CC BY
5
разработать ассортимент смол на основе олигомеров различного состава и молекулярного строения. Это обеспечит возможность регулировать свойства и кинетику деградации изготовленных изделий. Поэтому основной целью работы было установить влияние состава и молекулярной архитектуры олигомеров на свойства получаемых на их основе сшитых материалов. На первом этапе методом полимеризации с раскрытием цикла были синтезированы и комплексно охарактеризованы линейные и звездообразные (3- и 6-лучевые) олигоме-ры с длиной луча от 5 до 50 звеньев. Далее была проведена их модификация производным метакриловой кислоты для получения УФ-сшиваемых соединений. Отверждение олигомеров проводили в присутствии фотоинициатора при температуре 60 и 100°С. Показано, что в зависимости от молекулярной структуры исходных олигомеров, сшитые материалы характеризовались модулем упругости от 5 до 1 850 МПа, прочностью от 2 до 35 МПа и деформируемостью от 1 до 300%. При нагревании олигомеры демонстрируют достаточно низкую вязкость и высокую скорость сшивания, что делает их перспективными для 313-печати методом сте-реолитографии. Показано, что олигомеры могут быть использованы и в биопечати. С применением биопринтера Д!!еу| 3 изготовлены биодеградируемые скаффол-ды с гироидной структурой. Регулируемые в широком диапазоне механические характеристики открывают возможность гибкого «настраивания» свойств материалов и изготовления персонализированных скаффол-дов для решения различных биомедицинских задач. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта Президента РФ для молодых ученых — кандидатов наук (проект МК-5517.2021.1.3).
СОЗДАНИЕ БИОТРАНСПЛАНТАТА ДЛЯ СПОНДИЛОДЕЗА НА ОСНОВЕ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК И ПЛАЗМЫ, ОБОГАЩЕННОЙ РАСТВОРИМЫМИ ФАКТОРАМИ ТРОМБОЦИТОВ, ЧЕЛОВЕКА
А.Г. Ионова1, С.М. Космачева1, К.А. Криворот2, А.Н. Мазуренко2, А.В. Малашенко2, М.П. Потапнев1, В.И. Асаевич1
1 Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий, Минск, Республика Беларусь
2 Республиканский научно-практический центр ортопедии и травматологии, Минск, Республика Беларусь
e-mail: al_ionova96@mail.ru
Ключевые слова: спондилодез, биотрансплантат, мезенхи-мальные стромальные клетки; плазма, обогащенная растворимыми факторами тромбоцитов.
Спондилодез — хирургическое вмешательство, направленное на создание неподвижности между смежными позвонками с помощью установки между ними импланта из титана и формирования костной основы на основе компонентов биотрансплантата. В 3-15% случаев спондилодез осложняется несращением или образованием ложных суставов.
Цель исследования — разработать биотрансплантат для спондилодеза с использованием мезенхимальных стромальных клеток и оценить эффективность его применения в клинике.
Материалы и методы. Основу имплантируемого биотрансплантата составлял биодеградируемый сетчатый имплантат по объему имеющегося костного дефекта. В состав биотрансплантата входили резерцируемая ау-тологичная костная ткань позвонка и коллагеновая губка, пропитанная плазмой, обогащенной растворимыми факторами тромбоцитов (ПОРФТ аллогенной), и ауто-логичные мезенхимальные стромальные клетки (МСК, 18-30 млн клеток). МСК получали из 20 мл пунктата костного мозга пациента, наращивали in vitro в течение 21-24 дней с использованием AB (IV) сыворотки человека и преддифференцировали в остеогенном направлении в течение 3-4 дней в присутствии остеоген-ных факторов. Биотрансплантат формировался in situ при проведении операции спондилодеза 11 пациентам: 4-м — по поводу псевдоартроза, 7-ми — в связи с высокой вероятностью его формирования. Группу сравнения, сопоставимую по полу, возрасту, клиническому статусу, составили 10 пациентов, оперированных первично без применения МСК и ПОРФТ аллогенной. Эффективность лечения пациентов оценивали через 6 и 12 месяцев по клиническому статусу, рентгеновской компьютерной томографии, путем анкетирования с последующей статистической обработкой полученных данных.
Результаты. Ранних и отдаленных послеоперационных осложнений применения биотрансплантатов выявлено не было. У 80% пациентов основной и группы сравнения через 6 месяцев после операции сформировался костный блок, у остальных пациентов отмечена стадия консолидации. К 1 2 мес. наблюдения у всех пациентов был сформирован костный блок. У пациентов основной группы индекс болевого синдрома был в 5,3 раза ниже по сравнению с пациентами группы сравнения (6,4 ± 3,6 и 34,0 ± 22,7 баллов соответственно). Ни у одного пациента из группы риска формирования псевдоартроза, а также у пациентов, которым выполнялись повторные хирургические операции по поводу псевдоартроза, в отдаленном периоде ложный сустав не сформировался.
Заключение. Разработанный биотрансплантат на основе МСК и ПОРФТ аллогенной позволяет достичь костного блока у пациентов, нуждающихся в межтеловом спондилодезе позвоночника с предшествующими хирургическими вмешательствами, не приведшими к формированию сращения, и имеющими факторы риска образования ложного сустава.
ВЛИЯНИЕ ПОЛИФЕНОЛЬНЫХ ЭКСТРАКТОВ ПЛОДОВ РОДА VACCINIUM НА ОКСИДАТИВНЫЙ СТАТУС КРОВИ У КРЫС
Н.С. Кавушевская, Л.Г. Тер-Аветикян, Т.А. Синюкова, Л.В. Коваленко
Бюджетное учреждение высшего образования Ханты-Мансийского автономного округа — Югры Сургутский государственный университет, Сургут, Россия
e-mail: kavushevskaya_ns@surgu.ru
Ключевые слова: плоды черники обыкновенной, плоды клюквы обыкновенной, плоды брусники обыкновенной, плоды голубики обыкновенной, полифенолы, антирадикальный эффект.
Целью работы явилась оценка влияния полифеноль-ных экстрактов плодов рода Vaccinium (черники обыкновенной, клюквы обыкновенной, брусники обыкновенной,
голубики обыкновенной) на уровень свободных радикалов in vitro и процессы антиоксидантной защиты in vivo.
Водно-спиртовые экстракты были получены из плодов черники, клюквы, брусники, голубики, собранных в Сургутском районе Ханты-Мансийского округа Тюменской области Российской Федерации.
Изменение концентрации свободных радикалов in vitro после введения экстрактов было определено в тестах: DPPH [2,2-diphenyi-l -picryihydrazyl) и ABTS (2,2-а2тоЫз (3-ethylbenzthiаzоline)-6-sulfоnic аcid) [1]. Определено статистически значимое преимущество экстракта черники в ингибировании ABTS+ радикала.
PAT test использовали для оценки антиоксидантного потенциала плазмы крови на фоне введения экстрактов плодов рода Vaccinium. В наибольшей степени повышение антиоксидантной системы вызывают экстракты плодов голубики и черники.
Выраженность оксидативного гемолиза эритроцитов оценивали по реакции эритроцитов крыс на внесение в среду их инкубации HClO [2]. Факт снижения уровня гемолиза при воздействии HOCl на мембраны эритроцитов крыс, предварительно получивших полифенолы плодов экстрактов, коррелирует с ранее описанным защитным эффектом эпигаллокатехин галлата (EGCG) на эритроциты человека (RBC) и молекулярные модели его мембраны [3,4]. Следует указать, что и EGCG и ресвератрол, в качестве компонентов, входят в состав всех исследуемых полифенольных экстрактов северных плодов. Это обстоятельство позволяет предполагать, что именно механизм стабилизации мембран, выявленный в экспериментах с EGCG и ресвератролом, лежит в основе цитопротектор-ного действия экстрактов плодов рода Vaccinium, обнаруженного в условиях нашего эксперимента.
Предполагается, что полифенольные экстракты плодов исследуемых растений имеют потенциал влияния на оксидативный статус крови ввиду наличия антирадикальных свойств и способности повышать уровень анти-оксидантной защиты.
Литература:
1. R. Re, N. Pellegrini, A. Proteggente [et al.]. Free Radical Biology
and Medicine. - 1999. - Vol. 26. - P. 1231-1237.
2. Hawkins CL, Brown BE, Davies MJ Arch Biochem Biophys.
2001 Nov 15; 395(2). P.137-145.
3. Colina JR, Suwalsky M, Manrique-Moreno M, Petit K, Aguilar LF,
Jemiola-Rzeminska M, Strzalka K. Colloids Surf B Biointerfaces.
2019 Jan 1;173. P.742-750.
4. Ungarala, Ramakrishna et al. Antioxidants (Basel, Switzerland).
Vol. 11, 2, 294. 2022.
РОЛЬ СИГНАЛЬНОГО КАСКАДА
YAP1 В СТВОЛОВЫХ НИШАХ КЛЕТОК КОЖИ
ЧЕЛОВЕКА
Е.П. Калабушева, О.Л. Черкашина, Д.С. Аболин, О.С. Роговая, Е.А. Воротеляк
Институт биологии развития им. НК. Кольцова РАН, Москва, Россия
e-mail: Kalabusheva.e@gmail.com
Ключевые слова: эпидермальные кератиноциты, дермаль-ные фибробласты, YAP1, вертепорфин, дифференцировка.
Поддержание гомеостаза и стимуляция процессов регенерации кожи достигается путем реципрокных взаимодействий эпидермиса и дермы, реализуемых посредством активации сигнальных каскадов факторов
роста, цитокинов и молекул внеклеточного матрикса. Центральным звеном одного из таких сигнальных каскадов является белок УДР1. Активная форма УАР1 способна связываться с транскрипционными факторами и инициировать программы дифференцировки, пролиферации, фибротического или даже онкологического перерождения ткани. Мы исследовали экспрессию и активацию белка УДР1 в эпидермальных кератиноци-тах и дермальных фибробластах и сделали предположение о вкладе этого сигнального пути в эпителио-мезен-химные взаимодействия кожи человека.
Иммуногистохимическое окрашивание выявило единичные клетки с активной ядерной формой белка УДР1 в базальном слое эпидермиса и папиллярной дерме. Эпидермальные кератиноциты исследовали на моделях 20 и 30 культивирования. В монослойной культуре выявили ингибирование сигнального пути УДР1 при формировании конфлуэнтного монослоя. На модели живого эквивалента кожи показали взаимосвязь между гиперактивацией УДР1 и гипертрофией базального слоя эпидермиса. Аналогичный паттерн наблюдали в процессе регенерации ксенотрансплантированного лоскута кожи человека.
Тотальная фракция фибробластов дермы кожи человека в монослойной культуре была гомогенна по экспрессии УДР1, однако при помещении в трехмерные условия — кожные органоиды- разделялась на две субпопуляции. РОЭРПа-положительные клетки формировали центральное ядро органоида и не экспрессиро-вали УДР1, в то же время СЮ26 и РДР-положительные клетки являлись центром активного сигналинга УДР1, стимулируя его экспрессию даже в прилегающих РОЭ^а-клетках. В другой трехмерной модели культивирования при помещении в коллагеновый гель мы не наблюдали разделения фибробластов на субпопуляции. Ингибирование сигнального пути УДР1 посредством добавления вертепрофина также не приводило к клеточной сегрегации, однако препятствовало экспрессии сократительных белков и контракции коллагенового геля.
Наши результаты позволяют предположить существование специализированной субпопуляции фибробластов дермы, способной в некоторых условиях активировать сигнальный путь УДР1 в окружающих клетках. Подобная локальная активация может вносить вклад в поддержание пула стволовых клеток эпидермиса, а также стимулировать запуск посттравматической регенерации. Работа поддержана грантом РНФ № 21-74-30015.
ИЗУЧЕНИЕ МАРКЕРА И МЕДИАТОРА КЛЕТОЧНОЙ СЕНЕСЦЕНЦИИ В ПЕРВИЧНОЙ КУЛЬТУРЕ ЭНДОТЕЛИОЦИТОВ В ОТВЕТ НА ВОЗДЕЙСТВИЕ СОСУДИСТЫХ ИМПЛАНТАТОВ
Р.Е. Калинин, И.А. Сучков, Н.Д. Мжаванадзе, Н.В. Короткова, А.А. Крылов, А.В. Щулькин, Ю.В. Абаленихина, Е.А. Стрельникова, И.Ю. Суров, А.Д. Боженова, А.С. Захаров, Н.Д. Нозадзе
ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России, Рязань, Москва
e-mail: nina_mzhavanadze@mail.ru
Ключевые слова: клеточная сенесценция, PAI-1, культура HUVEC, ПТФЭ, ПЭТ, нитинол, сосудистые имплантаты.
Клеточная сенесценция (КС) играет важную роль в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний, таких
