата наблюдалось как после первой, так и после второй иммунизации. В крови телят __ Достижения науки и техники АПК, №07-2010
Таблица. Титр агглютининов в сыворотке крови телят контрольной и опытных групп (п=7)
Группа животных День исследования
9 18 30
Контрольная М±т 1: 14±2,19 1:38±6,11 1:76±4,Q9
% 1QQ, QQ 1 QQ, QQ 1QQ,QQ
I опытная М±т 1:22±2,Q2 1:46±2,58 1:94±3,17
% 157,14* 121,Q5** 123,68***
II опытная М±т 1: 12±Q, 38 1:44±3,Q7 1:82±2,85
% 85,71** 115,78* 1Q7,89**
Примечание: * р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001 - показатели
достоверности различий в сравнении с контрольной группой. первой опытной группы после первой вакцинации он составил 1:46±2,58; во второй - 1:44±3,07, что на 21,05 и 15,78 % выше, чем у животных, которым препараты не давали. При повторном введении вакцины в опытных группах величина этого показателя оказалась больше фона на
23,68 и 7,89 % соответственно.
Экономический эффект на 1 руб. затрат в I опытной группе составил 8,1 руб., во II опытной группе - 4,5 руб.
При этом себестоимость пантолизата на одно животное была равна 5,6 и 3,2 руб. соответственно.
Выводы. Пероральное и парентеральное применение пантолизата способствует повышению иммунного статуса организма телят при проведении специфической профилактики сальмонеллёза. Иммунокоррегирую-щий эффект связан с увеличением в крови животных опытных групп на 30-й день общего белка (на 11,19 и 5,34 % соответственно), уровня иммуноглобулинов (на 9,18 и 3,07 %) и титра противосальмонеллёзных антител (на
23,68 и 7,89 %). Мы предполагаем, что стимуляция иммунного ответа под действием препарата происходит потому, что в его состав входит широкий спектр аминокислот, макро- и микроэлементов, которые организм использует для синтеза иммунокомпетентных клеток и антител, ответственных за гуморально-клеточный иммунитет.
Таким образом, использование пантолизата можно рекомендовать для повышения иммунного ответа у телят при проведении специфической профилактики сальмонеллёза.
Литература.
1. Землянская Н.И. Механизмы иммунитета и вопросы специфической профилактики/Н.И.Землянская. - Благовещенск, ДальГАУ, 2005. - 42 с.
2. Ильясова З.З. Иммуностимуляция телят при вакцинации против сальмонеллёза / З.З.Ильясова//Ветеринарно-биологические проблемы науки и образования. - № 2. - 1999. - С. 77-79.
3. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: справочник/И.П. Кондрахин, А.В.Архипов, В.И.-Левченко, Г.А.Галанов и др. - М.: Колос, 2004. - 520 с.
4. Оценка естественной резистентности крупного рогатого скота и овец: методические рекомендации/П.Н.Смирнов, Н.Б.Гончарова, И.М.Воронова, В.М.Чекишев и др.//ВАСХНИЛ Сиб. Отделение ИЭВС и ДВ. - Новосибирск, 1989. - 20 с.
5. Смирнов, А.М. Практикум по клинической диагностике внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных/А.М.Смирнов, Г.А.Дугин, В.С.Кондратьев и др. - Л.: Колос, 1978. - 272 с.
6. Чекишев В.М. Электрофоретический анализ белков сыворотки крови в геле агарозы: сб. науч. работ СибНИВИ/ В.М.Чекишев. - 1975.-№2. - С. 213-217.
7. Ярцев В.Г. Биологически активные вещества отходов фармацевтической переработки пантов северного оленя/ В.Г.Ярцев//Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 1990. - №2. - С. 111-116.
INFLUENCE OF PREPARATION PANTOLIZAT ON THE IMMUNITY OF CALVES VACCINATED AGAINST SALMONELLOSIS
N.I. Zemlyanskaya, Z.A. Litvinova
Summary. Introduction in a diet calves pantolisat raises the immune answer of animals at earring out of specific preventive maintenance salmonellosis.
Key words: salmonellosis, calves, vaccination, pantolizat, immunostimulation.
УДК 619:616.003.268:577,1:474
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОЛОЗИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ СОХРАННОСТИ ТЕЛЯТ И ЦЫПЛЯТ
Л.А. ВОРОНЦОВА, кандидат биологических наук, профессор
Дальневосточный ГАУ
Е.В. ВОРОНЦОВ, кандидат биологических наук, врач
ЦРБ пос. Константиновка Амурской обл.
Е.Ю. ОСИПЕНКО, кандидат биологических наук, доцент
Е.В. ЗАХАРОВА, кандидат биологических наук, доцент Дальневосточный ГАУ E-mail: tikhonchukp@rambler.ru
Достижения науки и техники АПК, №07-2010
Резюме. В опытах, проведенных в зимне-весеннее время на телятах новорожденных и молочного периода кормления, а также на цыплятах, изучено влияние молозивныхпрепаратов на белковый состав крови и жизнеспособность молодняка. Установлено, что молозивные препараты активизируют синтез белков в крови опытных животных и птицы, достоверно увеличивают уровень имунноглобулинов и обеспечивают высокую сохранность молодняка.
Ключевые слова: молозиво, препараты, телята, цыплята, кровь, белок, сохранность.
-------------------------------------------- 53
