Влияние биотрита на состояниеслизистой оболочки полости рта крыс при токсическом гепатите на фоне дисбиоза Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

4

"BicHUK стоматологИ", № 1, 2010

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ТЕОРЕТИЧНИЙ РОЗД1Л

УДК 613.34-008.82+616.34-002-022-07.616.31-018.73

С. А. Демьяненко, к. мед. н., А. П. Левицкий, д. биол. н., О. А. Макаренко, к. биол. н.

ГУ "Институт стоматологии АМН Украины"

ВЛИЯНИЕ БИОТРИТА НА СОСТОЯНИЕ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА КРЫС ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ НА ФОНЕ ДИСБИОЗА

У крыс воспроизводили токсический гепатит (после введения гидразина) на фоне дисбиоза (после введения линкомицина) и установили по биохимическим маркерам развитие дисбиоза и воспалительно-дистрофических процессов в слизистой полости рта. Предварительное введение препарата адаптогена из проростков пшеницы "Биотрит" оказывало лечебно-профилактическое действие.

Ключевые слова: гепатит, дисбиоз, слизистая полости рта, биотрит, воспаление.

С. О. Дем 'яненко, А. П. Левицький, О. А. Макаренко

ДУ «1нститут стоматологи АМН Украши»

ВПЛИВ Б1ОТРИТУ НА СТАН СЛИЗОВО1 ОБОЛОНКИ ПОРОЖНИНИ РОТА ЩУР1В ПРИ ТОКСИЧНОМУ ГЕПАТИТ НА ТЛ1 ДИСБ1ОЗУ

У щурiв вiдтворювали токсичний гепатит (тсля вве-дення гiдразину) на тлi дисбюзу (тсля введення лiн-комщину) i встановили за бiохiмiчними маркерами розвиток дисбюзу та запально-дистрофiчних проце-сiв в слизовт порожним рота. Попередне введення препарату адаптогена з паросттв пшеницi "Бю-трит " виявило лiкувально-профiлактичну дiю. Ключовi слова: гепатит, дисбюз, слизова порожнини рота, бютрит, запалення.

S. A. Demianenko, A. P. Levitskij O. A. Makarenko

SE "the Institute of Dentistry of the AMS of Ukraine"

THE INFLUENCE OF BIOTRITIS UPON THE STATE OF ORAL MUCOUS MEMBRANE IN RATS' AT TOXIC HEPATITIS SIMULTANEOUS TO DISBIOSIS

Toxic hepatitis was simulated in rats (after the introduction of hydrazine) simultaneous to disbiosis (after the introduction of lincomycin). The development of disbiosis and inflammatory-dystrophic processes in oral mucosa were determined according to biochemical markers. The preliminary introduction of the adaprogene preparation

made from germinating wheat "Biotritis " was of treating andpreventive effect.

Key words: hepatitis, disbiosis, oral mucosa, "Biotritis ", inflammation.

Дисбиотические явления играют важную роль в патогенезе многих инфекционных и даже неинфекционных заболеваний [1]. Не являются исключением в этом плане и стоматологические заболевания [2, 3].

Установлено, что в регуляции микробиоценоза и устранении явлений дисбиоза (дисбакте-риоза) весьма значительную роль играет печень, являющаяся барьером на пути следования из кишечника бактерий и их токсинов [4, 5].

Ранее нами было показано участие в регуляции микробиоценоза, устранении дисбиотиче-ских явлений и восстановлении функций печени различных фитоадаптогенов [6, 7].

Одним из таких адаптогенов является биотрит — препарат полифенольных соединений (главным образом, биофлавоноидов) из проростков пшеницы, который обладает лечебно-профилактическими свойствами при стоматологических заболеваниях [8].

Цель настоящего исследования. Определение лечебно-профилактической эффективности биотрита в отношении слизистой оболочки полости рта при сочетании токсического гепатита с кишечным дисбиозом.

Материалы и методы исследования. Опыты были проведены на 24 белых крысах линии Вистар (самцы в возрасте 1 месяц, живой массой 50±3 г), которых разделили на 3 группы

1 — интактные (норма), которые получали стандартный полнофункциональный комбикорм в течение 22 дней;

2 — опытные без лечения, у которых с 13-го дня опыта воспроизводили экспериментальный дисбиоз путем введения с питьевой водой в течение 5 дней антибиотика линкомицина в дозе 50 мг/кг живой массы [9]. На 21-й день опыта 7 крыс этой группы воспроизводили токсический гепатит путем однократного внутримышечного введения гидразина гидрохлорида в дозе 100 мг/кг [10];

3 — опытная группа, которая получала с первого дня эксперимента биотрит с кормом (био-трит, диетическая добавка, ТУ У 13903778-41-96, заключение МЗУ № 05.03.02-06/64910 от 29.12.2006 г.). Начиная с 13-го дня опыта, крысы этой группы получали с питьевой водой в течение 5 дней линкомицин для воспроизведения

© Демьяненко С. А., Левицкий А. П., Макаренко О. А., 2010

"Вiсник стоматологИ", № 1, 2010

5

дисбиоза, а на 21-й день эксперимента гидразин гидрохлорид для воспроизведения гепатита.

Умерщвление всех животных осуществляли на 23-й день опыта под тиопенталовым наркозом путем тотального кровопускания из сердца. За стуки до этого животные не получали никаких препаратов и были лишены пищи, однако имели доступ к воде.

У животных иссекали слизистую щеки и языка и хранили до исследования при -300С.

Гомогенаты слизистой готовили из расчета 50 мг ткани на 1 мл 0,05М трис-НС1 буфера 7,5 и использовали для биохимических исследований надосадочную жидкость, полученную после центрифугирования гомогената в центрифуге РС-6 при 2500 об/мин в течение 30 минут при +40С.

Определяли концентрацию малонового ди-альдегида (МДА) [11], общую протеолитическую активность (ОПА) по расщеплению казеина при рН 7,6 [12], активность каталазы [13], уреазы

[14], лизоцима [15], а также концентрацию растворимого белка [16].

По соотношению активности каталазы и концентрации МДА рассчитывали антиокси-дантно-прооксидантный индекс АПИ по формуле [17]:

АПИ = Катх10 / [МДА].

По соотношению относительных активностей уреазы и лизоцима рассчитывали степень дисбиоза по методу Левицкого и др. [18].

Результаты исследования и их обсуждение. На рис. 1 и 2 представлены результаты определения уровня ОПА и МДА, которые являются маркерами воспаления [19]. Из этих данных видно, что в слизистой щеки и языка при воспроизведении гепатита на фоне дисбиоза развиваются воспалительно-дистрофические процессы, о чем свидетельствует достоверное увеличение уровня маркеров воспаления. Предварительное введение биотрита достоверно понижает степень воспаления (в слизистой языка практически до нормы).

Рис. 1. Влияние биотрита на уровень маркеров воспаления в слизистой щеки крыс при моделировании гепатита на фоне дисбиоза (Н - норма, Д+Г - дисбиоз+гепатит, Б - биотрит).

Рис. 2. Влияние биотрита на уровень маркеров воспаления в слизистой языка крыс при моделировании гепатита на фоне дисбиоза (Н - норма, Д+Г - дисбиоз+гепатит, Б - биотрит).

В табл. 1 и 2 представлены результаты опре- слизистой щеки и языка у крыс с дисбио-деления некоторых биохимических показателей зом+гепатитом и влияние на эти показатели био-

6

"Вiсник стоматологИ", № 1, 2010

трита. Как видно из представленных данных при сочетанной патологии достоверно снижается активность каталазы, лизоцима и индекс АПИ, а степень дисбиоза в слизистых значительно увеличивается. Предварительное введение биотрита достоверно повышает индекс АПИ и снижает

степень дисбиоза в слизистой щеки и языка, причем в щеке индекс АПИ увеличивается, главным образом, за счет роста активности каталазы, а в языке степень дисбиоза снижается, в основном, за счет значительного увеличения активности лизоцима.

Таблица 1

Влияние биотрита на биохимические показатели слизистой щеки крыс, у которых моделировали дисбиоз+гепатит

Показатели Норма Дисбиоз+гепатит Дисбиоз+гепатит +биотрит

Растворимый белок, г/кг 29,0±3,1 33,9±2,2 Р>0,1 28,8±2,7 р>0,9 р1>0,05

Каталаза, мкат/кг 9,0±0,1 8,3±0,2 Р<0,05 9,7±0,3 р>0,5 р1<0,001

Уреаза, мк-кат/кг 1,50±0,26 2,22±0,28 Р>0,05 1,65±0,18 р>0,3 р1>0,05

Лизоцим, ед/кг 620±57 391±39 Р<0,05 450±45 р<0,05 р1>0,1

Индекс АПИ 5,7±0,3 4,2±0,3 р<0,01 5,8±0,4 р>0,8 р1<0,05

Степень дисбиоза 1,0±0,1 2,4±0,2 р<0,001 2,0±0,2 р<0,01 р1>0,1

Примечание : р - показатель достоверности различий с нормой;

р1 - показатель достоверности различий с группой Д+Г.

Таблица 2

Влияние биотрита на биохимические показатели слизистой языка крыс, у которых моделировали дисбиоз+гепатит

Показатели Норма Дисбиоз+гепатит Дисбиоз+гепатит +биотрит

Растворимый белок, г/кг 39,3±1,4 42,7±2,7 р>0,1 44,1±0,9 р<0,05 р1>0,3

Каталаза, мкат/кг 4,3±0,1 3,7±0,1 р<0,01 3,9±0,1 р<0,01 р1>0,05

Уреаза, мк-кат/кг 2,14±0,15 2,33±0,27 р>0,4 1,94±0,22 р>0,3 р1>0,1

Лизоцим, ед/кг 205±25 20±5 р<0,001 150±20 р>0,05 р1<0,001

Индекс АПИ 2,7±0,1 1,8±013 р<0,001 2,4±0,2 р>0,05 р1<0,05

Степень дисбиоза 1,0±0,1 10,9±1,4 р<0,001 1,2±0,2 р>0,3 р1<0,001

Примечание : р - показатель достоверности различий с нормой;

р1 - показатель достоверности различий с группой Д+Г

"Bíchuk стоматологИ'", № 1, 2010

Выводы. 1. Сочетанная патология печени и кишечный дисбиоз вызывают развитие воспалительно-дистрофических процессов в слизистой полости рта.

2. Фитоадаптоген биотрит оказывает лечебно-профилактическое действие в отношении слизистой полости рта при моделировании гепатита и дисбиоза.

Список литературы

1. Левицкий А.П., Волянский Ю.Л., Скидан

К.В. Пребиотики и проблема дисбактериоза. - Харьков: ЭДЭНА, 2008. - 100 с.

2. Левицький А.П., Дем'яненко С.О., Романова Ю.Г. Вплив дисбюзу на розвиток експериментально-го стоматиту у щурiв // Одеський медичний журнал. -2009. - № 2 (112). - С. 15-17.

3. Левицкий А.П., Демьяненко С. А. Роль печени в патогенезе и лечении стоматологических заболеваний // Вюник стоматологи. - 2008. - № 5-6. -С. 124-128.

4. Яковлев М.Ю. Роль кишечной микрофлоры и недостаточности барьерной функции печени в развитии эндотоксинемии и воспаления // Казанский медицинский журнал. - 1988. - Т. 69,№ 5. - С. 353-358.

5. Guarner C. Bacterial translocation and its conse-quenceс in patients with cirrhosis / C. Guarner, G. Soriano // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. - 2005. - V. 17, № 1. - Р. 27-31.

6. Левицкий А.П., Демьяненко С.А., Скиба В.Я. Гепатопротекторные свойства биофлаваноидов // Вюник стоматологи. - 2008. - № 4. - С. 21-22.

7. Левицкий А.П. Полифенольные вещества как регуляторы микробного гомеостаза // Вюник стоматологи. - 2008. - № 4. - С. 19-21.

8. Молекулярные механизмы лечебно - профилактического действия биофлаваноидов / Макаренко О.А., Левицкий А.П., Россаханова Л.Н., Кнава О.Э., Ходаков И.В. // Патолопя. - 2008. - Т. 5, № 2. - С. 17.

9. Пат. № 31012 Украша, А61Р31/00. Споаб мо-делювання дисбюзу (дисбактерюзу) / Левицький А.П., Селиванська 1.О., Щсельський Ю.В., Почтар В.М., Розсаханова Л.М., Гулавський В.Т. - 2008. -Бюл. № 6.

10. Пустовойт П.И. Клинико-экспериментальное обоснование применения ингибиторов протеаз при заболеваниях желчевыводящих путей: Дис. ... канд. мед. наук. - Одесса, 1983. - 210 с.

11. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тио-барбитуровой кислоты. В кн.: "Современные методы в биохимии". - М.: Медицина, 1977. - С. 66-68.

12. Барабаш Р.Д., Левицкий А.П. Казеинолити-ческая и БАЭЭ-эстеразная активность слюны и слюнных желез крыс в постнатальном онтогенезе // БЭ-БИМ. - 1973. - № 8. - С. 65-67.

13. Гирин С.В. Модификация метода определения активности каталазы в биологических субстратах / Лабораторная диагностика. - 1999. - № 4. - С. 45-46.

14. Гаврикова Л.М., Сегень И.Т. Уреазная активность ротовой жидкости у больных с острой одон-

7

тогенной инфекцией челюстно-лицевой области // Стоматология. - 1996. - Спец. вып. - С. 49-50.

15. Левицкий А.П. Лизоцим вместо антибиотиков. - Одесса: КП ОГТ, 2005. - 74 с.

16. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.Y., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. - 1951. - V. 193. - P. 265-275.

17. Левицький А.П., Почтар В.М., Макаренко О.А., Гридша Л.1. Антиоксидантно-прооксидантний шдекс сироватки кровi щурiв з експериментальним стоматитом i його корекщя зубними елшсирами // Одеський медичний журнал. - 2006. - № 6. - С. 22-25.

18. Левицкий А.П., Макаренко О.А., Селиван-ская И.А., Россаханова Л.Н., Деньга О.В., Почтарь В.Н., Скидан К.В., Гончарук С.В. Ферментативный метод определения дисбиоза полости рта для скрининга про- и пребиотиков: Метод. рекомендации. -К.: ГФЦ МЗУ, 2007. - 26 с.

19. Маркеры воспаления в тканях полости рта при экспериментальном дисбактериозе / Левицкий А.П., Макаренко О. А., Россаханова Л.Н., Кнава О.Э., Романова Ю.Г., Ткачук Н.И. // Патолопя. - 2008. -Т. 5, № 2. - С. 16.

Поступила 25.12.09.

УДК 616-092.4:616.314-083+616.31-022-07

Т. П. Терешина, д. мед. н., О.В. Пивень, Н.В.Мозговая, к. мед. н..

ГУ «Институт стоматологии АМН Украины» Одесский медицинский государственный университет

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ОТБЕЛИВАЮЩИХ СИСТЕМ НА ТВЕРДЫЕ ТКАНИ ЗУБА

Отбеливание зубов в настоящее время является весьма востребованным стоматологическим вмешательством. Однако, несмотря на достигнутый эстетический эффект, возникающие после отбеливания осложнения являются серьезной проблемой. Цель исследования заключалась в изучении деминерализующего действия на эмаль зуба компонентов отбеливания, заложенных в отбеливающих системах. Установлено, что у животных, зубы которых обрабатывали перекисью карбамида, высокая интенсивность и распространенность кариеса, что свидетельствует о том, что процессы деминерализации преобладают над процессами реминерализации. Ключевые слова: отбеливание зубов, пероксид карбамида, деминерализация эмали, кариес.

© Терешина Т. П., Пивень О. В., МозговаяН. В., 2010