CC BY
1526
BicHUK стоматологИ'", № 1, 2013
Таблица 2
Влияние «Генгигеля» на уровень маркеров воспаления в слизистой языка крыс с экспериментальным стоматитом
Примечание : р - показатель достоверности различий с группой 1; pj - показатель достоверности различий с группой 2; р2 - показатель достоверности различий с группой 4.
Возможно, что лечебно-профилактическое действие исследуемого препарата гиалуроновой кислоты можно усилить путём увеличения дозы действующего фактора.
Результаты нашего исследования показали, что более информативным является определение активности эластазы, уровень которой достоверно повышался и в слизистой щеки, и в слизистой языка независимо от вида патогенного фактора, а также проявляет явную тенденцию к снижению после применения аппликаций препарата гиалуроновой кислоты, даже несмотря на столь незначительную дозу (всего 0,34 мг ГК на 1 кг массы крысы в день).
Выводы. 1. Аппликации на СОПР пчелиного яда или протамина вызывают достоверное повышение активности эластазы, свидетельствующее о развитии воспаления (стоматит).
2. Аппликации фитогеля с гиалуроновой кислотой снижают активность эластазы, что свидетельствует о его противовоспалительном действии.
Список литературы
1. Степаненко Б. Н. Углеводы. Успехи в изучении строения и метаболизма. Серия «Итоги науки, биология». - М., 1968. -300 с.
2. Fool B. P. Hyaluronanin morphogenesis // J. Intern. Med. -1997. - Vol. 242. - P. 35-40.
3. Соколова И. И. Роль гиалуронидазы в патогенезе дистрофически-воспалительных заболеваний пародонта / И. И. Соколова, Н. Л. Хлыстун, А. П. Левицкий // Вюник стоматологи. - 2012. - № 6 (79), спецвипуск. - С. 125.
4. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: метод. рекомендации / А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко [и др.] - Одесса, 2010. 16 с.
REFERENCES
11. Stepanenko B. N. Uglevody. Uspekhi v izuchenii stroeniya i metabolisma. Seriya „Itogi nauki, biologiya" [Carbohydrates. Successes on the study of their structurevand metabolism. Series "Outcomes of science. Biology"]. Moskva, 1968:300.
12. Fool B. P. Hyaluronanin morphogenesis. J. Intern. Med. 1997; 242:35-40.
13. Sokolova I. I., Khlystun N. L., Levitskiy A. P. Role of hya-luronidase in pathogenesis of dystrophic-inflammatory of periodontal diseases. Visnyk stomatologiy; 2012; 6 (79): 125.
14. Levitskiy A. P., Denga O. V., Makarenko O. A. i dr. Bi-okhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodi-cheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral tissue: method guidelines]. Odessa, KP OGT, 2010:16.
Поступила 15.02.13
УДК 613.34+008.17+616.34+008.022-07
А. В. Воронкова, Е. П. Ступак, к. мед. н., С.В. Гончарук, к. мед. н.
ВГГУ «Украинская медицинская стоматологическая академия» ГУ «Институт стоматологии НАМН»
ВЛИЯНИЕ ФИТОГЕЛЯ «СИМБИТЕР» НА СОСТОЯНИЕ КОСТНОЙ ТКАНИ ПАРОДОНТА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИСБИОЗЕ
При экспериментальном дисбиозе в костной ткани альвеолярного отростка нижней челюсти крыс наблюдается снижение активности лизоцима и увеличение уровня МДА, протеаз, щелочной фосфатазы и индекса минерализации. Аппликации на слизистую полости рта фитогеля с про-биотиками («Симбитер») повышает активность лизоцима, снижает уровень МДА и маркера воспаления — эластазы. Ключевые слова: пародонт, костная ткань, дисбиоз, ферменты, пробиотики, фитогель.
Г. В. Воронкова, О. П. Ступак, С.В. Гончарук
ВДДУ «Украшська медична стоматолопчна академiя» ДУ «1нститут стоматологи НАМН»
ВПЛИВ Ф1ТОГЕЛЯ «СИМБ1ТЕР» НА СТАН
КIСТКОВОÏ ТКАНИНИ ПАРОДОНТА ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМУ ДИСБ1ОЗ1
При експериментальному дисбiозi в юстковш тканин альвеолярного паростка нижньоЧ щелепи щурiв спостеркаеть-ся зниження активностi лiзоцима i збыьшення рiвня МДА, протеаз, лужноЧ фосфатази та тдекса мiнералiзацiï. Ami-каци на слизову порожнини рота фтогеля з пробiотиками («Симбтер») тдвищують активтсть лiзоцима, знижують рiвень МДА та маркера запалення — еластази. Ключовi слова: пародонт, юсткова тканина, дисбiоз, фер-менти, пробiотики, фтогель.
Группы животных Содержание МДА, ммоль/кг Активность эластазы, мк-кат/кг
Контроль (ин-тактные) 10,8 ± 0,5 53 ± 3
Стоматит (пчелиный яд СПЯ) 13,2 ± 1,0 р < 0,05 68 ± 5 р < 0,05
СПЯ + «Генги-гель» 11,0 ± 0,9 р > 0,5 Pi > 0,05 57 ± 5 р > 0,3 р1 > 0,05
Стоматит (прота-мин СП) 9,8 ± 0,6 р > 0,05 78 ± 8 р < 0,05
СП + «Генги-гель» 9,3 ± 0,4 р < 0,05 р2 > 0,3 69 ± 4 р < 0,05 р2 < 0,1
BicHUK стоматологИ", № 1, 2013
27
A. V. Voronkova, E. P. Stupak, S. V. Goncharuk
Ukrainian Medical Stomatological Academy State Establishment "The Institute of Stomatology of the NAMS"
THE INFLUENCE OF PHYTOGEL "SYMBITER" UPON THE STATE OF OSSEOUS TISSUE OF PERIODONTIUM AT THE EXPERIMENTAL DYS-BIOSIS
The preparation "Symbiter" is the symbiotic, containing 4 kinds of bacteria: bifidus bacteria, lactobacilli, propionibacteria and acetic-acid bacteria. The formulation of the mucosal-adhesive phytogel "Symbiter", including 10% of the preparation "Sym-biter", is offered by the authors. The aim of the investigation is the study of the influence ofphytogel "Symbiter" upon the osseous tissue of periodontium in rats with the experimental dysbio-sis.
The experiments were held with 21 white rats of Vistar line, divided into 3 groups: 1 - the control one, 2 - with dysbiosis (caused by lincomycin) + gel placebo and 3 - dysbiosis + phytogel "Symbiter". Gels dosed at 0.5 ml/per rat were applied to OMM every day during 10 days. After animals killing the activity of alkaline phosphatase (AP) and acid phosphatase, the activity of elastase, the general proteolytic activity (GPA), the activity of lysozyme, the contents of MDA, the activity of catalase, the index of mineralization (IM) and API index were determined in homogenate of alveolar appendage. At the experimental dys-biosis in periodontal osseous tissue the true decrease of lysozyme activity, the growth of the contents of MDA and reduction of API index are observed. The processes, directed to the preservation of the normal state, about which the growth of the activity of AP and the growth of IM, as well as the increase in GPA, reflecting the processes of collagen formation, speak, take place in osseous tissue. At dysbiosis in osseous tissue of perio-dontium the level of nonspecific immunity reduces and the intensity of lipids peroxide oxidation and the markers of inflammation grows. The applications of phytogel with probiotics "Symbiter" on OMM increase the level of nonspecific immunity, reduce the level of lipids peroxide oxidation and normalize the level of markers of inflammation.
Key words: periodontium, osseous tissue, dysbiosis, enzymes, probiotics, phytogel.
Препарат «Симбитер» представляет собой сим-биотик (мультипробиотик), содержащий 4 вида бактерий: бифидобактерии, лактобациллы, пропионибак-терии и уксусно-кислые бактерии [1]. Нами предложена рецептура мукозально-адгезивного фитогеля «Симбитер», в состав которого входит 10 % препарата «Симбитер» [2].
Экспериментальные исследования фитогеля «Симбитер» показали его антидисбиотическое и противовоспалительное действие на десну крыс с гингивитом [3].
Цель настоящего исследования. Изучение влияния фитогеля «Симбитер» на состояние костной ткани пародонта крыс с экспериментальным дисбиозом.
Материалы и методы исследования. Опыты были проведены на 21 белой крысе линии Вистар (самки, 13 месяцев, живая масса 330±12 г), разделенных на 3 группы: 1-ая - контроль, 2-ая - дисбиоз, который вызывали с помощью линкомицина [4] + гель плацебо и 3-ья - дисбиоз + фитогель «Симбитер». Гели в количестве 0,5 мл на крысу наносили на слизистую полости рта ежедневно в течение 10 дней.
После умерщвления животных на 11-й день под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг) иссекали альвеолярный отросток нижней челюсти, готовили из него гомогенат (75 мг/мл 0,1 М цитратного буфера рН 6,1). В гомогенате определяли активность щелочной (ЩФ) и кислой (КФ) фосфатаз [5], активность эластазы [6], общую протеолитическую активность (ОПА) [6], активность лизоцима [7], содержание малонового ди-альдегида (МДА) [6], активность каталазы [6], индекс минерализации (ИМ), представляющий собой соотношение ЩФ/КФ [8], антиоксидантно - прооксидант-ный индекс (АПИ) (соотношение активности катала-зы и концентрации МДА) [6].
Результаты и их обсуждение. В табл. 1 представлены результаты определения активности фосфа-таз в костной ткани пародонта крыс с экспериментальным дисбиозом. Можно отметить тенденцию к увеличению активности ЩФ, которая мало снижается после аппликации фитогеля «Симбитер». Изменения активности КФ статистически недостоверны, также как и показатель минерализации ИМ, хотя при дис-биозе этот показатель имеет явную тенденцию к увеличению. Фитогель «Симбитер» не снижает этот показатель, скорее, несколько увеличивает.
В табл. 2 представлены результаты определения активности протеаз и лизоцима в костной ткани паро-донта крыс с дисбиозом. Как видно из этих данных, при дисбиозе имеет место тенденция к увеличению активности протеаз, которая снижается после аппликаций фитогеля «Симбитер» (однако р>0,05).
В отличие от протеаз, лизоцим при дисбиозе более, чем в 2 раза снижает свою активность, что свидетельствует о существенном снижении неспецифического иммунитета при дисбиозе. Аппликации фитоге-ля «Симбитер» достоверно повышают активность ли-зоцима, хотя и не возвращают ее к норме (табл. 2).
В таблице 3 представлены результаты определения содержания МДА - показателя перекисного окисления липидов, активность антиоксидантного фермента каталазы и уровня индекса АПИ, отражающего баланс антиоксидантных и прооксидантных систем тканей.
Как видно из этих данных, при дисбиозе достоверно повышается в костной ткани содержание МДА и проявляется явная тенденция к снижению активности каталазы, что сказывается на уровне индекса АПИ, который при дисбиозе снижается почти в 2 раза. Аппликации фитогеля «Симбитер» снижают содержание МДА, не влияют на активность каталазы и слабо повышают уровень АПИ.
Таким образом, при экспериментальном дисбиозе в костной ткани пародонта наблюдается ослабление неспецифического иммунитета (достоверное снижение активности лизоцима), усиление перекисного окисления липидов (о чем свидетельствует рост содержания МДА и падение уровня индекса АПИ). Однако, одновременно в костной ткани происходят процессы, направленные на сохранение нормального статуса, о чем свидетельствует повышение активности ЩФ и увеличение индекса минерализации, а также увеличение ОПА, которое отражает процессы колла-генообразования [8].
28
Вiсник стоматологИ", № 1, 2013
Фитогель «Симбитер» оказывает благоприятное действие на костную ткань пародонта, повышая активность лизоцима, снижая содержание МДА и активность маркера воспаления эластазы. При этом, фитогель не снижает индекс ИМ и активность актиокси-дантного фермента каталазы.
Однако, если сравнивать результаты наших исследований в костной ткани с аналогичными показателями в десне [3], то они свидетельствуют о более сильном влиянии пробиотического препарата на мягкие ткани.
Таблица 1
Влияние фитогеля «Симбитер» на активность фосфатаз и индекс минерализации (ИМ) в костной ткани альвеолярного отростка крыс с экспериментальным дисбиозом (п=7 в каждой группе)
№№ пп Группы ЩФ, мкат/кг КФ, мкат/кг ИМ
1 Контроль 51,07±6,10 1,53±0,22 33,4±3,5
2 Дисбиоз 63,51±6,53 р>0,05 1,66±0,23 р>0,4 38,2±3,7 р>0,3
3 Дисбиоз + фитогель «Симбитер» 59,16±5,10 р>0,05 р1>0,5 1,45±0,12 р>0,4 р1>0,1 40,8±3,3 р>0,05 р1>0,5
Примечание : р - в сравнении с группой № 1; р1 - в сравнении с группой № 2.
Таблица 2
Влияние фитогеля «Симбитер» на активность протеаз
в костной ткани альвеолярного отростка крыс с экспериментальным дисбиозом (п=7 в каждой группе)
№№ пп Группы ОПА, нкат/кг Эластаза, нкат/кг Лизоцим, ед/г
1 Контроль 27,17±2,42 6,75±0,56 65±8
2 Дисбиоз 35,62±4,10 р>0,05 7,68±0,72 р>0,3 29±5 р<0,01
3 Дисбиоз + фитогель «Симбитер» 34,59±3,10 р>0,05 р1>0,5 6,37±0,46 р>0,4 р1>0,05 43±3 р<0,05 р1<0,05
Примечание : р - в сравнении с группой № 1; р1 - в сравнении с группой № 2.
Таблица 3
Влияние фитогеля «Симбитер» на содержание МДА, активность каталазы и индекс АПИ в костной ткани альвеолярного отростка крыс с экспериментальным дисбиозом (п=7 в каждой группе)
№№ пп Группы МДА, ммоль/кг Каталаза, мкат/кг АПИ
1 Контроль 7,01±0,25 1,71±0,23 2,44±0,15
2 Дисбиоз 8,89±0,62 р<0,05 1,27±0,13 р>0,05 1,43±0,12 р<0,01
3 Дисбиоз + фитогель «Симбитер» 7,74±0,33 р>0,05 р1>0,05 1,30±0,09 р>0,05 р1>0,5 1,68±0,14 р<0,01 р1>0,05
Примечание : р - в сравнении с группой № 1; р1 - в сравнении с группой № 2.
Выводы. 1. При дисбиозе в костной ткани паро-донта снижается уровень неспецифического иммунитета и повышается интенсивность перекисного окисления липидов, а также уровень маркеров воспаления.
2. Аппликации на СОПР фитогеля с пробиотика-ми «Симбитер» повышают уровень неспецифического иммунитета, снижают степень перекисного окисления липидов и нормализуют уровень маркеров воспаления.
Список литературы
1. Янковский Д. С. Микробная экология человека: современные возможности ее поддержания и восстановления / Д. С. Янковский - К.: Эксперт ЛТД, 2005. - 362 с.
2. Применение мукозальных гелей в стоматологии (метод. рекомендации) / А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. А. Селиван-ская [и др.] - Одесса, 2012. - 20 с.
3. Воронкова А. В. Пародонтопротекторное действие геля «Симбитер» при экспериментальном гингивите у крыс / А. В. Воронкова, Л. В. Смаглюк, А. П. Левицкий // Вюник стоматологи. -2013. - № 1. - С. 7-10.
В'гсник стоматологИ", № 1, 2013
29
4. Декларацшний патент на корисну модель № 31012. Спошб моделювання дисбюзу (дисбактерюзу) / Левицький А. П., Селiванська I. О., Цюельський Ю.В. [та iн.] - № u 200711609; заявл. 22.10.2007; опубл. 25.03.2008. Бюл. № 6.
5. Экспериментальные методы исследования стимуляторов остеогенеза: метод. рекомендации / А.П. Левицкий, О.А. Макаренко, О.В. Деньга [и др.] - К., ГФЦ, 2005. - 50 с.
6. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости (метод. рекомендации) / А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко [и др.] - Одесса, 2010. - 16 с.
7. Левицкий А. П. Лизоцим вместо антибиотиков / Левицкий А. П.- Одесса: КП ОГТ, 2005. - 74 с.
8. Ферментативний метод оцшки стану гастково! тканини / А. П. Левицький, О. А. Макаренко, I.B. Ходаков [та ш.] // Одесь-кий медичний журнал. - 2006. - № 3. - С. 17-21.
REFERENCES
1. Yankovskiy D. S. Mikrobnaya ekologiya cheloveka: sovre-mennye vozmozhnosti eye podderzhaniya i vosstanovleniya [The human microbic ecology: the modern ways of its preservation and restoration]. Kiev, Ekspert LTD, 2005:362.
2. Levitskiy A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. i dr. Primeneniye mukozalnykh geley v stomatologiy: metodicheskie reko-mendatsii [The use of mucosal gels in dentistry].Оdеssа, KP OGT, 2012:20.
3. Voronkova A. V., Smaglyuk L. V., Levitskiy A. P. The pe-
riodontoprotective effect of gel "Symbiter" at the experimental gingivitis in rats. Visnyk stomatologiy. 2013; 1:7-10.
4. Levitskiy A. P., Selivanskaya I. A., Tsiselskiy Yu. V. i dr. The way of simulation of dysbiosis (dysbacteriosis) Patent of Ukraine. IPC (2006) А61Р 31/00. Application number u 200711609. Date of filling: 22.10.2007. Publ.: 25.03.2008. Bul. № 6.
5. Levitskiy A. P., Makarenko O. A., Denga O. V. i dr. Eksperimentalnye metody issledovaniya stimulyatorov osteogeneza: me-todicheskie rekomendatsii [The experimental methods of the study of osteogenesis stimulators]. Kiev, GFK, 2005:50.
6. Levitskiy A. P., Denga O. V., Makarenko O. A. i dr. Bi-okhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodi-cheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral cavity tissue: method guidelines]. Оdеssа, KP OGT, 2010:16.
7. Levitskiy A. P. Lizotsym vmesto antibiotikov [Lysozyme instead of antibiotics]. Оdеssа, KP OGT, 2005:74.
8. Levitskiy A. P., Makarenko O. A., Khodakov I. V. The enzymatic method of the estimation of the state of osseous tissue. Оdеskiy medychnyy zhurnal. 2006; 3:17-21.
Поступила 17.02.13
УДК 517.112:612.8+615.462.03.
О. В. Деньга, д. мед. н., Е. С. Шумилина, О. А. Макаренко, д. биол. н.
ГУ "Институт стоматологии НАМН Украины"
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ОРАЛЬНЫХ МУКОЗОПРОТЕКТОРОВ "КАПОСОЛ" И "КВЕРЦЕТИН"
На модели эндотоксинового стоматита показано мукозо-протекторное действии зубного эликсира "Квертулин", содержащего кверцетин, инулин и цитрат кальция, которое связано с его способностью снижать степень дисбиоза. Препарат "Капосол" оказался неэффективным. Ключевые слова: стоматит, липополисахарид, дисбиоз, капосол, квертулин, мукозопротектор.
О. В. Деньга, К. С. Шумыта, О. А. Макаренко
ДУ «1нститут стоматологИ НАМН Украши»
ПОР1ВНЯЛЬНА ОЦ1НКА Л1КУВАЛЬНО-ПРОФ1ЛАКТИЧНО1 ДП ОРАЛЬНИХ МУКОЗОПРОТЕКТОР1В "КАПОСОЛ" I "КВЕРТУЛ1Н"
На Modeni ендотоксинового стоматиту показана мукозоп-ротекторна дiя зубного елжсиру "Квертулт", що мктить кверцетин, тулин i цитрат кальцю, яка залежить eid його здатнoстi знижувати стутнь дисбioзу. Препарат "Капосол " виявився неефективним.
Ключов1 слова: стоматит, лiпoпoлiсахарид, дисбюз, капосол, квертулт, мукозопротектор.
O. V. Den'ga, K. S. Shumilina, O.A. Makarenko
SE «The Institute of Dentistry of the NAMS of Ukraine»
THE COMPARISON OF PREVENTIVE AND TREATMENT ACTING OF ORAL MUCOSA PROTECTANT AGENTS "KAPOSOL" AND "KVERTULIN"
Background: Mucosa protectant agents have a protective antiinflammatory effect on mucous membranes, including the oral mucosa, two of them are "Caphosol" and "Kvertulin." Our purpose was to compare the therapeutic efficacy of mouth-washes "Caphosol" and "Kvertulin" for intestinal endotoxin-induced stomatitis in rats.
Materials and methods: Experiment was carried out on 49 Wis-tar rats, which were divided into 4 groups: 1 - standard, 2 -"stomatitis", 3 - "stomatitis" + "Caphosol", 4 - "stomatitis" + "Kvertulin."
Resalts: The study demonstrated that the level of inflammatory markers (MDA and elastase) significantly increased. "Caphosol" and "Kvertulin" did not significantly affect on these parameters. We could only note a tendency to reduce the activity of elastase. During stomatitis we noted the increase of urease activity. "Caphosol" did not affect on that index, whereas "Kver-tulin" significantly reduced the urease activity. The activity of lysozyme decreased during stomatitis. "Caphosol" had a little affect on the level of that index, whereas "Kvertulin" significantly increased the activity of lysozyme. The degree of dysbio-sis in the oral mucosa was almost three-times increased during stomatitis. "Caphosol" did not significantly reduce that index, while "Kvertulin" significantly (almost 2-times) reduced the degree of dysbiosis. The activity of catalase reduced and prooxi-dant-antioxidant index significantly reduced during stomatitis. "Caphosol" and "Kvertulin" increased the activity of catalase and do not affect on the prooxidant-antioxidant index. Conclusion: ' 'Kvertulin'' demonstrated significantly mucospro-tective activity.
Key words: stomatitis, lipopolysaccharide, dysbiosis, caphosol, kvertulin, mucosa protectant agents.
Мукозопротекторы (МП) оказывают защитное противовоспалительное действие на слизистые оболочки, в том числе и на слизистую оболочку полости рта (СОПР) [1-3].
К мукозопротекторам относится и новый иммуно-протекторный препарат «Капосол», содержащий фосфаты натрия, хлориды кальция и натрия [4]. По данным авторов, орошения СОПР капосолом влияют на степень и длительность поражения слизистой и снижают сроки проведения антибактериальной терапии.
