CC BY
31
Цель исследования
Оценить снотворный и анальгетический эффекты мелатонина.
Материалы и методы
Критериями включения в исследование явились: возраст от 20 до 35 лет, наличие патологического прелиминарного периода, доношенный срок беременности, одноплод-ная беременность, головное предлежание. Критерии исключения: индивидуальная непереносимость, летний период, нарушение плацентарного кровообращения по данным допплерометрии, гипотрофия плода, нарушение функционального состояния плода, тяжелая акушерская и экстрагенитальная патология. В соответствии с критериями включения и исключения в исследование были включены 20 пациенток. С целью предоставления медикаментозного сна-отдыха применяли мелатонин в дозировке 3 мг перорально в ночные часы от 23 : 00 до 01 : 00. Снотворный эффект определяли с помощью шкалы сна Левина Я.И., интенсивность боли оценивали в соответствии 11-балльной цифровой рейтинговой шкалы.
Результаты
Оценка сна по шкале Левина показала, что у 85 % беременных сон был нормальный, продолжительностью 3,5-4,5 часа, а у 15 % — сон был пограничный, продолжительностью 2-3 часа. Цифровая рейтинговая шкала, с помощью которой оценивали интенсивность
боли при поступлении пациентки, показала, что 4 беременные отмечали незначительную боль, 14 — умеренную боль и 2 - выраженную. После приема мелатонина 70 % пациенток отметили снижение интенсивности боли до незначительной, 10 % — до умеренной. У каждой третьей пациентки родовая деятельность развилась через 6 часов после приема мелатонина, у 20 % — через 3 часа, у 15 % — через 10 часов, у 15 % — через 11 часов, у 10 % — через 23 часа, у 5 % — через 19 часов. Через естественные родовые пути родили 80 % пациенток. В 20 % случаев роды закончены операцией кесарева сечения в связи с развитием аномалии родовой деятельности и клиническим несоответствием между размерами головки плода и таза матери. Следует отметить, что у женщин, ро-доразрешенных абдоминальным путем, родовая деятельность развилась через 19 и 23 часа после приема мелатонина.
Выводы
Полученные данные позволяют предположить эффективность применения мела-тонина с целью предоставления медикаментозного сна-отдыха для регуляции суточного ритма сна и бодрствования у беременных при патологическом прелиминарном периоде. Регуляция суточного ритма, в свою очередь, положительно сказывается на последующем развитии родовой деятельности. Однако для более глубокого изучения влияния мелатони-на требуются дальнейшие исследования.
влияние фрагментации днк сперматозоидов на эффективность оплодотворения и развитие эмбрионов человека, культивируемых in vitro
© М.А. Мазилина1,2, Е.М. Комарова2, Е.А. Лесин2, И.Д. Мекина2, А.М. Гзгзян1,2, В.С. Баранов2
1 ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный университет», Санкт-Петербург, Россия;
2 ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург
Бесплодие — одна из самых актуальных проблем современной биологии и медицины. Среди супружеских пар частота бесплодия во многих странах достигает 15 %. Разработка и внедрение в медицинскую практику методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) во многих случаях позволяет преодолеть бесплодие, тем не менее только около 30 % попыток экстракорпорального оплодотворения заканчиваются наступлением беременности.
Вопрос о влиянии фрагментации ДНК сперматозоидов на эффективность оплодотворения и раннее эмбриональное развитие как in vivo, так и in vitro остается открытым. Некоторые факторы, такие как различные методы детекции повреждений ДНК сперматозоидов, отсутствие стандартизированных методик и разнообразие критериев включения пациентов в группы исследования, приводят к противоречию результатов.
■ ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕЙ
ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017
ISSN 1684-0461
Целью данного исследования являлось изучение влияния фрагментации ДНК сперматозоидов на эффективность оплодотворения и доимплантационное развитие эмбрионов, культивируемых in vitro.
Материалом для исследования послужили 65 эмбриологических протоколов оплодотворения ооцитов супружеских пар, обратившихся в НИИ АГиР им. Д.О. Отта в связи с бесплодием. В 29 протоколах оплодотворение ооцитов проводили методом ЭКО, в 36 — методом внутрицитоплазматической инъекции сперматозоида в ооцит (метод ICSI). Выбор метода оплодотворения зависел от показателей спермиологического анализа. Эффективность оплодотворения рассчитывалась как отношение двупронуклеарных зигот к числу полученных ооцит-кумулюсных комплексов, выраженное в %. Показатель качества эмбрионов рассчитывали как отношение числа эмбрионов высшего качества на 3-4-е сутки развития (Grade 4, Tao et al., 2002) к числу двупронукле-арных зигот, выраженное в %. Перенос эмбрионов был осуществлен на 3-5-й дни развития.
В ходе данного исследования в 65 образцах эякулята, использованных для оплодотворения, была оценена доля сперматозоидов с фрагментированной ДНК. Для оценки фрагментации ДНК сперматозоидов использовался метод флуоресцентного мечения одно- и двунитевых разрывов ДНК TUNEL (Terminal deoxynucleotidil transferase (TdT)-mediated dUTP Nick and Labelling).
В данном исследовании между долей сперматозоидов с фрагментированной ДНК и эффективностью оплодотворения была выявлена отрицательная взаимосвязь вне зависимости от метода оплодотворения r = -0,33 (p = 0,01). При этом в группе пациентов, для которых оплодотворение проводили методом ЭКО, коэффициент корреляции составил r = -0,35 (p = 0,05), в группе ICSI — r = -0,34 (p = 0,04).
Пациентов разделили на две группы в зависимости от показателя эффективности оплодотворения <70 % и > 70 %. В группе пациентов с эффективностью оплодотворения <70 % доля сперматозоидов с фрагментиро-ванной ДНК была выше, чем в группе пациентов с эффективностью оплодотворения > 70 % (14,45 ± 14,89 vs. 7,47 ± 5,74; p = 0,02).
Было проанализировано влияние доли сперматозоидов с фрагментированной ДНК
на показатель качества эмбрионов. Не было обнаружено корреляции между долей сперматозоидов с фрагментированной ДНК и долей эмбрионов высшего качества, как при учете всех циклов (r = 0,03; p = 0,82), так и при разделении циклов в зависимости от метода оплодотворения (ICSI: r = -0,14; p = 0,42; ЭКО: r = 0,09; p = 0,67).
В данном исследовании между группами, сформированными по доле эмбрионов высшего качества (< 50 % и > 50 % соответственно), достоверных различий по доле сперматозоидов с фрагментированной ДНК обнаружено не было (10,76 ± 9,83 vs. 13,57 ± 11,93; p = 0,22).
Общее количество клинических беременностей составило 25,8 % (16/62). При этом в парах, в которых клиническая беременность наступила, и мужчина, и женщина были моложе, чем в парах с отсутствием беременности (p = 0,05). Однако группы, сформированные по наличию/отсутствию беременностей (10,90 ± 14,12 vs. 12,27 ± 7,91; p > 0,05), достоверно не отличались по доле сперматозоидов с фрагментированной ДНК.
Известно, что ферменты ооцита способны репарировать до 10 % разрывов ДНК сперматозоида вскоре после оплодотворения до стадии 4-8 клеток, когда происходит зиго-тическая трансформация (MZT, maternal to zygotic transformation). В то время как нере-парированные разрывы ДНК сперматозоида ведут к нарушению работы генома эмбриона и остановке развития на ранних этапах эмбриогенеза. В данной работе не было обнаружено взаимосвязи между долей сперматозоидов с фрагментированной ДНК и показателем качества эмбрионов. Однако для конечных выводов мы видим необходимость в увеличении выборки.
По результатам данной работы можно сделать следующие выводы: фрагментация ДНК сперматозоидов снижает эффективность оплодотворения, однако не приводит к нарушению доимплантационного развития эмбрионов при культивировании in vitro.
Результаты проведенного исследования могут быть использованы для разработки алгоритма обследования пациентов с нарушением фертильности, что особенно актуально для пар, прошедших ряд неудачных попыток ЭКО. Данное направление является актуальным и требует дальнейших исследований.
ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕЙ
ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017
ISSN 1684-0461 ■
