CC BY
71
УДК 619: 616. 676 + 612. 315 + 615. 383: 636. 22/. 28: 616.995.1
БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ СЛЮНЫ И СЫВОРОТКИ КРОВИ КРУПНОГО И МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ
ГЕЛЬМИНТОЗАХ
Махамат M.K. - аспирант; Гильмутдинов Р.Я. - д.б.н., профессор, зав. кафедрой;
Покровская Е.С. - аспирант ФГБОУ ВПО КГАВМ, тел. (843) 273-97-05
Ключевые слова: бактерицидная, активность, слюна, сыворотка крови, гельминтоз.
Key words: bactericidal, activity, saliva, blood serum, helminthiasis
Значительный экономический ущерб народному хозяйству, в частности животноводству, наносят гельминтозы. Широко
распространены стронгилятозы и мониезиозы овец и крупного рогатого скота. Между тем вопросы патогенеза иммунной системы, ее неспецифического звена и соответственно адекватной профилактики, разработаны на сегодня недостаточно. При изучении факторов неспецифического иммунитета обычно ограничиваются исследованием сыворотки крови (Петров Р. В.,1987), хотя и эти данные немногочисленны. Между тем удобным и информативным, на наш взгляд, объектом изучения является слюна.
Вышеизложенное свидетельствует о необходимости дальнейшего, более углубленного изучения факторов неспецифического иммунитета, в том числе слюны, у животных разных видов при гельминтозах. Целью наших исследований явилось определение бактерицидной активности слюны и сыворотки крови коров и овец при стронгилятозе и мониезиозе.
Материалы и методы. Слюну и сыворотку крови получали от здоровых и больных стронгилятозом нестельных коров черно-пестрой породы, (КРС) в возрасте 18-24 месяцев массой 300-400 кг (всего 12, из них 6 - здоровых и 6 - больных; количество гельминтов не менее 10 в поле зрения), в хозяйстве ООО «Сокуры» Атнинского района Республики Татарстан и у овец романовской породы в возрасте 24-30 месяцев массой 25 - 30 кг (всего 12, из них 6 - здоровых из Казанского зооботсада и 6 -больных сочетанным гельминтозом, а именно мониезиозом и стронгилятозом; соотношение возбудителей не менее 10:5, из вивария Казанской государственной академии ветеринарной медицины).
Слюну получали фармакологической активацией секреции подкожным введением 1 % - ного раствора пилокарпина гидрохлорида (глазные капли) крупному рогатому скоту в область лопатки в дозе 15 мл и овцам в область шеи в дозе 2,5 мл.
Сыворотку крови у вышеуказанных животных получали по методике Н.И. Гурьянова (1992). Кровь брали из яремной вены стерильно специальными системами во флаконы емкостью 250 мл, выдерживали 3 ч при 20-22 °С до получения первичной сыворотки, которую затем центрифугировали при 3 000 об./мин в течение 15 мин и стерилизовали фильтрацией через мембранные фильтры фирмы «Millipore» (США), после чего замораживали.
Свежие фекалии для выявления гельминтов брали от крупного рогатого скота и овец сразу после выделения из прямой кишки с пола (для этого использовали резиновые перчатки), в количестве 10 г помещали в целлофановые пакеты. На пробах указывалась клички животных, дата взятия материала.
При диагностике гельминтозов использовали
гельминтоовоскопический метод Котельникова Г.А., Хренова В.М. (1980). При этом в качестве флотационной жидкости применяли аммиачную селитру (нитрат аммония), 1,5 кг которой растворяли в 1 л воды, доводя плотность раствора до 1,3. Пробу фекалий массой 3 г помещали в стакан, заливали небольшим количеством флотационной жидкости и тщательно размешивали. Затем добавляли 30 мл этого раствора и процеживали через металлическое сито в сухой, чистый стакан. Взвесь отстаивали 10 мин, после чего прикосновением металлической петли снимали поверхностную пленку и переносили на предметное стекло для микроскопирования.
Дегельминтизацию осуществляли фебталом в форме гранулята индивидуально. Овцам давали 1 г гранулята на 22 кг массы животного по 2 г с кормом, крупному рогатому скоту давали 1 г гранулята на 29 кг массы животного по 10-13 г с кормом.
Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) и слюны определяли по методике Смирновой О.В., Кузьминой Т.А. (19бб), при этом в качестве тестовой культуры использовали B. subtilis в дозе 150 млн микроб. клеток и E. coli в дозе 5 млн микроб. клеток. В качестве основы мясопептонной бульона применяли гидролизат Хоттингера в количестве 5 мл в пробе, продолжительность инкубации в контрольных и опытных проб со слюной составила 5 ч, с сыворотки крови - 3 ч для B. subtilis и 5 ч - для
E. coli.
Результаты исследований и обсуждение. Данные по бактерицидной активности слюны и сыворотки крови представлены в таблице.
У коров и овец из хозяйств, имеющих идентичные условия содержания и кормления, при гельминтозах выявлены различия в бактерицидной активности слюны и сыворотки крови с использованием B. subtilis.
Бактерицидная активность (%) слюны и сыворотки крови у КРС и овец в норме, при гельминтозах и после дегельминтизации при использовании в качестве тестовой культуры Е. соїі и В.БиЫШБ
Вид живот- ного Объект исследования Состояние животного Е. соїі В. БиЬіІїІБ
М±т Су(%) Р< М±т Су(%) Р<
КРС Сыворотка крови Норма 91,6±1,1 2,66 0,004 68,1±1,3 4,34 0,001
Гельминтоз 80,9±2,7 7,34 0,001 53,0±1,1 4,67 0,001
Дегельминтизация 88,8±1,5 3,68 68,0±1,2 3,00
Слюна Норма 28,5±1,2 9,00 0,001 56,8±4,4 10,73 0,001
Гельминтоз 20,04±0,7 7,33 0,001 32,9±1,6 8,36 0,005
Дегельминтизация 37,5±5,5 32,54 42,98±1,9 7,45
Овца Сыворотка крови Норма 47,6±4,8 20,19 0,001 50,2±0,8 3,18 0,001
Гельминтоз 56,0±13,9 34,99 0,330 38,3±1,9 6,85 0,001
Дегельминтизация 73,6±7,8 15,05 49,1±1,8 5,20
Слюна Норма 28,7±1,7 11,66 0,011 58,0±2,7 6,62 0,005
Гельминтоз 21,6±1,0 6,54 0,001 42,9±3,0 11,91 0,001
Дегельминтизация 25,3±0,7 3,93 49,3±1,9 6,56
Из таблицы следует, что бактерицидная активность сыворотки крови у коров выше, чем у слюны, а у овец, наоборот, ниже. Установлено, что БАСК у КРС, в норме составлявшая 68,1±1,3 % для В. БиЫШБ и 91,6±1,1 % - Е. соїі, при гельминтозе падает до 53,0±1,1 % при использовании В. БиЫШБ и до 80,9±2,7 % - при использовании Е. соїі. Обработка антгельминтиком возвращает ее величину к исходному значению (68,0±1,2 % - с В. БиЫШБ и 88,9±1,5 % - с Е. соїі).
Также из таблицы видно, что величина этого показателя слюны у КРС при гельминтозе падает до 32,9±1,6 % для В. БиЫШБ и до 20,0±0,7% -для Е. соїі, тогда как в норме она равняется 56,9±4,4 и 28,5±1,2 % соответственно. Дегельминтизация повышает величину БАСК до 43,0±1,9% для В. БиЫШБ, но этот показатель остается все же ниже исходных значений; тогда как для Е. соїі его величина выше исходного значения - 37,5±5,5 %. Величина БАСК у овец при гельминтозах падает до 38,3±1,9 % при использовании В. БиЫШБ и возрастает до 56,0±13,9 %, при использовании Е. соїі, а после дегельминтизации повышается до 49,1±1,8 и 73,6±7,8 % соответственно.
Согласно представленным данным, бактерицидная активность слюны овец в норме при использовании В. БиЫШБ равняется 58,0±2,7 % и 47,6±4,8 % - для Е. соїі, а при гельминтозе снижается до 42,9±2,9 и 21,6±1,0 % соответственно. Дегельминтизация незначительно повышает эту величину (до 49,3±1,9 и 25,3±0,7 % соответственно), но она остается все же ниже исходных значений.
Обсуждение. Данные по изменению БАСК при различных видах гельминтозов у животных разноречивы: величина ее либо снижается (Безнос Т.В., 1987; Ященко Н.Ф., 1987; Ятусевич А.И., 1987; Довгій Ю., 1998; Пушкарев А.С., 1999), либо не изменяется (Баранова Н.Ф., 1986). По нашим данным, при гельминтозах во всех случаях наблюдается снижение величины бактерицидной активности слюны и сыворотки крови у КРС и овец. Вероятно, это связано с нарушение процесса всасывания питательных веществ в желудочно-кишечном тракте жвачных, отрицательным азотистым балансом и интоксикацией организма животных продуктами метаболизма гельминтов, а также сдвигом основных физиологических констант макроорганизма, что ведет к нарушению гомеостаза. После дегельминтизации же, отмечается повышение величины бактерицидной активности обеих биологических жидкостей и у коров и у овец. Возможно, это объясняется устранением самого гельминта, нормализацией обменных процессов, восстановлением иммунного статуса и гомеостаза у животных. Вероятно, использованный антгельминтик фебтал помимо основного терапевтического действия способствовал повышению резистентности макроорганизма, нормализовал его иммунное состояние и гомеостаз в целом и действовал на факторы неспецифической резистентности.
Выводы. Из полученных данных следует, что величина бактерицидной активности слюны и сыворотки крови при гельминтозах снижается и повышается после дегельминтизации фебталом.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Баранова, Н.Ф. Клинико-иммунологической характеристике анаплазмоза / Н.Ф. Баранова, К.К. Новинский, Ю.Г. Шубик // Сб. науч. тр. Ленингр. вет. ин-та. - 1986. - С. 12-16. 2. Безнос, Т.В. Применение левамизола при описторхозе / Т.В. Безнос, В.Я. Линник // Вет. наука - пр-ву. -1987. - Т. 25. - С. 114-117. 3. Довгий, Ю. Еффективность комплексной терапии при фасциолезе крупного рогатого скота в зоне радиоактивного загрязнения / Ю. Довгий // Вет. медицина Украины. - 1998. - С. 21. 4. Гурьянов, Н.И. Усовершенствование
технологий получения сывороток крови кур, бычков, эмбрионов коров и изучение их свойств при культивировании клеток и вирусов: Автореф. дисс. ... канд. биол. наук / Н.И. Гурьянов - Казань, 1992. - 19 с. 5. Котельников, Г.А. Методические рекомендации по диагностике наиболее распространенных гельминтозов сельскохозяйственных животных // Г.А. Котельников, В.М. Хренов. - М., 1980. - 34 с. 6. Петров, Р.В. Иммунология и иммуногенетика. М., 1976. - 326 с. 7. Пушкарев, А. С. Действие дисалара на иммунобиологическую реактивность при фасциолезе крупного рогатого скота и овец / А. С. Пушкарев // Ветеринария. - 1999. - №1 - С. 28-30. 8. Ятусевич, А.И. Влияние салиномицина на интенсивность эймериозной инвазии и естественную резистентность организма кроликов / А.И. Ятусевич, Т. В. Медведская // Ученые зап. Витеб. гос. академии вет. медицины. - 1998. - Т. 34. - С. 191-192. 9. Ященко, Н.Ф. Влияние желудочно-кишечных паразитов на показатели естественной резистентности овец / Н.Ф. Ященко // Тезисы докладов научной конференции, 1987. - С. 129. 10. Ahmad, M. Immunocytochemical localization of histatins in human salivary glands / M. Ahmad, M. Piludu,
F.Oppenheim, et al. // J. Histochem. Cytochem. - 2004. - V. 52. - P. 361-370.
БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ СЛЮНЫ И СЫВОРОТКИ КРОВИ КРУПНОГО И МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ
Махамат M.K., Гильмутдинов Р.Я., Покровская Е.С.
Резюме
В статье изложены результаты исследования бактерицидной активности слюны и сыворотки при гельминтозах. Показано снижение величины данного показателя у слюны и сыворотки крови жвачных при мониезиозе и стронгилятозе. Выявлено повышение бактерицидности обеих биологических жидкости у исследованных животных после дегельминтизации фебталом.
BACTERICIDAL ACTIVITY OF SALIVA AND BLOOD SERUM OF CATTLE AND
SMALL CATTLE IN HELMINTHIASIS
Mahamat M.K., Guilmutdinov R.Y., Pokrovskaya E.S.
Summary
The article presents the results of a study of bactericidal activity of saliva and serum in helminthiasis. It shows the decrease of this indicator value in saliva and serum in ruminants and moniezioze strongilyatoze. An increase in bactericidal activity was noticed in both of the biological fluids in animals examined after deworming by Febtal.
УДК 619: 616. 676: 612. 315 + 615.28: 636. 22/. 28: 616.995.1
БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА СЛЮНЫ КРУПНОГО И
МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ И
ДЕГЕЛЬМИНТИЗАЦИИ
Махамат M.K. - аспирант ФГБОУ ВПО КГАВМ, тел.: (843) 2739705
Ключевые слова: биохимические свойства, слюна, гельминтозы, дегельминтизация.
Key words: biochemical properties, saliva, helminthiasis, deworming.
Слюна (saliva) - прозрачная бесцветная, жидкая биологическая среда организма. По сравнению с кровью, она динамичнее отражает ежедневные изменения в организме (Bailey C., Balch C., 1961). На сегодня тесты со слюной позволяют выявлять наличие ряда заболеваний. Хотя анализ крови обладает более высокой точностью, слюна в качестве объекта для экспресс-диагностики имеет право на существование.
Вышеизложенное свидетельствует о необходимости исследований биохимических показателей слюны животных в норме и при различных патологиях. Исходя из этого, целью данной работы явилось изучение биохимических свойств слюны коров и овец при стронгилятозах и мониезиозах.
Материалы и методы. Слюну получали от здоровых и больных стронгилятозом нестельных коров (КРС) черно-пестрой породы в возрасте 18-24 месяцев, массой 300-400 кг (всего 12, из них 6 - здоровых и 6 -больных; количество гельминтов не менее 10 в поле зрения) в хозяйстве ООО «Сокуры» Атнинского района Республики Татарстан и у овец романовской породы в возрасте 24-30 месяцев массой 25-30 кг (всего 12, из них 6 - здоровых и 6 - больных сочетанным гельминтозом, а именно:
