CC BY
3УДК 619+615.038:636.5.033
Севостьянова О. И.
Sevost'yanova O. I.
ВИТАМИННО-МИНЕРАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ПТИЦЕВОДСТВА -ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ
THE VITAMIN-MINERAL DRUG FOR POULTRY - TOXICOLOGICAL PARAMETERS
Объем рынка ветеринарных препаратов пополняется все новыми и новыми методами и инструментами, направленными на повышение продуктивности птицеводства. Разработана сбалансированная диета, совершенные подходы к условиям содержания для домашней птицы, в которую ветеринарные препараты и кормовые добавки вводятся для повышения стойкости организма к действию стрессовых факторов для устойчивости к инфекционным агентам и т.д. Эти разные по качественному и количественному составу витаминов, минералов и ферментных препаратов, также эффективности известных пробиотических веществ и лекарственных трав для повышения производительности птицы [3, 5-11,13]. В связи с этим, важным и актуальным является данное исследование, в первую очередь, токсикологические показатели и получениее ветеринарных препаратов [4]. Качество конечного продукта должно быть безопасным и не должно влиять на здоровье потребителей.
Была проведена токсикологическая оценка нового разработанного комплекса витаминно-минерального препарата, содержащего в своем составе липофильную группу (А, й, Е, К) и гидрофильную группу (Н, В2, В6, С), витамины и микроэлементы селен, магний и цинка. Этот комплекс направлен на предотвращение негативного воздействия неизбежных стрессовых факторов, присутствующих у развивающихся птиц, за счет оптимизации внутренних сил организма. Параметры острой токсичности разработанной комплексной подготовки, такие как максимально переносимой, среднего ^Р50) и смертоносной ^Р100) дозы, средней эффективной дозы (Ей50), терапевтического индекса, определяемого на клинически здоровых нелинейных белых мышах. Поскольку индекс ЛД50 исследованного препарата после однократного перорального введения белых мышей была 1840,0 мг/кг массы тела, обнаружили, что терапевтический индекс 810,57 мг и терапевтического диапазона -1803,5 мг, в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 комплексный препарат принадлежит к 3 классу опасности малотоксичных веществ.
Ключевые слова: обмен веществ, птицеводство, токсикология, стресс, витамины, максимально переносимая доза, среднесмертельная доза, медианно эффективная доза, терапевтический индекс.
Annual market veterinary medicines replenished with new and new methods and tools aimed at improving the productivity of the poultry sector. Developed a balanced diet, improved approaches to conditions for poultry, veterinary medicines are being introduced and feed additives to increase the resistance of the organism to the action of stress factors, resistance to infectious agents, etc. These are different and on the qualitative and quantitative composition of vitamins and minerals, and enzyme preparations, also known about the efficiency of probiotic substances and of herbal medicines to improve productivity of poultry [3, 5-11, 13]. In this regard, important and relevant is the study in the first place, toxicological parameters produced veterinary drugs [4]. Because of safety will directly affect the quality of the end product and consumer health.
The study was conducted toxicological evaluation of new developed complex vitamin-mineral preparation containing in its composition of lipophilic group (A, D, E, K) and hydrophilic group (H, B2, B6, C) vitamins, and microelements selenium, magnesium and zinc. This complex is aimed at preventing the negative impact of the inevitable stressors present in growing birds, by optimizing the internal forces of the organism. Parameters of the acute toxicity of the developed complex preparation, such as the maximum tolerated, of the mean (LD50) and lethal (LD100) dose, the median effective dose (ED50), the therapeutic index, determined on clinically healthy, the past ten quarantine nonlinear white mice. Because the index LD50 study drug after a single oral administration to white mice was 1840.0 mg / kg body weight, and found that the therapeutic index of 810,57 mg and therapeutic range - 1803,5 mg, in accordance with GOST 12.1.007-76 complex drug belongs to class 3 hazard, the low-toxic substances.
Keywords: metabolism, poultry, toxicology, stress, vitamins, the maximum tolerated dose, dose of the mean, median effective dose, a therapeutic index.
Севостьянова Ольга Игоревна -
аспирант, ассистент кафедры терапии и фармакологии
Ставропольский государственный
аграрный университет,
г. Ставрополь
Тел: 8-918-771-73-34
E-mail: sevostyanova19@mail.ru
Sevost'yanova Olga Igorevna -
Postgraduate student, assistant
of the Department of Therapy and Pharmacology
Stavropol State
Agrarian University,
Stavropol
Tel: (8652) 71-72-04
E-mail: sevostyanova19@mail.ru
Ежегодно рынок ветеринарных препаратов пополняется все новыми и новыми методами и средствами, направленными на повышение продуктивности птицеводческой отрасли.
Разрабатываются сбалансированные рационы, совершенствуются подходы к условиям содержания птицы, внедряются ветеринарные препараты и кормовые добавки, направленные на увеличение резистентности организма к дей-
в
Спецвыпуск № 1, 2015
Клиническая фармакология и токсикология
139
ствию стресс-факторов, устойчивости к инфекционным агентам и т.д. К ним относятся и различные по качественному и количественному составу витаминно-минеральные комплексы, и ферментативные препараты, также известно и об эффективности применения пробиотических субстанций и фитопрепаратов для повышения продуктивности птицы [3, 5-11, 13].
Этому факту есть ряд объяснений - птицеводство укрепляет свои позиции не только на отечественном, но и на мировом рынке мяса и продовольствия, что обусловлено сравнительно коротким сроком выращивания птицы, меньшими экономическими затратами при ее содержании и, как следствие, большая ценовая привлекательность для потребителя.
Так, по литературным данным известно, что применение фосфорно-кальциевой минеральной добавки ФАКС-1 способствует увеличению прироста живой массы на 11,2-17,1 %, снижению затрат корма на 15-19 % [3]. Использование витаминно-минеральных комплексов, например, Витаминоацид и Меджик Антистресс Микс, в кормлении ремонтных курочек и петушков, способствует повышению показателя однородности птицы на 17,72 %, улучшению сохранности молодняка, увеличению качества инкубационных яиц [15]. По данным Цыгановой О.С., применение органической формы йода в течение первых 5-7 дней жизни в рационе бройлеров благоприятно воздействует на показатели мясной продуктивности и качество получаемой продукции [14]. В работах Алексеевой С.А. и Аганичевой А.А. отражена эффективность применения АСД Ф-2 - тканевого лекарственного препарата - в птицеводстве. Авторами установлено, что данный препарат способствует достоверному увеличению выводимости яиц на 3,4 %, сохранности поголовья составила 97 %, живая масса птицы опытных групп была на 18,9-20,9 % выше [1].
Требования к современным ветеринарным препаратам подобной направленности велики: недостаточно лишь простимулировать увеличение живой массы птицы. Сегодня этот показатель должен идти в купе со снижением потребления корма и, что самое главное, конечный продукт должен быть безопасен и отвечать вкусовым требованиям потребителя.
В этой связи важным и актуальным является изучение, в первую очередь, токсикологических параметров выпускаемых ветеринарных препаратов [4]. Поскольку их безопасность напрямую будет отражаться на качестве конечного продукта и здоровье потребителя.
Цель исследований: провести токсикологическую оценку разработанного витаминно-минерального комплекса для сельскохозяйственной птицы.
На базе ФГБОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет» в рамках реализации грантовой программы «Умник на Старт» Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфе-
ре разработан новый комплексный витаминно-минеральный препарат, содержащий в своем составе группу липофильных (А, Д, Е, К) и гидрофильных (Н, В2, В6, С) витаминов, а также микроэлементы селен, магний и цинк. Данный комплекс направлен на предупреждение негативного влияния неизбежных стресс-факторов, присутствующих при выращивании птицы, путем оптимизации внутренних сил организма.
Материалы и методы. Исследование осуществляли в условиях вивария факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет», оборудованного в соответствии с действующими правилами по устройству и оборудованию экспериментально-биологических клиник (вивариев) и содержанию опытных животных.
Параметры острой токсичности разработанного комплексного препарата определяли на клинически здоровых, прошедших десятидневный карантин нелинейных белых мышах (самцы и самки массой 20-22 г в возрасте 2 месяца).
Выбор данных видов животных для проведения фармако-токсикологических исследований обоснован их неприхотливостью и удобством содержания, возможностью использования компактной территории для размещения необходимого количества животных, выраженной иммуноустойчивостью к инфекционным заболеваниям, большим приплодом, который они дают. Помимо этого, постоянная заполненность желудка пищей при обычном режиме питания дает возможность интрагастрального введения достаточных доз различных токсических агентов, не вызывая катаральных изменений слизистой. Использовались молодые животные, поскольку у них меньше толерантность к различным токсическим веществам [2, 12].
Кормление осуществлялось стандартной диетой в соответствии с действующими нормами. Введение комплексного препарата осуществлялось перорально, с использованием стандартного одноразового стерильного медицинского шприца объемом 5,0 мл. Алгоритм введения испытуемого вещества: фиксирование животного вертикально, положение головы незначительно запрокинутое, после чего медленно вводится раствор. Кормление осуществляли через 2 часа с момента введения [2, 12].
Результаты исследований. В опыте по нахождению максимально переносимых доз препарата при пероральном введении понадобилось 45 лабораторных мышей. Лабораторным животным, разделенным на группы по 5 мышей в каждой, вводился препарат в возрастающих дозах. Наблюдение за животными составило 14 дней с момента введения препарата. Объем стартовой дозы составил 452,0 мг/кг живой массы и применялась животным группы № 1. В таблице 1 отражена схема проведения эксперимента по определению максимально переносимой дозы препарата на белых мышах.
При наблюдении за подопытной группой № 1 не было выявлено изменений в поведении, отказа от корма и воды также не наблюдалось,
ухудшение физиологического состояния животных отмечено не было.
Таблица 1 - Схема проведения эксперимента по определению максимально переносимой дозы препарата на белых мышах
Группа № Количество особей, гол Доза препарата, мг/кг м.т.
1 5 452,0
2 5 678,0
3 5 904,0
4 5 1130,0
5 5 1356,0
6 5 1582,0
7 5 1670,0
8 5 1755,0
9 5 1808,0
Состояние животных в группах № 2-7 также было в пределах физиологической нормы, без видимых отклонений, летальных исходов не наблюдалось. В группе № 8 у трех из пяти подопытных животных через 6 часов после введения препарата наблюдалась вялость, отказ от корма, однако через 9±1 час их состояние нормализировалось. При наблюдении за животными группы №9 через 2±0,5 часа после введения препарата отмечали кратковременные периоды возбуждения, сменяющиеся периодами угнетения, сопровождающиеся отказом от корма и воды, светобоязнью. По истечению 1,5-2 часов состояние животных в данной группе стабилизировалось. Поскольку у животных группы № 9 наблюдались признаки отравления и токсического действия изучаемого препарата, но при этом летальных исходов не наступало, доза 1808 мг/кг была принята в качестве максимально переносимой (МПД) и стартовой для проведения опыта по определению летальных доз разработанного комплексного препарата при пероральном введении [2, 12].
В токсикологическом эксперименте для испытания каждой дозы использовали по две группы белых мышей - контрольную и опытную - по 10 особей в каждой (по 5 самцов и самок, массой тела 20-22 г). Введение разработанного препарата осуществлялось согласно методическим рекомендациям и с соблюдениям правил асептики, антисептики и личной гигиены, животным контрольных групп вводился аналогичный объем
дистиллированной воды. Период наблюдения за состоянием животных составил 14 дней с момента введения препарата. Учитывали общее состояние и поведение животных, реакцию на корм и воду, степень возбуждения или угнетения, реакцию на внешние раздражители, определяли тактильную, болевую и температурную чувствительность, температуру и массу тела животного. Отмечали наличие, или отсутствие, клинических симптомов отравления, сроки наступления гибели в случае ее возникновения.
Исследуемый препарат вводился в возрастающих концентрациях с постоянной кратностью (табл. 2, 3), учитывали количество павших и выживших животных, процент летальности и ее выражение в пробитах.
Расчет среднесмертельной дозы производили по следующей формуле:
LD50= (сумма (А+В) х (М-Н)) / 200,
где А и В - величины смежных доз, мг/кг;
М и Н - частоты летальных исходов смежных доз, %;
200 - постоянный коэффициент.
При пероральном введении LD50 разработанного препарата = (3636 х 30) + (3676 х 40) + (3716 х 20) +(3756 х 10) / 200 = 368000 / 200 = 1840 мг/кг.
Определив показатель LD50, и учитывая, что медианно эффективная доза ЕD50 разработанного препарата составляет 2,27 мг/кг массы тела, установили значение терапевтического индекса. Он определяет степень безопасности любого лекарственного компонента и, в опыте на мышах, составил 810,57; терапевтическая широта - 1803,5 мг.
На основании полученных данных в остром опыте построили пробитный график (рис. 1.). Величины LD16 и LD84 определили графически на основании доз в мг и соответствующих про-битов, первой величине соответствует пробит 4, второй - пробит 6 [12].
Показатель ошибки средней дозы эффекта SLD50 рассчитали по следующей формуле:
SLD50 = №4 - LD16)/2n,
где LD16 и LD84 - дозы эффекта, мг/кг;
п - суммарное количество животных в группах для которых значения пробитов находятся в пределах 3,5-6,5;
SLD при расчете острой токсичности парентерального введения
(1861,4 - 1822,74)/(30 х 2) = 43,52/60 = 0,644.
Таблица 2 - Схема опыта и результаты изучения острой токсичности препарата на белых мышах
при пероральном введении (п = 10)
Тип введения № группы Доза препарата, мг/кг Кол-во животных в группе на начало опыта, гол Пало животных, гол Выжило животных, гол Летальность, % Пробиты
ш о 1 1808,0 10 0 10 0 3,04
I -0 2 1828,0 10 3 7 30 4,48
л со р 3 1848,0 10 7 3 70 5,52
о а е с 4 1868,0 10 9 1 90 6,28
5 1888,0 10 10 0 100 6,96
Вестник АПК
Ставрополья
Спецвыпуск № 1, 2015
Клиническая фармакология и токсикология
Таблица 3 - Острая токсичность препарата при однократном введении белым мышам, мг/кг (п=10)
Тип введения Параметры токсичности SLD50
МПД LD16 LD50 LD84 LD100
Пероральное 1808,0 1822,74 1840,0 1861,4 1888,0 ±0,644
Рисунок 1 - Пробитный график разработанного препарата (опыт на белых мышах п = 10)
Выводы. Поскольку показатель Ю50 исследуемого препарата при однократном оральном введении белым мышам составил 1840,0 мг/кг живой массы, а также установлено, что терапевтический индекс составляет 810,57 мг и те-
Литература:
1. Алексеева С. А., Аганичева А. А. Влияние новых отечественных препаратов на эмбриональное и постэмбриональное развитие цыплят // Птица и птицепродукты. 2013. № 5. С. 30-32.
2. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств (от 29 декабря 1997 г.) / Е. В. Арзамасцев, Т. А. Гуськова, С. С. Либерман, Б. И. Любимов, А. Г. Рудаков, О. Л. Верстакова ; Фармакологический государственный комитет Минздрава России и управлениее государственного контроля лекарственных средств и медицинской техники Минздрава России. Москва, 1997.
3. Бойко И. А., Головко А. Н. Новая минеральная добавка для выращивания цыплят-бройлеров // Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство. 2013. № 8. С. 24-34.
4. Джавадов Э. Д. Инновационные достижения в области ветеринарной медицины для промышленного птицеводства // Современные подходы к решению актуальных ветеринарно-санитарных и зоо-
рапевтическая широта - 1803,5 мг, то в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 комплексный препарат относится к 3 классу опасности, то есть к малотоксичным веществам.
References:
1. Alekseeva S. A., Aganicheva A. A. Impact of new domestic products on the embryonic development and postembryonic chickens // Bird and poultry products. 2013. № 5. P. 30-32.
2. Guidelines for the study of general toxicity of pharmacological agents (of 29 December 1997) / E. V. Arzamastsev, T. A. Gus'kova, S. S. Lieberman, B. I. Lyubimov, A. G. Rudakov, O. L. Verstakova // State Pharmacological Committee of the Ministry of Health of Russia and the management of state control of medicines and medical equipment Russian Ministry of Health, 1997.
3. Boyko I. A., Golovko A. N. New mineral supplement for growing broiler chickens // Animal Nutrition and Forage Production. 2013. № 8. P. 24-34.
4. Dzhavadov E. D. Innovative achievements in the field of veterinary medicine for poultry industry // Collection All-Russian scientific-practical conference "Modern approaches to solving the actual animal health and zootechnical problems in the poultry industry". SPb., 2013. P. 5-7.
5. Kravchenko N., Monin M. Effective enzymes for poultry // Aviculture. 2006. № 4. P. 26-27.
технических проблем в птицеводстве : сб. материалов Всерос. науч.-практ. конф. СПб., 2013. С. 5-7.
5. Кравченко Н., Монин М. Эффективные ферменты для птицеводства // Птицеводство. 2006. № 4. С. 26-27.
6. Мидивет - уникальная кормовая добавка / Н. Мухина, А. Смирнова, Е. Крюкова, Т. Каблучеева // Птицеводство. 2006. № 5. С. 21-22.
7. Оробец В. А., Севостьянова О. И. Влияние препарата «Экстраселен+Е» на биохимический состав крови перепелов // Вестник ветеринарии. 2012. № 61 (№ 2/2012). С. 46-48.
8. Оробец В. А., Севостьянова О. И. Определение влияния препарата «Экстраселен-Е+Ут1п» на продуктивность кур-несушек // Вестник ветеринарии. 2013. № 66. С. 49-52.
9. Оробец В. А., Севостьянова О. И., Серов А. В. Разработка и фармакотоксиколо-гическая оценка препарата для повышения качества здоровья и продуктивности сельскохозяйственной птицы // Ветеринария Кубани. 2011. № 1. С. 23-26 .
10. Патент 2514670 РФ. МПК А23К1/16, А23К1 /175, А61К31/355, А61К33/04, А61Р3/02 Способ повышения продуктивности цыплят-бройлеров / В. А. Оробец, А. В. Серов, В. А. Беляев, И. В. Киреев, О. И. Севостьянова, Е. А. Момотова: заявитель и патентообладатель ФГБОУ ВПО Ставропольский ГАУ. заявл. 27.04.2014 ; опубл. 27.04. 2014, Бюл. № 12. 9 с.
11. Савченко С. П., Савченко С. Я. Фитобио-тики для развития ремонтного молодняка // Птицеводство. 2006. № 4. С. 28-29.
12. Самохин В. Т. Методические указания по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных. Воронеж. 1987. 22 с.
13. Тменов И., Тохтиев А. Пробиотики из соевого молока и бифидобактерий // Птицеводство. 2006. № 5. С. 26.
14. Цыганова О. С., Шацких Е. В. Влияние органической формы йода на продуктивность цыплят-бройлеров // Птицы и пти-цепродукты. 2008. № 2. С. 29-31.
15. Шацких Е., Латыпова Е. Влияние антистрессовых препаратов на развитие молодняка родительского стада // Птицеводство. 2014. № 1. С. 22-27.
6. Midivet - a unique feed additive / N. Mukhi-na, A. Smirnova, E. Kryukova, T. Kablucheeva // Aviculture. 2006. № 5. P. 21-22.
7. Orobets V. A., Sevostyanova O. I. Influence of preparation "Extraselen+E" on serum biochemical composition from quails // Vestnik veterinarii. 2012. № 61 (N 2/2012). P. 46-48.
8. Orobets V. A., Sevostyanova O. I. Influence of Extraselen-E+Vmin the drug on laying hen productivity // Vestnik veterinarii. 2013. № 66. P. 49-52.
9. Orobets V. A., Sevostyanova O. I., Serov A. V. Development and pharmaco-toxicological evaluation of the preparation for increasing of the quality of health and productivity of poultry // Veterinaria Kubani. 2011. № 1. P. 2326.
10. Patent of 2514670 RF MPK A23K1/16, A23K1 /175, A61K31/355, A61K33/04, A61P3/02. A method of increasing the productivity of broiler chickens for an invention / V. A. Orobets, A. V. Serov, V. A. Belyaev, I. V. Kireev, O. I. Sevostyanova, E. A. Momo-tova; applicant and patentee VPO Stavropol State Agrarian University. appl. 04.27.2014; publ. 27.04. 2014 Bull. № 12. 9.04.27.2014.
11. Savchenko S. P., Savchenko S. Y. Fitobiotika for developing young replacement // Aviculture. 2006. № 4. P. 28-29.
12. Samohin V. T. Methodological guidelines for toxicological evaluation of new drugs for the treatment and prevention of non-communicable diseases of animals. Voronezh, 1987. 22 p.
13. Tmenov I., Tokhtiev A. Probiotics from soy milk and Bifidobacterium // Aviculture. 2006. № 5. P. 26.
14. Tsiganova O. S., Shatskih E. V. Effect of organic forms of iodine on the productivity of broiler chickens // Birds and poultry products. 2008. № 2. P. 29-31.
15. Shatskikh E., Latypova E. Effect of anti-stress drugs on the development of young breeder // Aviculture. 2014. № 1. P. 22-27.
