CC BY
74
человека отличаются Селенгинский и Булганский аймаки Монголии. С учетом интенсивного хозяйственного освоения этих районов, необходимо проведение широкого спектра профилактических мер как для местного населения, так и для туристов, посещающих эти районы.
Авторы выражают благодарность сотруднику ФГУС Роспотребнадзора в Иркутской области М.М.
ЛИТЕРАТУРА
1. Данчинова Г.А., Хаснатинов М.А., Злобин В.И. и др. Современная ситуация по клещевому энцефалиту в Монголии // Материалы расширенного пленума проблемной комиссии «Клещевой энцефалит и другие вирусные энцефалиты». - М., 2003. - С.36-37.
2. Нецкий Г.И. Учет и прогноз изменений численности клещей Ixodes persulcatus P. Sch. и Dermacentor pictus Herm. в природных очагах клещевого энцефалита, омской геморрагической лихорадки и туляремии в Западной Сибири: Метод. указания. - Омск: Омский НИИ природноочаговых инфекций, 1972. - 13 с.
3. Сердюкова Г.В. Иксодовые клещи фауны СССР. - М., Л.: Изд-во АН СССР, 1956. - 122 с.
Верхозиной (Иркутск), сотруднику Лимнологического института СО РАН Н.В. Кулаковой (Иркутск) и сотрудникам Национального Центра по изучению природноочаговых инфекций МЗ Монголии и. Шигеа1кЬап и В. ип^аа (Улан-Батор) за помощь в лабораторных исследованиях.
Работа выполнена при поддержке грантов РФФИ №08-04-90206-Монг_а и и РФФИ№11-04-92221-Ыо^_а.
4. Филиппова Н.А. Иксодовые клещи подсем. Ixodinae // Фауна СССР. Паукообразные. - Т. IV (4) - Л.: Наука, 1977. -396 с.
5. Абмэд Д., Нимадава П., Андреев В.П. и др. Исследование по арбовирусным инфекциям в МНР Сообщение II. Изоляция вируса клещевого энцефалита в Селенгинском аймаке // Мон тезис. - 1990. - №22.
6. GouldE.A., CleggJ.C.S. Growth, titration and purification of togaviruses // B. W. J. Mahy (ed.), Virology: A Practical Approach.
- IRL Press, 1985. - P43-48.
7. Kunz C, Heinz FX. Tick-borne encephalitis // Vaccine. -2003. - Vol. 21. - P1-2.
8. LindquistL., Vapalahti O. Tick-borne encephalitis.// Lancet.
- 2008. - Vol. 371. - P1861-1871.
Информация об авторах: Хаснатинов Максим Анатольевич - ведущий научный сотрудник, к.б.н., 664025, Иркутск, а/я 525, тел. (3952) 333971; e-mail: khasnatinov@yandex.ru; Данчинова Галина Анатольевна - руководитель, д.б.н.; Злобин Владимир Игоревич - заведующий кафедрой, академик РАМН, д.м.н., профессор; Ляпунов Александр Валерьевич -научный сотрудник, к.б.н.; Арбатская Елена Валентиновна - научный сотрудник; Чапоргина Елена Александровна -старший научный сотрудник, к.б.н.; Даваажав Абмэд - руководитель группы, д.б.н.; Жантсо Бата - заведующий отделом, д.б.н.; Дамдиндорж. Цэрэнноров - заместитель директора, д.м.н.; Дашдаваа. Отгонбаатар - директор, д.м.н.
© ЛЕОНОВА Г.Н., ПАВЛЕНКО Е.В., МАЙСТРОВСКАЯ О.С., БЕЛИКОВ С.И., КОНДРАТОВ И.Г. - 2012 УДК: 577.123
ВИРУЛЕНТНОСТЬ ШТАММОВ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА, ИЗОЛИРОВАННЫХ ОТ ЛЮДЕЙ С РАЗНЫМИ ФОРМАМИ ИНФЕКЦИИ
Галина Николаевна Леонова1, Елена Владимировна Павленко1, Ольга Сергеевна Майстровская1, Сергей Иванович Беликов2, Илья Геннадьевич Кондратов2 ('Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО РАМН, Владивосток, директор - д.м.н., проф. Л.М. Сомова; 2Лимнологический институт СО РАН, Иркутск, директор -
д.х.н., акад. РАН М.А. Грачев)
Резюме. На основании данных, полученных в трех сериях экспериментов, представлена характеристика 11 штаммов вируса клещевого энцефалита. Комплексные исследования, направленные на изучение молекулярной характеристики и вирулентности в частности нейроинвазивности, показали значительные различия инфекционного потенциала штаммов, изолированных от людей с очаговыми формами КЭ и от лиц с инаппарантной формой. Штаммы, вызвавшие манифестные по сравнению с инаппарантными формами инфекции, обладали выраженной нейроинвазивностью, быстрее проникали через гематоэнцефалический барьер и вызывали быструю потерю веса белых мышей с последующей их гибелью.
Ключевые слова: штаммы вируса клещевого энцефалита, молекулярная характеристика, нейроинвазивность, вирулентность.
THE VIRULENCE OF STRAINS OF TICKBORNE ENCEPHALITIS VIRUS ISOLATED FROM HUMANS
WITH DIFFERENT FORMS OF INFECTION
G.N. Leonova1, E.V. Pavlenko1, O.S. Maistrovskaya1, S.I. Belikov2, I.G. Kondratov2 ('Research Institute of Epidemiology and Microbiology SB RAMS, Vladivostok, 2Limnological Institute SB RAS, Irkutsk)
Summary. Based on three series of experimental data, we have characterized 11 strains of tick-borne encephalitis (TBE) virus. Complex studies aimed at molecular characterization and virulence in particular of neuroinvasiveness have shown significant differences in infectious potential of the strains isolated from patients with focal forms of TBE and those with inapparent forms of TBE. Unlike inapparent forms, the strains caused clinical infections had a pronounced neuroinvasiveness and penetrated faster through blood-brain barrier causing rapid weight loss in white mice followed by their death.
Key words: tick-borne encephalitis virus strains, molecular characteristic, neuroinvasiveness, virulence.
Исполнилось 75 лет, как был открыт вирус клещевого энцефалита (ВКЭ) на Дальнем Востоке России. За этот период случаи КЭ стали регистрировать во многих странах Евразии (Китай, Германии, Австрии, Чехии и др.). Но наиболее неблагоприятная обстановка по заболеваемости этой инфекцией наблюдается ежегодно на обширной территории Российской Федерации [7]. С
первых случаев изоляции ВКЭ исследователей интересовала важнейшая биологическая характеристика вируса - вирулентность, для изучения которой до настоящего времени остается классическая модель - белая мышь. Изучали, как правило, штаммы, изолированные из ик-содовых клещей и реже из мозга людей, умерших от КЭ [4]. На протяжении двух последних десятилетий наши
исследования были направлены на совершенствование способов изоляции штаммов ВКЭ от больных с разным клиническим проявлением инфекции: при манифестном (очаговые и лихорадочные формы) и бессимптомном течении (инаппарантная форма) [5]. Появилась возможность проводить всесторонние сравнительные изучения полученных нами штаммов ВКЭ, которые проявили важнейшее биологическое свойство - вирулентность для макроорганизма, вызвав ту или иную форму заболевания.
Целью настоящей работы было комплексное исследование биологической характеристики в частности вирулентности штаммов вируса клещевого энцефалита, вызвавших очаговые, лихорадочную и инаппарантную формы инфекции.
Материалы и методы
Штаммы вируса КЭ. Изучены 11 штаммов ВКЭ, которые были изолированы от больных людей с инаппа-рантной, лихорадочной и очаговыми формами инфекции. Штаммы вируса при лихорадочной и инаппарант-ной формах изолировали из крови больных, а в случаях летальных исходов при очаговых формах - из мозга умерших. Из таблицы 1 следует, что изоляция этих штаммов охватывала период с 1972 по 2000 гг. В работе использовали штаммы, прошедшие 2-9 пассажей через мозг 2-х суточных белых мышей.
Лабораторные животные. Во всех экспериментах использовали взрослых беспородных белых мышей, весом 18-20 г. На каждую точку в трех экспериментах брали по 10 животных с проведением 2-3-х кратных повторов опытов. Во всех опытах использовали одинаковую заражающую дозу вируса (100 или 1000 ТЦД50), которую вводили животным подкожно по 0,2 мл. В опытах №1 наблюдения за животными проводили на протяжении 4-х недель, №2 - до 11-14 дней и №3 - до 21 дня. Животные содержались в условиях вивария регламентируемых приказом Минздрава СССР №1179 от 10.10.1983 г. Опыты проводили в соответствии с приказами Минздрава СССР №755 от 12.09.1977 г. и №701 от 27.07.1978 г. «Об обеспечении принципов гуманного обращения с животными».
Титр вируса в биопробах определяли на культуре клеток СПЭВ по цитопатическому эффекту.
В работе использовали нуклеотидные последовательности геномов штаммов ВКЭ, депонированные в международную базу данных ОепВапк (табл. 1).
Выравнивание проводили с помощью пакета программ BioEdit 5.0.9 (URL: http://www.mbio.ncsu.edu/BioEdit/). Филогенетический анализ проводили методом объединения ближайших соседей (neighbor-joining, эволюционная модель Tamura & Nei) с помощью программ Mega 4 [11]и TreeCon [12]. Оценку достоверности реконструированной топологии древа осуществляли с помощью бутстреп-анализа на основе 1000 псевдореплик.
Результаты и обсуждение
Проведено полногеномное секвенирование 11 штаммов ВКЭ, на основе чего построено филогенетическое древо (рис. 1). Штаммы заняли разные позиции, образуя три группы (А - Oshima-, В - Sofin- и С - Senzhang-подобные штаммы). При выполнении данных исследо-
Штаммы вируса клещевого энцефалита, изолированные от больных людей с разными формами инфекции
Таблица 1
№ Штамм Пассаж Номер в GeneBank Район изоляции Год изоляции Объект изоляции
I группа (штаммы, вызвавшие очаговые формы КЭ)
1 Spassk-72 (Sp-72) VI JQ825151 Спасский 1972 мозг умершего больного КЭ
2 Dal'negorsk VIII FJ402886 Дальнегорский 1973 мозг
3 Kavalerovo V FJ402885 Кавалеровский 1985 мозг
4 Primorye-86 (P-86) IX EU816455 Кировский 1986 мозг
5 Primorye-90 (P-90) VII FJ997899 Пригород г. Арсеньева 1990 мозг
II группа (штаммы, вызвавшие лихорадочную форму КЭ)
1 Shkotovo-94 (Sh-94) V JQ825147 Шкотовский 1994 кровь
2 Kiparis-94 III JQ825146 Надеждинский п. Кипарисово 1994 кровь
III группа (штаммы, вызвавшие инаппарантную форму КЭ)
1 Primorye-823 (P-823) II JQ825164 Красноармейский 2000 кровь
2 Primorye-270 (P-270) III EU816452 Надеждинский район, п.Мирный 1991 кровь
3 Primorye-196 (P-196) VII JQ825155 Пригород Владивостока, б.Лазурная 2000 кровь
4 Primorye-437 (P-437) VIII JQ825162 Пригород Владивостока, б.Лазурная 1999 кровь
Примечание: А - ОвЫта-подобные штаммы; В - 8о^т-подобные штаммы; С - 8епгЬа^-подобные штаммы.
Рис. 1. Филогенетическое древо штаммов вируса КЭ, взятых в исследование.
ваний нами целенаправленно были выбраны представители из этих групп, вызвавшие разные клинические формы заболевания. В группе Oshima-подобных расположились штаммы, вызвавшие не только инаппарант-ную форму (Рптогуе-270, Рптогуе-823, Рптогуе-437), но и манифестные формы КЭ (Рптогуе-86, Рптогуе-90, Юраш-94). В группе 8о^т-подобных расположились штаммы, изолированные от людей с очаговыми формами инфекции (БаГпе§огек, Spassk-72) и лихорадочной
- ^коШуо-94), в группе Senzhang-подобные -штамм Кауа1егоуо, выделенный из мозга умершего, а также Рптогуе-196
- из крови больного с инаппарантной формой.
При сравнительном изучении вирулентности штаммов нами был охарактеризован основной ее показатель - нейро-инвазивность. На рис. 2 показано два параметра (выживаемость и СПЖ), полученных при подкожном заражении белых мышей разными штаммами в дозах 100 и 1000 ТЦД50. По этим параметрам ней-роинвазивность штаммов 1 группы была более выражена по сравнению с другими штаммами. У штаммов 2 и 3 групп показатели выживаемости и СПЖ были выше.
Рис. 2. Динамика накопления вируса в органах белых мышей, зараженных разными штаммами вируса КЭ (А - в крови, В - в селезенке, С - в мозге). По оси абсцисс - титр вируса в ^ ТЦД50, по оси ординат - дни наблюдения.
Чтобы понять механизм развития инфекционного процесса в организме белых мышей, зараженных разными штаммами ВКЭ, мы провели наблюдения за динамикой накопления вируса в органах белых мышей (рис. 2; А - в крови, В - в селезенке, С - в мозге). Одинаковая заражающая доза (3 ^ ТЦД50) для трех штаммов ^р-72, Shkotovo-94 и Р-437) показала различия в ходе развития патогенетического процесса. В крови все штаммы ВКЭ появились на 3-и сутки, но самый высокий показатель зарегистрирован для штамма Sp-72 (4 ^ ТЦД50), а низкий - для штамма Р-437 (1 ^ ТЦД50).
При этом пик вирусемии для штаммов Sp-72, Shkotovo-94 пришелся на 5 сут, для Р-437 - только на 9 сут. В селезенке пик накопления штаммов Sp-72 и Shkotovo-94 пришелся также на 5 сут., а для Р-437 - на 11 сут. Прохождение гематоэнцефалического барьера для штаммов Sp-72 и Shkotovo-94 наступило на 5 сут., а для штамма Р-437 - на 7 сут. Пик накопления вируса в мозге (6 ^ ТЦД50) для штамма Sp-72 наблюдали на 9-11 сут (срок гибели животных).
Для Shkotovo-94 максимальный показатель (4 ^ ТЦД50) был на 7 сут., затем титр вируса стал быстро снижаться.
Штамм Р-437 показал свою особенность: в мозге зараженных белых мышей он появился только на 7-е сут. (1 ^ ТЦД50), затем титр вируса постепен-
но повышался, достигая максимума (4 ^ ТЦД50) на 11 сут.
Получены дополнительные данные, характеризующие тяжесть инфекционного процесса по изменению показателей веса белых мышей, зараженных одной дозой (3 ^ ТЦД50) разными штаммами ВКЭ. На рис. 3 видно, что штаммы первой группы вызвали у мышей быстрое падение веса с последующей их гибелью. Во второй группе животных, зараженных штаммом Kiparis-94, происходило заметное отставание веса по сравнению с группой контроля, а для штамма Shkotovo-94, начиная с 9-х сут. животные стали резко терять вес. Животные из группы инап-парантных штаммов также по-разному набирали вес, так у мышей, зараженных штаммом Р-196, прибавка веса была замедленной, а животные, зараженные штаммом Р-437, до 8-ми сут. массу не набирали, а затем постепенно стали его терять.
В ранее проведенных молекулярно-генетических исследованиях нами было показано, что штаммы, выделенные от больных с разными формами заболевания, на филогенетическом древе заняли позиции в двух крупных кластерах Oshima- и Sofiiп-подобных [1]. Причем, в первом кластере доминировали штаммы, вызвавшие инаппарантную форму (82%), здесь же по 9% пришлось на штаммы с лихорадочной и очаговыми формами инфекции. Второй кластер в большинстве случаев состоял из штаммов, вызвавших манифестные формы и редко - инаппарантную форму инфекции [6]. И хотя исследователь всегда стремится получить четко ранжированные данные, следует признать, что штаммы из групп Oshima- и Sofiп-подобных в разной степени, но способны вызвать любое течение инфекции от очаговых до инап-парантных форм. В этой связи в настоящей работе нами вполне сознательно были взяты штаммы из разных генетических групп, способных вызывать очаговые, лихорадочную и инаппарантную формы инфекции.
Известно, что вирулентность возбудителей инфекционных болезней является одной из наиболее сложных функций, характеризующих меру патогенности. Оценку нейровирулентности штаммов можно связать со способностью их преодолевать гематоэн-цефалический барьер. Большинство авторов считает, что переход вируса из кровяного русла в вещество мозга происходит путем диффузии через цитоплазму эндотелия, либо путем прохождения через эндотелиальные щели. Этот важный компонент нейровирулентности - нейроинвазивность был охарактеризован нами в эксперименте при подкожном заражении взрослых белых мышей разными заражающими дозами штаммов ВКЭ (100 и 1000 ТЦД50), которые более наглядно помогли рассмотреть различия штаммов по их основной характеристике - вирулентности. Причем, у штаммов,
Таблица 2
Нейроинвазивность штаммов вируса КЭ, изолированных от больных людей с разными формами инфекции
№ п\п Штаммы Выживаемость (%) белых мышей при подкожном заражении Средняя продолжительность жизни (СПЖ) мышей (дней)
100 ТЦД50 | 1000 ТЦД50 100 ТЦД50 I 1000 ТЦД50
I группа («Очаговые» штаммы)
1 Бр-72 0 0 8,9 11,5
2 йа!педог$к 30 0 14,7 7,1
3 Кауа!егоуо 10 0 13,1 8,1
4 Р-86 80 0 24,9 16,0
5 Р-90 0 0 11,1 10,3
II группа («Лихорадочные» штаммы)
1 БЬ1ко1:оуо-94 80 40 26,3 16,0
2 КГрагГБ-94 Н.и. 10 Н.и. 15,5
III группа («Инаппарантные» штаммы)
1 Р-823 40 0 17,1 8,9
2 Р-270 100 90 28,0 26,2
3 Р-196 90 60 26,2 21,1
4 Р-437 60 60 22,1 25,1
М А.
0 - ■ ' ' А 12345 67?^ 10\Ц 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
Ж
*
—ф—сопио1 —■— 5ра55к-72 - -А,- - Кауа1егоуо
Р ■ иЯя ■
1^' 1 ,|< 1 1 л 1 Ш" 3 4 5 Е 9 Ао 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
*
А* 'А*-*’
-4 - —♦ согиго! —»— К1рам$-94 - -А- -5Икогоуо-84
А
/ ^ ш • “ "
1234567^*1* 11*12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
-2 - Д. * 4 .* А-* * * * —Ф—сопио! —и— Р-196 - -а- - Р-4 37
Рис. 3. Изменения показателей веса белых мышей, зараженных штаммами вируса КЭ, выделенными от больных людей (А - с очаговыми, В - лихорадочной и С - инаппарантной формами инфекции).
вызвавших инаппарантную форму, показатели (% выживших и СПЖ) были значительно выше (табл. 2). Это указывало на то, что преодоление гематоэнцефаличе-ского барьера у них затруднено. Подобные результаты были получены другими авторами при изучении вирулентности штаммов вируса лихорадки Западного Нила [9]. Жизнеспособность таких штаммов значительно ниже по сравнению с другими штаммами, которые быстро проникают в мозг экспериментальных животных. Действительно, такие штаммы мы выделяли на 2-3 сут. после укуса клеща из крови лиц, которые не заболели КЭ [5]. Примечательно то, что настоящие исследования проведены не на экспериментальных клонах вируса, с помощью которых исследователи получают подобные результаты [2], а на штаммах, выделенных непосредственно от больных людей (табл. 1). Кроме того, несмотря на то, что два штамма Р-86 и Р-90, вызвавшие у больных летальный исход, а на филогенетическом древе заняли позиции в группе ОзЫша-подобных штаммов, нейроинвазивные свойства у них были выражены, как у типичных вирулентных штаммов.
Убедительные данные получены в эксперименте на белых мышах по накоплению в органах разных штаммов (8р-72, 8Ько1:оуо-94 и Р-437). На фоне одинаковой и невысокой заражающей дозы (3,0 1§ ТЦД50) мы уловили различия в накоплении каждого штамма в крови, селезенке и мозге белых мышей. Прохождение гематоэнце-фалического барьера для штаммов 8р-72 и 8Ько1:оуо-94
наступило на 5 сут., а для штамма Р-437 - на 7 сут. Для штамма 8р-72 был характерен более активный инфекционный процесс с быстрым проникновением вируса в органы и мозг по сравнению со штаммом Р-437, который достиг максимальных показателей в крови на 9 сут., а в селезенке и в мозге только на 11 сут.
Впервые для таких штаммов получены значимые дополнительные данные, которые адекватно и комплексно характеризовали тяжесть инфекционного процесса по изменению показателей веса взрослых белых мышей. Штаммы, изолированные из мозга больных с летальным исходом, у экспериментальных животных вызывали быстрое ухудшение общего состояния, что отражалось на резком снижении веса и быстром наступлении летального исхода. Штаммы, изолированные от людей с лихорадочной и инаппарантной формой, проявили менее выраженную инфекциозность и показали возможность длительного и затяжного периода болезни или выздоровления отдельных особей в группе экспериментальных животных.
Несмотря на различия клинических синдромов КЭ, генетические основы особенностей патогенеза этих близкородственных штаммов изучены пока плохо. Хотя в работе Мйге1 и соавт. [10] уже содержатся доказательства того, что, в дополнение к хорошо известной роли Е белка вируса КЭ в тропизме к клеткам разных природных хозяев, белки М, N83, №4Л и N843 могут иметь вирусные детерминанты, ответственные за репликацию вируса. Авторы полагают, что мутации определяют не просто детерминанты репликации, но могут иметь специфические детерминанты нейроинвазивности. Значит, такие штаммы можно изучать с использованием обратной генетики для определения точной роли отдельных мутаций в хозяино-специфической репликации и патогенезе, что позволит обеспечить понимание функции этих белков в репликации вируса.
Молекулярно-генетический анализ изучаемых нами штаммов ВКЭ [8] указал на возможное снижение ферментативной активности вирусной про-теазы. Выявлены две мутации, которые способны вызвать конформационные изменения белкового комплекса и привести к пространственному разобщению гидрофильного мотива белка N823 и каталитического центра N83 протеазы, что может изменять скорость процессинга вирусного полипротеина и влиять на патогенность вируса. Авторы полагают, что дополнительно к этому необходима также согласованность во времени работы еще и клеточной сигналазы, поскольку дисбаланс в скоростях работы этих двух ферментов может приводить к образованию большого количества дефектных вирусных частиц, не содержащих вирусные РНК, т.е. не вирулентные частицы. Охарактеризованные нами три группы штаммов различаются, прежде всего, тем, что группа инаппарантных штаммов имеет пониженную скорость мутагенеза, предопределяя сниженную выживаемость такой вирусной популяции.
Таким образом, комплексные исследования, направленные на изучение вирулентности и в частности нейроинвазивности, показали значительные различия инфекционного потенциала штаммов, изолированных от людей с очаговыми формами КЭ и от лиц с инаппа-рантной формой. Понятно, что при попадании в кровь последних штаммов с укусом клеща вероятность выжить таких штаммов в макроорганизме не высокая. Как правило, происходит быстрая элиминация их из организма в начальном периоде инфекционного процесса. На это мы неоднократно обращали внимание, объясняя данный факт также образованием дефектных вирусных частиц [5]. Штаммы, вызвавшие лихорадочную форму инфекции у людей, могут по-разному проявить себя в макроорганизме. Кроме того, ранее нами было пока-
зано, что на развитие инфекционного процесса влияет также состояние иммунной системы [3], определяя тяжесть течения или быструю элиминацию вируса с на-
ЛИТЕРАТУРА
1. Беликов С. И., Леонова Г.Н., Кондратов И.Г. и др. Кодирующие нуклеотидные последовательности штаммов вируса клещевого энцефалита, изолированных из крови людей без клинических проявлений инфекции // Генетика. -2010. - Т. 46. №3. - С.356-363.
2. Карганова Г.Г. Механизмы микроэволюции вируса клещевого энцефалита: Автореф. дис ... д-ра биол.наук. - М., 2009 - 43 с.
3. Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Павленко Е.В. и др. Особенности противовирусного иммунного ответа у вакцинированных и невакцинированных пациентов на примере лихорадочной формы клещевого энцефалита // Бюл. СО РАМН. - №4. - С.72-78.
4. Левкович Е.Н., Погодина В.В., Засухина Г.Д., Карпавич Л.Г. Вирусы комплекса клещевого энцефалита. - Л.: Медицина, 1967. - 245 с.
5. Леонова Г.Н., Беликов С.И., Павленко Е.В. и др. Характеристика вирусной популяции клещевого энцефалита на юге Дальнего Востока России // Вопр. вирусол. - 2007. -№6. - С.13-17.
6. Леонова Г.Н., Крылова Н.В., Павленко Е.В. и др. Значение дальневосточных штаммов вируса клещевого энцефалита в инфекционной патологии // ЗНиСО. - 2012. - №1. - С.4-6.
ступлением выздоровления.
Работа выполнена при поддержке гранта МНТЦ №4006.
7. Онищенко Г.Г., Федоров Ю.М., Пакскина Н.Д. Организация надзора за клещевым энцефалитом и меры по его профилактике в Российской Федерации // Вопр. вирусол.
- 2007. - №5. - С.8-10.
8. Потапова У.В., Романова Е.В., Потапов В.В. и др. Анализ мутаций и молекулярное моделирование комплекса сери-новой протеазы NS2B-NS3 вируса клещевого энцефалита // Бюл. ВСНЦ СО РАМН . - 2011. - Т. 77. №1. Ч.1. - С.239-244.
9. Iyer A.V., Boudreaux M.J., Wakamatsu N., et al. Complete genome analysis and virulence characteristics of the Louisiana West Nile virus strain LSU-AR01 // Virus Genes. - 2009. - Vol. 38. - Р.204-214.
10. Mitzela D.N., Besta S.M., Masnicka M.F., et al. Bloom Identification of genetic determinants of a tick-borne flavivirus associated with host-specific adaptation and pathogenicity // Virology. - 2008. - Vol. 381. №2. - Р.268-276.
11. Tamura K., Dudley J., Nei M., Kumar S. MEGA4: Molecular Evolutionary Genetics Analysis (MEGA) software version 4.0 // Molecular Biology and Evolution. - 2007. - Vol. 24 - Р.1596-1599.
12. Van de Peer Y., De Wachter Y. TREECON for Windows: a software package for the construction and drawing of evolutionary trees for the Microsoft Windows environment // Comput. Applic. Biosci. - 1994. - Vol. 10. - Р.569-570.
Информация об авторах: 690087, г.Владивосток, ул. Сельская 1 ФГБУ НИИЭМ СО РАМН, e-mail: galinaleon@mail.primorye.ru; galinaleon41@gmail.com, тел. (423) 2440712, Леонова Галина Николаевна - заведующий лабораторией, д.м.н., профессор; Павленко Елена Владимировна - научный сотрудник, к.м.н., e-mail: pavlena_77@rambler.ru; Майстровская Ольга Сергеевна - младший научный сотрудник; Беликов Сергей Иванович -заведующий лабораторией, д.б.н., профессор, 664033, г. Иркутск, ул. Улан-Баторская, 3, e-mail: sergeibelikov47@gmail.com; Кондратов Илья Геннадьевич - старший научный сотрудник, к.б.н., e-mail: igkondratov@rambler.ru
© ПЕНЬЕВСКАЯ Н.А., ВАЙТОВИЧ М.А., РУДАКОВ Н.В., РУДАКОВА С.А. - 2012 УДК 614.4
МЕТОДОЛОГИЯ ОЦЕНКИ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА (НА ПРИМЕРЕ ОМСКОЙ ОБЛАСТИ)
Наталья Александровна Пеньевская1, Марина Анатольевна Вайтович2,
Николай Викторович Рудаков3, Светлана Анатольевна Рудакова3 ('Омская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. А.И. Новиков, ^Управление Роспотребнадзора по Омской области, руководитель - А.С. Крига, 3Омский НИИ природноочаговых инфекций,
директор - д.м.н., проф. Н.В. Рудаков)
Резюме. Продемонстрировано, что влияние специфической профилактики на проявления эпидемического процесса клещевого энцефалита, в том числе в период макроциклического снижения его интенсивности, можно оценить в ходе сравнительного ретроспективного анализа многолетних данных о заболеваемости и объемах профилактических мероприятий в разных возрастных и социальных группах населения территорий, сопоставимых по уровню популяционного риска заражения, используя следующие методические приемы: анализ динамики интенсивных и экстенсивных показателей заболеваемости детей относительно аналогичных показателей взрослых; парное сравнение районов; анализ динамики структуры клинических форм; кластерный анализ.
Ключевые слова: клещевой энцефалит, эпидемиологическая эффективность вакцинации.
THE METHODOLOGY OF EVALUATION OF EPIDEMIOLOGICAL EFFICACY OF TICK-BORNE ENCEPHALITIS SPECIFIC PREVENTION (ON THE EXAMPLE OF THE OMSK REGION)
N.A. Penevskaya1, M.A. Vaytovich2, N.V. Rudakov3, S.A. Rudakova3 ('Omsk State Medical Academy, 3Omsk Scientific Research Institute of Natural Focal Infections)
Summary. The research shows that the influence of specific prevention on the manifestations of the epidemic process of tick-borne encephalitis (TBE), including the period of macrocyclic reduce of its intensity, can be evaluated by comparative retrospective analysis of long-term data about the incidence and volume of preventive measures in different age and social groups of the population on territories that are comparable in terms of risk of population infecting. In order to implement this kind of evaluation the following methodological techniques can be used: the analysis of intensive and extensive children morbidity indicators relative to similar indicators of adults; pair comparison of areas; the analysis of dynamics of the clinical forms’ structure; the cluster analysis.
Key words: tick-borne encephalitis, epidemiological effectiveness of vaccination.______________
