CC BY
35
© ХОБРАКОВА В.Б., НИКОЛАЕВ С.М., ПАВЛОВ И.А., РАДНАЕВА Л.Д., АВЕРИНА Е.С., ДОЛГУШИН Г.В., ТЫХЕЕВА Н.А., БАДМАЕВ Б.Б., СУХОВ Б.Г., МАЛХАНОВА Г.Н.
ВЛИЯНИЕ ПЕРХЛОЗОНА И ЕГО ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ФОРМЫ НА СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ОРГАНИЗМА
В.Б. Хобракова. С.М. Николаев. И.А. Павлов. Л.Д. Раднаева. Е.С. Аверина.
Г.В. Долгушин. Н.А. Тыхеева. Б.Б. Бадмаев. Б.Г. Сухов. Г.Н. Малханова (Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, директор — д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов, Отдел биологически активных веществ, зав. — д.м.н., проф. С.М. Николаев; Байкальский институт природопользования СО РАН, директор — чл.-корр. РАН, проф. А.К. Тулохонов, лаборатория химии природных соединений, зав. — д.х.н., проф. Л.Д. Раднаева; Бурятский государственный университет, ректор — чл.-корр. РАО, проф. С.В. Калмыков; кафедра фармакологии и традиционной медицины, зав. — к.м.н., доцент С.А.Чукаев; Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН, директор — академик РАН Б.А. Трофимов, лаборатория природных синтонов и лигандов, зав. — к.х.н. Б.Г. Сухов)
Резюме. В опытах на мышах линий СВА и (СВАхС57В1/6) установлено иммунодепрессивное действие перхлозона в дозе 20 мг/кг, что выражается в снижении массы, клеточности тимуса и селезенки, показателей клеточного, гуморального и макрофагального звеньев иммунного ответа. Использование липосомальной формы перхлозона не изменяет массу, клеточность иммунных органов, показатели иммунитета у интактных животных.
Ключевые слова: перхлозон, липосомальная форма перхлозона, иммунитет, туберкулез.
Современная эпидемиологическая ситуация по туберкулезу характеризуется увеличением числа распространенных и остропрогрессирующих форм заболевания, более частым развитием лекарственной устойчивости к микобактериям туберкулеза, и, как следствие, снижением эффективности его лечения [5, 7].
Известно, что течение туберкулезного процесса сопровождается угнетением иммунной системы, у большинства больных туберкулезом легких отмечается развитие иммунодефицитного состояния в виде дисбаланса звеньев иммунной системы: снижения показателей клеточного иммунитета, макрофагального звена, гиперпродукции антими-кобактериальных антител [3,4,13]. Массивная полихимиотерапия усугубляет иммунодефицитное состояние больных туберкулезом [1,2,9].
Таким образом, проблема фармакологической коррекции и профилактики побочных эффектов базисной химиотерапии является актуальной, а включение препаратов с иммуномодулирующей активностью в схему лечения имеет важное значение. В настоящее время предложено множество иммуномодуляторов (тималин, Т-активин, диуцифон, ронколейкин, полиоксидоний и др.), применение которых ограничивается их высокой стоимостью и наличием побочных эффектов.
В Иркутском институте химии им. А.Е. Фаворского СО РАН совместно со специалистами-медиками Санкт-Петербургского НИИ фтизио-пульмонологии Минздравсоцразвития РФ разработан новый потенциально перспективный препарат перхлозон, отличающийся высокой эффективностью при туберкулезе (Патент РФ № 1621449).
Особый интерес в практике лечения туберкулеза легких представляет опыт тибетской медицины, широко использующий лекарственные средства растительного и животного происхождения. В народной медицине Сибири при лечении и профилактике туберкулеза, хронических обструктивных заболеваний органов дыхания известно использование жира сурка сибирского Магтойа вЛшса. Ресурсы сурков в России позволяют использовать их жир для изготовления лекарственных средств.
Однако до настоящего времени не существует официально зарегистрированных Фармакопеей России лекарственных препаратов на основе жира сурка, что не позволяет использовать его с лечебно-профилактической целью.
Таким образом, учитывая опыт традиционной медицины народов Сибири, с целью повышения фармакотерапевтической эффективности и предупреждения возможных побочных реакций нами разработаны липосомальные препараты на основе жира сурка сибирского с включением перхлозона.
Целью настоящего исследования явилось определение влияния перхлозона и его липосо-мальной формы на состояние иммунной системы организма.
Материалы и методы
Опыты проведены на мышах-самцах линий СВА и (СВАхС57В1/6) массой 18-20 г.
Перхлозон и его липосомальную форму вводили внутрибрюшинно в экспериментально-терапевтической дозе 20 мг/кг 1 раз в сутки в течение 14 дней. Животным интактной группы вводили эквиобъём-ное количество физиологического раствора.
Действие испытуемых средств на состояние клеточного звена иммунного ответа оценивали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) согласно стандартной методике локальной ГЗТ [8], гуморального звена — по количеству антителообразующих клеток, определяемых методом локального гемолиза по A.J.Cunningham [14] и макрофагального звена — в реакции фагоцитоза перитонеальных макрофагов мышей в отношении Staphyllococcus aureus in vitro по методике И.С. Фрейдлин [12]. Массу и клеточность иммунных органов — тимуса и селезенки определяли общепринятым методом [10].
Полученные результаты после проверки распределения на нормальность по методу Колмогорова-Смирнова обработаны статистическим методом с использованием критерия Стьюдента [6]. Критический уровень значимости при проверке гипотез р<0,05.
Результаты и обсуждение
При исследовании влияния перхлозона на массу и клеточность иммунных органов установлено, что введение исследуемого средства в дозе 20 мг/кг вызывает снижение относительных масс тимуса и селезенки на 20% и 16%, соответственно, по сравнению с данными в интактной группе. Наряду со снижением массы иммунных органов, под влиянием перхлозона наблюдалось уменьшение числа ядросодержащих клеток (ЯСК) тимуса и селезенки, соответственно, на 40% и 52% по сравнению с данными в интактной группе (табл. 1).
При введении мышам перхлозона в липосо-мальной форме наблюдалось достоверное увеличение относительной массы тимуса в 1,75 раза по сравнению с данными в группе животных, получавших перхлозон (табл.1). Кроме того, под влиянием липосомальной формы перхлозона происходило увеличение клеточности тимуса и селезенки в 1,5 и 1,7 раза, соответственно, по отношению к результатам опыта с введением чистого перхлозона.
Введение перхлозона приводило к угнетению показателей гуморального звена иммунного ответа и выражалось в снижении абсолютного и относительного количества АОК на 43% и 56%, соответственно, по сравнению с таковыми в интактной группе (табл. 2).
Использование исследуемого средства в липо-сомальной форме приводило к увеличению как абсолютного, так и относительного числа АОК в 1,5 и 2 раза, соответственно, по сравнению с данными в группе животных, получавших перхлозон.
Таблииа 2
Влияние перхлозона и его липосомальной формы на антителообразование
Группы животных Доза, мг/кг Количество АОК
на селезенку на 106 спленоцитов
Интактная - 97559±7256 752±56
Перхлозон 20 55560±3566*' 312±31*1
Липосомальная форма перхлозона 20 82843±5342*2 652±43*2
Таблица 3
Влияние перхлозона и его липосомальной формы на выраженность реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ)
Группы животных Доза, мг/кг Индекс реакции ГЗТ,%
Интактная - 21,49±1,64
Перхлозон 20 12,04±1,21*1
Липосомальная форма перхлозона 20 23,09±2,99*2
Введение перхлозона приводило к угнетению клеточноопосредованной иммунной реакции — ГЗТ, что выражалось в снижении индекса реакции на 44% по сравнению с таковым в ин-тактной группе, а при использовании перхлозона в липосомальной форме наблюдали повышение индекса реакции ГЗГ в 1,9 раза по сравнению с данными в группе животных, получавших перх-лозон (табл. 3).
Введение перхлозона приводило к угнетению функциональной активности макрофагов и выражалось в снижении активности (процент фагоцитирующих клеток из общего числа подсчитанных клеток) и интенсивности (среднее количество St. aureus, поглощенное одной клеткой) фагоцитоза на 45% и 41%, соответственно, по сравнению с таковыми в интактной группе. Введение липосо-мальной формы испытуемого средства приводило к увеличению активности и интенсивности фагоцитоза в 2 раза по отношению к данным опыта с введением чистого перхлозона (табл. 4).
Таблииа 4
Влияние перхлозона и его липосомальной формы на функциональную активность перитонеальных макрофагов
Группы животных Доза, мг/кг Показатели фагоцитоза
активность интенсивность
Интактная - 75,6±5,23 6,4±0,51
Перхлозон 20 41,5±3,10*1 3,8±0,21*1
Липосомальная форма перхлозона 20 81,3±4,06*2 7,2±0,44*2
Таким образом, на основании проведенных исследований следует, что внутрибрюшинное введение перхлозона в дозе 20 мг/кг вызывает угнетение иммунной системы, что выражается в снижении массы, клеточности тимуса и селезенки, показателей клеточного, гуморального и макрофагального звеньев иммунного ответа. Использование липосомальной формы испытуемого средства поддерживает состоятельность иммунитета у интактных животных. Иммуномодулирующее действие липосомальной формы перхлозона сопоставимо с таковым липосом, полученных из жира байкальской нерпы, которые в тех же реакциях стимулируют функциональную активность иммунной системы [11].
Полученные данные аргументируют целесообразность применения противотуберкулезного средства — перхлозона в липосомальной форме, повышающего эффективность лечения при включении его в схему комплексной терапии и профилактики туберкулеза.
Таблииа 1
Влияние перхлозона и его липосомальной формы на массу и клеточность иммунных органов мышей
Группы животных Доза, мг/кг Тимус Селезенка
Относительная масса, % ЯСК, х106 /орган Относительная масса, % ЯСК, х106 /орган
Интактная - 0,10±0,01 32,1 ±1,4 0,44±0,023 38,1±2,8
Перхлозон 20 0,08±0,01*1 19,2±1,0*1 0,37±0,01*1 18,3±1,2*1
Липосомальная форма перхлозона 20 0,14±0,01 *2 29,0±1,1*2 0,39±0,02 31,0±2,5*2
Примечание: здесь и далее *1 — означает, что разница существенна (р<0,05) по сравнению с данными в интактной группе, *2 — по сравнению с данными в группе животных, получавших «Перхлозон».
THE INFLUENCE OF THE PERCHLOZONE AND ITS LIPOSOME FORM ON THE STATE OF IMMUNE SYSTEM OF ORGANISM
V.B.Khobrakova. S.M. Nikolaev. I.A. Pavlov. L.D. Radnayeva. E.S. Averina.
G.V. Dolgushin. N.A. Tykheyeva. B.B. Badmaev. B.G. Sukhov. G.N. Malkhanova (Institute of General and Experimental Biology of SD RAS, Baikal institute of use of nature SD RAS, Buryat State University, Institute of chemistry named after A.E. Favorsky SD RAS)
^e immune depressive effect of the perchlozone in a dose of 20 mg/kg has been established in experiments on the СВА and F1 (СВАхС57/В1/6) mice. ^e perkhlozone decreased mass and amount of cells of thymus and spleen as well as indices of the cellular, humoral and macrophagal chains of the immune response. ^e use of liposome form of perkhlozone changes no mass and cell amount of immune organs as well as indices of the immunity in intact animals.
ЛИТЕРАТУРА
1. Александрова А.Е., Виноградова Т.И. Иммунотропная активность противомикробных средств, используемых во фтизиатрии // Проблемы туберкулеза. — 1996. — № 2. — С. 43-45.
2. Гудз И.М. Иммунологическое обоснование эффективности сочетанного применения антибиотиков и иммуномодуляторов в клинической практике: Автореф. дисс... к.м.н. — Киев, 1998. — 21 с.
3. Инсанов А.Б. Иммунохимиотерапия хронического туберкулеза легких. — Баку, 1990. — 160 с.
4. Кноринг Б.Е. Особенности иммунного статуса больных туберкулезом и его роль в диагностике, прогнозировании течения и иммунокоррекции // Автореф. дисс.д.м.н. — СПб., 1996. — 42 с.
5. Кресс В.М. Туберкулез в Российской Федерации — проблема государственной значимости // Вестник РАМН. — 2000. — № 12. — С. 19-20.
6. Лакин Г.Ф. Биометрия. — М., 1990. — 352 с.
7. Медведев С.Ю., Перельман М.И. Туберкулез в России // Бюллетень «Вакцинация. Новости вакцино-профилактики». — 2002. — № 1. — С. 9-13.
8. Петров Р.В., Хаитов Р.М., Чередеев А.Н. и др. Иммунофармакологические подходы к оценке иммуномодуляторов // Иммуномодуляторы. — М., 1987. — С. 9-10.
9. Пономарева Ю.Ю. Влияние антибактериальной терапии на эксперессию антигенов I и II классов HLA— системы у больных туберкулезом легких // Туберкулез и экология. — 1996. — № 2. — С. 21-24.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. — М., 2000. — 398 с.
11. Тыхеева Н.А. Иммуномодулирующее действие липосомальных средств, полученных на основе жира байкальской нерпы: Автореф. дисс... к.м.н. — Улан-Удэ, 1999. — 22 с.
12. Фрейдлин И.С. Использование культуры мышиных перитонеальных макрофагов в качестве модели для изучения клеток мононуклеарной фагоцитарной системы организма и их изменений под влиянием биологически активных веществ: Методические рекомендации. — Л., 1976. — С. 8-10.
13. Хоменко И.С. Течение деструктивного туберкулеза у больных с иммунодефицитом: Автореф. дисс. д.м.н. — М., 1993. — 39 с.
14. Cunningham A.J. A method of increased sensitivity for detecting single antibodyforming cells // Nature. — 1965. — Vol. 207. — № 5001. — P. 1106-1107.
© НАРДИНА И.В., НАРДИН Д.Б., ВИТКОВСКИЙ Ю.А. — 2007
ВЛИЯНИЕ КВЧ-ТЕРАПИИ НА ЛИМФОЦИТАРНО-ТРОМБОЦИТАРНУЮ АДГЕЗИЮ И СОДЕРЖАНИЕ ИЛ-1 В, ФНОА И ИЛ-4 У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКОЙ ВЕНОЗНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ
И.В. Нардина, Д.Б. Нардин, Ю.А. Витковский (Читинская государственная медицинская академия, (ректор — д.м.н. проф. А.В. Говорин) кафедра нормальной физиологии зав. — д.м.н., проф. Ю.А. Витковский;
Центр восстановительного лечения «Феникс», гл. врач — Г.В. Муравьева,
Читинская Областная клиническая больница гл. врач — к.м.н. И.Д. Лиханов
Резюме. Целью явилось изучение функции лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии и содержания некоторых цитокинов у больных хронической венозной недостаточностью. Исследование проведено на 66 больных, которые разделены на 2 группы. Основная группа получала 10 сеансов КВЧ-терапии, контрольная — только консервативное лечение. Установлено, что у больных хронической венозной недостаточностью снижается способность лимфоцитов к образованию контактов с кровяными пластинками, повышается концентрация ИЛ-1^, ФНОа, ИЛ-4. Сеансы КВЧ-терапии у больных хронической венозной недостаточностью способствуют усилению лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии, уменьшению продукции провоспалительных цитокинов ИЛ-1^, ФНОа и нарастанию содержания противовоспалительного ИЛ-4.
Ключевые слова: лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия, цитокины, КВЧ терапия, хроническая венозная недостаточность.
К настоящему времени показано, КВЧ-терапия ладает выраженным корригирующим действием
(крайне высокочастотная терапия, микрорезо- на реологические свойства крови и гемостаз у
нансная терапия, миллиметровая терапия), об- больных с разными нозологическими формами,
