Влияние гепатопротектора, содержащего жмых расторопши, на биохимические показатели слюнных желез крыс с токсическим гепатитом Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

"BicHUK стоматологи", № 4, 2016

L

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ТЕОРЕТИЧНИИ РОЗД1Л

УДК 616.31+612.31+616.98+615.97

Г. З. Борис1, А. И. Фурдычко1, к. мед. н., А. Э. Деньга2, к. мед. н.

1 Львовский национальный медицинский университет им. Данилы Галицкого Государственное учереждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины»

ВЛИЯНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРА, СОДЕРЖАЩЕГО ЖМЫХ РАСТОРОПШИ, НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ КРЫС С ТОКСИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ

При токсическом гепатите в слюнных железах развиваются воспалительно-дистрофические процессы, которые в значительной степени можно предотвратить с помощью гепатопротектора, содержащего жмых расторопши. Ключевые слова: гепатит, слюнные железы, гепатопроте-ктор, расторопша.

Г. З. Борис1, А. I. Фурдичко1, А. Е. Деньга2

1Льв1вський нацюнальний медичний ушверситет 1м. Данила Галицького 2Державна установа «1нститут стоматологи та щелепно-лицево! х1рурги Нацюнально1 академи медичних наук Украши»

ВПЛИВ ГЕПАТОПРОТЕКТОРА, ЯКИЙ М1СТИТЬ МАКУХУ РОЗТОРОПШ1, НА Б1ОХ1М1ЧН1 ПОКАЗНИКИ СЛИННИХ ЗАЛОЗ ЩУР1В З ТОКСИЧНИМ ГЕПАТИТОМ

При токсичному гепатитi в слинних залозах розвиваються запально-дистрофiчнi процеси, ят в значнш мiры можна попередити за допомогою гепатопротектора, який мiс-тить макуху розторопшi.

Ключовi слова: гепатит, слинт залози, гепатопротектор, розторопша.

G. Z. Boris1, A. I. Furdychko1, A. E. Denga2

1Lviv National Medical University named after Danylo Galytskij

2State Etablishment «The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery of the National Academy of Medical Science of Ukraine»

THE INFLUENCE OF HEPATOPROTECTOR, CONTAINING SILYBUM CAKE, UPON BIOCHEMICAL INDICES OF SALIVARY GLANDS IN RATS WITH TOXIC HEPATITIS

The aim. To determine the state of salivary glands at toxic hepatitis and influence of hepatoprotector, containing Silybum cake, using indices of biochemical markers of inflammation, microbe insemination and antioxidant protection.

The materials and methods. Toxic hepatitis was simulated in rats with sulfate hydrazine (50 mg/kg intraperitoneally during 3 days on the 8th, 9th and 10th days of the experiment). One of the groups of rats with toxic hepatitis got hepatoprotector, containing Silybum cake (the preparation "LeCaSyl". The contents: lecithin + Silybum cake + calcium citrate correlated as 1:1:1), dosed at 300 mg/kg from the first day of the experiment during 13 days. Euthanasia of animals was carried out on the 14th day. In salivary glands (parotid and submandibular) the contents of MDA, activity of elastase, urease and catalase were determined. According to correlation between the activity of catalase and contents of MDA the antioxidant-prooxidant index API was calculated. The contents of bilirubin, activity of ALT and alkaline phosphatase (AlP) were estimated in blood serum. The findings. The levels of hepatic markers (bilirubin, ALT and AlP) in blood serum really grew by 40, 85 and 372,5% correspondingly. The introduction of "LeCaSyl" normalized the indices of bilirubin and ALT and twice as reduced the index of AlP. In rats with toxic hepatitis in parotid glands the level of inflammatory markers and the index of microbe insemination really grew and the index API really reduced. The introduction of "LeCaSyl" normalized the level of MDA and API, reduced activity of elastase and increased activity of catalase. In subman-dibular gland at toxic hepatitis only activity of elastase did grow and index API really decreased. The introduction of "LeCaSyl" really reduced the level of MDA and really increased index API. The conclusion. At toxic hepatitis the inflammatory-dystrophic process develops in salivary glands, more expressed in parotid glands. The hepatoprotector, containing Silybum cake, has therapeutic and preventive influence not only on liver, but on salivary glands as well.

Key words: hepatitis, salivary glands, hepatoprotector, Silybum.

Установлена тесная связь состояния тканей полости рта от наличия патологических процессов в гепа-то-билиарной зоне (гепато-оральный синдром) [1-3]. Не исключено, что в патогенезе гепато-орального синдрома могут принимать участие слюнные железы, от функциональной активности которых, как известно, зависит и состояние тканей полости рта [4, 5].

По вопросу влияния гепато-билиарной патологии на функциональное состояние слюнных желез имеются лишь единичные работы [6, 7].

Целью настоящего исследования стало определение состояния слюнных желез при экспериментальном токсическом гепатите и воздействии гепатопро-тектора, содержащего жмых расторопши, с использованием показателей биохимических маркеров воспаления, микробного обсеменения и антиоксидантной защиты.

Материалы и методы исследования. Гепатоп-ротектор, содержащий жмых расторопши (препарат «ЛеКаСил»), был получен смешиванием лецитина подсолнечного (ТУ У 15.8-13903778-82-2000), жмыха из семян расторопши и цитрата кальция в соотношении 1:1:1 [8].

Эксперименты были проведены на 21 белой крысе линии Вистар (самки, 7 месяцев, средняя живая ма-са 216±13 г), распределенных в 3 равные группы: 1-ая - контроль (интактные), 2-ая и 3-я - токсический

© Борис Г. З, Фурдычко А. И., Деньга А. Э., 2016.

"Вiсник стоматологИ", № 4, 2016

гепатит (ТГ), который вызывали в/брюшинным введением раствора гидразин сульфата в дозе 50 мг/кг ежедневно в течение 3 дней на 8, 9 и 10-й дни опыта [8], и 3-я - дополнительно получала с первого дня опыта с кормом препарат «ЛеКаСил» в дозе 300 мг/кг.

Продолжительность опыта составила 14 дней. Эвтаназию животных осуществляли под тиопентало-вым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца. У крыс выделяли околоушную и подчелюстные слюнные железы и получали сыворотку крови.

В сыворотке крови определяли уровень печеночных маркеров - билирубина [10], аланинаминотранс-феразы (АЛТ) [10] и щелочной фосфатазы (ЩФ) [11]. В гомогенатах слюнных желез определяли уровень биохимических маркеров воспаления [12]: содержание малонового диальдегида (МДА) и активность эла-

стазы, маркер микробного обсеменения - активность уреазы [13] и показатель антиоксидантной защиты -активность каталазы [12]. По соотношению активности каталазы и содержания МДА рассчитывали антио-кидантно-прооксидантный индекс АПИ [12].

Результаты исследований подвергали стандартной статобработке [14].

Результаты и их обсуждение. В табл. 1 представлены результаты определения в сыворотке крови уровня печеночных маркеров, которые свидетельствуют о развитии токсического гепатита. Так, содержание билирубина увеличилось на 39,9 %, активность АЛТ на 84,6 % и активность ЩФ увеличилась в 4 раза. Введение препарата «ЛеКаСил» снизило уровень всех трех печеночных маркеров: билирубина на 20,4 %, АЛТ - на 56,9 % и ЩФ на 48,9 %, что подтвердило его гепатопротекторные свойства.

Таблица 1

Влияние препарата «ЛеКаСил» на уровень «печеночных» маркеров в сыворотке крови крыс при гидразиновом гепатите (М±т, п=7)

Показатели Гр. 1 Гр. 2 Гр. 3

Контроль Токсический гепатит (ТГ) ТГ + ЛеКаСил

Билирубин, мк-моль/л 2,38±0,24 3,33±0,15 р<0,05 2,65±0,81 р>0,3; р1>0,05

АЛТ, мк-кат/л 0,39±0,05 0,72±0,04 р<0,01 0,31±0,03 р>0,05; р1<0,001

ЩФ, мк-кат/л 1,60±0,11 6,56±0,40 р<0,01 3,35±0,44 р<0,05; р1<0,01

Применение : р - в сравнении с гр. 1; р1 - в сравнении с гр. 2.

Таблица 2

Влияние препарата «ЛеКаСил» на биохимические показатели околоушной железы крыс при токсическом гепатите (М±т, п=7)

Показатели Контроль Токсический гепатит (ТГ) ТГ + ЛеКаСил

МДА, ммоль/кг 23,4±1,5 31,9±2,7 25,5±0,5

р<0,05 р>0,05; р1<0,05

Эластаза, мк-кат/кг 32,3±2,3 62,2±1,6 55,2±3,3

р<0,001 р<0,001; р1<0,05

Уреаза, мк-кат/кг 0,35±0,06 0,80±0,21 0,76±0,28

р<0,05 р>0,05; р1>0,5

Каталаза, мкат/кг 4,28±0,10 4,00±0,11 4,59±0,08

р>0,05 р<0,05; р1<0,05

АПИ 1,83±0,06 1,25±0,05 1,80±0,06

р<0,01 р>0,3; р!<0,01

Применение : см. табл. 1.

В таблице 2 представлены результаты определения ряда биохимических показателей в околоушной железе крыс с токсическим гепатитом. Видно, что при гепатите достоверно возрастает уровень маркеров воспаления (МДА и эластазы), маркера микробного обсеменения (уреазы) и несколько снижается активность каталазы, что дает достоверное снижение показателя АПИ. Введение ЛеКаСила достоверно снижает уровень маркеров воспаления, достоверно повышает активность каталазы и индекс АПИ, однако не влияет на уровень уреазы.

В таблице 3 представлены результаты определения биохимических показателей в подчелюстной же-

лезе крыс с токсическим гепатитом. Видно, что достоверно возрастает лишь активность эластазы и достоверно снижается индекс АПИ, что может свидетельствовать о большей резистентности подчелюстной железы к токсическому воздействию со стороны печени. Введение ЛеКаСила достоверно снижает уровень МДА и достоверно повышает индекс АПИ. Активность эластазы хотя и снижается на 11,1 %, однако р>0,05; активность уреазы снижается на 32,2 % (однако р>0,05).

Таким образом, нами установлено, что при токсическом гепатите наблюдаются патологические процессы в слюнных железах: развитие воспаления, уве-

"BicHUK стоматологи", № 4, 2016

личение микробной обсемененности, снижение уровня антиоксидантной защиты, причем более чувствительными к гепатотоксичности оказались околоушные железы.

Введение гепатопротектора «ЛеКаСил» оказывает защитное действие на слюнные железы, возможно, опосредованно путем нормализации состояния печени.

Таблица 3

Влияние препарата «ЛеКаСил» на биохимические показатели подчелюстной железы крыс при токсическом гепатите (M±m, п=7)

Показатели Контроль Токсический гепатит (ТГ) ТГ + ЛеКаСил

МДА, ммоль/кг 14,3±0,4 15,2±0,7 13,2±0,2

р>0,05 р<0,05; р1<0,05

Эластаза, мкат/кг 2,90±0,39 3,97±0,17 3,53±0,19

р<0,05 р>0,05; р1>0,05

Уреаза, мк-кат/кг 0,92±0,25 1,21±0,23 0,72±0,28

р>0,3 р>0,3; р1>0,05

Каталаза, мкат/кг 6,21±0,10 5,95±0,20 6,06±0,06

р>0,05 р>0,05; р!>0,3

АПИ 4,34±0,13 3,91±0,15 4,59±0,18

р<0,05 р>0,05; р1<0,05

Применение : см. табл. 1.

В свете полученных нами данных, можно говорить о том, что наблюдаемые при гепатите изменения в тканях полости рта могут быть, в определенной степени, следствием развития патологических процессов в слюнных железах.

Выводы. 1. При токсическом гепатите развиваются в слюнных железах воспалительные процессы, увеличивается микробная обсемененность и снижается уровень антиоксидантной защиты, более выраженные в околоушных железах.

2. Гепатопротектор, содержащий жмых расторо-пши («ЛеКаСил»), оказывает не только гепатопротек-торное, но саливопротекторное действие, снижая степень воспаления и микробной обсемененности и повышая антиоксидантный уровень в слюнных железах.

Список литературы

1. Результаты сравнительного исследования микрофлоры содержимого зубодесневой бороздки в области интактных зубов у практически здоровых пациентов и больных, инфицированных вирусным гепатитом / В. Н. Трезубов, Г. Е. Афиногенов, А. А. Домо-рад [и др.] // Пародонтология. - 2003. - № 3 (28). - С. 32-35.

2. Левицкий А. П. Гепато-оральный синдром / А. П. Левицкий, С. А. Демьяненко. - Симферополь, 2012. - 140 с.

3. Очкор1з Х. А. Аспекти стоматолопчного здоров'я пащен-■пв iз хрошчним гепатитом С. Огляд л^ератури / Х. А. Сiчкорiз, Р. М. Гшдь // Новини стоматологи. - 2015. - № 2 (83). - С. 50-53.

4. Афанасьев В. В. Состояние слюнных желез и слизистой оболочки рта у больных хроническим активным гепатитом / В. В. Афанасьев, А. В. Муромцев, Н. В. Деркач // Стоматология. - 2008. - № 2. - С. 31-33.

5. Пруткина Е. В. Сравнительная оценка функциональных проб печени / Е. В. Пруткина, Н. Н. Цыбиков // Сибирский вестник гепатологии и гастроэнтерологии. - 2007. - № 21. - С. 8-11.

6. Труфанов С. Ю. Концентращя iмуноглобулiнiв у реногло-тичному секрет хворих на хрошчний пародонтит, сполучений з хрошчною патолопею гепатобшарно! системи / С. Ю. Труфанов // Укра1нський медичний альманах. - 2009. - т. 12, № 2. - С. 181-183.

7. Биохимические маркеры воспаления и дисбиоза в слюне больных холециститом / А. П. Левицкий, С. А. Демьяненко, П. И. Пус-товойт [и др.] // Вкник стоматологи. - 2011. - № 1 (74). - С. 21-23.

8. Биофлавоноидные гепатопротекторы / А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, Е. М. Левченко [и др.]. - Одесса: КП ОГТ, 2014. - 86 с.

9. Пустовойт П. И. Клинико-экспериментальное обоснование применения ингибиторов протез при заболеваниях желчевыводя-щих путей: дис. ... кандидата мед. наук / Пустовойт Петр Иванович. - Одесса, 1983. - 210 с.

10. Горячковский А. М. Клиническая биохимия в лабораторной диагностике / A. M. Горячковский. - Изд. 3-е исп. и доп. -Одеса: Еколопя, 2005. - 616 с.

11. Экспериментальные методы исследования стимуляторов остеогенеза: методические рекомендации / А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, О. В. Деньга [и др.] - К.: ГФЦ, 2005. - 50 с.

12. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: методические рекомендации / А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко [и др.] - Одесса: КП ОГТ, 2010. - 16 с.

13. Гаврикова Л. М. Уреазная активность ротовой жидкости у больных с острой и одонтогенной инфекцией челюстно-лицевой области / Л. М. Гаврикова, И. Т. Сегень // Стоматология. - 1996. -Спецвыпуск. - С. 49-50.

14. Трухачева Н. В. Математическая статистика в медико-биологических исследованиях с применением пакета Statistica / Трухачева Н. В.. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 379 с.

REFERENCES

1. Trezubov V. N., Afinogenov G. E., Domorad A. A. [i dr.].

The results of the comparative study of microflora of the contents of dentogingival sulcus near intact teeth in apparently healthy patients and the ones, infected with viral hepatitis. Parodontologiya. 2003; 3(28): 3235.

2. Levitsky A. P., Demyanenko S. A. Gepato-oralny sindrom [Hepato-oral syndrome]. Simferopol, 2012: 140.

3. Sichkoriz H. A., Gnid' R. M. The aspects of the stomatological state of patients with the clinical hepatitis C. Literary review. Novyny stomatologic. 2015; 2(83): 50-53.

4. Afanas'ev V. V., Muromtsev A. V., Derkach N. V. The state of salivary glands and oral mucous membrane in patients with chronic active hepatitis. Stomatologiya. 2008; 2: 31-33.

5. Prutkina E. V., Tsybikov N. N. The comparative estimation of the liver functional tests. Sibirskiy vestnik gepatologii i gastroenterologii. 2007; 21: 8-11.

6. Trufanov S. Yu. The concentration of immunoglobulins in renopharyngeal secret of patients with chronic periodontitis, simultaneous to chronic pathology of hepatobiliary system. Ukrai'ns'kyj medychnyj al'manah. 2009; 12(2): 181-183.

7. Levitsky A. P., Demyanenko S. A., Pustovoyt P. I. [i dr.]. Biochemical markers of inflammation and dysbiosis in saliva of patients with cholecystitis. Visnik stomatologii. 2011; 1(74): 21-23.

8. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Levchenko O. M. [i dr.]. Bioflavonoidnye gepatoprotektory [Bioflavonoid hepatoprotectors]. Odessa: KP OGT, 2014: 86.

9. Pustovoyt P. I. Kliniko-eksperimental'noe obosnovanie primeneniya ingibitorov protez pri zabolevaniyakh zhelchevyvodyashchikh putey [Clinical-experimemtal substantiation of the use of inhibitors of proteases at the diseases of bile passages: author's abstract of candidate's thesis in medicine]. Candidate's thesis in medicine. Оdеssа, 1983: 210.

"BicnuK стоматол огИ ", № 4, 2016

10. Goryachkovskiy A. M. Klinicheskaya biokhimiya v laboratornoy diagnostike [The clinical biochemistry in laboratorial diagnostics] [3rd ed.]. Odessa, Ekologiya, 2005: 616.

11. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Denga O. V. [i dr.]. Eksperimentalnye metody issledovaniya stimulyatorov osteogeneza: metodicheskie rekomendatsii [The experimental methods of the study of osteogenesis stimulators]. Kiev, GFK, 2005:50.

12. Levitsky A. P., Denga O. V., Makarenko O. A. [i dr.]. Biokhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodicheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral cavity tissue: method guidelines]. Odessa, KP OGT, 2010:16.

13. Gavrikova L. M., Segen I. T. Urease activity of oral liquid in patients with acute odontogenic infection of maxillo-facial part. Stomatologiya. 1996; The extra issue :49-50.

14. Truhacheva N. V. Matematicheskaja statistika v mediko-biologicheskih issledovanijah s primeneniem paketa Statistica [Mathematical Statistics in biomedical research using application package Statistica]. Moskva, GJeOTAR-Media, 2012: 379.

Поступила 25.11.16

УДК 616.31+612.31+616.98+615.97

И. В. Гинжул, С. А. Шнайдер, д. мед. н., И. А. Селиванская, к. тех. н.

Государственное учереждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины»

ВЛИЯНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРА, СОДЕРЖАЩЕГО ЖМЫХ РАСТОРОПШИ, НА СОСТОЯНИЕ СЛИЗИСТОЙ

ОБОЛОЧКИ ЩЕКИ КРЫС С ТОКСИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ

При токсическом гепатите в слизистой полости рта крыс развивается воспаление, дисбиоз и снижение неспецифического иммунитета. Гепатопротектор, содержащий жмых расторопши, оказывает мукозопротекторное действие, не уступая препарату Квертулин.

Ключевые слова: гепатит, слизистая полости рта, расто-ропша, гепатопротектор, дисбиоз.

I. В. Пнжул, С. А. Шнайдер, I. О. Селiванська

Державна установа «1нститут стоматологи та щелепно-лицево! хiрурril Нацюнально! академи медичних наук Украши»

ВПЛИВ ГЕПАТОПРОТЕКТОРА З ВМ1СТОМ МАКУХИ РОЗТОРОПШ1 НА СТАН СЛИЗОВО1 ОБОЛОНКИ ЩОКИ ЩУР1В З ТОКСИЧНИМ ГЕПАТИТОМ

При токсичному геnатитi в слизовш оболонц порожнини рота щурiв розвиваеться запалення, дисбюз та пригтчення несnецифiчного iмунiтету. Гепатопротектор з вмiстом макухи розтороnшi здтснюе мукозопротекторну дю, не поступаючись препарату Квертулт.

КлючовI слова: гепатит, слизова порожнинирота, розто-ропша, гепатопротектор, дисбiоз.

I. V. Ginzhul, S. A. Shnayder, I. A. Selivanskaya

State Etablishment «The Institute of Stomatology and Maxillo-Facial Surgery of the National Academy of Medical Science of Ukraine»

THE INFLUENCE OF HEPATOPROTECTOR, CONTAINING SILYBUM CAKE, UPON THE STATE OF MUCOUS MEMBRANE OF CHEEK OF RATS WITH TOXIC HEPATITIS

The aim. To determine the mucous protective effect of hepatoprotector, containing Silybum cake, upon oral mucous membrane at toxic hepatitis, in comparison to quercethin containing preparation quertulin.

The materials and methods. Toxic hepatitis was restored with the help of sulfate hydrazine. Hepatoprotectors LeCaSil (lecithin + Silybum cake + calcium citrate) and Quertulin (quercethin + inulin + calcium citrate) were introduced per os dosed at 300 mg/kg. The state of liver was estimated according to the level of hepatic markers in blood serum: bilirubin, ALT and alkaline phosphatase (AlP). The state of oral mucous membrane was evaluated by the level of inflammatory markers: the contents of MDA and activity of elastase, by the level of microbe insemination (activity of urease), the state of nonspecific immunity (activity of lysozyme), the level of antioxidant protection (activity of catalase and index API). The degree of dysbiosis was estimated by the correlation between relative activities of urease and lysozyme.

The findings. At toxic hepatitis in blood serum the level of hepatic markers (bilirubin, ALT, AlP) increases. It reduces under the influence of the introduction of hepatoprotectors, at that in greater degree under the influence of LeCaSyl. At toxic hepatitis in mucous membrane of cheek the level of inflammatory markers, the index of microbe insemination, the activity of cata-lase and the index API grow, but the activity of lysozyme decreases by 3.5 times. Both hepatoprotectors reduce all indices except lysozyme, the activity of which increases by 1.8-2.0 times. The essential difference in mucous protective effect of both hepatoprotectors was not found with the exception of the stronger antioxidant effect of Quertulin.

The conclusion. At toxic hepatitis the stomatitis and dysbiosis, conditioned by the reduction of the level of nonspecific immunity, develops. The hepatoprotector, containing Silybum cake, displays hepatoprotective and mucous protective effect, not being worse than Quertulin.

Key words: hepatitis, oral mucous membrane, Silybum, hepatoprotector, dysbiosis.

Установлено, что при гепато-оральном синдроме наблюдаются патологические процессы в слизистой оболочке полости рта, обусловленные нарушением антимикробной функции печени [1].

Для восстановления антимикробной функции печени предложено использовать препарат квертулин, который содержит кверцетин, инулин и цитрат кальция [2]. Недостатком этого препарата является его высокая стоимость, обусловленная использованием кверцетина.

Нами предложен новый гепатопротектор «ЛеКа-Сил», в котором вместо кверцетина используется жмых из семян расторопши, который содержит

© Гинжул И. В., Шнайдер С. А., Селиванская И. А., 2016.