CC BY
36
materialow (Engineering of biomaterials). Czasopismo Polskiego Stowarzyszenia Biomaterialow. 2007. Rok. X, № 63-64. P. 11-12.
36. Rotta L, Matechova E, Cerny M, Pelak Z. Determination of the fertile period during the menstrual cycle in women by monitoring changes in crystallization of saliva with the PC.2000 IMPCON minimicroscope // Сesk. Gynekol. 1992. Vol. 57, № 7. Р. 340-522.
37. Shabalin V.N., Shatochina S.N., Yakovlev S.A. Character of blood crystallization as an integral index of organism homeostasis // Phys. Chem. Biol. Med. 1995. Vol. 2, № 1. Р. 6-9.
АНДЮШКИН АДОЛЬФ ИЗОСИМОВИЧ - клинический ординатор, ассистент кафедры терапевтической стоматологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары.
ANDIUSHKIN ADOLPH IZOSIMOVICH - clinical ordinator, assistant of Therapeutic Stomatology Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
САПОЖНИКОВ СЕРГЕЙ ПАВЛОВИЧ - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой медицинской биологии с курсом микробиологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (adaptagon@mail.ru).
SAPOZHNIKOV SERGEY PAVLOVICH - doctor of medical sciences, professor, head of Medical Biology Chair with Microbiology course, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
КАРПУНИНА АНТОНИНА ВЯЧЕСЛАВОВНА - кандидат медицинских наук, доцент, заведующая кафедрой терапевтической стоматологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары.
KARPUNINA ANTONINA VIACHESLAVOVNA - candidate of medical sciences, assistant professor, head of Therapeutic Stomatology Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
УДК 577.175.824:616.329-089+577.217:616.329-089 ББК Р457.345.6
О.В. АРСЮТОВ, В.П. АРСЮТОВ
ВЛИЯНИЕ ИЗМЕНЕНИЙ СОДЕРЖАНИЯ В ТКАНЯХ ГИСТАМИНА И ДНК НА ЗАЖИВЛЕНИЕ ПИЩЕВОДНО-КИШЕЧНОГО СОУСТЬЯ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Ключевые слова: гистамин, ДНК, пищеводно-кишечное соустье.
В опытах на 30 беспородных собаках изучены изменения уровня гистамина, ДНК в тканях пищеводно-кишечного анастомоза на 1-,3-,5-,7-,9-,14-е сутки после гастрэк-томии и влияние содержания гистамина и ДНК на заживление соустья. Установлено, что заживление пищеводно-кишечного анастомоза происходит на фоне повышения содержания в тканях гистамина и значительного снижения содержания ДНК в ядрах клеток зоны соустья и на фоне выраженного воспалительно-некротического процесса, значительного угнетения репаративно-регенеративных процессов.
O.V. ARSYUTOV, V.P. ARSYUTOV THE INFLUENCE OF CHANGES IN HISTAMINE AND DNA CONTENT IN TISSUES ON ESOPHAGEAL-INTESTINAL ANASTOMOSIS HEALING IN THE EXPERIMENT
Key words: histamine, DNA, esophageal-intestinal anastomosis healing.
In experiments in 30 nonpedigree dogs the dynamics of changes in histamine and DNA content in tissues of esophageal-intestinal anastomosis and their influence on the healing character of anastomosis on the 1st, 3d, 5h, 7th 9h and 14th after gastrectomy were studied.
It is established that esophageal-intestinal anastomosis healing takes place on the background of significant histamine increase in tissues and DNA content decrease in the nuclei of anastomosis cells. On the background of a pronounced inflammatory process, the decrease of regeneration and reparative processes and reduction of anastomosis’ biological and physical hermeticity, the conditions for the development of sutures on esophageal-intestinal anastomosis healing failure are created.
Единственным средством реальной помощи больным раком желудка является хирургическое вмешательство - широкое иссечение пораженных отделов желудка или всего желудка единым блоком с зонами регионального лимфатического метастазирования при строгом соблюдении принципов абластики. Среди хирургических вмешательств по поводу рака наиболее тяжелой и травматичной является тотальная гастрэктомия, которая отмечается высокой летальностью и
большим числом осложнений. Одной из основных причин неблагоприятных послеоперационных исходов и осложнений продолжает оставаться несостоятельность швов пищеводных соустий [4-6].Поэтому углубленное изучение причин развития несостоятельности швов соустий после гастрэктомии является важнейшей задачей современной экспериментальной и клинической хирургии.
Цель исследования - изучение динамики изменений содержания в тканях гистамина и ДНК и их влияния на характер заживления пищеводно-кишечного анастомоза на различных сроках послеоперационного периода.
Материалы и методы исследования. Экспериментальные исследования выполнены на 30 беспородных собаках массой 10-15 кг. Под внутривенным тио-пенталовым наркозом подопытным животным производили тотальную гастрэк-томию с формированием пищеводно-кишечного анастомоза с межкишечным соустьем по Брауну. Для оценки состояния пищеводного анастомоза подопытные животные выводились из эксперимента на 1-, 3-, 5-, 7-, 9-, 14-е сутки после операции. Содержание ДНК в ядрах клеток зоны анастомоза определяли по методу В.А. Колесникова (1979). За норму принимали интенсивность люминесценции ДНК в ядрах клеток слизистой пищевода до наложения соустья. Уровень гистамина в тканях пищеводно-кишечного соустья определяли люминесцентногистохимическим методом Кросса, Эвана, Роста. За норму принимали интенсивность люминесценции гистамина в стенке пищевода до наложения анастомоза [1, 2]. Статистическая обработка полученных цифровых данных проведена с помощью пакета программ Microsoft Office (Excel) на компьютере. В работе приводятся следующие показатели: М - средняя арифметическая величина; m - средняя ошибка средней арифметической величины. Статистическую достоверность определяли критерием Стьюдента (t). Различия считали достоверными при p < 0,05 [3].
Для определения морфологии заживления препараты пищеводно-кишечного анастомоза после фиксации в 10%-ном нейтральном формалине окрашивались по методу Ван-Гизона и гематоксилин-эозином.
Результаты исследования и их обсуждение. При морфологическом исследовании зоны пищеводно-кишечного соустья наибольшие воспалительнонекротические изменения были обнаружены в первые 5 суток после операции. Уже через 1 сутки после гастрэктомии в зоне соустья выявлялись значительный дефект слизистой, некроз подслизистого и части мышечного слоев. Зона соустья была инфильтрирована лейкоцитами.
Спустя 3 суток дефект слизистой увеличен в размерах, дно его заполнено толстым слоем гнойно-некротических масс. Дном дефекта в большинстве случаев являлся мышечный слой, в котором определялось множество тромбиро-ванных сосудов. В прилежащих тканях имели место выраженный отек и инфильтрация нейтрофилами. Эти изменения наблюдались и в мышечном слое пищеводно-кишечного анастомоза. Спустя 5 суток после гастрэктомии в зоне соустья дефект в слизистой оболочке сохранялся, отмечалось выраженное гнойно-некротическое воспаление, охватывающее циркулярно почти всю зону анастомоза. На фоне этих изменений можно было наблюдать появление незначительного количества вновь образованных сосудов.
Спустя 7 суток после гастрэктомии у подопытных животных в зоне пищеводно-кишечного анастомоза сохранялось выраженное гнойно-некротическое воспаление, распространяющееся до мышечного слоя. Продолжали сохраняться отек и инфильтрация тканей соустья нейтрофилами. Дефект слизистой на этих сроках наблюдения несколько уменьшался в размерах. Отмечались рост грануляционной ткани и пролиферация кишечного эпителия. Дном дефекта служил мышечный слой с большим количеством вновь образованных сосудов.
Спустя 9 суток дефект слизистой в зоне анастомоза сохранялся и был заполнен тонким слоем гнойно-некротических масс. По краям дефекта слизистой обнаруживались пролиферация многослойного плоского и кишечного эпителия, множество вновь образованных мелких сосудов различного диаметра. Отек и инфильтрация нейтрофилами в зоне пищеводно-кишечного анастомоза сохранялись и достигали мышечного слоя.
Спустя 14 дней после гастрэктомии у подопытных собак в зоне пищеводнокишечного соустья определялся дефект слизистой в виде узкой полоски шириной 2-3 мм и менее, заполненный гнойно-некротическими массами, под которыми удавалось обнаружить разрастание грануляционной ткани. На этих сроках исследования сохранялась слабо выраженная инфильтрация тканей зоны соустья нейтрофилами. Наряду с этим отмечалась выраженная пролиферация пищеводного и кишечного эпителия (рис. 1).
Используя метод окраски препаратов по Ван-Гизону, мы выявили, что начиная с 5-х суток после операции отмечается пролиферация коллагеновых волокон, сопровождающаяся утолщением подслизистого слоя. Спустя 14 суток в зоне соустья имеет место диффузное разрастание коллагеновых волокон, в большинстве случаев грубых и утолщенных. При этом коллагеновые волокна в виде прослоек и муфт удается обнаружить в слизистом и подслизистом слое, а также вокруг мышечных волокон и сосудов (рис. 2).
Рис. 1. Пищеводно-кишечное соустье спустя 14 дней после гастрэктомии. Окраска гематоксилин-эозином. Объектив 10*. Гомаль 1,7
Рис. 2. Пищеводно-кишечное соустье спустя 14 дней после гастрэктомии. Окраска по Ван-Гизону. Объектив 10*. Гомаль 1,7
Динамика изменений уровня гистамина и ДНК, полученная при люминесцентном анализе тканей зоны пищеводно-кишечного анастомоза, приведена в табл. 1 и 2.
Содержание гистамина в тканях пищеводно-кишечного анастомоза на различных сроках после гастрэктомии, условные единицы (УЕ)
Таблица 1
Показа- тель Исход Сроки исследований, сут.
1-е 3-и 5-е 7-е 9-е 14-е
Гистамин (М±т) 72,9±0,70 130,8±1,37 174,7±0,74 189,3±1,62 119,9±0,99 104,4±1,64 91,5±1,44
Примечание. р < 0,001 (вероятность различия рассчитана по отношению к исходному значению).
Таблица 2
Содержание ДНК в ядрах клеток пищеводно-кишечного анастомоза на различных сроках после операции, УЕ
Показатель Исход Сроки исследований, сут.
1-е 3-и 5-е 7-е 9-е 14-е
ДНК (М±т) 78,6±1,21 83,4±1,50* 90,9±1,07** 86,4±0,86** 88,6±1,30** 70,7±0,78** 72,3±1,06**
Примечание. Вероятность различия рассчитана по отношению к исходному значению: * - р < 0,02, ** р < 0,001.
К концу 1-х суток после гастрэктомии (табл. 1) отмечается увеличение содержания гистамина в зоне пищеводно-кишечного анастомоза по сравнению с исходным значением почти в 2 раза, которое составляет в среднем 130,8+1,37 УЕ (р < 0,001). Максимальное повышение уровня гистамина в зоне соустья отмечается на 3-5-е сутки после операции. Среднее значение данного биоамина на 5-е сутки наблюдения в тканях анастомоза достигало 189,3±1,62 УЕ (р < 0,001). Начиная с 7-х суток после гастрэктомии содержание гистамина в тканях соустья постепенно уменьшается, хотя и на 14-е сутки послеоперационного периода продолжает достоверно превышать исходное значение, составляя 91,5±1,44 УЕ (р < 0,001).
У подопытных животных содержание ДНК (табл. 2) в ядрах клеток тканей пищеводно-кишечного анастомоза спустя 1 сутки после операции незначительно увеличивается, составляя 83,4±1,50 УЕ (р < 0,02).
Спустя 5 суток этот показатель равен 86,4±0,86 УЕ (р < 0,001), и к 9-м суткам после гастрэктомии отмечается резкое снижение содержания ДНК в ядрах клеток пищеводно-кишечного соустья, оно составлет 70,7±0,78 УЕ (р < 0,001). Полученные данные исследования свидетельствуют, что снижение ДНК в ядрах клеток тормозит, по-видимому, развитие репаративно-регенераторных процессов в зоне анастомоза.
Анализ полученных результатов исследования свидетельствует о том, что наиболее выраженные воспалительно-некротические изменения в зоне пищеводно-кишечного анастомоза наблюдаются на 3-5-е сутки после гастрэктомии. На этих же сроках отмечается значительное повышение содержания гистамина в тканях соустья. При этом удается выявить определенную зависимость между концентрацией гистамина в тканях пищеводно-кишечного анастомоза, степенью развития местного гнойно-некротического воспалительного процесса, а также параметрами физической и биологической герметичности пищеводно-кишечного анастомоза. После тотальной гастрэктомии в течение 7-9 дней в тканях пищеводно-кишечного соустья снижается содержание ДНК в ядрах клеток, что является одним из важных факторов торможения репаративных и регенераторных процессов.
Выводы. 1. На фоне выраженного воспалительного процесса, уменьшения репаративно-регенераторных процессов и снижения биологической и физической герметичности соустий создаются условия для развития несостоятельности швов пищеводно-кишечных анастомозов.
2. Заживление пищеводно-кишечного анастомоза, наложенного традиционным двухрядным швом Альберта-Шмидена, происходит на фоне выраженного воспалительно-некротического процесса, значительного угнетения репа-ративно-регенераторных процессов, уменьшения параметров биологической и механической герметичности соустья. Это приводит к тому, что заживление пищеводно-кишечного анастомоза в большинстве случаев протекает по типу вторичного натяжения с формированием в дальнейшем (к 14-м суткам после операции) грубого рубца в зоне анастомоза.
Литература
1. Арсютов В.П., Арсютов О.В. Лазерная и магнитно-лазерная терапия в профилактике ре-лапаротомий. Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2009. 188 с.
2. Арсютов В.П., Черкесов Л.И., Арсютов О.В. Активность ксантиноксидазы у больных с острыми хирургическими заболеваниями органов брюшной полости при магнитно-лазерной терапии. Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2009. 80 с.
3. Гланц С.А. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. М.: Практика, 1999. 500 с.
4. Поликарпов С.А, Лисицкий А.Н., Горюнов И.В. Выбор метода наложения пищеводно-кишечного анастомоза после гастрэктомии // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2008. № 9. С. 56-60.
5. Чарышкин А.Л, Гудошников В.Ю. Ближайшие результаты гастрэктомии по поводу рака желудка // Актуальные вопросы хирургии, травматологии и интенсивной терапии: материалы
межрегион. науч.-практ. конф., посвящ. 85-летию со дня рожд. Н.И. Атясова. Саранск: Прогресс, 2011. С. 136-137.
6. Andreollo N.A., Lopes L.R., Coeho N.J. Postoperative complications after total gastrectomy in the gastric cancer. Analis of 300 patients // ABCD-Arg. Cir. Dig. 2011. Vol. 24, № 2. P. 126-130.
АРСЮТОВ ОЛЕГ ВЛАДИМИРОВИЧ - кандидат медицинских наук, доцент кафедры госпитальной хирургии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (oleg.ars21@rambler.ru).
ARSUTOV OLEG VLADIMIROVICH - candidate of medical sciences, associate professor of Hospital Surgery Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
АРСЮТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой факультетской хирургии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (ArsVladP@yandex.ru).
ARSYUTOV VLADIMIR PETROVICH - doctor of medical sciences, head of Faculty Surgery Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
УДК 577.17:616.381-089.168.1-06 ББК Р457.465.1-387
О.В. АРСЮТОВ, В.П. АРСЮТОВ
РОЛЬ ГИСТАМИНА, СЕРОТОНИНА,
КАТЕХОЛАМИНОВ, ГЕПАРИНА, КСАНТИНОКСИДАЗЫ В ЗАЖИВЛЕНИИ ПОВРЕЖДЕННОЙ ВО ВРЕМЯ ОПЕРАЦИИ БРЮШИНЫ
Ключевые слова: гистамин, серотонин, катехоламины, гепарин, ксантинокси-даза, заживление поврежденной брюшины.
В опытах на 32 морских свинках изучены динамика изменений содержания в тканях гистамина, серотонина, катехоламинов, гепарина, ксантиноксидазы и их влияние на характер заживления поврежденной во время операции брюшины на 1-, 3-, 5-, 7-, 9-,
14-е сутки послеоперационного периода. Установлено, что наиболее выраженные воспалительно-некротические изменения в поврежденной брюшине происходят на 3-5-е сутки послеоперационного периода. На этих же сроках отмечается максимальное повышение в тканях поврежденной брюшины активности ксантиноксидазы, гистамина, серотонина, катехоламинов с преобладанием серотонинового влияния и минимальное содержание в них гепарина.
O.V. ARSYUTOV, V.P. ARSYUTOV THE ROLE OF HISTAMINE, SEROTONIN,
CATECHOLAMINES, HEPARIN, AND XANTHINE OXIDASE IN HEALING OF PERITONEUM DAMAGED DURING A SURGERY
Key words: histamine, serotonin, catecholamines, heparin, xanthine oxidase, healing of adamaged peritoneum.
In experiment son 32 guinea pigs the dynamics of changes in the content of histamine, serotonin, catecholamines,, heparin, xanthine oxidase in tissues was studied as well as their inthfluetnh cet hon the hthealing character of peritoneum damaged during a surgery on the 1st, 3rd,
5th, 7th, 9h and 14th of postoperational period. It is established that the most pronounced in-flammatory-necrotizing changes in the damaged peritoneum take place on the 3rd-5h day of the post-operational period. It is during this period that in damaged peritoneal tissues the maximum increase in the activity of xanthine oxidase, histamine, serotonin and catecholamines is noted with the prevalence of serotonin influence and with minimal heparin content in these tissues.
За последние десятилетия в связи с ростом количества и объема хирургических вмешательств на органах брюшной полости отмечается быстрый рост числа пациентов спаечной кишечной непроходимостью. Несмотря на большое количество предложенных методов, направленных на предупреждение возникновения спаечной болезни и спаечной кишечной непроходимости в послеоперационном периоде, эта проблема далека от своего разрешения. Результаты лечения больных с острой спаечной кишечной непроходимостью не могут удовлетворить клиницистов. Послеоперационная летальность при
