CC BY
41
№ 1 - 2012 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки УДК 618.3-06:618.34]-615.37
ВЛИЯНИЕ ИММУНОТРОПНОЙ ТЕРАПИИ НА АКТИВНОСТЬ ИММУНОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА У БЕРЕМЕННЫХ С РИСКОМ ВНУТРИУТРОБНОГО ИНФИЦИРОВАНИЯ ПЛОДА
12 1 3 2
А.Н. Трунов ’ , И.О. Маринкин , Л.А. Карпович , О.О. Обухова ,
О.М. Горбенко2, А.П. Шваюк2, Л.А. Трунова2
]ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России (г. Новосибирск)
2Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН (г. Новосибирск) ООО «Центр семейной медицины» (г. Новосибирск)
Обследовано 60 беременных группы риска по внутриутробному инфицированию плода. 1я группа — 30 женщин, получавших стандартную схему лечения. 2-я группа — 30 беременных, получавших стандартную схему лечения и препарат интерферон альфа-2b (Генферон Лайт). В сыворотке крови пациенток определялись концентрации ИЛ-1Р, ИЛ-4, лактоферрина и уровней аутоантител к антигенам нативной ДНК (ААТ к АГ нДНК), IgA и ЦИК. Показана патогенетическая обоснованность использования предложенной комплексной схемы лечения с включением в нее иммунотропного препарата, применение которой приводит к снижению активности воспалительно-деструктивного процесса (достоверное снижении концентраций ИЛ-1Р, лактоферрина, IgA, уровней ААТ к АГ нДНК и ЦИК) у женщин 2-й группы относительно стандартной схемы лечения.
Ключевые слова: внутриутробное инфицирование, иммуновоспалительный процесс, цитокины, иммунотропная терапия.
Маринкин Игорь Олегович — доктор медицинских наук, профессор, ректор ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития, е-mail: reсtomgmu@yandex.ru, рабочий телефон: 8 (383) 222-32-04
Трунова Лилия Алексеевна — доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН, главный научный сотрудник лаборатории иммунологии репродукции Научного центра клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, е-mail: trunov1963@yandex.ru
Карпович Лариса Алексеевна — врач акушер-гинеколог ООО «Центр семейной медицины», e-mail: reсtomgmu@yandex.ru, контактный телефон: 8 (383) 222-32-04
Обухова Ольга Олеговна — доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории иммунологии репродукции Научного центра клинической и
экспериментальной медицины СО РАМН, e-mail: trio188@yandex.ru
Горбенко Ольга Михайловна — кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории иммунологии репродукции Научного центра клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, e-mail: trunov1963@yandex.ru
Шваюк Аля Петровна — кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории иммунологии репродукции Научного центра клинической и
экспериментальной медицины СО РАМН, e-mail: trunov1963@yandex.ru
Трунов Александр Николаевич — доктор медицинских наук, профессор, руководитель лаборатории иммунологии репродукции Научного центра клинической и
экспериментальной медицины СО РАМН, профессор кафедры патологической физиологии и клинической патофизиологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет», e-mail: trunov1963@yandex.ru
Введение. Анализ современной научной литературы в области акушерства позволяет сделать заключение, что важнейшей из проблем данного раздела медицины является возрастание частоты встречаемости внутриутробного инфицирования плода (ВУИП) [2, 4,
5, 9].
Известно, что наличие во время беременности у женщины хронических инфекционновоспалительных заболеваний генитальной и экстрагенитальной локализаций может привести к значимому дисбалансу в системе «мать — плацента — плод», вызывая нарушения в механизмах реализации программы внутриутробного развития. Необходимо отметить, что при беременности в силу особого функционального состояния иммунной системы возникает многообразие клинических проявлений внутриутробного инфицирования, что создает значительные сложности для профилактики, ранней диагностики и своевременного лечения данных процессов. В настоящее время усилия ученых направлены на изучение особенностей развития иммуновоспалительного процесса в патогенезе ВУИП, на оценку значимости дисбаланса индукторов межклеточных взаимоотношений — цитокинов, регулирующих развитие как физиологической иммуносупрессии при беременности, так и активации иммунной системы в ответ на антигенную стимуляцию из очагов хронического воспаления. В то же время лечение пациенток данной категории с использованием антибиотикотерапии не вызывает полного удовлетворения его результатами у практических врачей, а использование
иммуностимулирующих средств при беременности резко ограничено регламентирующими документами, и только в последнее время появился ряд препаратов этого класса, разрешенных к использованию при беременности [1, 3, 6-8, 10].
Цель: изучить влияние препарата интерферон альфа-2Ь на активность
иммуновоспалительного процесса у беременных группы риска по внутриутробному инфицированию плода.
Материалы и методы. Было проведено обследование 60-ти женщин с наличием достоверных признаков хронической внутриматочной инфекции, составляющих группу риска в отношении реализации ВУИП в III триместре беременности. Для решения поставленной задачи все обследованные женщины, поступившие в стационар, были разделены на 2 группы, не отличающиеся по возрасту, клинической картине заболевания,
показателям общелабораторных анализов, что позволяет считать их сопоставимыми. Первая группа — 30 беременных, получавших стандартную схему лечения
(антибактериальные препараты и метаболическая терапия). Вторая группа —
30 беременных, получавших стандартную схему лечения и препарат интерферон альфа-2Ь (Генферон), разрешенный для использования у беременных во II и III триместрах. Препарат назначался вагинально в дозировке 250 000 МЕ ИФН-а 2 раза в сутки с интервалом 12 ч в течение 10 дней. Контрольную группу составили 20 женщин с физиологическим течением беременности и аналогичным сроком гестации. У всех пациенток было получено информированное согласие на использование данных обследования в научных целях
Определение концентраций интерлейкинов — ИЛ-1Ь, ИЛ-4 в сыворотке крови выполнялось с использованием коммерческих тест-систем ООО «Цитокин» С.-Петербург по инструкции производителя. Определение концентраций лактоферрина и 1§Л в сыворотке крови беременных женщин выполнялось с использованием коммерческих тест-систем ЗАО «Вектор-БЕСТ» (Новосибирск, Россия) по инструкции производителя. Определение уровня аутоантител к антигенам нативной ДНК в сыворотке крови беременных женщин выполнялось с использованием коммерческих тест-систем «ДНК-ТЕСТ» производства ПМЦ «Сибмедприбор» (Новосибирск, Россия). Определение уровня содержания циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови проводили методом жидкостной преципитации в 4 % полиэтиленгликоля-6000 на 0,01М боратном буфере рН 8,4. Результаты иммуноферментного анализа регистрировали на вертикальном фотометре «Униплан» при длине волны 450 нм. Полученные цифровые данные были подвергнуты математическому анализу, вычислялись среднее арифметическое значение (М) и ошибка среднего арифметического значения (т). Значимость различий вариационных рядов в несвязанных выборках оценивали с помощью критерия Манна-Уитни, в связанных попарно выборках — с помощью критерия Вилкоксона. Данные в табл. представлены в виде М ± т. Достоверным считали различие между сравниваемыми рядами с уровнем достоверной вероятности 95 % (р < 0,05).
Результаты исследований и их обсуждение. В результате проведенных исследований были выявлены следующие закономерности, представленные в табл.
Таблица
Значения изучаемых показателей в сыворотке крови беременных c ВУИП (М ± m)
Изучаемые показатели
ИЛ-1А ЙГ Ы.1 ИЛ-4, пг мл Лактоф^рнн нг мл А АТ к АГ я ДНК. уел. ед. Ц1ГК, уел. ед. г л
Контрольна* ГруйПа
58 = 6,2 49 = £Л 1385 = 355 1^2 ± О.ОЕ 71 = £.9 2,5=0,15
1 группа
190 = 25* 129= 25* 2155= 115* 2ГК = 0:17* 163 = 11* 4Й5 = 0.25*
2 группа
123 ^ 17*** 115= 14* 1627^215** 2,29-0.13*,** 131 ± 12*** 3=15^0=23 * ,**
Примечание: *— достоверно отличаются от значений изучаемого показателя в норме, р < 0,05; ** — достоверно отличаются от значений изучаемого показателя в 1-й группе, р < 0,05
При изучении содержания основного провоспалительного цитокина — ИЛ-1Ь, было показано, что его концентрации в сыворотке крови пациенток 1 -й группы достоверно, в 3,27 раза, превышали значения показателя в сыворотке крови пациенток контрольной
группы (р < 0,01). При сравнительном анализе результатов использования различных схем лечения было установлено, что использование препарата интерферон альфа-2Ь в комплексной терапии приводит к достоверному, в 1,54 раза, снижению концентраций ИЛ-1Ь в сыворотке крови беременных с признаками ВУИП относительно данных, полученных в группе, где использовалась только стандартная схема лечения (р < 0,05).
При изучении содержания ИЛ-4 было показано, что его концентрации в сыворотке крови пациенток 1-й группы достоверно, в 2,63 раза, превышали значения показателя в сыворотке крови пациенток контрольной группы (р < 0,01). При сравнительном анализе результатов использования различных схем лечения было установлено, что использование препарата интерферон альфа-2Ь в комплексной терапии не приводит к достоверному изменению ИЛ-4 в сыворотке крови беременных с признаками ВУИП относительно данных, полученных в группе, где использовалась только стандартная схема лечения.
Анализируя полученные данные, можно сделать следующее обобщение. Достоверное повышение концентраций ИЛ-1Ь в сыворотке крови свидетельствует об активности воспалительного процесса, протекающего в системе «мать — плацента — плод», что связано с реализацией риска внутриутробного инфицирования. Кроме того, учитывая значимость ИЛ-1Ь в процессах активации родовой деятельности, выявленное повышение содержания этого цитокина может являться одним из пусковых механизмов развития преждевременной родовой деятельности у данной группы беременных. Использование в комплексной схеме лечения препарата интерферон альфа-2Ь приводит к снижению активности воспалительного процесса у пациенток 2-й группы. Двояко можно расценивать установленное в исследовании нарастание синтеза ИЛ-4. С одной стороны, его можно рассматривать как активацию иммунного ответа по Т-хелпер-2 опосредованному пути в ответ на антигенную стимуляцию из очага воспаления и развитие инфекционно-воспалительного процесса, а с другой стороны, повышение концентраций этого цитокина может свидетельствовать о сохранности компенсаторной функции, которая направлена на снижение провоспалительного потенциала.
При изучении содержания лактоферрина — острофазового белка, обладающего бактерицидной активностью и иммуностимулирующими свойствами, а также способного влиять на продукцию провоспалительных цитокинов, было показано, что его концентрации в сыворотке крови пациенток 1-й группы достоверно, в 1,52 раза, превышали значения показателя в сыворотке крови пациенток контрольной группы (р <
0,05). При сравнительном анализе результатов использования различных схем лечения было установлено, что использование препарата интерферон альфа-2Ь в комплексной терапии приводит к достоверному, в 1,3 раза, снижению его концентраций в сыворотке крови беременных с признаками ВУИП относительно данных, полученных в группе, где использовалась только стандартная схема лечения (р < 0,05).
Учитывая полученные в исследовании данные о выраженной активности иммуновоспалительного процесса у беременных с признаками ВУИП, что, вероятно, должно привести к нарастанию клеточной деструкции, было проведено тестирование уровней аутоантител к антигенам нативной ДНК, являющихся маркером деструктивных процессов.
При сравнительном анализе результатов использования различных схем лечения было установлено, что использование иммуностимулятора генферон в комплексной терапии приводит к достоверному, в 1,22 раза, снижению концентраций ААТ к АГ нДНК в сыворотке крови беременных с признаками ВУИП относительно данных, полученных в группе, где использовалась только стандартная схема лечения (р < 0,05).
Учитывая наличие у обследованных пациенток очагов хронической инфекции и высокие уровни индуктора гуморального звена иммунной системы ИЛ-4, следующим этапом настоящего исследования было определение интегрального показателя активации гуморального звена иммунной системы — уровня циркулирующих иммунных комплексов и IgA.
В результате проведенного исследования было показано, что содержание ЦИК в сыворотке крови пациенток 1-й группы достоверно, в 2,28 раза, превышало значения показателя в сыворотке крови у пациенток контрольной группы (р < 0,05). При сравнительном анализе результатов использования различных схем лечения было установлено, что использование препарата интерферон альфа-2Ь в комплексной терапии приводит к достоверному, в 1,23 раза, снижению содержания ЦИК в сыворотке крови беременных с признаками ВУИП относительно данных, полученных в группе, где использовалась стандартная схема лечения (p < 0,05).
При изучении содержания IgA было показано, что его концентрации в сыворотке крови пациенток 1-й группы достоверно, в 1,94 раза, превышали значения показателя в сыворотке крови пациенток контрольной группы (p < 0,01). При сравнительном анализе результатов использования различных схем лечения было установлено, что использование интерферон альфа-2Ь в комплексной терапии приводит к достоверному, в 1,54 раза, снижению IgA в сыворотке крови беременных с признаками ВУИП относительно данных группы со стандартной схемой лечения (p < 0,05).
Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что в механизмах развития внутриутробного инфицирования значимую роль играет активация иммуновоспалительных процессов, развитие которых происходит на фоне постоянной антигенной стимуляции и развития инфекционного процесса. Однако развитие иммунного ответа не приводит к санации организма и может быть признано неэффективным.
Показана патогенетическая обоснованность использования предложенной комплексной схемы лечения с использованием препарата интерферон альфа-2Ь, применение которой приводит к снижению активности иммуновоспалительного процесса, что выражается в достоверном снижении содержания маркеров, отражающих активность воспалительнодеструктивного процесса и иммунного реагирования в сравнении со стандартной схемой лечения.
Список литературы
1. Кулаков В. И. Содержание цитокинов в амниотической жидкости, пуповинной крови и сыворотке крови женщин с внутриутробной инфекцией / В. И. Кулаков, Г. Т. Сухих, Н. Е. Кан // Акушерство и гинекология. — 2005. — № 5. — С. 5-7.
2. Нисевич Л. Л. Внутриутробная инфекция : мать-плацента-плод / Л. Л. Нисевич, А. Г. Талалаев, Л. Н. Каск [и др.] // Детские инфекции. — 2008. — Т. 7, № 2. — С. 9-13.
3. Сотникова Н. Ю. Роль ранних нарушений продукции цитокинов в формировании патологии беременности / Н. Ю. Сотникова, A. B. Кудряшова, H. B. Крошкина [и др.] // Рос. иммунологический журн. — 2007. — Т. 1, № 10, 3-4. — С. 258-265.
4. Сухих Г. Т. Иммунология беременности / Г. Т. Сухих, Л. В. Ванько. — М. : Медицина, 2003. — 400 с.
5. Genc M. R. The clinical use of inflammatory markers during pregnancy / M. R. Genc, C. E. Ford // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. — 2010. — Vol. 22, N 2. — Р. 116-121.
6. Grigsby P. L. Choriodecidual inflammation: a harbinger of the preterm labor syndrome / P. L. Grigsby [et al.] // Reprod. Sci. — 2010. — Vol. 17, N 1. — Р. 85-94.
7. Mestan K. Cord blood biomarkers of the fetal inflammatory response / K. Mestan // J. Matern. Fetal. Neonatal Med. — 2009. — Vol. 22, N 5. — P. 379-387.
8. Madan I. The frequency and clinical significance of intra-amniotic infection and orinflammation in women with placenta previa and vaginal bleeding: an unexpected observation / I. Madan [et al.] // J. Perinat. Med. — 2010. — N 3. — P. 275-279.
9. Romero R. Inflammation in pregnancy: its roles in reproductive physiology, obstetrical complications, and fetal injury / R. Romero, F. Gotsch, B. Pineles, J. P. Kusanovic // Nutr. Rev. — 2007. — Vol. 65, N 12. — P. 194-202.
10. Witkin S. S. Unique alterations in infection-induced immune activation during pregnancy / S. S. Witkin [et al.] // BJOG. — 2011. — Vol. 118, N 2. — P. 145-153.
INFLUENCE OF IMMUNOTROPIC THERAPY ON ACTIVITY OF IMMUNO-INFLAMMATORY PROCESS AT PREGNANT WOMEN WITH PRENATAL FETUS CONTAMINATION
RISK
12 1 3 2
A.N. Trunov ’ , I.O. Marinkin , L.A. Karpovich , O.O. Obukhova ,
O.M. Gorbenko2’ A.P. Shvayuk2’ L.A. Trunova2
!SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment» (Novosibirsk c.) 2Research center of clinical and experimental medicine of SB RAMS (Novosibirsk c.)
3LLC «Family Medical Center»
60 pregnant women from groups of risk on prenatal contamination of fetus are surveyed. 1st group of 30 women received the standard scheme of treatment. 2nd group of 30 pregnant women received the standard scheme of treatment and preparation interferon alpha-2b (Genferon Light). In blood serum the concentration of IL-1 p, IL-4, lactoferrin and levels of autoantibodies to antigens of native DNA (autoantibody to AG nDNA), IgA and the CIC were defined. Pathogenetic validity of use of the offered complex scheme of treatment with including in it immunotropic preparation which application leads to depression of activity of is inflammatory-destructive process (authentic depression of concentration of IL-1 p, lactoferrin, IgA, levels AAB to AG nDNA and CIC) at women of 2nd group concerning the standard scheme of treatment is shown.
Keywords: prenatal contamination, immune-inflmmatory process, cytokines, immunotropic therapy.
About authors:
Marinkin Igor Olegovich — doctor of medical sciences, professor, rector at SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», e-mail: rectorngmu@yandex.ru, office phone: 8 (383) 222-32-04
Trunova Liliya Alekseevna — doctor of medical sciences, professor, corresponding member of the Russian Academy of Medical Science, head research assistant of laboratory of reproduction immunology at Research center of clinical and experimental medicine of SB RAMS, e-mail: trunov1963@yandex.ru
Karpovich Larisa Alekseevna — obstetrician-gynaecologist of LLC «Family Medical Center», e-mail: rectorngmu@yandex.ru, contact phone: 8(383) 222-32-04
Obukhova Olga Olegovna — doctor of the medical sciences, leading research assistant of laboratory of reproduction immunology at Research center of clinical and experimental medicine of SB RAMS, e-mail: trio188@yandex.ru
Gorbenko Olga Mikhaylovna — candidate of biological sciences, senior research assistant of laboratory of reproduction immunology at Research center of clinical and experimental medicine of SB RAMS, e-mail: trunov1963@yandex.ru
Shvayuk Alya Petrovna — candidate of biological sciences, senior research assistant of laboratory of reproduction immunology at Research center of clinical and experimental medicine of SB RAMS, e-mail: trunov1963@yandex. ru
Trunov Alexander Nikolaevich — doctor of medical sciences, professor, principal of laboratory of reproduction immunology at Research center of clinical and experimental medicine of SB RAMS, professor of pathological physiology and a clinical pathophysiology chair of SEI HPE «Novosibirsk State Medical University Minhealthsocdevelopment», e-mail: trunov1963@yandex.ru
List of the Literature:
1. Kulakov V. I. Containing of cytokines in amnionic liquid, umbilical blood and blood serum of women with prenatal infection / V. I. Kulakov, G. T. Sukhikh, N. E. Kan // Obstetrics and gynecology. — 2005. — № 5. — P. 5-7.
2. Nisevich L. L. Prenatal infection: mother-placenta-fetus / L. L. Nisevich, A. G. Talalaev, L. N. Kask [etc.] // Children’s infections. — 2008. — V. 7, № 2. — P. 9-13.
3. Sotnikova N. Y. Role of early disturbances of production of cytokines in pathological formation of of pregnancy / N. Y. Sotnikova, A. B. Kudryashov, N. V. Kroshkina [etc.] // Rus. Immunologic jour. — 2007. — V. 1, № 10, 3-4. — P. 258-265.
4. Sukhikh G. T. Immunology of pregnancy / G. T. Sukhikh, L. V. Vanko. — M: medicine, 2003. — 400 P.
5. Genc M. R. The clinical use of inflammatory markers during pregnancy / M. R. Genc, C. E. Ford // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. — 2010. — Vol. 22, N 2. — P. 116-121.
6. Grigsby P. L. Choriodecidual inflammation: a harbinger of the preterm labor syndrome / P. L. Grigsby [et al.] // Reprod. Sci. — 2010. — Vol. 17, N 1. — P. 85-94.
7. Mestan K. Cord blood biomarkers of the fetal inflammatory response / K. Mestan // J. Matern. Fetal. Neonatal Med. — 2009. — Vol. 22, N 5. — P. 379-387.
8. Madan I. The frequency and clinical significance of intra-amniotic infection and orinflammation in women with placenta previa and vaginal bleeding: an unexpected observation / I. Madan [et al.] // J. Perinat. Med. — 2010. — N 3. — P. 275-279.
9. Romero R. Inflammation in pregnancy: its roles in reproductive physiology, obstetrical complications, and fetal injury / R. Romero, F. Gotsch, B. Pineles, J. P. Kusanovic // Nutr. Rev. — 2007. — Vol. 65, N 12. — P. 194-202.
10. Witkin S. S. Unique alterations in infection-induced immune activation during pregnancy / S. S. Witkin [et al.] // BJOG. — 2011. — Vol. 118, N 2. — P. 145-153.
