CC BY
31
УДК 619:576.8.093.1:612.315:636.22/.28 ВЛИЯНИЕ ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИХ ПРОЦЕДУР НА ВЕЛИЧИНУ
БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ СЛЮНЫ ЖВАЧНЫХ
ЖИВОТНЫХ
Покровская Е.С. - аспирант, Гильмутдинов Р.Я. - д.б.н., профессор, зав. кафедрой;
Махамат М.К. - аспирант ФГБОУ ВПО КГАВМ, тел.: (843) 273-97-05
Ключевые слова: бактерицидная активность, слюна, коровы, овцы, преаналитические процедуры.
Key words: bactericidal activity, saliva, cows, sheeps, preanalytical procedures.
Последнее десятилетие характеризуется активизацией исследований иммунологии полости рта, в основе которой лежит учение о местном иммунитете слизистой оболочки рта. Последняя служит барьерным
приспособлением для защиты организма от вредных агентов, т.е. обеспечивает естественную резистентность организма. Защитную роль играют как микрофлора, заселяющая слизистую оболочку рта, так и слюна [8, 7, 1]. Неспецифический иммунитет полости рта определяется
клеточными и секреторными элементами слюны. К последним относятся лизоцим, комплемент, катионные антимикробные пептиды и др. [4, 6, 5].
Бактерицидные свойства слюны играют важную роль в защите организма животного от инфекции. Используемые в ветеринарии фотонефелометрические методы исследования бактерицидной активности разработаны применительно к сыворотке крови, поэтому отдельные методические вопросы реализации их относительно слюны животных на сегодня остаются нерешенными. Так, на величине бактерицидной активности слюны могут сказаться ее неоднородность и вязкость, обусловленные содержанием большого количества муцина, слущенного эпителия ртовой полости, лейкоцитов, микрофлоры и продуктов ее жизнедеятельности, остатков пищи и др.
Вышеизложенное свидетельствует о необходимости исследования бактерицидной активности слюны животных разных видов, а также повышения информативности данного показателя путем минимизации влияния методических факторов на его величину. Целью наших исследований явилось установление влияния преаналитических процедур на величину бактерицидной активности слюны коров и овец.
Материалы и методы. Слюну получали от клинически здоровых нестельных коров черно-пестрой породы в возрасте 4-6 лет массой от 300 до 400 кг (10 голов), содержавшихся на молочно-товарной ферме ООО «Серп и Молот», с. Шапши Высокогорского района РТ, благополучного по
инфекционным заболеваниям, а также от овец в возрасте 2-х лет (10 голов) из Казанского зооботсада. Сбор ее проводили после фармакологической активации секреции 1 %-ным раствором пилокарпина гидрохлорида в дозах 15 и 2,5 мл коровам и овцам, соответственно. Собранную слюну сразу замораживали и после размораживания одну ее половину центрифугировали при 3 тыс. об./мин в течение 10 мин, одну часть надосадочной жидкости фильтровали, другую - нет, оставшуюся половину использовали нецентрифугированной. Кровь у животных забирали из яремной вены стерильно специальными системами во флаконы емкостью 250 мл. Сыворотку крови получали по методике Н.И. Гурьянова (1992), центифугировали при 1,5 тыс. об./мин в течение 15 мин и замораживали. После размораживания ее пропускали через мембранные фильтры фирмы «МПНроге» диаметром пор 0,22 мкм.
Бактерицидную активность слюны и сыворотки крови определяли по методике О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966), используя в качестве тест-культуры микроорганизмы, относящиеся к разным группам - Е.соН (грамотрицательные) в дозе 5 млн. бак. клеток в пробе, В. БиЫШБ и М. 1увоёе1к1;1сив (грамположительные) - 150 и 5 млн. бак. клеток в пробе соответственно. Продолжительность инкубации проб слюны при использовании Е.соН и В. БиЫШБ составила 5 ч, М. 1уБоёе1к11сив - 3 ч. В качестве основы питательной среды использовали гидролизат Хоттингера в количестве 5 мл в пробе.
Результаты исследований. Результаты исследования
бактерицидной активности слюны животных представлены в таблице.
Влияние преаналитических процедур на величину бактерицидной активности ______________________(%) слюны жвачных животных__________________________
Вид тест-микроба Способ обработки Вид животного М±т Су, %
Е.соїі Интактный Корова 46,7± 8,1 13,8
Овца 41,3± 7,6 15,8
Центрифугирование Корова 54,1± 1,6 7,7
Овца 48,2± 2,7 9,6
Фильтрование Корова 59,8± 1,7 5,0
Овца 51,6± 1,9 6,6
Б^иЬй^ Интактный Корова 53,5± 7,0 12,5
Овца 49,6±5,6 16,8
Центрифугирование Корова 59,3± 3,4 10,3
Овца 54,5± 4,0 9,9
Фильтрование Корова 66,7± 3,3 8,6
Овца 61,4± 1,8 5,2
М. lysodeikticus Интактный Корова 56,1± 5,2 12,9
Овца 50,3± 6,0 11,3
Центрифугирование Корова 60,3± 3,0 5,1
Овца 56,5± 4,2 9,1
Фильтрование Корова 69,6± 1,3 3,2
Овца 64,9± 2,2 5,8
Выявлено, что при центрифугировании и фильтровании величина бактерицидной активности слюны повышается с использованием тест-культур E.coli, B. subtilis и M. lysodeikticus у коров в среднем на 15,8 и 28; 10,8 и 24,7; 7,4 и 24; у овец - на 16,7 и 24,9; 9,9 и 23,8; 12,3 и 29 % соответственно. Отмечается высокая вариабельность величины данного показателя у интактной слюны, связанная, вероятно, с наличием в ней большого количества муцина, клеток и других частиц во взвешенном состоянии. При центрифугировании последние оседают. Кроме того, интактная слюна, скорее всего, контаминирована микробами, которые, наряду с кишечной палочкой, приводят к приросту оптической плотности в опытных пробах. Фильтрование слюны позволяет удалить посторонние микробы.
Выводы. Величина бактерицидной активности слюны коров и овец повышается при проведении дополнительных преаналитических процедур: центрифугировании и фильтровании. Отмечается значительная вариабельность величины данного показателя у интактной слюны.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Боровский, Е. В. и др. Биология полости рта / Е. В. Боровский, В. К. Леонтьев - М.: Медицина, 1991.- 304 с. 2. Гурьянов, Н.И. Усовершенствование технологий получения сывороток крови кур, бычков, эмбрионов коров и изучение их свойств при культивировании клеток и вирусов: Автореф. дисс. ... канд.биол.наук / Н.И. Гурьянов-Казань, 1992.19 с. 3. Смирнова, О.В. Определение бактерицидной активности сыворотки крови методом фотонефелометрии /О.В. Смирнова, Т. А. Кузьмина //ЖМЭИ.-1966.- № 4.- С. 8-11. 4. Jalil, R. et al. The relationship between 48-h dental plaque accumulation in young human adults and the concentrations of hypothiocyanite, ‘free‘ and ‘total‘ lysozyme, lactoferrine and secretory immunoglobulin A in saliva / R. Jalil, F. Ashley, R. Wilson // Arch. Oral Biol.-1992.- V. 37.- P.23-28. 5. Lande, R. et al. Plasmacytoid dendritic cells sense self-DNA coupled with antimicrobial peptide / R. Lande, J. Gregorio, V. Facchinetti et al. // Nature.- 2007.- V. 449.- P. 564-569. 6. Lehner, T. Immunology of oral diseases / T. Lehner,- 3rd ed. United Kingdom: Blackwell Scientific Publications, Oxford,1992. 7. Ouhara, K. et al. Susceptibilities of periodontopathogenic and cariogenic bacteria to antibacterial peptides, в-defensins and LL37, produced by human epithelial cells / К. Ouhara, Н. Komatsuzawa, S. Yamada et al. // J. Antimicrob. Chemother.- 2005.- V. 55.-P.888-896. 8. Shugars, D. Endogenous mucosal antiviral factors of the oral cavity / D. Shugars // J. Infect. Dis.- 1999.- V.179.- Suppl. 3.- P.431-435.
ВЛИЯНИЕ ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИХ ПРОЦЕДУР НА ВЕЛИЧИНУ
БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ СЛЮНЫ ЖВАЧНЫХ ЖИВОТНЫХ
Покровская Е.С., Гильмутдинов Р.Я.Махамат М.К.
Резюме
Установлено влияние преаналитических процедур на величину бактерицидной активности слюны коров и овец. При центрифугировании и фильтровании величина бактерицидности обеих биологических жидкостей увеличивается. У интактной слюны величина данного показателя сильно вариабельна.
THE IMPACT OF PREANALYTICAL PROCEDURES FOR THE BACTERICIDAL ACTIVITY OF SALIVA OF RUMINANT ANIMALS
Pokrovskaya E.S., Guilmutdinov R.Y., Mahamat M.K.
Summary
An influence of preanalytical procedures for the bactericidal activity of saliva of cows and sheep was established. For centrifugation and filtration value of the bactericidal activity both biological fluids increases. Value of this rate in intact saliva is strongly varied.
УДК 636.39:611.3
МАКРО- И МИКРОАНАТОМИЯ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ
ТОНКОГО ОТДЕЛА КИШЕЧНИКА КОЗ ОРЕНБУРГСКОЙ
ПОРОДЫ
Савилова О.В. - аспирант, Тайгузин Р.Ш. - д.б.н.,профессор ФГБОУ ВПО «Оренбургский ГАУ»
Ключевые слова: коза оренбургской породы, лимфатический узел, тонкий отдел кишечника, капсула узла, лимфатический узелок, фолликул, синус, корковое плато, тощая кишка, двенадцатиперстная кишка, лимфоузлы печени, дорзальные сычуга.
Key words: orenburg goat breeds, lymph node, small intestine, the capsule unit, lymphatic nodule, follicular, sinus, cortical plateau, jejunum, duodenum, intestine, lymph nodes of the liver, dorsal abomasum.
Мы пришли к выводу, что в отечественной и зарубежной литературе мало уделяется внимания изучению морфологии и микроскопическому строению лимфатических узлов тонкого отдела кишечника у сельскохозяйственных животных, особенно у коз, имеются лишь
