CC BY
33
УДК 619:615.37
Ключевые слова: вакцинация, иммунитет, пантолизат, сальмонеллез, телята Key words: vaccination, immunity, pantolysate, salmonellosis, calves
Литвинова З. А.
ИММУННАЯ РЕАКЦИЯ ОРГАНИЗМА КОРОВ И ТЕЛЯТ ПРИ ВВЕДЕНИИ ПАНТОЛИЗАТА В СОЧЕТАНИИ С ВАКЦИНОй ПРОТИВ САЛьМОНЕЛЛЕЗА
the immune reaction of the organism of cows and calves with the use of pantolysate in combination with vaccine against salmonellosis
ФГБОУ ВО «Дальневосточный государственный аграрный университет» Адрес: 675005, Россия, Амурская область, г. Благовещенск, ул. Политехническая, д. 86
Far East State Agrarian University Address: 675005, Russia, Amur area, Blagoveshchensk, polytechnicheskaya str., 86
Литвинова Зоя Александровна, к. в. н., доцент. E-mail: Litvinova-08@mail.ru Litvinova Zoya A., phD in Veterinary Science, Associate professor. E-mail: Litvinova-08@mail.ru
Аннотация. Для повышения эффективности вакцинации коров и телят против сальмонеллеза многие исследователи рекомендуют использовать иммуномодулирующие препараты. К группе таких препаратов относят пан-толизат. Установлено, что сочетанное применение пантолизата с вакциной против сальмонеллеза способствует повышению иммунного статуса коров и телят, а также эффективности специфической профилактики инфекции, что подтверждается высокими титрами специфических антител.
Summary. Many researchers recommend to use the immunomodulatory drugs to increase the effectiveness of vaccination of cows and calves against salmonellosis. pantolysate is a drug of this group of products. It is found that the combined use of pantolysate with the vaccine against salmonellosis helps to improve the immune status of cows and calves and the effectiveness of specific prevention of infection evidenced by high titers of specific antibodies.
Введение
В комплексе профилактических мероприятий при сальмонеллезе телят важное место отводится вопросу плановой вакцинации маточного поголовья и молодняка. Однако иммунизация коров и телят на фоне нарушений обменных процессов организма, угнетения иммунной системы приводит к значительному снижению эффективности вакцин.
Для повышения эффективности вакцинации, наряду с улучшением кормления и содержания животных, важным моментом является повышение естественной резистентности и стимуляция поствакцинального иммунитета с помощью средств, обладающих иммуномодулирующими свойствами. К таким препаратам относят пантолизат, который представляет собой гистолизат из отходов фармацевтического производства ран-тарина (препарат из неокостеневших рогов оленя). Важно отметить, что на фоне дороговизны многих фармакологических средств данный препарат отличается низкой себестоимостью и его производство возможно в хозяйственных условиях.
Материалы и методы
Целью исследования явилось изучение влияния пантолизата на иммунитет вакцинированных против сальмонеллеза коров и телят. Эксперимент проведен в трех сериях опыта в производственных условиях ОПХ ВНИИ сои с. Лозовое Тамбовского района Амурской области. В опыт были подобраны коровы со сроком стельности 7-7,5 месяца и полученные от них телята. По принципу аналогов были сформированы две группы стельных коров по 10 голов в каждой. Всех животных дважды иммунизировали формол-васцовой вакциной против сальмонеллеза телят согласно инструкции по применению. Коровам первой (опытной) группы одновременно с введением вакцин внутримышечно инъецировали пантолизат в дозе 5 мл. Вторая группа коров считалась контрольной, им пантолизат не вводили. Отбор проб крови у коров проводили до вакцинации, за 1-2 недели до отела и на 2-3 день после родов.
Новорожденные телята, полученные от подопытных коров, были разделены на соответствующие группы. В первую (опытную)
группу вошли телята, полученные от коров, которым вводили вакцину против сальмо-неллеза в сочетании с пантолизатом (n = 10); во вторую (контрольную) - животные, полученные от иммунизированных без пан-толизата коров (n = 10). Всех телят двукратно вакцинировали против сальмонеллезной инфекции. Первая иммунизация проведена в 20-дневном возрасте, повторная - еще через 10 дней. Телятам опытной группы на фоне первой и второй вакцинации внутримышечно вводили пантолизат в дозе 2 мл. Отбор проб крови у телят проводили до выпаивания молозива, на 3-5, 10, 20, 30 и 60-е дни их жизни.
Для оценки состояния иммунитета животных исследовали сыворотки крови и молозива коров-матерей, а также сыворотки крови телят. Бактерицидную активность сывороток крови определяли по методике О. В. Смирновой и Т. А. Кузьминой (1966); лизоцим-ную активность - методом А. Г. Дорофей-чука (1968); фагоцитарную активность лейкоцитов - по методике В. С. Гостева (1950). Количество иммунных белков определяли по реакции с цинком сульфатом. Т-лимфоциты идентифицировали методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК). В-лимфоциты идентифицировали по выявлению рецепторов к третьему компоненту комплемента (ЕАС-РОК). Титр про-тивосальмонеллезных антител определяли в реакции агглютинации с использованием моновалентного антигена S. dublin.
Цифровой материал обрабатывали с помощью математических методов вариационной статистики с использованием прикладных статистических программ Statistica 5.0 и Microsoft Excel.
Результаты исследований
Результаты проведенных исследований показали, что вакцинация коров против сальмонеллеза способствует повышению гуморальных и клеточных показателей иммунитета как до, так и после отела. Более высокие показатели отмечены у животных, которым одновременно с вакцинами вводили пантолизат. Уровень бактерицидной и лизоцимной активности сывороток крови коров опытной группы до родов были достоверно выше фоновых значений на 5,76 %
(89,05±2,38 %) и 11,76 % (3,81±0,17 %); после отелов - на 6,42 % (94,72±1,39 %) и 15,38 % (4,5±0,14 %), соответственно.
Положительное влияние пантолизат оказал и на клеточное звено иммунитета коров-матерей. Введение иммуномодулятора совместно с вакциной сопровождалось увеличением фагоцитарной активности нейтро-филов и фагоцитарного индекса. В опытной группе животных разница показателей с контрольными значениями до отелов составила 26,53 % (71,62±1,54 %; р < 0,01) и 16,32 % (5,72±0,34 %; р < 0,01); после рождения телят - 4,52 % (88,01±2,12 %; р < 0,001) и 25,48 % (9,01±0,15; р < 0,01).
У коров опытной группы перед отелом в сравнении с контролем отмечено увеличение Т- и В-лимфоцитов на 5,95 % (р < 0,05) и 22,41 % (р < 0,01), соответственно. После родов данная динамика сохранялась, разница на 2-3 дни после отелов составило 9,21 % (р < 0,01) и 41,44 % (р < 0,01).
Уровень иммуноглобулинов в сыворотках крови коров двух групп до родов снижался. Однако у животных, которым вводили вакцину с пантолизатом, уровень иммунных белков был выше контроля во все дни исследования. Так, разница показателя до отела составила 21,51 % (р < 0,01); после родов -14,13 % (р < 0,001).
Анализ динамики накопления противо-сальмонеллезных антител в сыворотках крови коров представлен в таблице 1. При фоновых исследованиях в сыворотках крови коров всех групп выявлены агглютинины к сальмонеллезному антигену в титре от 1 : 28 до 1 : 40, что может являться следствием ранее проведенной вакцинации или циркуляции возбудителя у взрослых животных.
Вакцинация коров против сальмонеллеза с использованием пантолизата способствовала повышению титров антител до и после отела животных. Уровень специфических агглютининов в сыворотках крови коров опытной группы за 1-2 недели до родов был в 1,19 раза выше аналогического показателя в контрольной группе животных. Положительное влияние пантолизат оказал и на содержание специфических агглютининов в молозиве. Так, у коров опытной группы в молозиве первого доения уровень
Таблица 1.
Титры специфических антител в сыворотках крови коров, М±m
Группа
Срок исследования Опытная, (п = 10) (вакцина + пантолизат) Контрольная, (п = 10) (вакцина)
До вакцинации 1 : 28±7,51 р < 0,001 1 : 40±4,9 р < 0,001
За 1-2 недели до отела 1 : 210±9,3 р < 0,001 1 : 176±16,01 р < 0,001
На 2-3 сутки после отела 1 : 182±14,24 р < 0,001 1 : 168±6,14 р <0 ,001
антител составил 1 : 2248, а в контроле -1 : 1807±9,87; при этом разница составила 24,4 % (р < 0,05) (табл. 2).
Полученные данные свидетельствуют о выраженной ответной иммунобиологической реакции организма коров на двукратное введение вакцины против сальмонелле-за в сочетании с пантолизатом.
Положительное действие пантолизата на биохимические и иммунологические показатели крови коров-матерей оказало влияние на иммунный статус полученных от них телят. Установлено, что бактерицидная и ли-зоцимная активность сывороток крови телят опытной группы до приема молозива были на уровне 30,05±1,53 % и 3,22±0,47 %, соответственно, что достоверно выше аналогичных контрольных цифр на 37,90 % и 49,67 %. На фоне первой вакцинации против сальмо-неллеза в опытной группе телят показатели были выше фоновых значений на 15,23 % (р < 0,01) и 36,34 % (р < 0,05), соответственно; после повторного введения антигена -на 3,85 % (р < 0,01) и 9,33 % (р < 0,01).
Показатель фагоцитарной активности нейтрофилов и фагоцитарный индекс в опытной группе телят превышал фон во все дни эксперимента. На 30-й день исследования разница с контролем составила 6,98 % (43,52±1,24 %; р < 0,01) и 4,71 % (14,54±0,91 %; р < 0,001); в месячном возрасте - 8,42 %
Содержание специфических
(48,11±0,96 %; р < 0,01 ) и 21,78 % (13,36±1,02 %; р < 0,01).
В период молозивного кормления, а также в 10- и 30-дневном возрасте уровень Ти В-лимфоцитов в крови телят, полученных от опытной группы коров, превосходил аналогичные показатели контрольных животных. При двукратной вакцинации телят против сальмонеллеза с пантолизатом количество Т- и В-лимфоцитов в крови животных составило 32,68±2,09 % и 27,02±0,89 %, соответственно, что больше контрольных значений на 10,62 % (р < 0,01) и 11,01 % (р < 0,001).
Во всех исследуемых группах телят максимальное количество иммуноглобулинов отмечено в первые дни после рождения. Содержание иммуноглобулинов у телят опытной группы во все дни эксперимента было выше, чем в контроле. На 60-й день опыта увеличение на фоне контроля составило 13,58 %.
Исследования сывороток крови новорожденных телят до выпаивания молозива показали отсутствие специфических к сальмонеллам антител (табл. 3). В период молозивного кормления (3-5 дни) противо-сальмонеллезные антитела были выявлены у всех подопытных животных, причем высокий титр агглютининов достоверно установлен у телят, полученных от коров, иммунизированных в сочетании с пантолизатом.
Таблица 2.
антител в молозиве коров, М±ш
Группа Первое доение Второе доение Третье доение Через 10 дней после отела
Опытная (вакцина + пантолизат) 1 : 2248±14,71 р < 0,001 1 : 950±16,73 р < 0,001 1 : 417±12,4 р < 0,001 1 : 76±11,56 р < 0,001
Контрольная (вакцина) 1 : 1807±9,87 р < 0,001 1 : 704±2,2 р < 0,001 1 : 329±4,8 р < 0,001 1 : 52±7,00 р < 0,01
Таблица 3.
Динамика накопления агглютининов в сыворотках крови иммунизированных телят, М±m
Срок исследования Группа
Опытная, (п = 10) (вакцина + пантолизат) Контрольная, (п = 10) (вакцина)
До выпаивания молозива Отр. Отр.
Дни жизни 3-5 1 : 82±9,25 р < 0,001 1 : 69±4,24 р < 0,001
10 1 : 60±16,09 р < 0,001 1 : 44±11,73 р < 0,001
20 1 : 27±7,11 р < 0,001 1 : 18±8,2 р < 0,001
30 1 : 120±12,12 р < 0,001 1 : 74±14,61 р < 0,001
60 1 : 200±6,45 р < 0,001 1 : 125±7,27 р < 0,001
К 20-дневному возрасту телят уровень антител во всех пробах сывороток снизился. Вероятно, это связано с выведением специфических белков из организма и незрелостью иммунной системы. Введение молодняку вакцинного штамма сальмонелл способствовало увеличению титра специ-фических агглютининов у всех животных, но с разной интенсивностью. Титр специфических антител в опытной группе телят после первой вакцинации был выше контрольных значений на 62,16 %; после второй - на 60,0 %. Максимального значения изучаемый показатель достиг в опытной группе телят на 60-й день после рождения (1 : 200).
Использование пантолизата отразилось на клиническом проявлении желудочно-кишечных и респираторных болезней телят, уровне их заболеваемости и сохранности. Заболеваемость снизилась на 64,8 %; сохранность телят увеличилась на 14,28 %.
Заключение
Вакцинация коров-матерей и телят против сальмонеллеза в сочетании с пантоли-затом оказывает модулирующее действие на иммунный статус животных, способствует повышению эффективность специфической профилактики инфекции. Активация иммунного ответа в организме животных, вероятно, возникает вследствие оп-
тимизации обменных и иммунных процессов за счет широкого спектра биологически активных веществ, содержащихся в пантоли-зате. Таким образом, для повышения иммунного статуса, а также специфической устойчивости коров и телят в животноводческих хозяйствах рекомендуется с вакциной против сальмонеллеза вводить пантолизат.
Список литературы
1. Землянская, Н. И. Механизмы иммунитета и вопросы специфической профилактики / Н. И. Землянская. - Благовещенск : ДальГАУ, 2005. - 42 с.
2. Ильясова, З. З. Иммуностимуляция телят при вакцинации против сальмонеллеза / З. З. Ильясова // Ветеринарно-биологические проблемы науки и образования. - № 2. - 1999. - С. 77-79.
3. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: справочник / И. П. Кондрахин,
A. В. Архипов, В. И. Левченко, Г. А. Галанов и др. -М. : Колос, 2004. - 520 с.
4. Оценка естественной резистентности крупного рогатого скота и овец: методические рекомендации / П. Н. Смирнов, Н. Б. Гончарова, И. М. Воронова,
B. М. Чекишев и др. // Новосибирск : ВАСХНИЛ Сиб. Отделение ИЭВС и ДВ, 1989. - 20 с.
5. Смирнов, А. М. Практикум по клинической диагностике внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных / А. М. Смирнов, Г. А. Дугин, В. С. Кондратьев и др. - Л. : Колос, 1978. - 272 с.
6. Ярцев, В. Г. Биологически активные вещества отходов фармацевтической переработки пантов северного оленя / В. Г. Ярцев // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 1990. - № 2. - С. 111-116.
