CC BY
86
153_
ORIGINAL ARTICLE
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2019
УДК 616.24-002:616.94-022.7]-036.22-053.2
Маянский Н.А.1, Кварчия А.З.2, Бржозовская Е.А.2, Пономаренко О.А.2, Крыжановская О.А. 2, КуличенкоТ.В.2
ВИДОВОЕ РАЗНООБРАЗИЕ И ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К АНТИБИОТИКАМ ОРАЛЬНЫх
стрептококков, выделенных У ДЕТЕЙ
'ФГБОУ ВО «Российский национальный медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Минздрава России, 117997, г Москва, Россия, ул. Островитянова, 1;
2 ФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Минздрава России, 119991, r. Москва, Россия, Ломоносовский проспект, 2, стр. 1
Представители рода Streptococcus viridans (оральные стрептококки), колонизирующие верхние дыхательные пути, составляют группу комменсалов, которые могут вызывать тяжелые инфекции (преимущественно у иммунокомпрометированных лиц). Оральные стрептококки могут обмениваться генетическим материалом с другими бактериями, колонизирующими те же локусы организма, профили их резистентности могут служить маркерами риска развития устойчивости к определенным антибиотикам у близкородственных бактерий, в частности, Streptococcus pneumoniae. Целью исследования явилось описание видового состава оральных стрептококков и определение профиля их чувствительности к широкой панели антибиотиков. Материалы и методы. Исследовали изоляты оральных стрептококков, выделенных при посеве ротоглоточных мазков, полученных у детей различного возраста с острыми респираторными инфекциями, не получающих антимикробную терапию, на селективную стрептококковую среду с добавлением пенициллина (Пен, 1 мг/л) или эритромицина (Эри, 2 мг/л). Идентификацию проводили при помощи масс-спектрометра Microflex LT/SH с программным обеспечением MALDI Biotyper 3.1. Минимальные подавляющие концентрации (МПК) для 11 групп антибиотиков определяли на планшетах Sensititre STP6F. Результаты. Всего исследовано 253 ротоглоточных мазка. Чаще всего высевались Пен-устойчивые и Эри-устойчивые стрептококки из группы Streptococcus mitis, которые были обнаружены у 158 (62,5%) и 169 (66,8%) обследованных соответственно. Эри-устойчивые стрептококки группы Streptococcus salivarius были выявлены в 107 (42,3%) образцах, Пен-У стрептококки из этой группы встречались значительно реже - 16 (6,3%) образцов. Пен- и Эри-устойчивые изоляты группы Streptococcus sanguinis присутствовали в 69 (27,3%) и 49 (19,4%) образцах соответственно. Все исследованные стрептококки были чувствительны к ванкомицину, линезолиду и (кроме одного) к левофлоксацину; около 90% - к дапто-мицину, рифампицину и хлорамфениколу. Чувствительность к тетрациклину была ниже и составила 57,5%. Множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ; устойчивость к >3 группам антибиотиков) обладали 93 (58,1%) изолята; наиболее часто наблюдалось комбинирование устойчивости к пенициллину, эритромицину и тетрациклину, выявленная у 53 (57%) изолятов с МЛУ. Streptococcus mitis/oralis отличались более высокими МПК пенициллина, ампициллина и цефтриаксона, а также частотой устойчивых форм, в том числе с МЛУ, по сравнению с другими стрептококками. Таким образом, в видовой структуре антибиотикоустойчивых оральных стрептококков преобладают стрептококки группы Streptococcus mitis, в первую очередь S. mitis/oralis, среди которых распространена МЛУ, включая устойчивость к в-лактамам.
Ключевые слова: оральные стрептококки; резистентность; множественная лекарственная устойчивость.
Для цитирования: Маянский Н.А., Кварчия А.З., Бржозовская Е.А., Пономаренко О.А., Крыжановская О.А. , Кули-ченко Т.В. Видовое разнообразие и чувствительность к антибиотикам оральных стрептококков, выделенных у детей. Российский педиатрический журнал. 2019; 22(3): 153-161. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1560-9561-2019-22-3-153-161.
Mayanskiy N.A.1, KvarchiyaA.Z.2, BrzhozovskayaE.A.2, Ponomarenko O.A.2, Kryzhanovskaya O.A.2, Kulichenko T.V.2
SPECIES DIVERSITY AND SENSITIVITY TO ANTIBIOTICS AGAINST ORAL STREPTOCOCCI ISOLATED IN CHILDREN
1N.I. Pirogov Russian National Research Medical University, 1, Ostrovitianova str., Moscow, 117997, Russian Federation; 2National Medical Research Center of Children's Health, 2, bld. 1, Lomonosov avenue, Moscow, 119991, Russian Federation
Oral streptococci can exchange genetic material with other bacteria colonizing the same loci of the body, their resistance profiles can serve as markers of the risk of the developing resistance to certain antibiotics in closely related bacteria, in particular, Streptococcus pneumoniae. Materials and Methods To describe the species composition of oral streptococci and to detect the profile of their sensitivity to a wide range of antibiotics there were investigated oral streptococcal isolates isolatedfrom oropharyngeal smears sown in children of various ages with acute respiratory infections not receiving antibacterial therapy for selective streptococcal medium with penicillin (Pen, 1 mg/l) or erythromycin (Ery, 2 mg/l). 253 oropharyngeal smears were studied.
Results. The most frequent sowings were Pen-resistant and Ery-resistant Streptococcus mitis, found in 158 (62.5%) and 169 (66.8%) studied, respectively. Ery-resistant Streptococcus salivarius group was detected in 107 (42.3%) samples, Pen-resistant streptococcus from this group were found much less frequently in 16 (6.3%) samples. Pen and Eri-resis-tant isolates of Streptococcus sanguinis group were present in 69 (27.3%) and 49 (19.4%) samples respectively. All the streptococcus specimens studied were sensitive to vancomycin, linezolid and (except for one) levofloxacin; about 90% were sensitive to daptomycin, rifampicin and chloramphenicol. Sensitivity to tetracycline was lower at 57.5%. Multiple drug resistance (MDR; resistance to >3 groups of antibiotics) had 93 (58.1%) isolates; the most common combination
Для корреспонденции: Куличенко Татьяна Владимировна, доктор мед. наук, проф., зав. отд-нием неотложной педиатрии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: tkulichenko@yandex.ru
154
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
of penicillin, erythromycin and tetracycline resistance was found in 53 (57%) MDR isolates. Streptococcus mitis/oralis were characterized by higher MPCs ofpenicillin, ampicillin and ceftriaxone, as well as the frequency of stable forms, including MDR, as compared to other streptococci. Streptococcus mitis, first S. mitis oralis group streptococcus predominate in the species structure of antibiotic-resistant oral streptocococci, among which MDR is widespread, including resistance to fS-lactams.
Keywords: oral streptococci; resistance; multiple drug resistance.
For citation: Mayanskiy N.A., Kvarchiya A.Z., Brzhozovskaya E.A., Ponomarenko O.A., Kryzhanovskaya O.A., Kulichenko T.V. Species diversity and sensitivity to antibiotics against oral streptococci isolated in children. Rossiiskiy Pediatricheskiy Zhurnal (Russian Pediatric Journal). 2019; 22(3): 153-161. (In Russian). DOI: http://dx.doi. org/10.18821/1560-9561-2019-22-3-153-161.
For correspondence: Tatyana V Kulichenko, M.D., Ph.D., Head of Pediatric emergency department National Medical Research Center of, Children's Health, 2, bld. 1, Lomonosov avenue, Moscow, 119991, Russian Federation. E-mail: tkulichenko@yandex.ru Information about authors:
Mayanskiy N.A., https://orcid.org/0000-0002-5050-3103 Kulichenko T.V., https://orcid.org/0000-0002-3523-5411 Kvarchiya A.Z., https://orcid.org/0000-0001-9985-509X Kryzhanovskaya O.A., https://orcid.org/0000-0001-7242-3019
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Acknowledgment. The study had no sponsorship.
Received 14.06.2019 Accepted 26.06.2019
Введение
, ■ у представители рода Streptococcus (стрепто-' / / кокки), колонизирующие человека, являют-J L ся частью нормальной микробиоты верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного и уроге-нитального тракта [1]. Стрептококки, выделяемые из ротоглотки, представляют собой разнородную группу потенциально патогенных грамположительных кокков, которые могут вызывать тяжелые инфекции, такие как эндокардит, абдоминальные инфекции, пневмонию, инфекционно-токсический шок преимущественно у иммунокомпрометированных лиц [2].
Выделяют более 30 различных видов стрептококков, среди которых доминируют зеленящие стрептококки (viridans group Streptococci, VGS) [3]. Таксономическая классификация и номенклатура стрептококков всегда отличалась сложностью и неопределенностью [4]. Традиционно их классифицировали на основе способности вызывать гемолиз на чашках с кровяным агаром с образованием зоны зеленоватого цвета вокруг колонии (a-гемолиз) за счет частичного лизиса эритроцитов (отсюда происходит термин «зеленящие стрептококки») или формировать ß-гемолитические колонии, т.е. полностью лизировать эритроциты и обесцвечивать среду вокруг зоны роста [2, 5]. Однако гемолиз перестал быть надежной основой для стрептококковой таксономии, тем более что многие «зеленящие» виды могут не вызвать гемолиза (так называемый g-гемолиз) или быть ß-гемолитическими. Многие виды стрептококков имеют схожие фенотипические характеристики, такие как размер колоний, тип гемолиза, групповые углеводные антигены, что требует проведения целых панелей биохимических реакций для более или менее надежной видовой идентификации [1, 4]. Появление молекулярных инструментов и использование секвенирования гена 16S рРНК и ряда других консервативных генов позволило существен-
но прояснить систему видовой классификации рода Streptococcus [5, 6]. В последние годы для идентификации многих микроорганизмов с успехом начали использовать масс-спектрометрическое профилирование рибосомальных белков [7]. Эта технология обеспечивает удовлетворительную групповую идентификацию стрептококков, а для многих видов VGS - и видовую идентификацию [8-10].
Снижение чувствительности стрептококков к антибиотикам зафиксировано многими исследованиями [2, 3, 11-13]. Это относится как к антибиотикам пенициллинового ряда [2], так и к макролидам [12, 13]. С учетом того, что VGS могут обмениваться генетическим материалом с другими бактериями, колонизирующими те же локусы организма, профили их резистентности могут служить маркерами риска развития устойчивости к определенным антибиотикам у близкородственных бактерий, в частности, Streptococcus pneumoniae [3].
В связи с этим, целью нашего исследования стало описание видового разнообразия оральных стрептококков, полученных при помощи селективных сред с добавлением пенициллинам (Пен) и эритромицина (Эри), а также определения профиля их чувствительности к широкому спектру антибиотиков.
Материалы и методы
Ротоглоточные мазки получали при помощи сухих стерильных зондов с велюр-тампоном (Copan, Италия); полученные образцы помещали в транспортную среду и замораживали и хранили при -70 °С до исследования [14]. После посева на колумбийском кровяном агаре в присутствии селективной стрептококковой добавки (COBA Medium, Oxoid, Великобритания) и оценки интенсивности роста (через 24-48 ч) для дальнейшего исследования отбирали колонии на основе морфологии. С селективной стреп-
155_
ORIGINAL ARTicLE
тококковой среды (ССС) без антибиотиков отбирали только колонии, имевшие морфологически признаки Streptococcus pyogenes (крупные колонии >0,5 мм с зоной ß-гемолиза) или S. pneumoniae (суховатые небольшие колонии с вдавлением в центре и зоной а-гемолиза) с последующим подтверждением их видовой принадлежности с использованием бацитра-цина или оптохинового теста и латекс-агглютинации (набор Slidex Pneumo-kit, bioMerieux, Франция) соответственно, как описано ранее [1, 15]. С чашек, содержавших ССС и 1 мг/л Пен (Sigma-Aldrich, США; среда ССС+Пен) или 2 мг/л Эри (Sigma-Aldrich; среда ССС+Эри) отбирали колонии с наличием а- или ß-гемолиза, которые могли принадлежать VGS [5]. Выбранные концентрации антибиотиков обеспечивали селективный рост устойчивых стрептококков со сниженной чувствительностью/резистентностью в отношении Пен и Эри (Пен-У и Эри-У). Для получения достаточного объема чистой культуры колонии пересевали на стандартный колумбийский кровяной агар и через 24 ч проводили идентификацию.
Идентификацию не пневмококковых VGS проводили при помощи масс-спектрометра Microflex LT/ SH с программным обеспечением MALDI Biotyper 3.1 [база данных DB7311] (все - Bruker Daltonics Inc., США). Данный метод позволяет дифференцировать большинство видов стрептококков, за исключением ряда представителей групп mitis и sanguinis (см. табл. 1). В частности, затруднена видовая идентификация S. mitis, S. oralis, S. peroris и S. pseudopneuminae, а также S. parasanguinis и S. sanguinis. В связи с этим при анализе видового разнообразия согласно рекомендациям производителя эти виды стрептококков объединили в группу S. mitis/oralis/peroris/pseudopneumoniae и S. parasanguinis/sanguinis. Для группы изолятов S. mitis/oralis/peroris/pseudopneumoniae, отобранной для анализа чувствительности методом микроразведений (определение минимальной подавляющей концентрации [МПК] антибиотиков; см. ниже), провели биохимическую видовую дифференцировку с использованием наборов API 20 Strep (bioMerieux). В своей работе мы опирались на классификацию, которая разделяет VGS на шесть групп [4]: группы anginosus, bovis, mitis, mutans, salivarius и sanguinis. Кроме того, мы включили в анализ группу ß-гемолитических стрептококков в связи с их высокой клинической значимостью.
Во избежание дублирования при отборе стрептококков для определения МПК не допускали включения Пен-У и Эри-У изолятов одного вида, выделенных из одного образца. МПК исследовали методом микроразведений с использованием готовых планшетов Sensititre STP6F (Thermo Fisher Scientific, США). В лунки этих планшетов вносили известные концентрации антимикробных препаратов, относящихся к 11 различным группам, включая ß-лактамы (Пен, ампициллин, цефтриаксон), макролид (Эри), линкозамид (клиндамицин), тетрациклин (Тет), триметоприм/ сульфаметоксазол, хлорамфеникол, рифампицин, ли-попептид (даптомицин), фторхинолон (левофлокса-цин), оксазалидинон (линезолид), гликопептид (ван-комицин). Категоризацию МПК проводили согласно критериям CLSI (2019 г.) [16]. Множественную ле-
карственную устойчивость определяли как снижение чувствительности или резистентность к трем и более группам антибиотиков.
Для определения генов ermB и mef у макролид-резистентных стрептококков использовали ПЦР, как описано ранее [17]. Носительство tetM и tetO тестировали также при помощи ПЦР [18].
Статистическую обработку осуществляли с помощью пакета статистических программ SPSS v. 22.0 (IBM SPSS Statistics, США). Для сравнения долей использовали z-критерий. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05.
Результаты
Видовое разнообразие оральных стрептококков
Видовое разнообразие оральных стрептококков было проанализировано в 253 образцах. Всего исследовали 264 колонии, отобранные с ССС+Пен и 344 колонии, отобранные с ССС+Эри. С чашек, содержавших ССС без антибиотиков, отбирали только колонии, имевшие морфологические признаки S. pyogenes и S. pneumoniae с учетом высокой клинической значимости указанных организмов. В результате ротоглоточное носительство S. pyogenes было выявлено у 23 (9,1%) обследованных, а пневмококк обнаружили в 13 (5,1%) образцах.
Данные о диагнозе были доступны у 22 из 23 S. pyogenes-позитивных обследованных, из которых у 10 был острый тонзиллит и еще у двух - острый лимфаденит (суммарно n = 12, 54%). У остальных 10 (46%) пациентов посещение не было связано с болями в горле и они не имели данных за S. pyogenes-ассоциированную инфекцию, что свидетельствовало о бессимптомном носительстве S. pyogenes.
Были идентифицированы представители шести основных групп VGS и Р-гемолитические стрептококки. Среди антибиотикоустойчивых VGS преобладали представители 3 групп, а именно mitis, salivarius и sanguinis. Чаще всего высевались Пен-У и Эри-У стрептококки из группы mitis, которые были обнаружены у 158 (62,5%) и 169 (66,8%) обследованных соответственно (см. табл. 1). Видовая дифференцировка 72 изолятов S. mitis/oralis/peroris/pseudopneumoniae при помощи биохимического метода (см. раздел «Материалы и методы») показала, что 46 (64%) и 26 (36%) изолятов представляли виды S. mitis и S. oralis соответственно; других видов из этой группы в исследованной выборке идентифицировано не было.
Эри-У стрептококки группы salivarius были выявлены в 107 (42,3%) образцах, Пен-У стрептококки из этой группы встречались значительно реже - 16 (6,3%) образцов. Группа sanguinis стала второй по частоте встречаемости среди Пен-У стрептококков - 69 (27,3%) образцов, и третьей - среди Эри-У стрептококков (49 [19,4%] образцов). Эри-У Р-гемолитические стрептококки были выявлены в 4 (1,6%) образцах.
Спектр чувствительности к нелактамным антимикробным препаратам
Для анализа профиля чувствительности к 11 группам антимикробных препаратов методом микрораз-
156
оригинальная статья
Таблица 1
Видовое разнообразие стрептококков, выделенных из ротоглотки у детей (п = 253)
Группа Вид Пен-У, n (%) Эри-У, n (%)
Mitis б
S. mitis/oralis/peroris/pseudopneumoniae 158 (62,5%) 169 (66,8%)
S. australia 9 (3,6%) 4 (1,6%)
S. infantis 5 (6%) 2 (0,8%)
S. gordonii 0 1 (0,4%)
Всего 172 (68%) 176 (69,6%)
Salivarius а S. salivarius 15 (5,9%) 98 (38,7%)
S. vestibularis 1 (0,4%) 9 (3,6%)
Всего 16 (6,3%) 107 (42,3%)
Sanguinis а S. parasanguinis/sanguinis 69 (27,3%) 49 (19,4%)
Anginosus а S. anginosus 2 (0,8%) 0
S. intermedius 1 (0,4%) 1 (0,4%)
Всего 3 (1,2%) 1 (0,4%)
Bovis а S. bovis 1 (0,4%) 1 (0,4%)
S. equinus 0 1 (0,4%)
Всего 1 (0,4%) 2 (0,8%)
Mutans а S. criceti 0 1 (0,4%)
S. mutans 0 1 (0,4%)
Всего 0 2 (0,8%)
Необычные а S. acidominimus 2 (0,8%) 2 (0,8%)
S. thoraltensis 1 (0,4%) 0
S. uberis 0 1 (0,4%)
Всего 3 (1,2%) 3 (1,2%)
ß-гемолитические в S. agalactiae 0 2 (0,8%)
S. dysgalactiae 0 2 (0,8%)
Всего 0 4 (1,6%)
Итого 264 (104%) г 344 (136%) г
Примечание. Пен-У и Эри-У - выделены со среды с добавлением 1 мг/л пенициллина и 2 мг/л эритромицина соответственно. а Зеленящие стрептококки (VGS). Классификация согласно [4].
б Со среды без антибиотиков было выделено 13 изолятов S. pneumoniae, относящегося к группе mitis; доля носителей составила 5,1% (13/253). в Со среды без антибиотиков было выделено 23 изолята S. pyogenes; доля носителей составила 9,1% (23/253). Сумма превышает 100%, т.к. в некоторых образцах обнаруживали несколько видов стрептококков одновременно.
ведений было отобрано 160 изолятов стрептококков (ССС+Пен - 58 изолятов, ССС+Эри - 102 изолята). Как и ожидалось, все изоляты, полученные с ССС+Пен и ССС+Эри, были нечувствительны к Пен (МПК > 0,25 мг/л) и Эри (МПК > 0,5 мг/л) соответственно. При этом 48 (83%) ССС+Пен-стрептококков были устойчивы к Эри, а 60 (59%) ССС+Эри-стрептококков демонстрировали нечувствительность к Пен. Таким образом, перекрестной резистентностью к Пен и Эри обладало 108 (67,5%) исследованных изолятов. Кроме того, поскольку S. mitis и S. oralis имели схожий профиль чувствительности, но отличались от других стрептококков большей устойчивостью к антибиотикам, мы сформировали две группы: S. mitis/oralis и остальные виды (колонка «Другие»; табл. 2).
Все исследованные стрептококки были чувствительны к ванкомицину и линезолиду; также все изоляты, за исключением одного, обладали чувствительностью к левофлоксацину. Более 90% изолятов были полностью чувствительны к даптомицину и рифампицину, 89,4% - к хлорамфениколу. Доля
клиндамицин-чувствительных стрептококков составила 83,1%. Чувствительность к Тет была ниже и составила 57,5% (табл. 2). Доля Тет-Р изолятов была выше среди mitis/oralis по сравнению с другими видами стрептококков (46% против 31%, р = 0,049). Кроме того, у mitis/oralis была ниже доля чувствительных к триметоприму/сульфаметоксазолу (50% против 68%; р = 0,020).
МЛУ обладали 93 (58,1%) исследованных стрептококка. Наиболее часто наблюдалось комбинирование устойчивости к Пен, Эри и Тет, которая была выявлена у 53 (57%) изолятов с МЛУ в сочетании с устойчивостью к триметоприму/сульфаметоксазолу (выявлена у 31 изолята) или без нее. Один изолят (5. salivarius) обладал пониженной чувствительностью сразу к шести группам антимикробных препаратов, включая Р-лактамы, эритромицин, клиндамицин, тетрациклин, хлорамфеникол и рифампицин. Доля МЛУ-изолятов S. т^/ога^ была выше по сравнению с другими стрептококками (68% против 50%, р = 0,020; табл. 2).
ORIGINAL ARTicLE
Таблица 2
Спектр чувствительности оральных стрептококков к 11 группам антибиотиков
Антибиотик Категория МПК (мг/л) S. mitis/oralis (n=72) Другие (n=88) Всего (n=160)
Пенициллин Ч (<0,12) 17 (24%) 25 (28%) 42 (26,3%)
СЧ (0,25-2) 26 (36%) 50 (57%) 76 (47,5%)
Р (>2) 29 (40%) a 13 (15%) 42 (26,3%)
Ампициллин Ч (<0,25) 18 (25%) 28 (32%) 46 (28,8%)
СЧ (0,5-4) 27 (38%) 45 (51%) 72 (45%)
Р (>4) 27 (38%) 15 (17%) 42 (26,3%)
Цефтриаксон Ч (<1) 45 (63%) б 70 (80%) 115 (71,9%)
СЧ (2) 7 (10%) 11 (13%) 18 (11,3%)
Р (>2) 20 (28%) а 7 (8%) 27 (16,9%)
Эритромицин Ч (<0,25) 5 (7%) 5 (6%) 10 (6,3%)
СЧ (0,5) 2 (3%) 2 (2%) 4 (2,5%)
Р (>0,5) 65 (90%) 81 (92%) 145 (90,6%)
Клиндамицин Ч (<0,25) 59 (82%) 74 (84%) 133 (83,1%)
СЧ (0,5) 1 (1%) 0 1 (0,6%)
Р (>0,5) 12 (17%) 14 (16%) 26 (16,3%)
Тетрациклин Ч (<2) 36 (50%) 56 (64%) 92 (57,5%)
СЧ (4) 3 (4%) 5 (6%) 8 (5,0%)
Р (>4) 33 (46%) в 27 (31%) 60 (37,5%)
Триметоприм/ Ч (<1) 36 (50%) г 60 (68%) 96 (60%)
сульфаметоксазол СЧ (2) 19 (26%) 12 (14%) 31 (19,4%)
Р (>2) 17 (24%) 16 (18%) 33 (20,6%)
Хлорамфеникол Ч (<4) 64 (89%) 79 (90%) 143 (89,4%)
СЧ (8) 2 (3%) 1 (1%) 3 (1,9%)
Р (>8) 6 (8%) 8 (9%) 14 (8,8%)
Рифампицин Ч (<0,06) 67 (93%) 78 (89%) 145 (90,6%)
СЧ (0,120-0,5) 5 (7%) 8 (9%) 13 (8,1%)
Р (>0,5) 0 2 (2%) 2 (1,3%)
Даптомицин Ч (<1) 69 (96%) 86 (98%) 155 (96,9%)
? (>1) д 3 (4%) 2 (2%) 5 (3,1%)
Левофлоксацин Ч (<2) 71 (99%) 88 (100%) 159 (99,4%)
СЧ (4) 0 0 0
Р (>4) 1 (1%) 0 1 (0,6%)
Линезолид Ч (<2) 72 (100%) 88 (100%) 160 (100%)
Ванкомицин Ч (<1) 72 (100%) 88 (100%) 160 (100%)
МЛУ Да 49 (68%) г 44 (50%) 93 (58,1%)
Примечание. Жирным шрифтом выделены доли mitis/oralis, значимо отличающиеся от Других.
МПК - минимальная подавляющая концентрация; Ч - чувствительный; СЧ - со сниженной чувствительностью; Р - резистентный; МЛУ - множественная лекарственная устойчивость.
а р < 0,001 при сравнении с Другими. б р = 0,017 при сравнении с Другими. в р = 0,049 при сравнении с Другими. гр=0,020 при сравнении с Другими. д Нет интерпретации для значений МПК >1 мг/л.
Чувствительность к в-лактамам и их МПК
Полностью чувствительными ампициллину были менее 30% изолятов, остальные относились к категории с умеренной устойчивостью или были резистентными (табл. 2). К цефтриаксону сохраняли чувствительность 71,9% исследованных изолятов. При этом доля ампициллинрезистентных и цефтриаксонрезистентных стрептококков была выше среди 5. mitis/oralis по сравнению с другими видами стрептококков (38% против 17% и 28% против 8% соответственно; табл. 2).
Использованные нами планшеты для определения МПК методом микроразведений охватывали широкий
диапазон концентраций Пен, ампициллина и цефтриак-сона (табл. 3). МПК50 и МПК90 для всех исследованных Р-лакгамов были выше у 5. mitis/oralis по сравнению с другими VGS. В частности, для этих видов стрептококков МПК достигали 8, >16 и 4 мг/л для Пен, ампициллина и цефтриаксона соответственно (табл. 3).
Молекулярные механизмы устойчивости к макролидам и тетрациклину
Носительство генов те/и егтВ исследовали у 83 (57,2%) Эри-У стрептококков, большинство из которых содержали только те/ (п = 47; 57%) (табл.4). Комбинация те/+егтВ была обнаружена у 30 (36%)
158
оригинальная статья
исследованных Эри-У изолятов; еще у 4 (5%) изолятов был обнаружен только егтВ, а оставшиеся 2 (2%) изолята были те//егтВ-негативными (табл. 4). Механизмы устойчивости к Тет были изучены у 63 (93%) Тет-резистентных стрептококков. Носителем гена 1е1М был 61 (96,8%) изолят; ген 1еЮ присутствовал в 1 (1,6%) изоляте, еще один изолят был tetM/teЮ-негативным (табл. 4).
Обсуждение
Ранее нами было установлено, что носительство Пен- и Эри-устойчивых оральных стрептококков у детей чрезвычайно распространено: они были выявлены у 79,8% и 92,3% детей соответственно [14]. В настоящей работе мы провели более подробный анализ выделенных стрептококков, определив их видовое разнообразие и оценив профиль устойчивости к широкому спектру антимикробных препаратов.
В структуре изученной нами популяции антибио-тикоустойчивых оральных стрептококков доминировали организмы из группы mitis (68% и 69,6% обследованных были носителями Пен-У и Эри-У стрепто-
кокков), в первую очередь S. mitis/oralis. Преобладание VGS из этой группы было отмечено и другими авторами, причем не только среди комменсальных изолятов, но и в структуре VGS-ассоциированных инфекций, в том числе при инфекционном эндокардите и у пациентов с нейтропенией, имевших положительные гемокультуры [13, 19-21]. Представители групп anginosus, bovis, mutans и Р-гемолитические стрептококки в исследовании встречались спорадически, хотя по данным ряда авторов они могут занимать заметную долю как в популяции комменсальных VGS, так и среди клинических изолятов. В частности, организмы группы anginosus составляли долю 32,6% в числе оральных VGS, выделенных у пациентов с высоким риском инфекционного эндокардита [22] и 38,8% VGS, обнаруженных в гемокультурах взрослых пациентов [10]. Низкое представительство отдельных групп стрептококков в нашем исследовании связано с тем, что мы отбирали для анализа антибиотикоу-стойчивые изоляты, а главным резервуаром устойчивости являются стрептококки из группы mitis и, реже, salivarius [13, 19, 20]. Оценка видовых особенностей устойчивости VGS, проведенная S. Chun и соавт. [13],
Таблица 3
Распределение значений МПК b-лактамных антибиотиков у оральных стрептококков
Антибиотик Вид Доля (%) изолятов с соответствующим значением МПК (мг/л) МПК50 МПК90
<0,06 0,12 0,25 0,5 1 2 4 8 >16 мг/л
Пеницил- 5. mitis/oralis (п=72) 15 8 4 8 8 15 21 13 7 2 8
лин Другие (п=88) 15 14 19 14 13 11 5 9 1 0,5 4
Все(п=160) 15 11,3 12,5 11,3 10,6 13,1 11,9 10,6 3,8 0,5 8
Ампицил- 5. mitis/oralis (п=72) 18 7 11 7 8 11 19 18 2 >16
лин Другие (п=88) 13 19 23 11 11 6 9 8 0,5 8
Все(п=160) 15 13,8 17,5 9,4 10 8,1 13,8 12,5 1 >16
Цефтриак- 5. mitis/oralis (п=72) 17 13 18 15 10 19 7 1 1 4
Другие (п=88) 26 23 15 16 13 3 5 0 1 2
Все(п=160) 21,9 18,1 16,3 15,6 11,3 10,6 5,6 0,6 0,5 4
Примечание. МПК - минимальная подавляющая концентрация.
Таблица 4
генотипы устойчивости оральных стрептококков к макролидам и тетрациклину
Антибиотик Генотип n (%)
Эритромицин mef+/erm- 47 (57%)
mef+/erm+ 30 (36%)
mef-/erm+ 4 (5%)
mef-/erm- 2 (2%)
Итого 83 (100%)
Тетрациклин tetM+ 61 (96%)
tetO+ 1 (2%)
tetM-/tetO- 1 (2%)
Итого 63 (100%)
159_
ORIGINAL ARTicLE
показала, что доля нечувствительных к Пен изолятов составила 60,3% и 78,9% в группах mitis и salivarius соответственно, в то время как в группе anginosus Пен-У стрептококков было всего 6,2%.
Исследование показало, что S. mitis/oralis имели более высокие МПК50 и МПК90 Р-лактамов по сравнению с другими стрептококками. Устойчивость к Р-лактамам у стрептококков связана с изменением структуры пенициллин-связывающих белков (ПСБ), причем степень альтерации ПСБ прямо коррелирует с МПК Пен [23]. Организмы, имеющие консервативные ПСБ, сохраняют высокую чувствительность к Пен, демонстрируя минимальные МПК. К таким видам принадлежат, в частности, Р-гемолитические стрептококки, включая S. pyogenes. Напротив, стрептококки из группы mitis (к их числу относится один из главных респираторных патогенов - пневмококк) обладают способностью к генетической трансформации и передаче генов между близкородственными видами внутри своей группы. Это приводит к появлению крайне вариабельных мозаичных генов (т.е. чередующих участки ДНК разных видов стрептококков), кодирующих ПСБ со сниженной аффинностью к Пен и другим Р-лактамам, что обеспечивает таким стрептококкам Пен-устойчивый фенотип [23]. Было показано, что S. mitis и в меньшей степени S. oralis служат главным источником генов измененных ПСБ, распространяя их в своей экологической нише на более патогенные организмы [19, 24, 25].
Исследованные нами стрептококки, как правило, обладали перекрестной устойчивостью сразу к нескольким группам антибиотиков. В частности, устойчивость к Пен фактически предопределяла резистентность к Эри (83% Пен-У/Эри-У изолятов), а самым частым вариантом МЛУ стало сочетание устойчивости к Пен, Эри и Тет. Устойчивость к макролидам опосредуется 2 главными механизмами [26]. Один из них связан с метилированием рибосомальной мишени ферментом метилазой, которая кодируется преимущественно геном ermB, и обусловливает устойчивость ко всем макролидам, линкозамидам, стрептограмину Б (МЛСБ-фенотип). Второй механизм определяется эффлюксом антибиотика из бактериальной клетки при участии одного из вариантов гена mef и придает устойчивость к 14- и 15-членным макролидам (М-фенотип). Обе детерминанты локализованы на различных видах мобильных генетических элементов, которые поддерживают их внутри- и межвидовое распространение [27]. В нашей выборке >90% Эри-У изолятов несло ген mef (один или в сочетании с ermB). Тот факт, что 83,1% исследованных стрептококков были чувствительны к клиндамицину, т.е. имели М-фенотип, мог говорить о том, что ген ermB в этих изолятах не функционировал, как это было описано ранее [28]. Доминирование М-фенотипа среди Эри-У оральных стрептококков наблюдали и в других работах [11]. Интересно, что МЛСБ-фенотип может чаще встречаться у VGS, выделенных из гемо-культур [12].
Преобладание mef отличало популяцию VGS от пневмококков и S. pyogenes, в которых более распространен ген ermB [17, 29]. Это могло быть связано с
носительством разных мобильных генетических элементов, т.к. гены mef переносятся преимущественно на элементе MEGA (macrolide efflux genetic assembly), а ermB стрептококков связан с конъюгативными транспозонами семейства Tn916-Tnl545 [26, 27]. Мобильные генетические элементы способствуют диссеминации МЛУ путем интеграции в более крупные структуры, которые кодируют дополнительные детерминанты резистентности, например, гены tet, обеспечивающие резистентность к Тет [18]. Снижение активности Тет в отношении стрептококков чаще всего обусловлено продукцией особых белков (в частности, белок Тет-М), защищающих рибосомы и позволяющих им функционировать даже после связывания с антибиотиком [18]. Действительно, ген tetM встречался у подавляющего большинства исследованных нами Тет-резистентных стрептококков. Отметим, что индукция резистентности к макролидам может случайным образом приводить к отбору Тет-резистентных организмов, поскольку главные детерминанты устойчивости mef/ermB и tetM часто присутствуют на одном и том же мобильном генетическом элементе [27].
Около 10% обследованных были носителями S. pyogenes, при этом только половина из них имела признаки, которые могли указывать на s. pyogenes-опосредованную инфекцию. Таким образом, само по себе выявление s. pyogenes обладает низкой диагностической специфичностью и в отсутствие симптомов острого фарингита не должно считаться значимым, как и не должно назначаться микробиологическое исследование без веских на то оснований. Наши данные в целом соответствуют литературным сведениям о носительстве s. pyogenes, которое авторы метаанализа 2010 г. оценили как 12% [30].
Пневмококк в нашем исследовании обнаруживался редко (5,1% обследованных). Отсюда следует методически важный вывод о том, что ротоглоточные мазки не следует использовать для поиска и исследования носительства пневмококков, отдавая предпочтение материалу из носоглотки, который позволяет выявить пневмококк у 20-70% детей в зависимости от возраста [15].
Таким образом, нами установлена значительная частота МЛУ среди оральных стрептококков и в первую очередь S. mitis/oralis. Устойчивость к Р-лактам с высоким МПК свидетельствует о серьезной перестройке ПСБ у этих видов VGS, что несет опасность передачи детерминант резистентности более патогенным организмам.
Участие авторов:
Концепция и дизайн исследования: Маянский Н.А., Куличенко Т.В.
Сбор и обработка материала: Кварчия А.З., Крыжа-новская О.А., Пономаренко О.А., Бржозовская Е.А.
Статистическая обработка: Маянский Н.А., Кварчия А.З.
Написание текста: Маянский Н.А.
Редактирование: Куличенко Т.В.
Благодарность. Авторы выражают благодарность проф. Л.К. Катосовой за помощь, оказанную при проведении исследования.
оригинальная статья
Конфликт интересов. Авторы данной статьи подтвердили отсутствие финансовой поддержки/конфликта интересов, о которых необходимо сообщить.
ЛИТЕРАТУРА
1. Баранов А.А., Брико Н.И., Намазова-Баранова Л.С., Ряпис Л.А.
Стрептококки и пневмококки. Ростов н/Д: Феникс, 2013.
2. Doern CD, Burnham CA. It's not easy being green: the viridans group
streptococci, with a focus on pediatric clinical manifestations. J Clin Microbiol. 2010; 48(11): 3829-35. doi: 10.1128/JCM.01563-10.
3. Brenciani A, Tiberi E, Tili E, Mingoia M, Palmieri C, Varaldo PE,
et al. Genetic determinants and elements associated with antibiotic resistance in viridans group streptococci. JAntimicrob Chemother. 2014; 69(5): 1197-204. doi: 10.1093/jac/dkt495.
4. Facklam R. What happened to the streptococci: overview of taxonomic
and nomenclature changes. Clin Microbiol Rev. 2002; 15(4): 61330.
5. Spellerberg B, Brandt C. Streptococcus. In: Versalovic J, Carroll KC,
Funke G, Jorgensen JH, Landry ML and Warnock DW (ed.), Manual of Clinical Microbiology, 10th ed., ASM Press, Washington, DC, 2011; 331-49.
6. Pontigo F, Moraga M, Flores SV. Molecular phylogeny and a taxo-
nomic proposal for the genus Streptococcus. Genet Mol Res. 2015; 14(3): 10905-18. doi: 10.4238/2015.
7. Маянский Н.А., Калакуцкая А.Н., Мотузова О.В., Ломинадзе
Г.Г., Крыжановская О.А., Катосова Л.К. MALDI-TOF масс-спектрометрия в рутинной работе микробиологической лаборатории. Вопросы диагностики в педиатрии. 2011; 3(5): 20-5.
8. Angeletti S, Dicuonzo G, Avola A, Crea F, Dedej E, Vailati F. et al.
Viridans Group Streptococci clinical isolates: MALDI-TOF mass spectrometry versus gene sequence-based identification. PLoS One. 2015; 10(3):e0120502. doi: 10.1371/journal.pone.0120502.
9. Harju I, Lange C, Kostrzewa M, Maier T, Rantakokko-Jalava K, Haan-
pera M. Improved Differentiation of Streptococcus pneumoniae and Other S. mitis Group Streptococci by MALDI Biotyper Using an Improved MALDI Biotyper Database Content and a Novel Result Interpretation Algorithm. J Clin Microbiol. 2017; 55(3): 914-22. doi: 10.1128/JCM.01990-16.
10. Su TY, Lee MH, Huang CT, Liu TP, Lu JJ. The clinical impact of patients with bloodstream infection with different groups of Viri-dans group streptococci by using matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Medicine (Baltimore). 2018; 97(50):e13607. doi: 10.1097/ MD.0000000000013607.
11. Ioannidou S, Papaparaskevas J, Tassios PT, Foustoukou M, Legakis NJ, Vatopoulos AC. Prevalence and characterization of the mechanisms of macrolide, lincosamide and streptogramin resistance in viridans group streptococci. Int J Antimicrob Agents. 2003; 22(6): 626-9.
12. Ergin A, Ercis S, Hasjelik G. Macrolide resistance mechanisms and in vitro susceptibility patterns of viridans group streptococci isolated from blood cultures. J Antimicrob Chemother. 2006; 57(1): 139-41.
13. Chun S, Huh HJ, Lee NY. Species-specific difference in antimicrobial susceptibility among viridans group streptococci. Ann Lab Med. 2015; 35(2): 205-11. doi: 10.3343/alm.2015.35.2.205.
14. Маянский Н.А., Кварчия А.З., Пономаренко О.А., Лазарева А.В., Куличенко Т.В. Носительство оральных стрептококков, устойчивых к пенициллину и эритромицину, у детей с острыми респираторными инфекциями. Российский педиатрический журнал. 2018; 21(6): 337-44. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1560-9561-2018-21-6-337-44.
15. Mayanskiy N, Alyabieva N, Ponomarenko O, Pakhomov A, Kuli-chenko T, Ivanenko A. et al. Bacterial etiology of acute otitis media and characterization of pneumococcal serotypes and genotypes among children in Moscow, Russia. Pediatr Infect Dis J. 2015; 34(3): 255-60. doi: 10.1097/INF.0000000000000554.
16. CLSIM100 ED29:2019 - Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 29th Edition.
17. Маянский Н.А., Алябьева Н.М., Пономаренко О.А., Куличенко Т.В., Артемова И.В., Лазарева А.В. и др. Динамика распространенности серотипов и антибиотикорезистентности носоглоточных пневмококков, выделенных у детей в 2010-2016 гг.: результаты ретроспективного когортного исследования. Вопросы современной педиатрии. 2017; 16 (5): 413-23. doi: 10.15690/vsp. v16i5.1806).
18. Rodriguez-Avial I, Rodriguez-Avial C, Culebras E, Picazo JJ. Distribution of tetracycline resistance genes tet(M), tet(O), tet(L) and tet(K) in blood isolates of viridans group streptococci harbouring erm(B) and mef(A) genes. Susceptibility to quinupristin/dalfopristin and linezolid. Int J Antimicrob Agents. 2003; 21(6): 536-41.
19. Smith A, Jackson MS, Kennedy H. Antimicrobial susceptibility of viridans group streptococcal blood isolates to eight antimicrobial agents. Scand J Infect Dis. 2004; 36(4): 259-63.
20. Rozkiewicz D, Daniluk T, Sciepuk M, Zaremba ML, Cylwik-Rokicka D, Luczaj-Cepowicz E et al. Prevalence rate and antibiotic susceptibility of oral viridans group streptococci (VGS) in healthy children population. AdvMedSci. 2006; 51 Suppl 1: 191-5.
21. Nielsen MJ, Claxton S, Pizer B, Lane S, Cooke RP, Paulus S, Carrol ED. Viridans Group Streptococcal Infections in Children After Chemotherapy or Stem Cell Transplantation: A 10-year Review From a Tertiary Pediatric Hospital. Medicine (Baltimore). 2016; 95(9): e2952. doi: 10.1097/MD.0000000000002952.
22. Süzük S, Kajkatepe B, Qetin M. Antimicrobial susceptibility against penicillin, ampicillin and vancomycin of viridans group Streptococcus in oral microbiota of patients at risk of infective endocarditis. InfezMed 2016; 24(3): 190-3.
23. Hakenbeck R, Brückner R, Denapaite D, Maurer P. Molecular mechanisms of ß-lactam resistance in Streptococcus pneumoniae. Future Microbiol. 2012; 7: 395-410.
24. Chi F, Nolte O, Bergmann C, Ip M, Hakenbeck R. Crossing the barrier: evolution and spread of a major class of mosaic pbp2x in S. pneumoniae, S. mitis and S oralis. Int J Med Microbiol. 2007; 297: 503-12. https://doi.org/10.1016/j.ijmm.
25. Jensen A, Valdorsson o, Frimodt-Moller N, Hollingshead S, Kilian M. Commensal streptococci serve as a reservoir for beta-lactam resistance genes in Streptococcus pneumoniae. Antimicrob Agents Chemother-. 2015; 59: 3529 -40. https://doi.org/10.1128/AAC.00429-15.
26. Leclercq R. Mechanisms of resistance to macrolides and lincos-amides: nature of the resistance elements and their clinical implications. Clin Infect Dis. 2002; 34: 482-92.
27. Schroeder MR, Stephens DS. Macrolide Resistance in Streptococcus pneumoniae. Front Cell Infect Microbiol. 2016; 6: 98.
28. van der Linden M, Otten J, Bergmann C, Latorre C, Linares J, Hakenbeck
R. Insight into the Diversity of Penicillin-Binding Protein 2x Alleles and Mutations in Viridans Streptococci. Antimicrob Agents Chemother. 2017; 61(5). pii: e02646-16. doi: 10.1128/AAC.02646-16.
29. Катосова Л.К., Лазарева А.В., Хохлова Т.А., Пономаренко О.А., Алябьева Н.М. Распространение и механизмы устойчивости к макролидам Streptococcus pyogenes, выделенных у детей. Антибиотики и химиотерапия. 2016; 61(3-4): 23-9.
30. Shaikh N, Leonard E, Martin JM. Prevalence of streptococcal pharyngitis and streptococcal carriage in children: a meta-analysis. Pediatrics. 2010; 126(3): e557-64. doi: 10.1542/peds.2009-2648.
REFERENCES
1. Baranov A.A., Briko N.I., Namazova-Baranova L.S., Ryapis L.A. Streptococcus and Pneumococcus. [Streptokokki I pnevmokokki]. Rostov-on-Don: Phoenix, 2013.
2. Doern CD, Burnham CA. It's not easy being green: the viridans group streptococci, with a focus on pediatric clinical manifestations. J Clin Microbiol. 2010; 48(11): 3829-35. doi: 10.1128/JCM.01563-10.
3. Brenciani A, Tiberi E, Tili E, Mingoia M, Palmieri C, Varaldo PE, et al. Genetic determinants and elements associated with antibiotic resistance in viridans group streptococci. J Antimicrob Chemother. 2014; 69(5): 1197-204. doi: 10.1093/jac/dkt495.
4. Facklam R. What happened to the streptococci: overview of taxonomic and nomenclature changes. Clin Microbiol Rev. 2002; 15(4): 613-30.
5. Spellerberg B, Brandt C. Streptococcus. In: Versalovic J, Carroll KC, Funke G, Jorgensen JH, Landry ML and Warnock DW (ed.), Manual of Clinical Microbiology, 10th edition, ASM Press, Washington, DC, 2011; 331-49.
6. Pöntigo F, Moraga M, Flores SV. Molecular phylogeny and a taxonomic proposal for the genus Streptococcus. Genet Mol Res. 2015; 14(3): 10905-18. doi: 10.4238/2015.
7. Mayansky N.A., Kalakutskaya A.N., Motuzova O.V., Lominadze G.G., Kryzhanovskaya O.A., Katosova L.K. MALDI-TOF mass spectrometry in routine work of microbiological laboratory. Diagnostics issues in pediatrics. 2011; 3(5): 20-5.
8. Angeletti S, Dicuonzo G, Avola A, Crea F, Dedej E, Vailati F et al.
ORIGINAL ARTicLE
Viridans Group Streptococci clinical isolates: MALDI-TOF mass spectrometry versus gene sequence-based identification. PLoS One. 2015; 10(3): e0120502. doi: 10.1371/journal.pone.0120502.
9. Harju I, Lange C, Kostrzewa M, Maier T, Rantakokko-Jalava K, Haanpera M. Improved Differentiation of Streptococcus pneumoniae and Other S. mitis Group Streptococci by MALDI Biotyper Using an Improved MALDI Biotyper Database Content and a Novel Result Interpretation Algorithm. J Clin Microbiol. 2017; 55(3): 914-22. doi: 10.1128/JCM.01990-16.
10. Su TY, Lee MH, Huang CT, Liu TP, Lu JJ. The clinical impact of patients with bloodstream infection with different groups of Viri-dans group streptococci by using matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). Medicine (Baltimore). 2018; 97(50): e13607. doi: 10.1097/ MD.0000000000013607.
11. Ioannidou S, Papaparaskevas J, Tassios PT, Foustoukou M, Legakis NJ, Vatopoulos AC. Prevalence and characterization of the mechanisms of macrolide, lincosamide and streptogramin resistance in viridans group streptococci. Int J Antimicrob Agents. 2003; 22(6): 626-9.
12. Ergin A, Ercis S, Hasjelik G. Macrolide resistance mechanisms and in vitro susceptibility patterns of viridans group streptococci isolated from blood cultures. J Antimicrob Chemother. 2006; 57(1): 139-41.
13. Chun S, Huh HJ, Lee NY. Species-specific difference in antimicrobial susceptibility among viridans group streptococci. Ann Lab Med. 2015; 35(2): 205-11. doi: 10.3343/alm.2015.35.2.205.
14. Mayansky N.A., Kvarchiya A.Z., Ponomarenko O.A., Lazareva A.V., Kulichenko T.V. Carrying oral streptococcus resistant to penicillin and erythromycin in children with acute respiratory infections. Rossiyskiy pediatricheskiy zhurnal. 2018; 21(6): 337-44. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1560-9561-2018-21-6-337-344.
15. Mayanskiy N, Alyabieva N, Ponomarenko O, Pakhomov A, Kuli-chenko T, Ivanenko A. et al. Bacterial etiology of acute otitis media and characterization of pneumococcal serotypes and genotypes among children in Moscow, Russia. Pediatr Infect Dis J. 2015; 34(3): 255-60. doi: 10.1097/INF.0000000000000554.
16. CLSIM100 ED29:2019 - Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 29th Edition.
17. Mayansky N.A., Alyabieva N.M., Ponomarenko O.A., Kulichenko T.V., Artemova I.V., Lazareva A.V. et al. Dynamics of serotypes prevalence and antibiotic resistance of nasopharyngeal pneumococcal patients in children in 2010-2016: results of a retrospective cohort study. Issues of modern pediatrics. 2017; 16 (5): 413-23. doi: 10.15690/vsp.v16i5.1806).
18. Rodriguez-Avial I, Rodriguez-Avial C, Culebras E, Picazo JJ. Distribution of tetracycline resistance genes tet(M), tet(O), tet(L) and tet(K) in blood isolates of viridans group streptococci harbouring erm(B) and mef(A) genes. Susceptibility to quinupristin/dalfopris-tin and linezolid. Int J Antimicrob Agents. 2003; 21(6): 536-41.
19. Smith A, Jackson MS, Kennedy H. Antimicrobial susceptibility of viridans group streptococcal blood isolates to eight antimicrobial agents. Scand J Infect Dis. 2004; 36(4): 259-63.
20. Rozkiewicz D, Daniluk T, Sciepuk M, Zaremba ML, Cylwik-Ro-kicka D, Luczaj-Cepowicz E. et al. Prevalence rate and antibiotic susceptibility of oral viridans group streptococci (VGS) in healthy children population. AdvMedSci. 2006; 51 Suppl 1: 191-5.
21. Nielsen MJ, Claxton S, Pizer B, Lane S, Cooke RP, Paulus S et al. Viridans Group Streptococcal Infections in Children After Chemotherapy or Stem Cell Transplantation: A 10-year Review From a Tertiary Pediatric Hospital. Medicine (Baltimore). 2016; 95(9): e2952. doi: 10.1097/MD.0000000000002952.
22. Süzük S, Kajkatepe B, Qetin M. Antimicrobial susceptibility against penicillin, ampicillin and vancomycin of viridans group Streptococcus in oral microbiota of patients at risk of infective endocarditis. InfezMed. 2016; 24(3): 190-3.
23. Hakenbeck R, Brückner R, Denapaite D, Maurer P. Molecular mechanisms of ß-lactam resistance in Streptococcus pneumoniae. Future Microbiol. 2012; 7: 395-410.
24. Chi F, Nolte O, Bergmann C, Ip M, Hakenbeck R. Crossing the barrier: evolution and spread of a major class of mosaic pbp2x in S. pneumoniae, S. mitis and S oralis. Int J Med Microbiol .2007; 297: 503-12. doi.org/10.1016/j.ijmm.
25. Jensen A, Valdorsson o, Frimodt-Moller N, Hollingshead S, Kilian M. Commensal streptococci serve as a reservoir for beta-lactam resistance genes in Streptococcus pneumoniae. Antimicrob Agents Chemother. 2015; 59: 3529-40. doi.org/10.1128/AAC.00429-15.
26. Leclercq R. Mechanisms of resistance to macrolides and lincos-amides: nature of the resistance elements and their clinical implications. Clin Infect Dis. 2002; 34: 482-492.
27. Schroeder MR, Stephens DS. Macrolide Resistance in Streptococcus pneumoniae. Front cell Infect Microbiol. 2016; 6: 98.
28. van der Linden M, Otten J, Bergmann C, Latorre C, Linares J, Hakenbeck R. Insight into the Diversity of Penicillin-Binding Protein 2x Alleles and Mutations in Viridans Streptococci. Antimicrob Agents Chemother. 2017; 61(5). doi: 10.1128/AAC.02646-16.
29. Katosova L.K., Lazareva A.V., Khokhlova T.A., Ponomarenko O.A., Alyabieva N.M. Distribution and mechanisms of resistance to Streptococcus pyogenes macrolides isolated in children. Antibiotiki i khimiotherapiya. 2016; 61(3-4): 23-9.
30. Shaikh N, Leonard E, Martin JM. Prevalence of streptococcal pharyngitis and streptococcal carriage in children: a meta-analysis. Pediatrics. 2010; 126(3): e557-64. doi: 10.1542/peds.2009-2648.
Поступила 14.06.2019 Принята в печать 26.06.2019
Сведения об авторах:
Маянский Николай Андреевич, доктор мед. наук, проф. РАН, E-mail: mayansky@nczd.ru; Куличенко Татьяна Владимировна, доктор мед. наук, проф. РАН, зав. отд-нием неотложной педиатрии с группой анестезиологии-реанимации ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: tkulichenko@yandex.ru; Кварчия Астанда Зауровна, аспирант ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: astanda.kvarchia@yandex.ru; Пономаренко Ольга Александровна, мл. науч. сотр. лаб. и молекулярной микробиологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: olga99alex@yandex.ru; Крыжановская Ольга Андреевна, канд. мед. наук, врач высшей категории, врач-бактериолог, лаб. молекулярной микробиологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: kryzhanovskaya@nczd.ru; Бржозовская Екатерина Анатольевна, мл. науч. сотр. лаб. экспериментальной иммунологии и вирусологии ФГАУ «НМИЦ здоровья детей» Минздрава России, E-mail: emmbf@yandex.ru
