CC BY
0
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
(64 — ОМЛ, 20 — ОЛЛ, б — неуточненных на момент исследования ОЛ); вторая менее компактная группа включала 21 пробу пациентов (14 с ОМЛ, 3 — ОЛЛ, 4 — ОЛ), а третья — 32 пробы (22 пациента с ОМЛ, 3-е ОЛЛ и7~ ОЛ) (рис. 2).
Заключение. Высокая чувствительность ПЦР-теста мРНК эмбриональных генов при острых лейкозах, вместе с его доступностью и относительной простотой, дает основания для использования на первичном этапе диагностики, особенно при отсутствии или низком уровне бластных клеток в венозной крови пациентов. Кроме того, высокая гетерогенность полученных значений отдельных комбинаций мРНК позволяет высказать гипотезу о возможной прогностической роли отдельных транскрип-томных комбинаций.
fx л д
\ \ t- + + + + - -+ ++ + +
Рис.2
2 3
Компонента 1
Ольховский И. А.1, Почтарь Е. В.2, Горбенко А. С.1, Столяр М. А.1,3, Дмитриева Е. А.4, Бахтина В. И.5, Михалёв М. А.5, Луговская С. А.6
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ И ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ШШ
В ЛЕЙКОЦИТАХ КРОВИ ПРИ ХЛЛ
'Красноярский филиал ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, 2ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, 3ФИЦ КНЦ СО РАН, 4МГГЦ Городская клиническая больница имени С.П. Боткина Департамента здравоохранения города Москвы, 5КГБУЗ «Красноярская краевая клиническая больница», 6ФГБОУ ВО КрасГМУ Минздрава
России, ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России
Введение. RORl-трансмембранная рецепторная тирозинки-наза, член семейства «receptor tyrosine kinase-like orphan receptor (ROR)», не детектируется в тканях взрослого организма, за исключением короткого периода дифференцировки В-лимфоцитов. Ранее показано, что ROR1 способствует активации и выживанию лейкозных клеток иускоряет прогрессирование заболеванияу пациентов с ХЛЛ (Blood, 2016, 128(25):2931-2940). Определение антигена ROR1 предложено включить в панель иммунофенотипиче-ских маркеров ХЛЛ (doi: 10.4999/uhod.215209). В предварительном исследовании было продемонстрировано присутствие детектируе-мого уровня мРНК ROR1 в клетках крови большинства пациентов с ХЛЛ, в отличие от здоровых добровольцев и пациентов с некло-нальными лейкоцитозами (Горбенко А.С. и др. Разработка метода определения мРНК гена ROR1 в лейкоцитах крови. Лабораторная служба. 2021;10(1):32-37) Вместе с тем соотношение уровня экспрессии антигена и мРНК гена ROR1 в венозной крови при ХЛЛ ранее не исследовалось.
Цель работы. Исследовать ассоциацию экспрессии мРНК и антигена RORly пациентов с ХЛЛ.
Материалы и методы. В работе были использованы образцы крови 40 пациентов МГГЦ (24 женщины, Me возраста 68 лет, и 16 мужчин, Me возраста 66 лет) с подтвержденным диагнозом ХЛЛ. Иммунофенотипическое исследование проводили с использованием 5-цветной панели моноклональных антител (BD) CD19/ ROR1/CD20/CD5/CD45 на приборе FACSCanto II (BD Biosciences, США). Для определенияуровня экспрессии мРНК ROR1 использовали образцы венозной крови, отобранные в раствор стабилизатора РНК (ООО «Формула гена»), с дальнейшем тестированием методом ПЦР-РВ, разработанным в лаборатории красноярского филиала НМИЦ гематологии.
Результаты и обсуждение. У всех пациентов с ХЛЛ, включенных в данную выборку, в пробах цельной крови определялась экспрессия мРНК ROR1 (от 0,01 до 0,44 отн.ед.; Ме=0,03), при этомвысокийуровень (более 60%) циркулирующих CD19+CD5+
и CD19+RORl+ лимфоцитов сочетался с относительно низким уровнем мРНК RORl (до 0,1 отн.ед). Вместе с тем в отдельных пробах крови фиксировалось как высокие значения экспрессии антигена RORl, так и мРНК его гена (рис.). Расчетная удельная экспрессия мРНК RORl, отражающая интенсивность транскрипции гена RORl, находилась в диапазоне от 0,04 до 25,6 на 1000 CD19+RORl+ клеток и вероятно может иметь самостоятельное диагностическое значение. У пациентов, находящихся на терапии, этот показатель был на порядок ниже уровня, регистрируемого при первичной диагностике Ме=4,42 и Ме=0,44 (р=0,03) соответственно. Однако сделать вывод о преимущественном влиянии отдельных схем терапии в данном пилотном исследовании не представляется возможным в связи с недостаточной выборкой.
Заключение. Дополнение цитометрического определения CD19+RORl+ клеток молекулярно-генетическим исследованием уровня экспрессии мРНК гена RORl может быть перспективно для дальнейшего изучения этого потенциального маркера для первичной диагностики и оценки эффективности терапии пациентов с ХЛЛ.
Омарова Ф. А., Дроков М. Ю., Попова Н. Н., Давыдова Ю. О., Капранов Н. М., Никифорова К. А., Старикова О. С., Масликова У. В., Сайдуллаева И. С., Карасева Л. А., Васильева В. А., Кузьмина Л. А., Гальцева И. В., Паровичникова Е. Н., | Савченко В. Г.
ВЛИЯНИЕ АНТИТИМОЦИТАРНОГО ГЛОБУЛИНА В СОСТАВЕ СХЕМ ПРОФИЛАКТИКИ РЕАКЦИИ «ТРАНСПЛАНТАТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА» С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПОСТТРАНСПЛАНТАЦИОННОГО ЦИКЛОФОСФАМИДА НА ВОССТАНОВЛЕНИЕ Т-КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУНИТЕТА ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Внедрение в схемы профилактики реакции «транс- результаты трансплантации аллогенных гемопоэтических ство-плантат против хозяина» (РТПХ) посттрансплантационного ловых клеток (алло-ТГСК). Однако остается не изученной циклофосфамида (ПТ-ЦФ) позволило значительно улучшить целесообразность иногда применяемой комбинации ПТ-ЦФ
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
NVSCM
р = 0.032
и антитимоцитарного глобулина (АТГ), влияние этой комбинации на исходы трансплантации, и особенно на иммунологическое восстановление.
Цель работы. Оценить влияние использования ПТ-ЦФ в комбинации с АТГ и без него в качестве профилактики РТПХ на восстановление Т-клеточного звена иммунной системы у пациентов после алло-ТГСК.
Материалы и методы. В работу было включено 42 пациента, которым алло-ТГСК была выполнена в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России. Характеристика пациентов указана 0.1 в таблице. У 5 пациентов с целью профилактики РТПХ использовался ПТ-ЦФ в дозе 50 мг/кг/сут на +3, +4 день после алло-ТГСК в сочетании с АТГ (лошадиный АТГ в дозе 10 мг/кг/сут с -4 по -1 день), у 37 пациентов — ПТ-ЦФ без АТГ. Все пациенты также получали циклоспорин А в дозе 3 мг/кг/сут и микофенолата мофетил в дозе 30—45 мг/кг/сут начиная с +5 дня после алло-ТГСК. С помощью проточной цито-метрии нами было выполнено определение абсолютного количества Т-клеток памяти периферической крови (CD8+/CD4+: Tnv+Tscm, Tcm, Ttm, Tern, Tte). Далее было выполнено сравнение этих показателей между группами, разделенными в зависимости от схемы профилактики РТПХ (ЦФ50 и АТГ+ЦФ) в первые 100 дней (на +30 и на +90 день) после алло-ТГСК. Для оценки различий между двумя независимыми группами был использо-ван критерий Манна — Уитни.
Результаты и обсуждение. Как видно на рисунках А и В, в первые 100 дней нами не было зафиксировано значимых различий в количестве Т-клеток памяти между исследуемыми группами, что говорит нам о том, что АТГ при применении его в комбинации с ПТ-ЦФ не оказывает существенного влияния на иммунологическую реконституцию у пациентов после ал-ло-ТГСК в сравнении с пациентами, которым использовался только ПТ-ЦФ.
Заключение. При анализе, однако, было отмечено, что соче-танное применение АТГ с ПТ-ЦФ ведет к значимомуувеличению числа рецидивов, что требует дополнительного изучения иммунологических характеристику данной категории пациентов.
СМ ТМ ЕМ ТЕ В NVSCM СМ ТМ ЕМ ТЕ
р = 0.Я р=0-51 Р = М7 «.ООО- р = |)г8 p=oji р = р=м< р = оя
1г-Ц loo-
Профилактика РТПХ
Ф АТГ+ЦФ
р = 0.23 р = 0.4
Л'
I ЦФ50
■ I*'*
t>-*i
Характеристика АТГ+ЦФ, N=5 ЦФ50, N=37 р-значение
Пол, п (%) 0,38
жен 2 (40) 23 (62)
муж 3 (60) 14 (38)
Возраст, медиана (МКР) 33 (30-38) 35 (31-42) 0,67
Диагнозы, п (%) >0,99
Лимфома 0 (0) 1 (2.7)
ОЛЛ 3 (60) 18 (49)
ОМ Л 2 (40) 18 (49)
Вид кондиционирования, п (%)
ИС 5 (100) 37 (100)
Трансплантат, п (%) 0,12
КМ 1 (20) 0 (0)
СКК 4 (80) 37 (100)
ВидТКМ, п (%) 0,60
аллогенная неродственная несовместимая 0 (0) 5 (14)
аллогенная неродственная совместимая 0 (0) 8 (22)
аллогенная родственная несовместимая (гаплоидентичная) 5 (100) 24 (65)
оРТПХ, п (%) >0,99
Да 1 (20) 11 (30)
Нет 4 (80) 26 (70)
Рецидив, п (%) 0,040
Да 3 (60) 5 (14)
Нет 2 (40) 32 (86)
Смерть, п (%) 0,14
Да 2 (40) 4 (11)
Нет 3 (60) 33 (89)
Орлова А. А., Обухова Т. Н., Новикова Т. Ю., Габеева Н. Г., Беляева А. В., Сейдалиева К. Р., Кузнецова С. А., Ковригина А. М.,
Звонков Е. Е.
СЛУЧАЙ СЛОЖНОЙ Т(8;1418)(024032;021), ВАРИАНТ DOUBLE-HIT, У БОЛЬНОЙ ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЛИМФОМОЙ С ТРАНСФОРМАЦИЕЙ В В-КЛЕТОЧНУЮ ЛИМФОМУ ВЫСОКОЙ СТЕПЕНИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОСТИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Сочетание транслокаций (t) с вовлечением ло-кусов генов BCL2 и MYC в одном опухолевом клоне (double-hit лимфома) ассоциируется с агрессивным течением и неблагоприятным прогнозом заболевания. В большинстве случаев double-hit лимфом гены BCL2 и MYC перестраиваются с локусами разных генов IG (тяжелых и легких цепей) или, в случае MYC, с не-IG хромосомными партнерами. В литературе описаны единичные случаи сложной t вышеуказанных генов с одним аллелем IgH.
Цель работы. Представить редкий случай сложной транслокации с вовлечением локусов генов BCL2 и MYC с одним аллелем гена IgH.
Материалы и методы. Больная 37 лет в октябре 2019 г. поступила в НМИЦ гематологии с поражением периферических, висцеральных, забрюшинных л/у, селезенки, костей и к/м. Морфологическая картина и иммунофенотип соответствовали ФЛ 1—2-й градации с низкой пролиферативной активностью (Ki67 15%) и экспрессией MYC<5% клеток. Выполнено стандартное цито-генетическое исследование (СЦИ) клеток л/у, FISH-исследование интерфазных ядер отпечатков опухоли и метафазных пластинок культуры клеток с использованием ДНК-зондов break-apart MYC, BCL6, BCL2, dual-fusion t(14;18)(q32;q21) и t(8;14)(q24;q32) (Abbott, Metasystems).
Результаты и обсуждение. При СЦИ в дебюте заболевания хромосомные аберрации не выявлены. FISH-исследование
биоптата опухоли выявило 1(14;18)^32^21) и I МУС. Из-за недостаточного количества исследуемого материала хромосомный партнер гена МУС не былустановлен. Проведена терапии по программе Я-тМНЬ-ВРМЭО с венетоклаксом и ауто-ТГСК, полная ремиссия достигнута в апреле 2020 г. Через 14 мес. развился генерализованный рецидив. При повторной биопсии л/у морфологическая картина характеризовала трансформацию ФЛ в В-клеточную лимфому высокой степени злокачественности с бластоидной морфологией, высокой экспрессией МУС (до 50%) и Ш-67 40—50%. При СЦИ были выявлены дериваты хромосом 8, 14 и 18 (предположительно, сложная 1(8;14; 18)^24^32^21) в составе комплексного кариотипа. ИвН-исследование подтвердило наличие 1(14;18) и 1(8; 14) с атипичным распределением сигналов (дополнительными сигналами от локуса гена ЮН и значительным снижением интенсивности флуоресценции от локуса гена ЮН в составе одного из слитных сигналов). При ИвН-исследовании на метафазных пластинках на деривате хромосомы 8 был обнаружен слитный ген МУС::ЮН::ВСЬ2 (со значительным снижением интенсивности сигнала от локуса гена ЮН), на деривате хромосомы 14 — ЮН::МУС, на деривате хромосомы 18 — ВСЬ2::ЮН. Проведен курс С-ОНАР с положительной динамикой. Планируется выполнение алло-ТГСК.
Заключение. Представлен редкий случай сложной I генов ВСЬ2 и МУС с одним аллелем гена %Н. Комбинация СЦИ
