CC BY
53
межрегион. науч.-практ. конф., посвящ. 85-летию со дня рожд. Н.И. Атясова. Саранск: Прогресс, 2011. С. 136-137.
6. Andreollo N.A., Lopes L.R., Coeho N.J. Postoperative complications after total gastrectomy in the gastric cancer. Analis of 300 patients // ABCD-Arg. Cir. Dig. 2011. Vol. 24, № 2. P. 126-130.
АРСЮТОВ ОЛЕГ ВЛАДИМИРОВИЧ - кандидат медицинских наук, доцент кафедры госпитальной хирургии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары ([email protected]).
ARSUTOV OLEG VLADIMIROVICH - candidate of medical sciences, associate professor of Hospital Surgery Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
АРСЮТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой факультетской хирургии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары ([email protected]).
ARSYUTOV VLADIMIR PETROVICH - doctor of medical sciences, head of Faculty Surgery Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
УДК 577.17:616.381-089.168.1-06 ББК Р457.465.1-387
О.В. АРСЮТОВ, В.П. АРСЮТОВ
РОЛЬ ГИСТАМИНА, СЕРОТОНИНА,
КАТЕХОЛАМИНОВ, ГЕПАРИНА, КСАНТИНОКСИДАЗЫ В ЗАЖИВЛЕНИИ ПОВРЕЖДЕННОЙ ВО ВРЕМЯ ОПЕРАЦИИ БРЮШИНЫ
Ключевые слова: гистамин, серотонин, катехоламины, гепарин, ксантинокси-даза, заживление поврежденной брюшины.
В опытах на 32 морских свинках изучены динамика изменений содержания в тканях гистамина, серотонина, катехоламинов, гепарина, ксантиноксидазы и их влияние на характер заживления поврежденной во время операции брюшины на 1-, 3-, 5-, 7-, 9-,
14-е сутки послеоперационного периода. Установлено, что наиболее выраженные воспалительно-некротические изменения в поврежденной брюшине происходят на 3-5-е сутки послеоперационного периода. На этих же сроках отмечается максимальное повышение в тканях поврежденной брюшины активности ксантиноксидазы, гистамина, серотонина, катехоламинов с преобладанием серотонинового влияния и минимальное содержание в них гепарина.
O.V. ARSYUTOV, V.P. ARSYUTOV THE ROLE OF HISTAMINE, SEROTONIN,
CATECHOLAMINES, HEPARIN, AND XANTHINE OXIDASE IN HEALING OF PERITONEUM DAMAGED DURING A SURGERY
Key words: histamine, serotonin, catecholamines, heparin, xanthine oxidase, healing of adamaged peritoneum.
In experiment son 32 guinea pigs the dynamics of changes in the content of histamine, serotonin, catecholamines,, heparin, xanthine oxidase in tissues was studied as well as their inthfluetnh cet hon the hthealing character of peritoneum damaged during a surgery on the 1st, 3rd,
5th, 7th, 9h and 14th of postoperational period. It is established that the most pronounced in-flammatory-necrotizing changes in the damaged peritoneum take place on the 3rd-5h day of the post-operational period. It is during this period that in damaged peritoneal tissues the maximum increase in the activity of xanthine oxidase, histamine, serotonin and catecholamines is noted with the prevalence of serotonin influence and with minimal heparin content in these tissues.
За последние десятилетия в связи с ростом количества и объема хирургических вмешательств на органах брюшной полости отмечается быстрый рост числа пациентов спаечной кишечной непроходимостью. Несмотря на большое количество предложенных методов, направленных на предупреждение возникновения спаечной болезни и спаечной кишечной непроходимости в послеоперационном периоде, эта проблема далека от своего разрешения. Результаты лечения больных с острой спаечной кишечной непроходимостью не могут удовлетворить клиницистов. Послеоперационная летальность при
острой спаечной кишечной непроходимости остается высокой, составляя 1134,8% [1, 3, 5, 6]. Поэтому углубленное изучение причин развития и формирования внутрибрюшинных сращений и спаек является важнейшей задачей современной экспериментальной и клинической хирургии.
Цель исследования - изучение динамики изменений содержания в тканях гистамина, серотонина, катехоламинов, гепарина, ксантиноксидазы (КО) и их влияния на характер заживления поврежденной во время операции брюшины.
Материалы и методы исследования. Проведены опыты на 32 морских свинках (самцы) массой 600-800 г. Экспериментальным животным под масочным эфирным наркозом производили лапаротомию и скарификацию брюшины толстой кишки щеткой на одном и том же участке на протяжении 8-10 см до появления мелкоточечных кровоизлияний и липкого кровянисто-фибринозного налета. Поврежденную кишку орошали 70%-ным этиловым спиртом. Для оценки состояния поврежденной висцеральной брюшины подопытные животные выводились из эксперимента на 1-, 3-, 5-, 7-, 9-, 14-е сутки после операции. Две морские свинки умерли на 5-е сутки после операции от развившейся острой спаечной кишечной непроходимости. Содержание гистамина в тканях брюшины определяли люминесцентно-гистохимическим методом Кросса, Эвана, Роста (1971). Содержание серотонина и катехоламинов в тканях определяли методом Фалька и Хилларпа в модификации Е.М. Крохиной (1969). Уровень гепарина в тканях определяли методом Энербека (1974). Активность ксантиноксидазы (КО) в тканях определяли по методике И.Г. Бондаренко и В.А. Симоновой (1988) [1, 2]. Статистическая обработка полученных цифровых данных проведена с помощью пакета программ Microsoft office (Excel) на компьютере. В работе приводятся следующие показатели: М - средняя арифметическая величина; m - средняя ошибка средней арифметической величины. Статистическую достоверность определяли критерием Стьюдента (t). Различия считали достоверными при p < 0,05[4].
Для определения морфологии заживления поврежденной во время операции брюшины препараты поврежденной толстой кишки после фиксации в 10%-ном нейтральном формалине окрашивались по Ван-Гизону и гематоксилин-эозином.
Результаты исследования и их обсуждение. Содержание гистамина в тканях поврежденной брюшины к концу 1-х суток после операции увеличивается по сравнению с исходным значением более чем в 2 раза, составляя 50,5±0,48 УЕ (p < 0,001). Максимальное повышение уровня гистамина в тканях поврежденной брюшины отмечается на 3-и сутки послеоперационного периода и составляет 70,9±1,21 УЕ. Начиная с 5-х суток послеоперационного периода содержание гистамина в тканях поврежденной во время операции брюшины постепенно уменьшается, хотя и на 14-е сутки достоверно превышает исходное значение, составляя 28,8+0,56 УЕ.
Концентрация серотонина и катехоламинов в тканях поврежденной брюшины увеличивается с 1-х суток, достигая максимальных значений к 3-м суткам после операции и составляя, соответственно, 15,9+0,74 УЕ (p < 0,001) и 26,4+0,85 УЕ (p < 0,001). С 5-х суток послеоперационного периода содержание серотонина и катехоламинов в тканях поврежденной висцеральной брюшины постепенно уменьшаются, однако и на 14-е сутки эти показатели достоверно превышают исходные значения, составляя, соответственно, 6,1+0,27 УЕ и 12,2+0,43 УЕ. При определении соотношения катехоламинов и серотонина установлено преобладание серотонинового влияния на ткани поврежденной висцеральной брюшины, и лишь спустя 2 недели этот показатель приближается к исходному значению.
Содержание гепарина в поврежденной брюшине, наоборот, уменьшается с 1-х суток послеоперационного периода, достигая минимальных значений к концу 3-х суток после повреждения, составляя 22,5+0,61 УЕ (р < 0,001). С 5-х суток после операции отмечается постепенное увеличение содержания гепарина в тканях поврежденной брюшины, однако и на 14-е сутки этот показатель достоверно ниже исходного значения и составляет 31,3+0,37 УЕ.
Активность КО в тканях поврежденной брюшины увеличивается с 1-х суток, достигая максимальных значений к 3-м суткам послеоперационного периода, составляя на этих сроках исследования 0,195+0,007 УЕ (р < 0,001). С 5-х суток активность КО в тканях поврежденной брюшины постепенно уменьшается, хотя и на 14-е сутки достоверно превышает исходное значение, составляя 0,138+0,005 УЕ.
Подопытные животные, как выведенные из эксперимента, так и умершие, подвергались аутопсии. При этом основное внимание уделялось наличию в брюшной полости спаек, инфильтратов, абсцессов и состоянию поврежденной во время операции брюшины толстой кишки. Из 32 подопытных животных две морские свинки умерли на 5-е сутки после операции. На аутопсии у них установлена острая спаечная кишечная непроходимость с развитием разлитого фибринозногнойного перитонита. При аутопсии остальных морских свинок, выведенных из эксперимента на 1-, 3-, 5-, 7-, 9-, 14-е сутки послеоперационного периода, получены следующие результаты. Через 1 сутки после операции в брюшной полости подопытных животных отмечено незначительное количество серозногеморрагического выпота. Толстая кишка была раздута, поврежденный участок кишки гиперемирован, покрыт местами фибрином. У части животных определялось прилипание к поврежденному участку сальника и петель тонкой кишки.
На 3-и сутки послеоперационного периода в брюшной полости у всех экспериментальных животных содержалось небольшое количество геморрагического выпота. Толстая кишка была раздута, стенки утолщены, к зоне повреждения припаяны петли тонкой кишки и сальник почти на всем протяжении. У некоторых морских свинок отмечено формирование «двустволок» петель кишки за счет рыхлых спаек. Спустя 5 суток после операции в брюшной полости геморрагический выпот определялся только у некоторых морских свинок. Тол -стая кишка у всех подопытных животных оставалась раздутой, увеличенной в размерах. К зоне повреждения толстой кишки были припаяны петли тонкой кишки, сальник с образованием в ряде случаев конгломерата. В ряде случаев установлено сложение толстой кишки в зоне повреждения в виде «двустволки» за счет спаек. Стенка кишки воспалена, плотная и покрыта фибрином.
Через 7 суток после повреждения у животных выпот в брюшной полости практически отсутствовал. У большинства морских свинок в зоне повреждения определялся инфильтрат, образованный толстой кишкой, петлями тонкой кишки и сальником. У 2 подопытных животных при выделении толстой кишки из инфильтрата вскрылся межкишечный абсцесс с густым гноем в небольшом количестве. Стенка кишки в зоне повреждения инфильтрирована, местами утолщена.
Спустя 9 суток после хирургического вмешательства практически у всех морских свинок в зоне поврежденной кишки отмечено наличие конгломератов и инфильтратов. В 2 случаях установлено наличие микроабсцессов в инфильтрате. Стенка кишки в зоне повреждения была представлена грануляционной тканью, инфильтрирована, отечна с наличием практически у всех животных «двустволок» за счет спаечного процесса в зоне повреждения с частичным нарушением проходимости, из-за чего толстая кишка была у всех животных раздута, увеличена в диаметре.
На 14-е сутки послеоперационного периода в брюшной полости подопытных животных выпот отсутствовал. К зоне повреждения были припаяны сальник и петли тонкой кишки, у ряда морских свинок отмечалось формирование тяжей и «двустволки», конгломератов с частичным нарушением проходимости. Стенка кишки в зоне повреждения оставалась плотной, утолщенной, без признаков воспаления (рис. 1).
При морфологическом исследовании зоны поврежденной серозной оболочки толстой кишки наибольшие воспалительно-некротические изменения нами были обнаружены в первые 5 суток послеоперационного периода. Через 1 сутки после операции в месте повреждения серозная оболочка отсутствовала, глубина повреждения достигала 2/3 толщины мышечного слоя. Дефект был заполнен фибрином, некротическими массами, лейкоцитами с преобладанием нейтрофилов, часть из которых была представлена гнойными тельцами. Контуры клеток мышечного слоя смазаны, цитоплазма базофильная, ядра нечеткие. В межмышечных пространствах установлена обильная инфильтрация нейтрофилами. Было отмечено резкое полнокровие подслизистого слоя с большим количеством клеток белой крови с преобладанием гранулоцитов. Отмечалась периваскулярная лейкоцитарная инфильтрация тканей. Спустя 3-е суток после повреждения язвенный дефект распространялся до подслизистого слоя и был заполнен некротическими массами, фибрином, со значительной примесью эритроцитов в гнойном экссудате. Под-слизистый слой утолщен, отмечались полнокровие сосудов и выраженная инфильтрация подлежащих тканей лейкоцитами с преобладанием нейтрофилов.
На 5-е сутки послеоперационного периода сохранялся дефект в зоне повреждения кишки до подслизистого слоя, который был практически очищен от некротических масс. Дно дефекта представлено толстым слоем грануляционной ткани. Отмечалась клеточная инфильтрация прилежащих тканей с преобладанием нейтрофилов над макрофагами, где также определялись эритроциты. На фоне этих изменений установлено появление незначительного количества вновь образованных сосудов в толще грануляционной ткани. Преимущественно периваскулярно отмечены очень крупные фибробласты, волокна практически отсутствовали. Спустя 7 суток в зоне повреждения сохранялся очищенный от некротических масс дефект до подслизистого слоя. Дно дефекта было представлено толстым слоем грануляционной ткани с небольшим количеством вновь образованных сосудов. Продолжали сохраняться отек и инфильтрация тканей зоны повреждения нейтрофилами.
Через 9 суток после операции отмечено отсутствие мышечного слоя в зоне повреждения, дефект был заполнен грануляционной тканью с большим количеством вновь образованных сосудов, соотношение гранулоцитов и макрофагов в которой составляло примерно 1:1. Фибробласты имели различную форму, были ориентированы беспорядочно. В воспалительной инфильтрации окружающих тканей преобладали макрофаги, также определялись нейтрофилы и эритроциты. Отмечалось наползание мезотелия на грануляционную ткань.
На 14-е сутки послеоперационного периода дефект в зоне повреждения был полностью покрыт мезотелием. Вместе с тем мышечный слой отсутствовал, вместо него была выявлена оформленная грубоволокнистая соединительная ткань,
Рис. 1. Поврежденная толстая кишка спустя 14 суток после операции. Макропрепарат
представленная зрелыми фиброб-ластами и пучками коллагеновых волокон (рис. 2).
Используя метод окраски препаратов поврежденной во время операции висцеральной брюшины толстой кишки по Ван-Гизону, мы установили, что начиная с 5-х суток послеоперационного периода отмечается пролиферация фиб-робластов и коллагеновых волокон. И спустя 14 суток после операции в зоне повреждения выявлена рубцовая ткань, представленная грубыми коллагеновыми волокнами и единичными фиб-робластами, замещающими мышечный слой (рис. 3).
Анализ полученных результатов экспериментального исследования свидетельствует, что наиболее выраженные воспалительно-некротические изменения в поврежденной висцеральной брюшине происходят на 3-5-е сутки послеоперационного периода. На этих же сроках отмечаются максимальное повышение в тканях поврежденной брюшины активности КО, гистамина, серотонина, катехоламинов с преобладанием серотонинового влияния и минимальное содержание в тканях гепарина, что, несомненно, способствует усилению и затягиванию воспалительно-некротических процессов в поврежденных тканях.
Выводы. 1. Длительное увеличение содержания в тканях исследуемых биоаминов, КО и уменьшение содержания гепарина способствуют усилению и затягиванию воспалительно-некротических, уменьшению репаративно-регене-раторных процессов, возникновению тромботических процессов и нарушению микроциркуляции, возможно, нарушению иммунного статуса в них и заживлению поврежденной во время операции брюшины по типу вторичного натяжения с формированием грубого рубца в месте повреждения и инфильтратов, конгломератов, абсцессов, «двустволок» петель тонкой кишки, спаек и тяжей в брюшной полости.
2. Полученные в ходе экспериментального исследования результаты убедительно демонстрируют значимость пуринового обмена, в частности КО во взаимосвязи с активностью гистамина, серотонина, катехоламинов и гепарина, в заживлении поврежденной во время операции брюшины и его определяющую роль в патогенезе развития внутрибрюшинных сращений в послеоперационном периоде.
Рис. 2. Серозная оболочка толстой кишки через 14 суток после операции. Окраска гематоксилин-эозином. Объектив 10*. Гомаль 1,7
Рис. 3. Серозная оболочка толстой кишки через 14 суток после операции. Окраска по Ван-Гизону. Объектив 10*. Гомаль 1,7
Литература
1. Арсютов В.П., Арсютов О.В. Лазерная и магнитно-лазерная терапия в профилактике ре-лапаротомий. Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2009. 188 с.
2. Арсютов В.П., Черкесов Л.И, Арсютов О.В. Активность ксантиноксидазы у больных с острыми хирургическими заболеваниями органов брюшной полости при магнитно-лазерной терапии. Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2009. 80 с.
3. Бондарев Г.А. Острая кишечная непроходимость в Курской области за 35 лет // Методы современной диагностики и лечения острой кишечной непроходимости: материалы науч.-практ. конф. хирургов Республики Карелия и Северо-Западного фед. округа России / Минзравсоцразвития Республики Карелия; Петрозаводский гос. ун-т; Санкт-Петербургский НИИ скорой помощи им. проф. И. И. Джанелидзе; Карельский науч.-мед. центр СЗО РАМН. Петрозаводск, 2011. С. 61-64.
4. Гланц С.А. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. М.: Практика, 1999. 500 с.
5. Современные взгляды на проблемы лечения острой кишечной непроходимости / В.Е. Милюков, Е.Н. Долгов, Д.Н. Телепанов и др. // Методы современной диагностики и лечения острой кишечной непроходимости: материалы науч.-практ. конф. хирургов Республики Карелия и СевероЗападного фед. округа России / Минзравсоцразвития Республики Карелия; Петрозаводский гос. ун-т; Санкт-Петербургский НИИ скорой помощи им. проф. И.И. Джанелидзе; Карельский науч.-мед. центр СЗО РАМН. Петрозаводск. 2011. С.80-83.
6. Trew G. Consensus in adhesion reduction management // Obstet Gynaecol. 2004. № 6. P. 2.
АРСЮТОВ ОЛЕГ ВЛАДИМИРОВИЧ. См. с. 363.
АРСЮТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ. См. с. 363.
УДК 612.438:612.8 (075.8)
ББК Р457.344.5
И.Л. АРТЕМЬЕВА, В.Е. СЕРГЕЕВА СОМАТОСТАТИН-ПОЗИТИВНЫЕ СТРУКТУРЫ ТИМУСА
Ключевые слова: нейропептид, соматостатин (Som), тимус.
Изучено распределение Som-позитивных структур в тимусе. Установлено, что Som-позитивные структуры выявляются во всех зонах долек тимуса. Результаты исследования демонстрируют наличие тесного сотрудничества между ней-ропептидной и иммунокомпетентной системами.
I.L. ARTEMEVA, V.E. SERGEEVA THE SOMATOSTATIN-POSITIVE STRUCTURES OF THE THYMUS Key words: neuropeptid, somatostatin (Som), thymus.
The spread of Som-positive structures in thymus has been studied. Som-positive structures are identified in all areas of the lobules of the thymus. Investigation results demonstrate the presence of close cooperation between neuropeptide and immunocompetent systems.
В центральном органе иммунитета - тимусе - вырабатываются либо экспрессируются рецепторы практически для всех известных нейромедиаторов и нейропептидов [1, 3]. Все эти данные свидетельствуют о тесных функциональных связях иммунной и нервной систем. В обеспечении этих взаимодействий важная роль отводится нейропептидам. На сегодняшний день известно, что нейропептиды продуцируются разнообразными клетками организма и представлены практически во всех органах. Нейропептиды тимуса выполняют роль регуляторов разнообразных физиологических процессов, обеспечивая созревание тимоцитов и функционирование различных популяций иммунокомпетент-ных клеток, тем самым демонстрируя активное участие в нейроиммунных взаимодействиях [6, 7]. Ранее нами были изучены распределение и морфофункциональные особенности нейропептид субстанция Р-, вазоактивный интестинальный пептид-, нейропептид Y-содержащих структур тимуса крыс [2]. Установлено, что нейропептиды активно участвуют в процессе пролиферации и диффе-ренцировки развивающихся тимоцитов, функционировании тучных клеток, макрофагов, дендритных клеток тимуса. С учетом отсутствия в научной литературе четкой информации о соматостатин-экспрессирующих структурах тимуса
