CC BY
44
АБИСИЛИН ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА АБИСИЛИНОО 25
УДК 616.24-006.6-033.2:616-036.87:616-006-092.9 Л.А. Лацерус1, Н.М. Пинигинаї А.М. Козлов2, А.Ю. Барышников2 ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА АБИСИЛИН®
НА ПРОЦЕСС СПОНТАННОГО РЕЦИДИВИРОВАНИЯ И МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ КАРЦИНОМЫ ЛЕГКОГО ЛЬЮИС МЫШЕЙ 1ООО «Инитиум-Фарм», Москва 2РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Контактная информация
Лацерус Людмила Анатольевна, кандидат медицинских наук, генеральный директор ООО «Инитиум-Фарм» адрес: 142000, Московская область, г. Домодедово, Каширское ш., д. 7, тел.: +7(499)-722-2357 e-mail: initium-pharm@,yandex.m
Статья поступила: 24.11.2009, принята к печати 25.03.2010.
Резюме
На линейных мышах с перевиваемой карциномой легкого Льюис проведено изучение влияния препарата Абисилин®, содержащего в своем составе природный комплекс терпеноидов хвойных деревьев, на процесс спонтанного рецидивирования и метастазирования опухоли. Изучение активности Абисилина® в режиме адью-вантной терапии (на фоне хирургического удаления первичной опухоли) выявило его способность ингибировать появление и развитие спонтанных рецидивов карциномы легкого Льюис. Наиболее эффективным оказалось применение препарата в дозе 60 и 100 мг/кг в течение 5 и 10 дней после хирургического удаления первичной опухоли. Применение препарата в дозе 120 мг/кг более эффективным было в предоперационном режиме. Послеоперационное применение Абисилина® на 45 46 % ингибировало процесс метастазирования карциномы легкого Льюис. Полученные экспериментальные данные свидетельствуют о возможности клинического изучения препарата Абисилин® как агента, способного повысить эффективность хирургического лечения злокачественных новообразований.
Ключевые слова: Абисилин®, спонтанные рецидивы экспериментальной опухоли, антирецидивная и антиметастатическая активность.
L.A. Latseruz1, N.M. Pinigina1, A.M. Kozlov2, A.Yu. Baryshnikov2 THE INFLUENCE OF ABISILIN®
ON SPONTANEOUS RECURRENCE
AND METASTASIS FORMATION IN MICE WITH LEWIS CARCINOMA
'Initium-Parm, LTD, Moscow
2N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center of RAMS, Moscow Abstract
We have studied the anticancer activity of Abisilin® in combination with Cisplatin in melanoma B-16, large intestine adenocarcinoma and mammary gland adenocarcinoma (Ca-755). Treatment of large intestine adenocarcinoma with Abisilin® for 16 days in combination with Cisplatin resulted in reduction of tumor for about 42-62 %. It is worth to note that monotherapy of both drugs was not effective. The combined treatment of Ca-755 tumor reveal an synergistic effect. On the other hand, combination of Abisilin® with Cisplatin has not possessed an advantage over Cisplatin as monotherapy in melanoma. The data obtained indicate that Abisilin® could be use in combination with Cisplatin in some tumors.
Key words: Abisilin®, Cisplatin, transplantable tumors, anticancer activity.
Введение
Лекарственный препарат Абисилин® (Абисил 20%-ный раствор в масле для перорального применения) содержит в своем составе природный комплекс терпеноидов, синтезируемый хвойными деревьями [7]. Субстанция препарата (Абисил - пихты сибирской терпены) и его лекарственная форма для местного и наружного применения, включенные в Г осударствен-ный реестр лекарственных средств, проявляют антимикробные, противовоспалительные, ранозаживляющие, иммуномодулирующие и другие фармакологически значимые эффекты [1; 5].
В настоящее время препарат Абисил - 20%-ный раствор в масле, для местного и наружного употребления, применяется в клинической практике как антимикробное, противовоспалительное и ранозаживляющее средство. При использовании препарата в лечении гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей и кожи установлено, что это лекарственное средство
оказывает болеутоляющий эффект, губительно действует на патогенную грамположительную и грамотри-цательную микрофлору (стафилококки, энтерококки, псевдомонады, эшерихии, протей и др.), приводит к быстрому завершению стадии воспаления и стимуляции процессов регенерации тканей [4]. Широкий спектр фармакологической активности препарата, по-видимо-му, связан с многокомпонентным набором терпеноидов, входящих в его состав. Известно, что среди природных соединений этого класса найдены вещества с выраженными противоопухолевыми свойствами, такие например, как таксаны, каротиноиды, токоферолы и другие [6]. Представляет интерес изучение возможности применения препарата Абисилин® как потенциального агента, способного повысить эффективность хирургического лечения злокачественных опухолей.
Цель настоящей работы - изучение влияния препарата Абисилин® на процесс спонтанного реци-дивирования и метастазирования на модели экспериментальной опухоли - ЬЬС.
26 АБИСИЛИН ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА АБИСИЛИНОО
Материалы и методы
В экспериментах использовали мышей линии С57ВЬ/6 и гибридов первого поколения ВБРЬ массой тела 20-25 г. Мышей получали из отдела лабораторных животных РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН и содержали на обычном рационе питания. Все экспериментальные процедуры проводили в соответствии с международными правилами работы с животными.
Влияние препарата на процесс спонтанного рецидивирования опухолей оценивали в экспериментах на животных на фоне резекции первичного опухолевого узла, развившегося после подкожной трансплантации животным 1 х 106 клеток ЬЬС в сроки (на 7-10 день), не обеспечивающие достижения радикальности операции [3].
Препарат Абисилин® применяли перорально в виде масляного раствора в дозах 60; 100 или 120 мг/кг до, после или до и после хирургического удаления первичного опухолевого узла, в течение 5 или 10 дней. В качестве растворителя использовали подсолнечное масло.
Предварительно перед операцией из общего количества животных формировали контрольную и терапевтические группы с опухолями размером 1,0—1,5 см3. В контрольной группе и в группе животных, получавших лечение, было от 7 до 10 особей. Оценку противоопухолевой, антирецидивной и ан-тиметастатической активности препарата Абиси-лин® проводили в соответствии с методическими рекомендациями, изложенными в «Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [2; 3].
Статистическую обработку полученных результатов проводили по критерию Стьюдента, различия считали достоверными при р<0,05.
Результаты и обсуждение
Полученные результаты экспериментальных исследований, характеризующие влияние Абисили-на® на процесс спонтанного рецидивирования, а также влияние проведенной терапии на метастазирование карциномы легкого Льюис на фоне хирургического удаления первичных опухолей, представлены в табл. 1—3.
Влияние Абисилина® на частоту и динамику спонтанного рецидивирования LLC у мышей BDF1
Таблица 1
N Воздействие Дни введения Доза, мг/кг Сутки опыта
14 19 27
1 Контроль Масло + операция 3-12 0,1 мл/мышь 0/7 4/7 6/7
2 Абисилин® + операция 3-7 60 1/7 5/7 5/7
3 Абисилин® + операция 3-12 60 0/7 5/7 5/7
4 Операция + Абисилин® В-12 60 0/7 3/7 3/7
5 Операция + Абисилин® В-17 60 2/7 4/7 5/6
6 Абисилин® + операция 3-7 120 1/7 2/7 4/7
7 Абисилин® + операция 3-12 120 0/7 6/7 7/7
В Операция + Абисилин® В-12 120 2/7 4/7 6/7
9 Операция + Абисилин® В-17 120 0/7 4/7 4/7
Первичная опухоль удалена на 7-е сутки. Абисилин® вводили per os
Как видно из табл. 1, влияние Абисилина® на процесс спонтанного рецидивирования ЬЬС зависело от режима терапии.
В случае применения препарата в дозе 60 мг/кг в течение 5 дней наилучший эффект получен в режиме послеоперационной (адъювантной) терапии. К 27 суткам опыта рецидивы возникли у 3 из 7 мышей по сравнению с 6 из 7 в контрольной группе.
Применение препарата в предоперационном, а также комбинированном (пред- и послеоперационном) режимах было менее эффективным. В то же время, Абисилин® в дозе 120 мг/кг оказался наиболее эффективным в предоперационном режиме.
При умерщвлении этих животных на 35-е сутки опыта для оценки влияния проведенной терапии на процесс метастазирования карциномы Льюис получены данные, свидетельствующие о том, что Абисилин® в дозе 60 мг/кг также наиболее эффективен в режиме послеоперационной терапии (табл. 2). У животных, получавших Абисилин® в этом режиме (per os в дозе 60 мг/кг в течение 5 дней), отмечено торможение процесса метастазирования на 45 % (тср легких, пораженных Mts у леченных - 393,3 ± 160,0 мг по сравнению с 70,4 ± 237,3 мг у контрольных животных). Использование Абисилина® в дозе 120 мг/кг было менее эффективно во всех режимах.
Таблица 2
Влияние Абисилина® на спонтанное рецидивирование и метастазирование карциномы легкого Льюис на фоне хирургического удаления первичной опухоли
N Воздействие Дни введения Доза, мг/кг п мышей с рецидивами Забой животных на 35 сутки Частота метастазирования*
Рецидив Легкие
Ср. масса, г ТРО, % Ср. масса, мг ТРМ, %
1 Контроль: масло + операция 3-12 0,1 мл/мышь 6/7 4,8±2,4 - 709,4+237,3 - 7/7[1++;6+++]
2 Абисилин® + операция 3-7 60 5/7 5,7±2,1 +18 883,6+352,7 +25 7/7[1++;6+++]
3 Абисилин® + операция 3-12 60 5/7 6,0±1,8 +25 471,7+167,8 34 6/6[1++;5+++]
4 Операция® + Абисилин® 8-12 60 3/7 5,8±2,6 +20 393.3+160,0 45 7/7 [4++;3+++]
5 Операция® + Абисилин® 8-17 60 5/7 5,3±3,5 +11 560,4+338,3 21 7/7[1+;1++; 5+++]
6 Абисилин® + операция 3-7 120 4/7 3,0±2,0 38 602,7+254,7 15 6/7[1-;2++;4+++]
7 Абисилин® + операция 3-12 120 7/7 4,4±2,3 8 758,4+435,7 +7 7/7 [ 1 +;2++;4+++]
8 Операция® + Абисилин® 8-12 120 6/7 5,2±2,7 +8 596,4+343,6 16 7/7[2++;5+++]
9 Операция® + Абисилин® 8-17 120 4/7 5,6±4,2 +4 585,8+101,0 17 7/7[3++;4+++]
Первичная опухоль удалена на 7-й день; Абисилин® (или масло в контроле) вводили животным per os; *субъективная оценка интенсивности метастазирования в условных единицах (от + до +++).
Таблица 3
Влияние сочетанного применения препарата Абисилин® и хирургического удаления подкожного опухолевого узла
на метастазирование карциномы легкого Льюис у мышей ВРБ!_______________________________________________________________________________________________________
N Воздействие Дни введения препаратов Доза, мг/кг п мышей с рецидивом Легкие* Частота метастазирования
Ср. масса, мг* ТРМ, %*
1 Контроль (хирургическое лечение) - - 5/7 532,4+418,7 - 7/7[1-;1+;1++; 4+++]
2 Абисилин® + операция 2-6 100 3/7 323,5+267,2 39 7/7 [ 2+; 2+++]
3 Абисилин® + операция + Абисилин® 2-6, 11-15 100 4/7 515,0+263,5 3 5/6[1-; 1+; 3+++]
4 Операция + Абисилин® 11-15 100 3/7 287,0+43,3 46 5/6[1-;5+]
5 Операция + Абисилин® наружно (на шов) 11-15 100 3/7 687,9+273,4 +29** 6/7[1-; 1+; 5+++]
Первичную опухоль удалили на 10-е сутки; Абисилин® вводили животным per os: *результаты получены при забое животных на 40-е сутки опыта; **стимуляция процесса.
В табл. 3 представлены результаты опыта по изучению эффективности сочетанного применения Абисилина® и хирургического лечения мышей с подкожно трансплантированной ЬЬС.
В данном эксперименте первичные опухоли были удалены в более поздний срок - на 10-й день после трансплантации. Это привело к повышению уровня спонтанного рецидивирования опухолей животных в контрольной группе. На момент забоя животных на 40-е сутки после трансплантации опухолей рецидивы возникли у 5 из 7 мышей контрольной группы. Применение Абисилина® в дозе 100 мг/кг в соответствии с разными режимами (до операции; до и после операции; после операции) сопровождалось снижением частоты спонтанного рецидивирования опухолей. Более эффективным был режим послеоперационной терапии. Спонтанные рецидивы зарегистрированы только у 3 из 7 мышей, получавших лечение по данной схеме. Более того, у этих животных отмечено снижение интенсивности метастазирования на 46 %.
Заключение
Применение препарата Абисилин® в режиме адъювантной терапии (на фоне хирургического удаления первичной опухоли) выявило его способность ингибировать появление и развитие спонтанных рецидивов карциномы легкого Лъюис.
Наиболее эффективным оказалось применение препарата в дозе 60 и 100 мг/кг в течение 5-10 дней после хирургического удаления первичной опухоли. Применение Абисилина® в дозе 120 мг/кг более эффективным было в предоперационном режиме.
Послеоперационное применение Абисилина® также на 45-46 % ингибировало процесс метастазирования карциномы легкого Льюис.
В результате проведенного исследования получены данные, свидетельствующие о возможности клинического изучения препарата Абисилин® как агента, способного повысить эффективность хирургического лечения злокачественных новообразований.
Литература
1. Государственный реестр лекарственных средств. - М., 2004. - Т. 1. - С. 93.
2. Зуева Е.П., Козлов А.М., Герасимова Г.К. и др. Методические указания по доклиническому изучению средств, обладающих способностью ингибировать процесс метастазирования и повышать эффективность цитостатической терапии опухолей. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Хабриева Р.У. - М.: Медицина, 2005. - С. 674-82.
3. Козлов А.М., Перетолчина Н.М., Киселев С.М. и др. Методические рекомендации по доклиническому изучению средств, способных ингибировать рецидивирование злокачественных опухолей. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Хабриева Р.У. - М.: Медицина, 2005. - С. 669-74.
4. Лацерус Л.А., Носков А.П., Пинигина Н.М. Биологическая активность и клиническая эффективность нового фитопрепарата «Абисил-1» //Современные проблемы педиатрии и детской хирургии: Материалы Сибирско-Американской научно-практической конференции. 7-8 октября 1998 г. - Иркутск: Изд-во Иркут. Ун-та, 1998. - С. 233-8.
5. Пинигина Н.М., Лацерус Л.А., Брайн Э.В. и др. Средство «Абисил-1», обладающее противовоспалительной, антибактериальной и ранозаживляющей активностью. Патент РФ №2054945 от 27.02.1996.
6. Трещалина Е.М. Противоопухолевая активность веществ природного происхождения. - М.: Практическая медицина, 2005. - 272 с.
7. PCT/RU2008/000147. Pub.No.: W0/2009/113902, 17.09.2009. Pinigina N.M., Latserus L.A., Baryshnikov F.U. et. al. Antitumoral terpenoid pharmaceutical composition “Abisilin” exhibiring angiogenesis-inhibitig action.
Издание 2-е, переработанное и дополненное
ЭНЦИКЛОПЕДИЯ
КЛИНИЧЕСКОЙ
ОНКОЛОГИИ
Готовится к печати Издательская группа РОНЦ
