CC BY
73
aminotransferase and alanine aminotransferase - accordingly on 19,1 and 24,6 % in comparison with animals of control group. At the same time, fluctuations in the values of these indicators were within the physiological norm for this type of animals.
Thus, on the basis of the results obtained from chronic experience, we can conclude that floropen in doses 315,0 mg/kg and 788,0 mg/kg has no negative effect on morphological and biochemical indicators of the blood of animals, and in the dose of 1575,0 mg/kg, these changes are minor and are reversible.
Key words: floropen, laboratory animals, chronic toxicity, hematology, biochemistry.
УДК 619:615.281:615.9:612.6:636.028
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА ЭРИТРОКСИД НА РЕПРОДУКТИВНЫЕ ФУНКЦИИ БЕЛЫХ КРЫС
Т.А. ПАНИНА, младший научный сотрудник ции, наряду с общетоксикологическими исследованиями,
И.Ю. КАШАПОВА, кандидат биологических наук, на- предусматривает изучение таких специфических видов
учныи сотрудник
Е.И. ПОНОМАРЕВА, младшиИ научный сотрудник ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии Россель-хозакадемии
E-mail: vnivipat@mail.ru
Резюме. В работе проведено изучение эмбриотоксического и тератогенного деИствия комплексного препарата эритроксид, в состав которого входят эритромицин и окситетрациклина гидрохлорид, растворенные в полиэтиленоксиде-400 и 1,2-пропиленгликоле. Препарат вводили самкам беспородных крыс в дозе 0,3 мл/кг массы тела на 5 (I опытная группа) и 15 (II опытная группа) дни беременности. Эритроксид не индуцировал гибели эмбрионов, не оказывал отрицательного влияния на развитие потомства. Все исследованные показатели соответствовали физиологическим значениям, аномалии развития внутренних органов и скелета плодов отсутствовали. Существенных различии в плодовитости крыс опытных и контрольной групп не установлено. Среднее число плодов на самку в контрольной группе составило 9,7 ± 0,4 шт, в I опытной - 9,9 ± 0,6 и во II опытной - 9,7 ± 0,3 шт. Выживаемость потомства в постнатальном онтогенезе во всех группах составляла 86,4...88,3 %. Анализ физического развития потомства (сроков отлипания ушных раковин, появления волосяного покрова, прорезывания резцов, открытие глаз и др., а также динамики массы тела и роста крысят) не выявил каких-либо отклонений от нормы. Так, отлипание ушных раковин в контроле происходило на 2,74 ± 0,06 дн., в I опытной группе - на 2,80 ± 0,04 дн., во II - на 2,83 ± 0,07дн. Появление первичного волосяного покрова отмечено соответственно на 5,91 ± 0,05, 5,86 ± 0,07 и 5,79 ± 0,08 дн.
Таким образом, внутримышечное введение препарата эритроксид в дозе 0,3 мг/кг массы тела в период имплантации (5 день беременности) и органогенеза (15 день) не влияет на выживаемость и развитие потомства беспородных крыс.
Ключевые слова: репродуктивная токсичность, эритроксид, развитие потомства.
Каждое лекарство - это химическое вещество, которое взаимодействует с организмом, причем по мере увеличения эффективности препарата, чаще всего, возрастает его опасность [1].
Сочетание различных химических структур в композиции позволяет достичь их синергетического эффекта, в частности расширить спектр антимикробной активности препарата, и получить лекарства с новыми полезными свойствами [2]. Однако любой комбинированный препарат более опасен, чем его однокомпонентная альтернатива, в связи с увеличением риска возникновения негативных реакций организма [1].
Именно по этой причине система оценки безопасности лекарственных средств, принятая в Российской Федера-
токсичности, как генотоксичность, иммунотоксичность, аллергенность, репродуктивная токсичность [3].
Цель нашего исследования изучить эмбриотоксическое и тератогенное действие препарата эритроксид.
Условия, материалы и методы. Эритроксид - новый комплексный инъекционный препарат для лечения коли-бактериоза и сальмонеллеза поросят. В его состав входят эритромицин (50 мг/см3) и окситетрациклина гидрохлорид (50 мг/см3), растворенные в полиэтиленоксиде-400 и 1,2-пропиленгликоле. Препарат обладает широким спектром антимикробной активности в отношении грамотрицатель-ных и грамположительных микроорганизмов, основных возбудителей желудочно-кишечных болезней поросят (Временное наставление по применению эритроксида для лечения бактериальных инфекций телят и поросят. Регистрационный номер 00 1053-0П).
Опыты проведены на самках белых крыс с массой тела 220,0 ± 20,0 г. Фазу полового цикла устанавливали путем исследования вагинального содержимого. Первым днем беременности считали день обнаружения спермиев после подсадки самцов к самкам. Животные разделили на три группы (контрольную и две опытные) по 12 гол. в каждой. Крысам I опытной группы на 5 день беременности (период имплантации) внутримышечно вводили эритроксид в дозе 0,3 мл/кг массы тела. Животным II опытной группы препарат инъецировали в такой же дозе на 15 день беременности (период органогенеза). Для определения повреждающего действия препарата на плод половину самок каждой группы убивали на 19...20 день беременности, затем проводили осмотр матки, плацент и плодов, определяли число желтых тел беременности, оценивали равномерность расположения плодов в рогах матки. Раннюю и позднюю резорбцию, общую эмбриональную смертность, выживаемость подсчитывали по формулам, предложенным А.М. Малашенко и И.Е. Егоровым [4].
Для выявления патологии внутренних органов эмбрионов материал фиксировали в жидкости Боуэна и 70 %-ном спирте. Аномалии скелета определяли по методу Доусона в модификации А.П. Дыбан с соавторами [5].
Критериями оценки эмбриотоксического и тератогенного действия препарата служили показатели гибели зародышей на пред- и постимплантационных стадиях развития (эмбриональный эффект), наличие аномалий развития внутренних органов и скелета (тератогенный эффект), уровень плодовитости и масса зародышей.
Постнатальное развитие потомства оценивали в течение одного месяца жизни по числу живых и мертвых новорожденных, динамике зоометрических показателей (масса тела и краниокаудальный размер), общему физическому развитию (сроки отлипания ушных раковин, появления первичного волосяного покрова, прорезывания резцов, открытия глаз, опускания семенников, открытия влагалища). Кроме того, определяли среднюю величину помета, а также соотношение самцов и самок.
Исследования выполнены в соответствии с требованиями, изложенными в методических указаниях [3, 6], а также с учетом рекомендаций международных организаций [7].
Результаты и обсуждение. При сравнении пренатального развития потомства самок опытных и контрольной групп значимых различий между ними не выявлено (см. табл.).
тых тел и мест имплантации, живых и мертвых плодов, предимплантационная гибель эмбрионов во всех трех группах находились в пределах физиологической нормы для беспородных крыс [8].
Проведенные морфологические исследования показали отсутствие аномалий развития внутренних органов и скелета плодов, рожденных от животных опытных групп.
Также не установлено существенных различий в плодовитости крыс опытных и контрольной групп. Для постнатального развития потомства животных всех групп характерна достаточно высокая выживаемость (86,4...88,3 %). Средняя величина помета крыс находилась в пределах физиологических значений, достоверных различий между группами не выявлено. Соотношение самцов и самок в группах не выходило за пределы величин, характерных для беспородных крыс (в среднем 46,4
и 54,6 % соответственно).
Анализ сроков физического развития потомства животных всех групп не выявил каких-либо отклонений от нормы [8]. Так, отлипание ушных раковин в контроле происходило на 2,74 ± 0,06 дн., в I опытной группе - на 2,80 ± 0,04 дн., во II группе - на 2,83 ± 0,07 дн. Появление первичного волосяного покрова отмечено соответственно на 5,91 ± 0,05, 5,86 ± 0,07 и 5,79 ± 0,08 день.
Вывод. Таким образом, внутримышечное введение эритроксида в дозе 0,3 мл/ кг массы тела крысам в различные периоды эмбриогенеза не оказывает эмбрио-токсического и тератогенного действия.
Таблица. Эмбриотоксическое и тератогенное действие эритроксида
Показатель группа
контроль 1 I II
Эмбриотоксическое действие
Число, шт./самку
желтых тел 11,8±0,6 11,5±0,7 11,9±0,3
мест имплантации 10,7±0,4 10,8±0,2 10,6±0,4
живых эмбрионов 9,7±0,4 9,9±0,6 9,7±0,3
мертвых эмбрионов 1,2±0,5 1,1±0,3 1,3±0,4
Общая эмбриональная смертность, % 13,6±0,4 13,7±0,3 12,9±0,7
Постимплантационная гибель, % 9,6±0,7 9,4±0,5 9,9±0,4
Доимплантационная гибель, % 4,3±0,2 4,2±0,2 4,2±0,3
Выживаемость, % 86,4±10,2 87,3±10,5 88,3±8,3
Тератогенное действие
Средняя масса тела крысенка, г 2,98±0,12 3,11±0,10 3,06±0,11
Средняя длина туловища крысенка, мм 29,1±0,61 29,8±0,43 29,0±0,74
Средняя масса плаценты, мг 318,5±42,2 315,4±36,7 317,3±37,5
Уродства, аномалии развития внутренних
органов и скелета нет нет нет
Величины таких показателей, характеризующих эмбриотоксическое действие препарата, как число жел-
Литература.
1. Викторов А.П. Патогенез побочных реакций при фармакотерапии // Острые и неотложные состояния в практике врача. -2007. - №2 (4).
2. Шабунин С.В. Антимикробное действие фармакологических композиций // Ветеринария. - 1999. - №9. - С. 47-48.
3. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ/Под ред. Р.У. Ха-бриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2005. - 832 с.
4. Малашенко А.М., Егоров И.Е. Доминантные летали у инбредных мышей под действием этиленимина // Генетика. - 1967. - №3. - С. 59-68.
5. Дыбан А.П., Баранов В.С., Акимова И.М. Основные методические подходы к тестированию тератогенной активности химических веществ //Арх. анатомии, гистол. и эмбриол. - 1970. - Т. 59. - №10. - С. 89-100.
6. Дыбан А.П. и др. Методические указания по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияние их на репродуктивную функцию. - М., 1986. - 62 с.
7. OECD (Organisation for Economic Cooperation and Development). Draft guidance document on reproductive toxicity and assessment. - Paris: OECD, 2004. - 68 p.
8. Проблема нормы в токсикологии (современные представления и методические подходы, основные параметры и константы) / И.М. Трахтенберг, Р.Е. Сова, В.О. Шефтель и др. Под ред. И.М. Трахтенберга. - М.: Медицина, 1991. - 208 с.
THE INFLUENCE OF THE PREPARATION ERITROKSID ON THE REPRODUCTIVE FUNCTION
OF WHITE RATS
T.A. Panin8,1.Yu. Kashapova, E.I. Ponomareva
Summary. The system of assessment of safety of medicinal products, adopted in the Russian Federation, along with general toxicological researches, is the study of specific types of toxicity, such as genotoxicity, immunotoxicity, allergenicity, reproductive toxicity. In this paper embryotoxic and teratogenic action of an integrated drug eritroksid is studied. The received experimental data testify that the drug is not induce death of embryos, has no negative impact on the development of the offspring and investigated parameters were consistent to physiological values for the given species. The conducted morphological researches have shown absence of development anomalies of an internal organs and a skeleton of foetuses born from rats of experimental groups. Substantial distinctions in rat fertility of experimental and control groups it is not established. The average number of foetuses on the female in the control group equaled 9.7±0.4, and in rats receiving eritroksid in the dose 0.3 ml/kg of body weight by 5 and 15 days of pregnancy - 9,9±0,6 and 9,7±0,3, respectively. Postnatal development of the offspring in the experimental and control groups are characterized by a high survival rate of86,4-88.3%. The infant rats born from females of experimental groups, did not differ from infant rats of control females. Analysis of the physical development of the offspring - the timing of the auricles detachment, the appearance of the hair, the appearance of new tools, the opening of the eyes, etc., as well as the dynamics of body weight and height rats - not reveal any deviations from the norm. So, detachment of the auricles of infant rats of control group was on 2,74±0,06 days, of experimental group - on 2,80±0,04 and 2,83±0,07 days. The appearance of the primary hair was happening on 5,91±0,05 days (control), 5,86±0,07 and 5,79±0,08 days (experimental). Thus, for intramuscular administration to rats in different periods of embryogenesis in the dose 0.3 ml/kg of body weight eritroksid does not have embryotoxic and teratogenic action. Keywords: reproductive toxicity, eritroksid, development of the offspring.
